Способ получения эйкозапентаеновой кислоты

 

Союз Соввтскми

Соцнапнстнческми

Рвспубпнк

ОПИСАНИИ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

А 61 К 31/185

// С 07 С 57/02

1Ьеударотеаииый комитет

СССР до делам изобретений и открытий

Опубликовано 15.11.82. Бюллетень № 42

Дата опубликования опнсання 17.11.82 (53) УДК615.45;

:547.295.96 (088.8) ! (,. . „, Д тt я

1

В.Е. Васьковский и Н.А. Ромашина с . " "" - - : т т0т . . >"..Г г1 р

1 /!

Институт биологии моря Дальневосточного научного центра

AH СССР (72) Авторы изобретения (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУ4ЕНИЯ ЭЙ1:ОЗАПЕНТАЕНОВОЙ

КИСЛОТЫ

Изобретение относится к химикоФармацевтической промышленности и может быть использовано в биохимии, дистологии, гематологии, эндокринологии, Известен способ получения эйкозапентаеновой кислоты, включающий экстракцию липидов из сырья животного происхождения смесью растворителей хлоро1 форм-метанол, омыление выделенных ли- . пидов раствором метилата натрия в ме.- то таноле, этерификацию избытком хлористого водорода в метаноле, экстрагиро" ванне метиловых эфиров гексаном и их очистку колоночной хроматографией на селикагеле с последующей элюцией opra-т5 ническим растворителем, разделением метиловых эфиров колоночной хроматограОН ей и элюцией целевого продукта 1 ).

Однако в известном способе используется сырье, в котором наряду с эйкозапентаеновой кислотой присутствует в значительных количествах докозагексаеновая, которая при выделении эй козапентаеновой кислоты затрудняет ее очистку, а препараты эйкозапентаеновой кислоты с примесью докозагекса-. еновой могут вызывать побочные эфФекты, не давать нужных произволных.

Цель изобретения - расширение сырьевой базы.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу получения эйкозапентаеновой кислоты, включающему экстракцию липидов из сырья животного происхождения смесью растворителей хлороформ-метанол, омыление выделенных липидов раствором метилата натрия в метаноле, этерификацию избытком хлористого водорода в метаноле, экстрагирование метиловых эфиров гексаном и их очистку колоночной хроматографией на силикагеле с последующей элю цией органическим растворителем, раз,делейием метиловых эфиров колоночной хроматографией и элюцией целевого про973128

150 мл

3 дукта, в качестве сырья используют гонады морского ежа S t rongy l ocen t rotus 1пйетед1ы, а элюцию целевого продукта осуществляют последовательно смесями органических растворителей с увеличивающейся полярностью, внача" ле гексаном, далее смесью гексан-серный эфир при их соотношении 96:4 и затем смесью гексан - серный эфир - уксусная кислота при соотношении по- (10 следних (96:4: 0,5) - (80: 20: 2,5) .

ll р и м е р. 10 r гонад, самцов морского ежа Ьtronqylocentrotus interm6dfus гомогенизируют при комнат.ной температуре в 30 мл смеси раство- ителей хлороформ-метанол (1:2), Фил труют, разбавляют 10 мл воды и 1О мл ю хлороФорма, хлороформный 1слой отбирают, концентрируют на роторном исяарителе при 30-35 С, 2,4 г выделенО ных липидов разбавляют 50 мл бензола, омыляют 100 мл 0,5 метилата натрия в метаноле при 50 С 10-15 мин, этерифицируют избытком 53 хлористого водорода в метаноле, разбавляют 400 мл

И воды и экстрагируют метиловые эфиры гексаном (400 мл) дважды. Экстракт концентрируют, и мввиловые эфиры очищают колоночной хроматографией на

20 r силикагеля Moelm, элюируя мети" ловые эфиры 100 мл гексана и 50 ил смеси растворителей гексан - серный эфир (95;5). Содержание эйкозапентаеновой кислоты в полученной смеси жирных кислот 36,63 (определяют методом газожидкостной хроматографии), 1,4 г метиловых эфиров разделяют колоноч-, ной хроматографией на 30 г активиро- ванного силикагеля Woelm и импрегнированного 54 нитрата серебра. Элюцию с колонки осуществляют следующими системами:

Гексан 100 мл

Гексан - серный эфир (96т4) 100 мл

Гексан - серный эфир - уксусная кислота (96:4:0,5) 100 мл

Гексан — серный эфир- уксусная кислота (96:4:1) 100 мл 50

Гексан - серный эфир- уксусная кислота (96:4 .1,5)

Гексан - серный эфируксусная к (95:5:2) ислота 55

100 мл

ВНИИПИ Заказ 8565/5 . Т

Гексан - серный эфир- уксусная кислота (90: 10: 2) 100 мл

Гексан " серный эфир- уксусная кислота (85:20:2,5) 100 мл

146 г эйкозапентаеновой кислоты (чистота 96,6a) получено при элюции системами 8,9. Выход составляет 28,53 от теоретического.

Предлагаемый способ позволяет наладить в отечественном производстве выпуск эйкоэапентаеновой кислоты вы" сокой чистоты для научных целей и для получения препаратов, обогащенных эйкозапентаеновой кислотой для диетологии. Это возможно благодаря применению нового вида сырья для ее получения -, гонад морского ежа Strongylocentrotus lntermedius, практически не содержащего примесей докозагексаеновой кислоты. Сырье легко доступно. Для освоения способа не требуется особого оборудования и реагентов для выделения кислоты.

Формула изобретения

Способ получения эйкозапентаеновой кислоты, включающий экстракцию липидов из сырья животного происхождения очесью растворителей хлороформ - метанол, омыление выделенных липидов раствором метилата натрия в метаноле, этерификацию избытком хлористого водорода в метаноле, экстрагирование метиловых эфиров гексаном и их очистку колоночной хроматографией на сили-. кагеле с последующей элюцией органическим растворителем, разделением ме" тиловых эфиров колоночной хроматографией и элюцией целевого продукта, о тл и ч а ю щ и "ся тем,,что, с целью расширения сырьевой базы, в качестве сырья используют гонады морского ежа Strongylocentrotus intermedlus а элюцию целевого продукта осуществля ют последовательно смесями органических растворителей с увеличивающейся полярностью, вначале гексаном, далее смесью гексан"- серный эфир при их соотношении 96:4 и затем смесью гексан " серный эфир - уксусная кислота при соотношении последних (96:4:0,5)(80:20:2)5) °

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Патент Японии Р 84.519, кл. 2 (2)(30) 396, 1979 . ираж 714 Подписное жгород, ул. Проектная, 4