Способ скрининга антгельминтиков

 

С>нзз Советских

Социалистических

Республик

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИ ЕТИЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. сеид-ву (22) Заявлено 2Я11.79 (21) 2843357/30-15 с присоединением заявки ¹â€” (23) Приоритет

Опубликовано 1511881, Бюллетень № 30

Дата опубликования описания 150881 (51)м. кл.з

G 0l М 33/48

Государственный комитет

СССР по делам нзобр«теннй н открытий (53) УДК 615.733 (088.8) (72) Автор изобретения

P.A.Ïåíüêoâà

{71) Заявитель (5 4) СПОСОБ CKPHHHHl À АНТГЕЛЬМИНТИКОВ как он не подлежит длительному хранению, и определение серотонина в тромбоцитарном осадке, что усложняет методику постановки реакции, а также использование централизованной плазмы иэ пунктов переливания крови, что связано со специальным подбором доноров для взятия крови.

Цель изобретения — эффективный отбор ангельмин тиков .

Эта цель достигается тем, что в какачестве тромбоцитарной плазмы используют плазму крови крыс, а в качеств е буферных растворов — раСтворы Рингера или Тиродэ. в соотношении 0,9-.

1 °

Пример 1. Берем крысу, получаем иэ нее 3 мл крови, добавляем

0,1 мл раствора Трилон Б, центрнфугируем 15 мин при 1000 об/мин.

Полученную плазму разводим раствором Рингера в соотношении 0,9: 1,0.

K 1 мл разбавленной плазм добавляем 1 мкг серотонина, инкубируем при

Т-37о н определяем с помощью флюориметра скорость поглощения серотоннна тромбоцитами плазмы. Полученные данные являются исходной концентрацией серотонина. Затем берем пробирки с раэбавленной плазмой и добавляем

Изобретение относится к сельскому хоз яйству, в частнос ти к ветеринарии для проведения скрининга (поиска) антгельминтнков при гельминтоэах животных и может быть использовано в медицине при данных заболеваниях.

Известно использование для проведения скрининга антгельминтиков подбора веществ из ряда химических соединений, близких по строению, и метода скрининга на экспериментальных моделях (11.

Недостатком данных способов является трудоемкость изыскания,. требующего больших затрат.

Изв естен метод флюорометрического определения серотонина в тромбозитах для поиска препаратов и определения их антидепрессивного действия, основанный на том, что препараты по разному действуют на трансмембранный транспорт серотонина. Измерение скорости поглощения серотонина тромбоцитами человека используют для скринин га антидепрессантов (2) и (3) .

Недостатком этого способа является приготовление специального раствора для разведения тромбоцитов, который нужно часто готовить, так

Всесоюзный ордена Трудового Красного амйф, институт / гельминтологии им. К.И.Скряби

855500

Формула изобретения

Источники информации, принятые во внимание прн экспертизе

Гистаглобулин

10 4 104

10 4 204

10" 204

10 " 104

104

2. Вопросы медицинской химии, 1973. Т. 19. Вып. 3, с. 328-330.

103

Диэ тил стил ьбэс трол

102

195

Скополамин

Составитель Т.Тулякова

Редактор К.Вопощук Техред М. Голинка Корректор Г.Решетник

Заказ 6 896/6 1 Тираж 90 7 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35,. Раушская наб.,д.4/5

Филиал ППП Патент, r. Ужгород, ул. Проектная, 4 препарат (например, левамиэол) в количестве 0,1 мп, через 5 мин добавляем 1 мкг серотонина и инкубируем

15 мин при Т37о, а затем быстро охлаждаем и с помощью флюориметра определяем скорость поглощения серотонина, сравнивая с исходными данными исчисляем в процентах.

Пример 2. Аналогично получаем из крови плазму и разводим 1 мл плазваа 3 мл раствора Тиродэ или Рингера с последующим добавлением в 1 мл tO разбавленной плазмы 1 мкг серотонина и инкубируем 15 мин при Т37е . Затем определяем скорость поглощения серотонина тромбоцитами. Полученные данные являются исходной концентрацией серотонина. Затем берем пробирки с разбавленной плазмой и добавляем препарат (например, гисталобулин) s количестве 0,1 мп, через 5 мин добав-, ляем 1 мкг серотонина и инкубируем

15 мнн при.Т=37о, а затем быстро ох-. лаждаем.и с помощью флкориметра определяем скорость поглощения серотонина, сравнивая с исходными даннымн, исключаем в процейтах.

В таблице представлены результаты исследований. Наилучшей концентрацией является.10 >, так как поглощение серотонииа с препаратом меньше исходной серотонина, а с увеличением концентрации увеличивается и процент 30 поглощения.

Иэ таблицы видно, что заведомо известный препарат антгельминтиклевамизол имеет замедленную скорость поглощения серотонина тромбоцитами.

Дл я подтв ерждени я ан тгел ьмин тных свойств препаратов, например, гистаглобулина, проведены дополнительно проверки, акт комиссионной проверки прилагается. Следовательно, чем медленее происходит поглощение серотонина тромбоцитами в сравнении с исходными данными, тем увереннее можно сказать, что препарат обладает антгельминтными свойствами н может использоваться как антгельминтик.

Способ скрининга антгельминтиков. включающий получение тромбоцитарной плазмы, разведение буферными растворами и определение скорости поглощения серотонина тромбоцитами плазмы в растворах с добавлением и без добавления препаратов, о т л и ч а ю шийся тем, что, с целью эффективного отбора антгельминтиков, в качестве тромбоцитарной плазмы используют плазму крови крыс, а в качестве буферных растворов — растворы

Рингера или Тиродэ в соотношении

0,9-1,1:1-3.

1. Диденко П.П. Поиски новых антгельминтиков с нематоцидными и цестодоцидными свойствами среди различных органических соединений и излучение антгельминтных свойств сульфена. Диссертация. М., 1972, c ..15-48, 3. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1976, т.Z, с. 51-52.