Способ определения трофической активности планктонных организмов

 

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТРОфЙЧЕСКСЛ АКТИВНОСТИ ПЛАНКТОННЫХ ОРГАНИЗМОВ , включакщий их вьщерживание в темноте, последуюй ее освещение преptiiBHCTbiM светом с длинвй волны 600670 нм и измерение интенсивности замешенной флуоресценции, о т л ичающийся . тем, что, с повышения точности, использу|рт планктонные организмы в концентрация 1000-20000 клеток/мл в экспоненциальной фазе роста, а перед освещением вносят организмы-фитофаги, выдержанные без корма в течение; 1-3 сут. в количестве 1-10 особей на 1 мл культуры планктонных организмов, к по снижению сигнааа замедленной флуоресценции определяют .трофическую I активность., л с

(19) (!B

COOS СОВЕТСНИХ

СОЯЩЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

Пб ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ

И АВТОРСКОМ,Ф СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 2968133/30-15 (22) 30е05 ° 80 (46) 15 07 83 Бюл» 9 26

:(72) О.П. Щвылев, М.В. Переладоэ и С.A. Патин (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт морского рыбного хозяйства и океанографии (53) 591.524.12(088.8) (56) 1. Патент США 9 3564588, кл. 195-1035, 1972.

2. Авторское свидетельство СССР

9 381336, кл. А 01 К 67/00, 1973.

3. Авторское свидетельство СССР

В 547199 кл. A 01 К 67/00, 1977. (54) (57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТРОфИ1ЕСКОй AKWSaHOCm

3(51) О 01 N 33/52) A 01 К 67/10

НИЗМОВ, включающий их выдерживание в темноте, последующее освещение пре». рывистым светом с длиной волны 600-

670 нм и измерение интенсивности замедленной флуоресценции, о т л ич а ю шийся .тем, что, с целью повыаения точности, используют планктонные организмы в концентрации

1000-20000 клеток/мл в эксцоненциальной фазе..роста, а перед освещением вносят организмы-фитофаги, выдержанные без корма в течение,1-3 сут. э количестве 1-10 особей на 1 мл культуры планктонных организмов, и по снижению сигнаиа замедленной флуоресценции определяют .трофическую

- активность.

1029079

Изобретение относится к гидробиологии и может быть использовано в водной токсикологии, экологии и рыбоводстве.

Известен способ определения биологической активности фитопланктонных организмов путем дифференциального окрашивания после патогенного воздействия (1 J.

Однако этот способ не обеспечивает высокой точности измерения, требует много времени и является трудоемким.

Известен способ оценки токсичности химических веществ для водных организмов путем предварительной экспозиции тест-объектов в условиях гипоосмоти- 15 ческой нагрузки с последующим выдерживанием в опытной и контрольной средах 52 3.

Этот способ также является трудоемким, требует много времени и не обеспечивает высокой точности изме-. рения.

Наиболее близким техническим,-решением к предложенному является способ определения трофической активнос-g5 ти планктонных организмов, включающий их выдерживание в темноте, последующее освещение прерывистым светом с длиной волны 600-670 нм и измерение интенсивности замедленной флу оресценции 3 1.

Однако известный. способ не обеспечивает высокой точности измерений.

Целью изобретения является повышение точности измерения.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу определения трофической активности планктонных организмов, включающему их выдерживание в темноте, последующее освещение прерывистым светом с дли- 40 ной волны 600-670 нм и измерение интенсивности замедленной флуорес- ценции, используют планктонные организмы в концентрации 1000-20000. клеток/мл в экспоненциальной фазе рос- 45 та, а перед освещением вносят организмы-фитофаги, выдержанные без корма в течение 1-3 сут в количестве

1 10 особей на 1 мл культуры планктонных организмов, и по снижению 50 сигнала замедленной флуоресценции определяют трофическую активность.

Пример 1. Берут культурУ хлореллы в экспоненциальной фазе рос-55 та в концентрации 8000 клеток/мл, помещают в кварцевые кюветы объемом

5 мл, выдерживают в темноте 10 мин, в каждую кювету вносят фитофаги (дафнии), выдержанные без корма s тече- 60 ние 1 сут в количестве 20 особей1

Кюветы с организмами освещают в камере фосфороскопа прерывистым светом длиной волны 630 нм и измеряют замедленную флуоресценцию в течение

10 с через каждые 10 мин на протяжении 40 мин. Величина ET5 äëÿ дафний составляет 9 мин.

5о

Пример 2. То же, что в примере 1, но берут культуру хлореллы в концентрации.20000 клеток/мл, выдержанную в темноте 15 мин, вносят в кюветы по 50 дафний, освещают светом с 1 670 нм и измеряют сигнал замедленной флуоресценции в течение

60 мин. Величина ET >- составляет

12 мин.

Пример 3. Тоже, чтовпримере 1, но концентрация хлореллы составляет 1000 клеток/мл, выдержка в темноте 5 мин, количество вносимых дафний 5 особей, 600 нм, длительность измерения 30 мин. Величина

ЕТ<о равняется 11 мин.

П р имер 4. Тоже, что в примере 1, но концентрация хлореллы составляет 35000 клеток/мл, выдержка в темноте 20 мин, количество дафний

75 особей, 700 нм, длительность измерения 100 мин, ЕТ не поддается точному графическому определению в связи с тем, что снижение сигнала замедленной флуоресценции во времени носит нелинейный характер из-за внесения погрешности в сигнал за счет флуоресценции самих дафний, присутствующих в большом количестве в единице объема.

Пример 5. То же, что в примере 1, но концентрация хлореллы составляет 5000 клеток/мл, выдержка в темноте 2 мин количество дафний

2 особи, Л 580 нм, длительность измерения 15 мин. Величина ЕТ равняется 34 мин. При укаэанных экспериментальных условиях продолжительность опыта увеличивается более чем в 3 раза. .Пример 6. То же, что в примере 1, но дафнии перед внесением в кварцевую кювету экспонируют в присутствии поверхностно-активного ве» щества в концентрации 10 мг/л. Величина ЕТ равняется.600 мин, что указывает на подавление трофической активности дафний в 66 раз .

Предложенный способ можно использовать для оценки нарушения трофич еской активности планктонных фитофагов под влиянием любых физикО-химических факторов, в том числе и загрязняющих примесей типа ртути, мышьяка и др., а также для выявления скрытых сублетательных эффектов, По сравнению с известными предложенный способ требует значительно меньших затрат квалифицированного труда и времени (минуты вместо суток) .

Кроме того, его отличает более высо1029079

Составитель A. Макаров

Редактор Л. Повхан Техред С.Мигунова Корректор р. Макаренко

Заказ 4968/42 Гираж 873 Подписное вНИИПИ Государственного комитета СССР но делам изобретений и открытий

113035, Москва, й-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 кая точность, так как он учитывает рые вносят значительные погрешности выедание только живой взвеси и не ре- прн измерении остальными спосогистрирует косные компоненты, кото- бами.