Штамм @ @ @ -2384,используемый для очистки промышленных сточных вод коксохимических производств от роданидов

Авторы патента:

ПЕРМЯКОВА РАИСА ПАВЛОВНА

ГРИШАЕВА ВАЛЕНТИНА ДМИТРИЕВНА

ВОЛЯНСКИЙ ЮРИЙ ЛЕОНИДОВИЧ

РОДЬКИН СВЕТОСЛАВ ПЕТРОВИЧ

ГРИЦАЕВ ЕВГЕНИЙ ИЛЬИЧ

ДВОРЕЦКИЙ БАЯН МАКСИМОВИЧ

УШАКОВ ЕВГЕНИЙ БОРИСОВИЧ

ПАК АЛЛА ЛЕОНИДОВНА

КРАВЧУК ВАЛЕНТИНА ФЕДОРОВНА

ГОРИЧЕВА НИНА ИВАНОВНА

C12R1/01 - Схема кодирования для подклассов C12C-C12Q или C12S, относящаяся к микроорганизмам

C02F3/34 - отличающаяся используемыми микроорганизмами

C02F103/34 - Обработка воды, промышленных и бытовых сточных вод или отстоя сточных вод (разделение вообще B01D; специальные устройства на судах для обработки воды, промышленных и бытовых сточных вод, например для получения питьевой воды B63J; добавление к воде веществ для предотвращения коррозии C23F; обработка жидкостей, загрязненных радиоактивными веществами G21F 9/04)

C02F101/10 - Обработка воды, промышленных и бытовых сточных вод или отстоя сточных вод (разделение вообще B01D; специальные устройства на судах для обработки воды, промышленных и бытовых сточных вод, например для получения питьевой воды B63J; добавление к воде веществ для предотвращения коррозии C23F; обработка жидкостей, загрязненных радиоактивными веществами G21F 9/04)

Штамм,Thiobacillus thiodyanoxidans В-2384 (депонирован в Центральном музее про№Л1шенных микроорганизмов института ВНИИгёнетика, коллекционный номер ЦМПМ В-2384), используемой для очистки промышленных сточных вод коксохимических производств от роданидов. (Л о: оо 00 со

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (И) .

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н ABTOPGHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ГО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И OTHPbfTHA (21) 3404837/28-13 (22) 09.03,82 (46) 30.12.83., Бюл. 9 48 (72) P.Ï. Пермякова, В.Д. Гришаева, Ю.Л. Волянский, С.П. Родькин, Е.И. Грицаев, Б.M. Дворецкий, Е.Б. Ушаков, А.Л. Пак, В.Ф. Кравчук и H.È ° Горичева (71) Кузнецкий филиал Ордена Трудового Красного Знамени Восточного научно-исследовательского углехимического института и Новокузнецкий ордена Трудового Красного Знамени институт усовершенствования врачей (53) 663.18(088.8) (56) 1. Путилина Н.Т. Микробы, окисляющие роданистые и цианистые соединения в сточных водах . -"Иикробиоло-: гия", 1962, Т, ХХХ, в. 2, с. 294-298.

2. Юровская Е.M. Бактерии, окисляющие роданистые соли в промышленных сточных водах . вЂ” "Микробиологический журнал", 1971, т. 33,в. 2. с, 148-151.

3(5D С 12 N 15/00//С 02 F 3/34, С 12 R 1/01 (54 ) (() )4)4 THI0BAC ILLUS THI0CYAN0XIDANS В-23&4, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ОЧИСТКН. ПРОМЫШЛЕННЫХ СТОЧНЫХ ВОД КОКСОХИИИЧЕСКИХ ПРОИЗВОДСТВ ОТ РОДАНИДОВ. (57) Штамм, Thiobac illus thiodyanoxidans В-2384 (депонирован в Центральном музее промпаленных микроорганизмов института "ВНИИгенетика", коллекционный номер ЦМПМ В-2384), используемый для очистки промышленных сточных вод коксохимических производств от роданидов.

1063831

Изобретение относится к микробиологической промышленности и касается нового штамма бактерий, испольэveMoго для разрушения роданидов при очистке промышленных сточных вод коксохимичесцих производств.

Известны штаммы роданразрушающих микроорганизмов, близких к роду

Pseudomonas non 2ipusactis и сходных с Ва . thiocyanoxidags Happoid °

Штаммы имеют следующую характеристику.

Морфологические признаки.. Короткие, мелкие, утолшенные палочки, напоминающие кишечные, но размером меньше в 4-5 раэ. Длина клеток 0,2- )5

0,5 мкм. Неподвижные. По Граму окрашиваются отрицательно или в неопределенный розовато-голубой цвет.

Физиологические признаки. Аэроб.

Оптимальная температура жизнедеятель-20 ности 25-30 С, Оптимальный рН 6,8-7,2

Культуральные свойства. При росте на агаризованной среде образуются колонии в виде росинок. На мясопептонном агаре вырастают подобные колонии, но более крупные, при этом среда окрашивается в желто-зеленый. цвет. После культивирования на мясо-пептонном агаре теряет способность окислять роданиды.

Биохимические свойства. Не изменяют молоко и сахаров, не продуцируют индол и сероводород, не разжижают мясо-пептонную желатину (1j .

Известны штаммы вида Thiobaoiifus

thiосу8,похidanз разрушающие роданиды в сточных водах и имеющие следующую характеристику.

Морфологические свойства. Мелкие, короткие, палочки с округленными .краями, похожие на коккобактерии. 40

Длина клеток 0,5-0,7 мкм, ширина

0,2-0,3 мкм. Располагаются отдельно.

Спор не образуют ° Окрашиваются по

Граму отрицательно. Слабо окрашиваются метиленовым синим и фукси- 45 ном. Подвижны. Размножаются делением. Типичный признак: постоянство формы и величины клеток.

Культуральные признаки. На мясопептонном агаре и плотных элективных родановых средах образуют очень мелкие, прозрачные, круглые колонии, Растут на питательных средах, включающих промышленные сточные воды, содержащие роданиды.

Биохимические признаки. Не ферментируют лактозу, глюкозу. маннит, мальтозу, сахароэу., не образуют индол, выделяют сероводород (2) .

Недостатками штаммов являются: сравнительно низкая интенсивность 60 окисления роданидов в промышленных сточных водах (до 80 г/M5 ° сутки, медленное развитие бактерий (5-6 сутокj и низкая удельная скорость роста бактерий. 65

Цель изобретения вЂ” создание нового штамма, интенсифицирующего процесс окисления роданидов в сточных водах.

Поставленная цель достигается использованием штамма Thiobaci2lus

thiocyanoxidans В-2384 для очистки промышленных сточных вод коксохимических производств от роданидов.

Предлагаемый штамм отличается от известных своими морфологическими, физиологическими и биохимическими свойствами, а также выраженной способностью окислять роданистые соединения.

Штамм выделен иэ почвы и адаптирован на питательных средах, содержащих роданиды до 0,4 мг/л.

Штамм имеет следующую характеристику.

Морфологические признаки. Клетки палочковидные, мелкие, короткие, размером 0,8-1 0.,5-0,6 мкм с закругленными краями, Располагаются поодиночно, размножаются делением. Полиморфные. По методу Грама окрашиваются отрицательно. Окраска клеток равномерная, интенсивная. Кислоточувствительны. Включений и спор не имект, выраженной капсулы не образует. Подвижные °

Физиологические свойства. Аэроб, температурный диапазон роста 25-42оС

Оптимальная концентрация водородных ионов среды (рН) вЂ” 8,0, при рН 77,g рост слабый. добавление к мясопе тонному бульону поваренной соли до 2Ъ стимулирует рост, концентрация соли 6% и выше приводит к полной задержке роста культуры.

Культуральные свойства. На мясопептонном агаре (МПА) суточная культура образует колонии диаметром 23 мм с блестящей поверхностью, возвышенным центром, ровным и плоским краем. Колонии бесцветные, непрозрачные, легко снимаются петлей. Агар вокруг колоний не окрашивается. На

МПА с добавлением 3-5Ъ крови зоны гемолиза не дает. На средах Эндо, Левина, Плоскирева колонии мелкие, диаметром 0,5-1 мм сухие, матовые, плоские с приподнятым центром, на висмут-сульфит агаре роста нет. На

МПБ по Хиттигеру штамм дает равномерную муть без образования пленки.

На синтетической агаризованной родановой среде при 30-37ОС штамм через 48 ч образует мелкие точечные колонии, выпуклые с блестящей поверхностью, ровным краем, непрозрачные. Петлей снимаются легко ° Штамм приводит к легкой опалесценции жидкой родановой среды в первые сутки роста при 30-37ОС, через 48 ч дает равномерную муть.

Биохимические свойства. Неактивен в отношении глюкозы лактоэы, мальто. зы, сахарозы, ксилозы, арабинозы, 1063831 галактоэы, маннита, дульцита, иноэита, сорбита. Гроба Хью-Лейфсона отрицательная (окисление и фермента . ция глюкозы не происходят), Ацетилметилкарбонил не образует, реакция с метил-рот отрицательная. Крахмал не гидролизует. Протеолитическими свойствами не обладает (желатин не разжижает, молоко не свертывает, реакцию молока. не изменяет) . Индол и сероводород не образует. Продуцирует оксидаэу,кат.алазу, не облада-.ет уреаэной активностью.Цитрат в качестве единственного источника углерода не может использовать. В среде Виноградского,окисляет нитриты 15 до нитратов (в пределах 30% от ис ходного количества нитритов) .

Не утилизирует аргинин, лизин и орнитин (аргининдигидролаза) лиэини орнитиндекабоксилазы отсутствуют. gp

Штамм депонирован во Всесоюзном научно-исследовательском институте генетики и селекции промышленных микроорганизмов и ему присвоен шифр

ЦМПМ В-2384. Хранится в музеях живых 75 культур микробов Кузнецкого филиала

Восточного научно-исследовательского углехимического института и .кафедры микробиологии Новокузнецкого института усовершенствования врачей.

Выделенный штамм сохраняют в лабораторных условиях на жидкой родановой среде следующего состава: водопроводная вода 1 л, NH CNS 0,3 r., .

КН2Р04 0,5 г; MpS04 0,1 г; FeS04 слек<нР04 0,5 r, 35

Роданраэрушающая активность штамма поддерживается путем пересевов на жидкие родановые среды (соотношение 1:4 ). Инкубация 24 ч при 30 С, в последующем штамм следует хранить 40 при температуре 1-4 С в темноте.

Пример 1. Штамм Thiobaci2lus

thiocyanoxidanq В-2384 используют для обеэроданивания промышленных сточных вод коксохимических произ- 45 водств, Роданазная активность штамма проверена на лабораторной установке со свгочными водами коксохимических производств ° Основные параметры бактериального обезроданивания промышленных сточных вод следующие: оптимальная температура процесса обеэроданивания 28-30 С, рН срео ды 7,8-8,0. Испытания проводят в ферментаторах периодического культи-. вирования микроорганизмов.

Сточная вода коксохимического производства, содержащая роданиды . 450 Mr/л, фенолы 1-5 мг/л, общий азот 3000 мг/л, цианиды 15-20 мг/л, 60 смолы и масла 5р-60 мг/л Обезроданивается за 4-5 сут, отноеительная скорость окисления 73-92 мг/л в сутки. Остаточное содержание роданидов составляет 1-3 мг/л.

Пример 2. Штамм Thiobaci22.is

thiocyanoxidans В-2384 используют для обеэроданивания родановой жидкой среды с концентрацией роданидов (NH4 CNS ) 240 мг/л; K ZHP04 500 мг/л, КН .Р04 500 мг/л; Ре $04 следя. Обезроданнвание производят в условиях примера 1 ° Относительная скорость обеэроданивания 120 мг/л в сутки.

Остаточное содержание роданидовдо 1 мг/л.

Предлагаемый штамм интенсивно развивается на родановых синтетических средах и МПА в первые сутки.

B динамике обезроданивания многократно изучались ферментативные свойства штамма и существенных отклонений от характеристик исходного штамма не отмечено.

При сравнительно короткой лагФазе период экспоненциального роста культуры наступает уже через 3-5 ч культивирования в отличие от известного, у которого развитие наблюдается на 5-6 сутки. По исследованным параметрам периодическая культура предлагаемого штамма охарактеризована как быстрорастущая.

Таким образом, штамм Thiobacillus

thiocyanoxidans В-2384 обеспечивает эффективное обезроданивание, например, характеризуется высокой (1 сутки) скоростью роста и стабильностью ферментативных свойств.

Активность штамма беэ аэрации при. ведена в .табл. 1 и с аэрацией подтверждается данными, приведенными в табл, 2.

Результаты испытаний. В период проведения испытаний массовая концентрация роданидов в среде и сточной воде колебались от 240 до 500 мг/л, а конечная 1-3 мг/л. Исследования проводились с подачей и беэ подачи воздуха в ферментатор. Длительность эксперимента составляла от 1 до 7 суток.

Таким образом, лабораторные испытания штамма В-2384 показали высокую окислительную способность по отношению к роданидам на синтетической родановой среде 169 мг/л. сут ь(169 г/м ° сут), а на промышленных водах 83 г/мэ сут, что выше известного штамма (до 80 г/м -сут).

Использование предлагаемого штамма для очистки коксохимических сточных вод от роданндов позволит сократить время обезроданивания (с 5 су ток до 1 суток), и увеличить съем роданидов.

1063831

Т а б л и ц а 1

Массовая концентрация роданидов в ферментаторе, мг/л

Относительная скорость окисления, мг/л сут

Время обезвреживания, сут

Состав среды, мг/л

Среде до испыта- после ний

CNS 400-500, фенолы 1-5, общий азот

3000, фосфор 5-10

400

Сточная .вода коксохимического производства после

1-й ступени очистки (от фенолов) 400