Способ выделения альбумина

 

СПОСОБчВВДЕЛЕНИЯ АЛЬБУМИНА путем обработки крови человека водным раствором полиэтиленгликоля, отделения надосадочной жидкости, извлечения альбумина, отличающийся тем, что, с целью повы- . шения выхода и степени очистки целевого продукта, обрабатьгаают водный раствор белка концентрации 5-40 г/л, содержащий 50-80% альбумина и группоспецифические вещества крови, полиэтиленгликолем с ММ от 2000 до 10000 при рН 6,6-9,6 до концентрации полиэ тилен гликоля 13-30%. V

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

WUWIMOIN

РЕСПУБЛИК зцр А 61 К 37/02

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И 03МРЫТИЙ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ (21) 2507261/28-13 (22) 29.07.77 (31) 41762/77 (32) 12.04.77 (33) Япония (46) 30.11.84. Бюл. Р 44 (72) Ерихико Мурата и Зйзо Цуцуи (Япония) (71) Дзе Грин Кросс Корпорейшн (Япония) (53) 611-018.54(088.8) (56) 1. Cohns sixth procedure of

low tempetature ethanol fractionati

on and modification thereof (Japanese Patent И265704, Publication

N5297/60).

2. Шинкаренко А.А. Автореферат докт. дисс. Киев, 1972, с. 7-.18 (прототий). (54) (57) СПОСОБ ВЬЩЕЛЕНИЯ АЛЬБУМИНА путем обработки крови человека водным раствором полиэтиленгликоля, отделения надосадочной жидкости, извлечения альбумина, о т л и ч а юшийся тем, что, с целью повышения выхода и степени очистки целевого продукта, обрабатывают водный. раствор белка концентрации 5-40 г/л, содержащий 50-803 альбумина и группоспецифнческие вещества крови, полизтиленгликолем с ММ от 2000 до

10000 при рН 6,6-9,6 до концентрации полиэтиленгликоля 13-30Х.

525

Составитель Е.Колчина

Техред О.Ващишина Корректор M.Максимишинец

Редактор С. Тимохина

Заказ 8760/46 Тираж 687

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписное Филиал ППП "Патент", r.Óærîðîä, ул.Проектная, 4

1 1127

Изобретение относится к медицине (биотехнологии), в частности к спосо- бам получения альбумина из крови человека.

Известен способ получения альбумина из крови человека путем низкотемпературного фракционирования крови этанолом по Кону (1) .

Известен. также способ выделения альбумина из крови человека путем 10 обработки водным раствором полиэтиленгликоля, отделения надосадочной жидкости и извлечения альбумина (2) .

Однако получение альбумина по известным способам не обеспечивает дос- 15 таточно высокий выход целевого продукта и достаточную степень его очистки.

Целью изобретения является повышение выхода и степени очистки целево- 20

ro продукта.

Эта цель достигается тем, что согласно способу выделения альбумина путем обработки крови человека водным раствором полиэтиленгликоля от- 25 деления надосадочной жидкости, извлечения альбумина, водный раствор белка концентрации 5-40 г/л, содержащий

0-80Х альбумина и группоспецифичесие вещества крови, обрабатывают полиэтиленгликолем с MM от 2000 до

10000 при рН 6,6-9,6 до концентрации полиэтиленгликоля 13-30Х.

Пример. Примерно 600 кг тонко нарезанной плаценты смеши35 вают с 700 л 1 -ного водного солевого раствора. Смесь перемешивают при температуре ниже 12 С в течение

45 мин для экстракции компонентов крови. Экстракт центрифугируют для удаления остатков плаценты. К 1 л экстракта добавляют 285 r сульфата аммония и образовавшийся осадок, содержащий гамма-глубулин, отделяют.

К наДОсаДОчной жиДКОсти Добавляют 45 сульфат аммония в количестве 200 г/л

-и доводят рН раствора до 6-7 ° Выпавший 1 осадок растворяют в деионизированной дистиллированной воде в соотношения

7 л на 1 кг осадка. Полученный раствор смешива10Т с миндальной кислотой до конечной концентрации кислоты 4Х.

Поддерживая рН раствора на уровне

4,9-5,0,его прогревают при 58-60 С в течение 1 ч для осаждения термолабильных белков.

Полученный белковый раствор содержит 1,5Х альбумина. Для извлечения группоспецифических и гипотонических веществ раствор доводят до концентрации белка 5-40 г/л и концентрации хлорида натрия 5Х или менее. Затем в нем растворяют 220 г твердого полиэтиленгликоля с молекулярным весом 600 в расчете íà 1000 мл раствора и доводят рН среды до 8,0 для осаждения части белка. Осадок отделяют и получают раствор, содержащий в основном альбумин. С целью осаждения альбумина из раствора рН последнего снижают до 4,5-5,6. Выпавший в осадок альбумин отделяют путем дегидратации и получают плазменный белок, содержащий альбумин, очищенный от группоспецифических и гипетонических веществ.

Полученный осадок растворяют в деионизированной дистиллированной воде и анализируют электрофоретическим методом.

Полученный белок содержит 95-98Х альбумина, 2-5Х альфа-глобулина и бета-глобулина.

Выход альбумина составляет 2,3г на плаценту.

Предлагаемый способ позволяет повысить выход и степень очистки целевого продукта и получить преларат альбумина человека, не подвергающийся денатурированию, нетоксичный и очищенный от группоспецифических и гипотенических веществ.