Способ получения фракции гваяковойсмолы
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
Союз Советскик
Соцналисткческих
Республик
К ПАТЕНТУ (61) Дополнительный к патенту (22) Заявлено 0704.78 (21)2600100/23-04 (51)М. Хл.з
С 07 G 17/00 (32) 09.04.77 (23) Приоритет
Государствеммый комитет
СССР по делам изобретений и открытий (31) Р 2716061. 8 (33) ФРГ (53) УДК 547. 565. 2..07 (088.8) Опубликовано 070881. Бюллетень М 29
Дата опубликования описания 070881 (72) Авторы изобретения
Иностранцы (Вернер Гютляйн (ФРГ), Ханс Вилингер (Ав трия), Вальтер Риттерсдорф и Вольфганг Вернер фРГ) "
Иностранная фирма
"Берингер Ианнхайм ГмбХ" (ФРГ) (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФРАКЦИИ ГВАЯКОВОИ СМОЛЫ
Изобретение относится к области органической химии, а именно к способу получения фракции гваяковой смо- лы, применяемой в медицине в случае заболеваний органов пищеварения, приводящих к появлению скрытой крови в стул6, обнаружение которой является важным моментом при установлении правильного диагноза. 10
Известна гваяковая смола, которая добывается из сердцевины тропического дерева Guajacum officinalis и .Gмаj асum sanktum и применяется для определения скрытой крови в кале..
Однако частое использование гваяко-, вой смолы приводит к получению ошибочных результатов. Анализ осуществляют путем обработки взвеси кала перекисью водорода и спиртовым раствором гваяковой смолы. Появление голу2О бого окрашивания указывает на наличие скрытой крови. 3а появление голубого окрашивания ответственно два основных компонента смолы, а именно фурогваяцин, а также гваяконовая кислота (11 . Однако гваяковая смола не всегда содержит имеющиеся в ней компоненты в одном и том же соотношении, часто образуются нестабильные компоненты, которые могут разла- ° гаться и, таким образом, снижать точность и воспроизводимость анали". за.
В то же время выделение и применение двух главных компонентов в индивидуальном виде затруднено, посколь. ку применение фурогваяцина не дает стабильных результатов, в выделение гваяконовой кислоты возможно осуществить только с помощью тонкослойной хроматографии с очень низким выходом..
Цель изобретения заключается s разработке способа получения новой стабильной смеси компонентов гваяковой смолы - фракции гваяковой смолы, пригодной для диагностики наличия крови в кале.
Поставленная пель достигается способом получения фракции гваяковой смолы, заключающимся в том, что гваяковую смолу, выделенную иэ сердцевины тропического дерева Guajacum
officinal! s u Guajacum sanktum растворяют в ацетоне, затем прибавляют толуол, после чего полученную смесь фильтруют, фильтрат упаривают досуха и остаток растворяют в смеси н-гептана и уксусного эфира в соотношении 2:5 или в ацетоне и разде-.
854274 ляют на колонке с силикагелем в атмосфере углекислого газа при помощи элюента, в качестве которого используют смесь н-гептана и уксусного эфира в соотношении 2:5 или смесь ацетона и толуола в соотношении 1:5, при этом отбирают фракции с R 0 45
Р в смеси толуол, диоксан и ледяная уксусная кислота в соотношении
SOl25l10, упаривают их досуха и полученный остаток перекристаллизо вывают иэ п-ксилола.
Фракция гваяковой смолы характеризуется удельной экстинкцией Е
4см при 600 нм, которая должна быть.не менее 200, определяемой по реакции с перекисью водорода, отличающаяся диапазоном ИК 1600 см (м); 1505 см (v, s); 1260 см (s, Ь); 1200 см (s, b); 1115 ; 1025 см (м) и величиной R< 0, 45 в смеси толуол диоксан ледяная уксусная кислота
90:45:10.
Под удельной экстинкцией понимается экстинкция,которая вызывается
1 г гваяконовой кислоты в 100 мл растворителя при помощи пероксидазы и перекиси водорода и измеряется в кювете длиной 1 см при 600 нм, Н р и м е р, 200 г Гваяковой смолы растворяют в 500 мл ацетона, причем вся смола за исключением небольшого остатка переходит в раствор.
Затем при постоянном помешивании по каплям добавляют 3 л толуола, примерно через 30 мин отсасывают выпавший материал (около 60 r) и выбрасывают его. Фильтрат выпаривают в вакууме, причем получают примерно 160 г темно-коричневого стекловидного остатка; Этот остаток при подогревании растворяют в 500 мл смеси н-гептана и уксусного эфира в соотношении 2:5 и после охлаждения подают на силикагелевую колонку (3,1 кг силикагеля. размеры частиц соответствуют проходу
0,063-0,2 мм диаметром Ц см и высотой 1,65 м). Силикагель предварительно промывают 2N соляной кислотой для удаления следов железа, затем дистиллированной водой и высушивают под вакуумом. Разделение производят с
7,5 л смеси н-гептана с уксусным эфиром при их соотношении 2:5 в атмо- сфере углекислого газа. Собирают
150 фракций по 50 мл. Франции 115145 после выпаривания дают 16,5 r под крашенного стекловидного материала, из которого путем перекристаллиэации в 150 г ксилола получают 12 r фракции гваяковой смолы. Целесообразно отдельные фракции исследовать-методом тонкослойной хроматографии, так как в зависимости от условий возможны забросы элюата в получаемый матеPHBJl ° ВНИИПИ Заказ 5706/35
Тонкослойная хроматография.
Силикагелевые готовые пластины
60I — 254 (Nerck) °
Носитель: толуол, диоксан, ледяная уксусная кислота (90:25:10);
R< — 0,45.
Раствор для обрызгивания.
Раствор 0,05% пероксидазы и 0,5Ъ перекиси водорода в воде окрашивают гваяконовую кислоты A в голубую окраску.
Раствор 6Ъ формалина и 26Ъ-ный раствор серной кислоты в воде окрашивает фракцию гваяковой смолы в коричнево-фиолетовую окраску,а загряз " нения — в красно-фиолетовую окраску.
15, Определение удельной экстинкции.
Растворяют 4,0 мг фракции гваяковой смолы в 400 мл 50%-ного водного раствора спирта.
1 мл этого раствора, 0,5 мл 3%-нощ го раствора поливинилпирролидона К в дистиллированной воде, 1,0 мл
0,1 молярного раствора перекиси водорода в воде и 0,1 1%-ного раствора пероксидазы из морской редьки (1е
2 ° 10 U/ìr) в дистиллироьанной воде доводят дистиллированной водой до
10 мл.
Хорошо перемешанный раствор через
5-10 мин подвергают измерению в кюве= те длиной 1 см при 600 нм.
Удельная экстинкция = измеренной экстинкции х 1000.
ИК-сйектр (КВг): 1600 см (m);
1505 см (v, s); 1260 см (s, b);
1115 см (т); 1025 см (гп); 1200 см ,(s Ь).
Формула изобретения
Способ получения фракции гваяковой смолы, отличающийся тем, что гваяковую смолу, выделенную
jg из сердцевины тропического дерева
Guajacum officinaIis u Guajacum
sanktum растворяют в ацетоне, затем прибавляют толуол, после чего полученную смесь фильтруют, фильтрат упаривают досуха и остаток растворяют в смеси н-гептана и уксусного эфира.в соотношении 2:5 или в ацетоне и разделяют на колонке с силикагелем в атмосфере углекислого газа при помощи элюента, в качестве о которого используют смесь н-гептана и уксусного эфира в соотношении 2:5 или смесь ацетона и толуола в соотношении 1:5, при этом отбирают фракции с и 0,45 в смеси толуол, И диоксан и ледяная уксусная кислота в соотношении 90:25:10,- упаривают их
:досуха и полученный остаток перекристаллизовывают из п-ксилола.
Источники информации, принятые во внимание при экспертизе
1. Диссертация: 1. KGhi Т;Н.Sranschweig, ФРГ, 1964, с,2 тираж 397 Подписное
Филиал ППП "Патент", r.óæãoðîä, ул.Проектная,4
