Способ определения степени фибринолиза тромба

Авторы патента:

G01N33/52 - использование соединений или составов для колориметрического, спектрофотометрического или флуорометрического анализа, например реактивной бумаги

Союз Соаетскик

Социааистическик

Республик

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (6I) Дополнительное к &sT. спид-ву (22} Заявлено 180779 (2f) 2780017/28-13 с присоединением заявки ¹ (23) Приоритет

Опубликовано 150481. Бкзллетень 89 30

Дата опубликования описания 150881 51 М,,(„э

G 01 И 33/56

Государственный комитет

СССР по делам изобретений и открытий (53) УДК 612. 115 (088.8) (72) Авторы изобретения

Я.Д. Мамедов, Р . Г. Сафаров и О. A. Н ариман беков

Азербайджанский государс твенный медицине "ий институт им.Н.Нариманова, Общественная конструкто - ехнологическа лаборатория изобретателей и рационализаторов в области медицины и Азербайджанский общественный институт из обре тательского творчес тв а (7I) Заявители (5 4) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СТЕПЕНИ ФИБРИНОЛИЗА

ТРОМБА

Изобретение относится к медицине а именно к биохимии крови для изучения механизма фибринолиза тромба на молекулярном уровне.

Из вес тен способ определени я степени фибринолиза тромба путем его инкубации I 11 .

Однако известный способ н е поз воляет выявить структурные превращения тромба при его фибринолизе, что и определяет его низкую точность.

Цель изобретения вЂ” повышение точности способа.

Поставленная цель дос тигается тем, что в способе определения степени фибринолиза тромба его инкубации, пробы тромба, взятые до инкубации, и инкубационную среду наносят на пластинку KRS-5 до образования пленки толщиной 10-20 мк, проводят инфракрасный спектральный анализ в области 700-4000 см, выявляют характе25 ба в интервалах 3200 см ", 1650 см и 1550 cM, а инкубационной средыв интервалах 2800 см 1, 1600 см ", 1400 can, и при частичном подавлении характеристических полос поглощения тромба определяют частичный фйбринолнз тромба, а При полном подавлении - полный фибринолиз.

Степень фибрннолиза тро;4ба при воздействии на него протеолитического фермнта, например террилитина, определяют следующим образом.

Пробу тромба помещают в 5%-ный водныл раствор террилитина.Проводят инкубацию в термостате при 37 С до фибринолиза тромба. Пробы тромба, взятые до инкубации,и инкубационную среду наносят на отдельные пластинки KRS-5, высушивают в теплом потоке воздуха в течение 15-20 мин при 25оС до образования равномерной пленки толщиной 10-20 мк, проводят инфракрасный спектральный анализ в области

700-4000 см" . На спектрограммах выявляют характеристичес кие полосы поглощения тромба в интервалах

3200 см, 1650 см, 1550 см .Характеристические полосы поглощения дпя инкубационной среды выявляют в интервалах 2800 см, 1600 см ", 1400 см . При частичном подавлении характеристических полос поглощения тромба определяют частичный фибринолиз тромба, а при полном подавлении характеристических полос - полный фибринолиз.

85550 1

Формула изобретения

О, 125 мг

Составитель Ю. Алмазов

Редактор К.Волощук Техред N.Ãoëèíêà Корректор Г.Решетник

Заказ 6896/61 Тираж 907 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва,Ж-35, Раушская наб.,д.4/5

Филиал ППП Патент ., г.ужгород, ул . Проектная,4

Пример 1.

Террилитин 0,125 мг

Бидис тиллиро ванн а я вода 0,25 мл

Тромб 0,428 мг

Температура 150 C

Время инкубации 2 ч

В спектре не обнаруживают иные полосы поглощения, кроме полос 3200 см

1650 см ", 1550 см, отвечающие белкам тромба. В примере 1 расщепления тромба не происходит. t0

Пример 2.

Террилитин . О, 125 мг Бидистиллиров анн ая вода 25 мл

Тромб 0,403 мг 35

Температура 37о С

Время инкубации l5 мин

В спектре поглощения кроме полос, принадлежащих белкам тромба (3200 см

1650 см ", 1550 см " ), отчетливо . 2О проявляются хауактеристические полосы, отвечающие продуктам ферментативного расщепления тромба вЂ,пептидам (2500 см ", 1600 см, 1400 см ) . В примере 2 обнаруживается частичное расщепление тромба.

Пример 3.

Террили тин

Бидистиллированн ая вода 25 мл

Тромб 0,412 Mr 30

Температура 37 ОС

Время инкубации 30 мин

В спектре поглощения с высокой интенсивностью проявляются характеристические полосы поглощения продуктов З5 ферментативного расщепления вЂ” пептидов (3200 см, 1600 см, 1400 см " ), полностью подавляя полосы белков тромба, В примере 3 обнаруживается полное расщепление тромба.

Таким образом, предлагаемый способ обеспечивает повышение точности опре-деления стейени фибринолиза.

Способ определения степени фибринолиэа тромба путем его инкубации, отличающийся тем,что, с целью повышения точности способа, пробы тромба, вз ятые до ин ку бации, и инкубационную среду наносят на пластинки ERS-5 до образования пленки толщиной 10-20 мк, проводят инфракрасный спектральный ан ализ в области 700-4000 см, выявляют характеристические полосы поглощения тромба в интервалах 3200 см ", 1650 см и 1550 см 1, а инкубационной среды в интервалах 2800 cM ", 1650 см-, 1400 см ", и при частичном подавлении характеристичес ких полос поглощения тромба определяют частичный фибринолиз тромба, а при полном подавлении полный фибринолиз.

Источники информации, принятые во.внимание при экспертизе

1. Гринберг Г.Б., Михайлец Г.A.

Тромболитическое действие ферментного препарата террилитина, Проблеьы гематологии и переливания крови. М,, Р 9, с.„. 21-27, 1972.

Способ определения степени фибринолиза тромба

Способ определения свободного гидрокси-пролина b плазме крови // 834518

Способ определения тканевой несов-местимости донора и реципиента // 828087

Способ количественного определения препаратов фенотиазинового ряда в биологических жидкостях1изобретение относится к области медицины,, а именно к методам анализа лекарственных препаратов.известен способ количественного определения препаратов фенотиазинового ряда в биологических жидкостях путем экстракции их с последующим разделением жидкостной хроматографией [1].однако известный способ _трудоёмок, длителен' и не обеспечивает .высокой чувствительности и воспроизводимости результатов..цель изобретения ~ повышение точности способа.эта цель достигается путем экстр^кции препаратов с последующим ра^вделением жидкостной хроматографией. при этом хроматографию ведут на катионите, а в качестве элюентов ис- 20 пользуют смесь этанола и воды, взятых в соотношении 1:5 - 5:1 по объему с добавлением 0,1-5,0% смеси уксусной кислоты и дизтиламин'а в соотношении 5:4.' способ осуществляют следующим образом.образец биологической жидкости, содержащий один или несколько препа_- ратов фенотиазинового ряда, под- ' 30101525вергают экстракции при рн 9,5 хлороформом. затем экстракт упаривают, остаток растворяют в этаноле и вводят в колонку длиной от 10 до 50 см, заполненную сильньм катионитом, например партисилом 10- scx. через колонку пропускают смесь этанола и воды с добавлением диэтиламина и уксусной кислоты. время удерживания фенотиазиновых препаратов различно. детектирование выходящих из колонки разделенных konotohehtob осуществляют по поглощению уф-света в проточной кювете. поскольку все фенотиазиновые 'препараты характеризуются сильным поглощением уф~света, такой метод детектирования гарантирует высокую чувствительность анализа. содержание препарата опреде.пяют по калибровочному графику,пример 1. , построение калибровочного графика для анализа ч нонахлазина и этмозина.к 2 мл плазмы добавляют нонахлазин и этмозин в виде водных райтворов соответствующих гидрохлоридов. прибавляют 0,5 г сульфата аммония и 0,5 мл 10%-ного аммиака. экстрагируют 2 раза по 5 мл хлороформа. объединенный экстракт испаряют'в // 826242

Патент 826241 // 826241

Способ определения фосфоновыхкислот b биологических жидкостях // 819721

Средство для очистки сыворотки при фотометрических измерениях // 791267

Способ диагностики раковых заболеваний // 428278

Способ определения чнсла аминокислотных остатков в молекулах белков // 303569

Способ определения микроколичеств полихлорпинена в растительных объектах // 275501

Способ определения антиоксидантной активности плазмы крови // 2102757

Способ дифференциальной диагностики гемморрагической лихорадки с почечным синдромом от острых распираторных вирусных инфекций и воспалительных заболеваний почек // 2104540

Изобретение относится к медицине, а именно к нефрологии и инфекционным болезням

Способ прогнозирования острого инфаркта миокарда // 2105981

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и предназначено для прогнозирования течения инфаркта миокарда

Способ определения влияния со*002 на генерацию супероксидного анион-радикала фагоцитами // 2108572

Изобретение относится к медицине и касается исследования влияния CO2 на генерацию супероксидного анионрадикала фагоцитами

Способ определения степени магниточувствительности человека // 2108581

Изобретение относится к медицине, в частности, к гигиене, может быть использовано для определения индивидуальной магниточувствительности человека при профотборе

Способ определения естественной киллерной активности лимфоцитов человека в условиях гипербарии // 2109288

Изобретение относится к области водолазной медицины и физиологии подводных погружений и может быть использовано для определения влияния факторов гипербарии (величины общего давления, вида используемой газовой смеси, типа водолазного спуска, параметров микроклимата в гипербарических комплексах и т.д.) на естественную киллерную активность лимфоцитов крови водолазов

Способ диагностики перинатальных нефропатий на стадии предболезни // 2110799

Способ определения бактериальных липополисахаридов // 2114436

Изобретение относится к медицине, а именно к способам количественного определения бактериальных липополисахаридов в процессе производства медицинских иммунобиологических препаратов

Способ обнаружения идентификации и/или количественной оценки материала, набор для анализа, оптический волновод, биосенсор // 2116349

Изобретение относится к генной инженерии, а именно к способу проведения анализов с помощью генных зондов и с использованием биосенсора, включающего детектор затухания колебаний

Способ определения количества бактерий в биопрепарате // 2117291

Изобретение относится к способам исследования биологических материалов с использованием соединений или составов для колориметрического, спектрофотометрического или флуорометрического анализа, в частности к способам определения количества бактерий в биопрепаратах, и может быть использовано в медицинской микробиологии и микробиологической промышленности