Способ диагностики гетерозиготногоносительства при вульгарномихтиозе

 

О П И С А Н И Е I 8523Б

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

Союэ Сооетских

Социалистических

Республик

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 07.05.79 (21) 2762762/28-13 с присоединением заявки №вЂ” (23) Приоритет— (51) М. Кл.а

А 61 В 10/00

Государственный комитет

СССР по делам иаабретений и открытий (43) Опубликовано 07.08.81. Бюллетень № 29 (53) УДК 616-06 (088.8) (45) Дата опубликования описания 07.08.81 (72) Авторы изобретения ва

В. Т. Куклин, Г. Г. Рункова и 3. Л. Степан (" мологий центра

БЯ ;,:,:„, (71) Заявители Свердловский научно-исследовательск кожно-венерологический институт и Институ растений и животных Уральского научног

АН СССР (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ГЕТЕРОЗИГОТНОГО

НОСИТЕЛЪСТВА ПРИ ВУЛЬГАРНОМ ИХТИОЗЕ

4,25

5,28

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано в медицинской генетике.

Известен способ диагностики гетерозиготного носительства при вульгарном ихтио зе путем выявления женщин, имеющих в родословной заболевание вульгарным ихтиозом с рецессивным сцепленным с полом типом наследования по мужской линии (1).

Однако известный способ не обеспечивает высокой точности диагностики.

Целью изобретения является повышение точности диагностики способа. Эта цель достигается тем, что выявляют женщин, имеющих в родословной заболевание вульгарным ихтиозом с рецессивным, сцепленным с полом типом наследования по мужской линии, при этом в сыворотке крови женщин определяют содер>канне фенилаланина, на правой ладони в ГП и 1Ч межпальцевом промежутке наличие кожного узора в виде петли и при повышенном содержании фенилаланина диагностируют гетерозиготное ноаительство.

Способ осуществляют следующим образом.

У предполагаемых гетерозиготных носителей, т. е. у женщин, в родословной которых имеется заболевание ихтиозом по му>кской линии с рецессивным, сцепленным с по2 лом типом наследования, берут кровь нз вены и сыворотку крови обрабатывают по методу 3. С. Чулковой и Н. И. Гуминой.

При определении содержания свободных аминокислот для осаждения белков в сыворотку вводят 4%-ную сульфосалициловую кислоту (1: 10), пробу центрифугируют в течение 10 мин при 8000 об/мин и полученный супернатант наносят на колонку

10 автоматического анализатора аминокислот.

Количество аминокислот находят по методу

Спекмана. Параметры ионообменного хроматографического анализа следующие: ц5 При определении кислых и нейтральных аминокислот

Высота столбика смолы, см 55

1-й буферный натрийцитратный раствор, мл 3,25

20 2-й буферный натрийцитратный раствор, мл

Время замены буферного раствора, мин 80

Скорость движения буферного я5 раствора, Ml ч 60

Температура колонки, С 53

При определении основных аминокислот

Высота столбика смолы, см 8

Буферный натрийцитратный зо раствор, мл

Таблица 1

Содержание фенилаланина в

100 мл, мг

Обследуемые группы

Гетерозиготные носители

Контрольные

1,41 0,15

0,74 0,20

Из табл. 1 следует, что у гетерозиготных носителей, т. е. у женщин, дети которых страдают вульгарным ихтиозом с рецессив ным, сцепленным с полом типом наследования, обнаружено содержание фенилаланина в сыворотке крови (P(0,05), Однако одни лишь показатели повышенного содержания аминокислоты фенилаланина не позволяют с достоверностью устанавливать данный диагноз.

Поэтому для выявления гетерозиготного носительства используют дерматоглифические признаки, характерные для женщин, дети которых больны вульгарным ихтиозом

Скорость движения буферного раствора, мл/ч 60

Скорость движения нингидрина, мл/ч 30

Температура колонки, С 53

Для определения аминокислотного состава сывороточных белков их подвергают гидролизу: к 1 мл сыворотки добавляют

10 мл 6% соляной кислоты, пробу выдерживают в автоклаве в течение 4 ч при 134 С и выпаривают на водяной бане при температуре 60 — 70 С для удаления следов соляной кислоты. Сухой остаток растворяют в натрийцитратном буферном растворе (рН 2,20) и пробу наносят на колонку анализатора, определяя количественно все аминокислоты, содержащиеся в исследуемой сыворотке после гидролиза белков. Так как свободные аминокислоты исследованных сывороток составляют только 0,3% по отношению к сумме связанных (или белковых) аминокислот, количество всех аминокислот, найденных в сыворотке после ее гидролиза, принимают за общий белок.

Режим определения белковых аминокислот на анализаторе такой же, как режим при определении свободных аминокислот.

Характеризуя аминокислотный состав сывороточных белков, рассчитывают не только абсолютное содержание аминокислот в белке, но и содержание каждой из аминокислот в процентах к сумме белковых аминокислот.

Статистическую обработку результатов проводят стандартным методом, используя температурный критерий.

Результаты исследования приведены в табл. 1.

852315 с рецессивным, сцепленным с полом типом наследования.

Отпечатки правой ладонной поверхности получают методом типографической краски, и в Ш и IV междупальцевом промежутке устанавливают наличие узора петли.

В табл. 2 приведена частота встречаемости типа узора петли в III или IV междупальцевом промежутке правой ладони.

Таблица 2

Частота встречаемости узора в промежутках между пальцами правой руки, %

Тип узора

П5 Обследуемые группы

Гетерозиготные носители

Контрольные

57 -7

40+ 7

Петля

Петля

54

48+.7

22 -6

Формула изобретения

Способ диагностики гетерозиготного носительства при вульгарном ихтиозе путем выявления женщин, имеющих в родословной заболевание вульгарным ихтиозом с рецессивным, сцепленным с полом типом .на05 следования по мужской линии, о т л и ч а юИз табл. 2 видно, что у гетерозиготных носителей узор петли в III или IV междупальцевом промежутке правой ладони наблюдается во всех случаях; при этом возможно одновременное наличие петли в Ш

80 или IV междупальцевом промежутке. У контрольных женщин узор петли в соответствующих промежутках составляет 62%.

По наличию узора петли в III или IV междупальцевом промежутке правой ладо85 ни невозможно достоверно установить диагноз гетерозиготного носительства. Одновременное сопоставление результатов исследования сыворотки крови на свободную аминокислоту-фенилаланин и установление на40 личия узора петли в III или IV междупальцевом промежутке правой ладони у женщин, в родословной которых имеется заболевание вульгарным ихтиозом по мужской ли нии с рецессивным, сцепленным с полом

45 типом наследования, позволяют с достоверностью установить диагноз гетерозиготного носительства вульгарного ихтиоза.

Предложенный способ обеспечивает высокую точность диагностики и позволяет

50 предупредить рождение больного ихтиозом ребенка после медико-генетического консультирова ния.

Последующий генеалогический анализ в медико-генетических консультациях позволяет установить возможные вариации заболевания ихтиозом в будущих поколениях.

852315

Составитель С. Малютина

Техред А. Камышникова

Редактор П, Горькова

Корректоры: А. Галахоса и Л. Слепая

Заказ 4831

Изд. 461 Тираж 694

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписи e

Загорская типография Упрполиграфиздата Мособлисполкома

5 щ и Й с я тем, что, с целью повышения точности диагностики способа, в сыворотке крови женщин определяют содержание фенилаланина, на правой ладони в П1 или IV межпальцввом промежутке наличие кожного узора в виде петли и при повышенном содержании фенилаланина диагностируют гетерозиготное носительство.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Кряжева С. С., Ведрова И. Н., ЕлецS кий А. Ю. Клинико-генетические особенности различных форм ихтиоза. Журнал

«Вестник дерматологии и венерологии», 1977, № 9, с. 17 — 23.