Способ дифференциальной диагностики амилоидоза

 

(72) Авторы изобретения

С. Н. Савицкий и Н. А. Мухин

1-й Московский ордена Ленина и ордена Трудового Красного

Знамени медицинский институт им. И. М. Сеченова (71) Заявитель (54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНБИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ

АМИЛОИДОЗА

Изобретение относится к медицине, а именно клинической иммунологии.

Известен способ дифференциальной диагностики амилоидоза от других почечных патологий путем исследования тканей организма (1)

Однако известный способ травматичен, требует длительных исследований до 710 дней и малоинформативен, что снижает точность : .диагностики. 1О

Белью изобретения является снижение травматичности и ускорение способа.

Эта цель достигается тем, что при осуществлении способа дифферендиальной диагностики амилоидоза от других почеч- 15 ных патологий путем исследования тканей организма, у пациента берут кровь 1 выделяют лейкоциты, далее проводят реакцию торможения миграции лейкоцитов с амилоидной фибриллой, выделенной из трупно- го материала, и при значении индекса миг рации от 80 до 0% диагностируют амилоидоэ. Спс" об осуществляют следующим ооразом.

Взятую из вены гепаринизированную кровь больного в количестве 5-6 мл при, о температуре 37 С отстаивают в термостате в стерильной пробирке 50 мин под углом в 45 и . 1 мин - в вертикальном положении. Полученную плазму больного отсасывают в дентрифужную пробирку и в течение 10 мин дентрифугируют при

1000 об/мин для получения лейковэвеси.

Полученный осадок трижды промывают в среде для культивирования клеток. Отмытую лейковэвесь больного насасывают в стеклянные капилляры диаметром 0,60,7 мм, свободный конец капилляра запаивают в пламени горелки и пентрифугируют 5 мин при 1000 об/мнн. Концы капилляров, содержащие клетки, нарезают на кусочки длиной 5-6 мм и немедленно погружают в камеры, заполненные средой

199 (контроль) и с добавлением амилоидной фибриллы в концентрации 50 и

100 мкгlмл (опыт). Капилляры прикреп3 971276 ф ляют на дно камеры к нанесенной заранее больная отказалась. Реакция торможения полоске вазелина, оставляя с.вободными миграции лейкоцитов с амилоидной фибрилдва конца капилляра, Обычно в одну каме- лой отрицательная (индекс миграции 85%) ру помещают два капилляра, получая при с ОПА - отрицательная (индекс миграэтом 4-е зоны миграции, Камеры пред s ции 139%), с БМК почки положительная ставляют собой стеклянные кольца разме- (индекс миграции 47%), что позволяет ром 20 ° 10-2 мм, которые приклеивают исключить диагноз амилоидоза почек н высс помощью смеси парафина и воска (4: 1) тавнтьбольнойдиагноэхроническогоннфрнта. к стандартным предметным стеклам Пример 3. Больная В., 21 год. обычно дйа кольца на одно предметное 10 Выявлена гепато- и спленомегалия, уйестекло. Камеры герметиэируют покровным@ ренное повышение общего и пря б щего и прямого бистеклами (24 24 мм) со стерильным ва- лирубина B сыво отке к ови Слир ина в сыворотке крови. С диагнозом зелином и инкубируют на строго горизонтальной площадке в термостате при темхронического гепатита получала лечение кортикостероидами (преднизолон максипературе 37 С в течение 18-20 ч, после

1З мально до 60 мг/сут) вскоре п исоеди» чего полученные эоны миграции проецинилась протеинурия 2 3% о. При поступруют при, - помощи фотоувеличителя на ленин в клинику выявлена развернутая рентгеновскую пленку (в масштабе 1: 4). картина нефротического синдрома. РеакЗоны миграции (в контроле и опыте) зарисовывают карандашом, вырезают и вэве- -р - миграции лейкоцитов с шивают на торзйонных весах. Индекс миг- тигенами {БМК почки и

20 почечными антигенами рации опрЕделяют по формуле

ОПА) была отрицательной (индексы мигмо „ / рации соответственно 109 и 102%) с

ИМ- О -",Оа /о, к амилоидной фибриллой — и оложительная где /Ьо - средний вес 4-х эон миграции в (индекс миграции 32%), при биопсии почопыте (с добавлением амилоид- >S ки выявлено отложение амилоида, что.позной фибриллы); вопиет выставить больной диагноз первичМ, — средний вес 4-х зон миграции ного амилоидоза с поражением почек (предв контроле. ниэолон отменен).

Реакцию оценивают положительной Предложенный способ применен при при индексе миграции ниже 80%. щ обследовании 148 больных с различными

Пример 1. Больная П., 19 лет. нефропатнями. Установлено, что предлоДо 3-х летнего возраста 8 раз перенесла женный способ атравматичен, информатипневмонию, в последующем периодически вен и требует не более суток для постаобострение хронического бронхита. Появ . новки диагноза, в то время, как при ление отечного синдрома, слабость, выяв-з> применениииэвес ногоспособа-7-10дней, лена протеинурия до 2,6%о. Поступила в Ф o p м у л а и з о б р е т е н и я клинику для уточнения диагноза. Реакция Способ дифференциальной диагностики торможения миграции лейкоцитов с почеч- амилоидоза от других почечных патологий ными антигенами (базальной мембраной пУтем исследовании тканей оРганизма, клубочков почки (БМК) и водно- олевым 111 о T Jl H ч B 1o IIl H " c Я

1, экстрактом почки - общим почечным анти- целью снижениЯ тРавматичности H усхо геном (ОПА) была отрицательной (индек- РениЯ способа, У пациента беРУт кРовь, сы миграции соответственно 105 и 100%) выделЯют лейкоциты, далее пРоводЯт Реак. с амилоидной фибриллой - положительная цию тоРможениЯ мигРации лейкоцитов с (индекс миграции 59%). При биопсии сли-.4 амилоидной Фибриллой выделенной Не зистой прямой кишки и ткани почки обна- тРУпного матеРиала, и пРи значении инружен амилоид. докса миграции от 80 до 0% диагностиПример 2. Больная Ш., 28 лет.,Р Т амилоидоз

В детстве перенесла ревматизм, ставился Источники информации, диагноз ревматического митрального лоро- g) принятые во внимание при экспертизе ка сердца. В последние годы выявлена 1. Варшавский В. А., Березина Т. А. протеинурия, сначала следовая, затем до Диагностическое значение биопсий слиэис1,2%о. Поступила в клинику с прецполо- той оболочки прямой кишки и ткани десны жительным диагнозом амилоидоэа почек. при амилоидозе. Труды 1- .о Московского

При биопсии десны амилоид не обнаружен, медицинского института, т. 83, с. 105от биопсий слизистой кишки и ткани почки 106, 1975 (прототип).

ВНИИПИ Заказ 8767/8 Тираж 714 Подписное

Филиал ППП "Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4