Способ приготовления гистологических препаратов

 

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Реслублик

<)9О9622 (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлемо 180880 (21) 2974827/28-13 с присоединением заявки HP (23) Приоритет

Опубликовано 2802.82. Бюллетень HP 8

Дата опубликования описания 2802,82

Р !М. Кл.

G 01 N 1/28

A 61 В 10/00

Государственный комнтет

СССР по делам нзобретеннй н открытнй

1Щ УДК 616-0918 (088. 8) Л.И. Бикбулатова, Н.Т. Бикбулатов, Х.Х. Мурэабаев и P.М. Масагутов (72) Авторы изобретения (Башкирский государственный медицинский институт им. 15-летия ВЛКСМ

{71) Заявитель (54) СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ

ПРЕПАРАТОВ

Изобретение относится к медицине, в частности к технике приготовления гистологических препаратов, используемых в морфологических исследованиях в различных отраслях науки, н может быть также использовано в биологии и ветеринарии.

Известен способ приготовления гистологических препаратов путем фик" сации и заключения в парафнновую среду (1}.

Однако по известному способу приготовление препаратов длительное и многоэтапное наблюдается низкая проникаемость фиксатора в ткань, что приводит к деструктивным изменениям, связанным с аутолическими процессами, что качественно изменяет строение ткани.

Цель изобретения — сокращение времени приготовления препаратов.

Указанная цель .достигается тем, что в способе приготовления гистоло" гических препаратов путем фиксации и заключения в парафиновую среду, фиксацию ведут в растворе состава, вес.в:

Тиофансульфоксид 20-50

Этиловый спирт 96о 76«46 в течение от 30 с до 3 ч, причем после фиксации препараты непосредственно переносят в парафиновую среду.

Тиофансульфоксид и его спиртовые растворы хранят в темном месте при комнатной температуре в сосуде с хорошо притертой пробкой. Тиофансульфоксид и его спиртовые растворы обеспечивают быструю и надежную фиксацию. Кусочки органов, размерами

0 5-1 см, фиксируют при экспозиции от 0,5 ч (30 мин) до 3-4 ч в 20%-ном спиртовом растворе тиофансульфоксида.

Эффективность фиксации Зависит от плотности и толщины объекта. При наличии кусочков более 2 см изменяют условия фиксации путем повышения концентрации тиофансульфоксида до

50%-ного или применения чистого тиофансульфоксида, а также удлинением времени фиксации (экспозиции) до 12-24 ч.

Тиофансульфоксид обезвоживает ткани, свертывает белки и уплотняет

2э объект, не вызывая резкого сжатия бИопогических структур. Тиофансульфоксид имеет преимущество перед широко применяемям фиксатором (спирт) при фиксации рыхлых н отечных

ЗО тканей.

909622

Формула изобретения

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Ромейс Б. Микроскопическая техника. М., Иностранная литература, 1953, с. 62-67.

Составитель А. Бражникова

Редактор С ° Крупенина Техред А, Бабинец Корректор В. Синицкая

Заказ 884/68 Тираж 883 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент, r. Ужгород, ул. Проектная, 4

После процесса фиксации кусочки органов переносят в смесь тиофансульфоксида, ксилола и парафина в

Разных частях. Кусочки в этой смеси в зависимости от их величины выдерживают в термостате 1 — 3 ч при 5

37 С, затем переносят в следующую о порцию смеси, состоящую иэ тиофансульфоксида и ксилола по 25 ч и

50 ч парафина. Концентрацию парафина во второй смеси повышают и выдерживают в этой смеси в термостате при

37 1 — 3 ч.

Из смеси тиофансульфоксида, ксилола и гарафина материал переносят в Расплавленный чистый парафин и )5 выдерживают 1-2 ч в термостате при

54-56 C а затем переносят во вторую порцию чистого парафина также на

1-2 ч при 54-56 С.

Пропитывание парафином завершают заливкой объекта в чистый расплавленныйй парафин в формочк ах и охла.ждением В Bope °

После укрепления кусочков на деревянные блоки делают срезы на микротоме„ которые после удаления парафина окрашивают необходимыми красками соответственно поставленным задачам (гематоксилин-зозин, Ван-1изон и др.), и заключают цо известной методике в бальзам.

Для фиксаций таких объектов, как рыхлая соединительная ткань, наиболее приемлемым является 503-ный тиофансульфоксид на этиловом спирте. Тиофансульфоксид и его спиртовые растворы обеспечивают быструю фиксацию, не вызывая существенного искажения строения тканей и органов, что дает 40 тиофансульфоксиду и его спиртовым растворам большие преимущества перед известными фиксаторами (разведения формалина, этиловый спирт, жидкость .Буэна). Тиофансульфоксид рекоменду- 45 ется как фиксатор при изготовлении обзорных препаратов и для более тонких исследований.

Преимуществом тиофансульфоксида и его спиртовых растворов (20,30и 50%-ные) является то, что такая фиксация не требует последующей промывки в воде для его удаления и обезвоживания объекта перед уплотнением парафином путем проведения через спирты.

Предлагаемый способ обеспечивает сокращение времени при изготовлении гистологических препаратов, сокращение числа реактивов, через .которые необходимо провести исследуемый объект °

Ускоренная проводка уменьшает также время пребывания биологического объекта в реактивах, что ïîâûшает качественное сохранение структур, подвергающихся обработке. Сокращение многоэтапной проводки обеспечивает экономию реактивов, в частности этилового спирта, и рабочую силу.

Испольэуемюй в предлагаемом способе фиксатор позволяет фиксировать любую ткань и кусочки органов, обеспечивая качественное изготовление препаратов для микроскопирования.

Способ приготовления гистологических препаратов путем фиксации и заключения в парафиновую среду, о тл и ч а ю шийся тем, что, с целью сокращения времени приготовления препаратов, фиксацию ведут в растворе состава, вес.4:

Тиофансульфоксид 20-50

Этиловый спирт 96 76-46 в течение от 30 с до 3 ч, причем после фиксации препараты непосредственно переносят в парафиновую ñðåду °