Способ получения раствора альбумина



 

Изобретение относится к медицинской промышленности. Проводят фракционирование плазмы на фракционных столах с выделением сырого осадка альбумина. Растворение его в апирогенной дистиллированной воде с последующей осветляющей фильтрацией и ультрафильтрацией на установке Sartakon-2. Розлив во флаконы и пастеризацию препарата. Изобретение позволяет повысить качество продукта. 1 з.п.ф-лы, 1 ил.

Изобретение относится к медицинской промышленности и может быть использовано для получения раствора альбумина, применяемого для внутривенного введения гемодинамического действия и парэнтерального питания.

Основным сырьем для получения раствора альбумина служат различные виды донорской плазмы, заготовленные согласно нижеперечисленным документам: 1. Инструкция по фракционированию крови на клеточные компоненты и плазму, утвержденная МЗ СССР 06-14/24 от 11.06.87 г.

2. Инструкция по медицинскому освидетельствованию доноров крови, плазмы, клеток крови, утвержденная МЗ РФ от 16.11.98 г.

3. Приказ МЗ СССР за 155 от 12.04. 90 г. "О совершенствовании деятельности учреждений службы крови".

Альбумин относится к полипептидам, по форме макромолекулы представляет собой глобулярный белок и является белковым компонентом гемоглобина.

Разделение белков плазмы крови доноров достигают путем изменения на разных этапах фракционирования величины рН, концентрации спирта, температуры и ионной силы. В процессе фракционирования химических превращений не происходит.

Известен способ получения раствора альбумина, разработанный НИИ гематологии и переливания крови МЗ УССР (типовой регламент производства раствора альбумина 5, 10, и 20%), утвержденный в 1987 г.

Способ заключается в фракционировании плазмы на фракционных столах с выделением сырого осадка альбумина и растворении его в апирогенной дистиллированной воде, центрифугировании и осветляющей фильтрации с последующим розливом для замораживания и сушки. После стадии лиофилизации сухой альбумин растворяют, подвергают стерилизационной фильтрации, производят розлив во флаконы и пастеризуют.

Недостатками известного способа являются трудоемкость процесса и невозможность получения более качественного продукта. Качественные показатели раствора альбумина, полученные по известному способу, соответствуют нормативным показателям.

Изобретением решаются задачи улучшения качества продукта и снижения трудоемкости технологического процесса.

Для достижения названного технического результата в предлагаемом способе, включающем стадии фракционирования плазмы на фракционных столах с выделением сырого осадка альбумина и растворением его в апирогенной дистиллированной воде с последующей осветляющей фильтрацией, розливом во флаконы и пастеризацией препарата, стадия сублимационной сушки заменена ультрафильтрацией на установке Sartakon-II (отмывание молекул спирта и других низкомолекулярных примесей 5-ти кратным объемом воды).

Это позволяет улучшить качество получаемого раствора альбумина и снизить трудоемкость процесса.

Предлагаемый способ поясняется чертежом, на котором изображена схема производства раствора альбумина (чертеж). На схеме показаны фракционные столы (1), центрифуги рефрижераторные (2), осветляющий фильтр (3), Sartakon (4), стерильный фильтр (5), закаточный станок (6), термостат (7).

Способ осуществляется следующим образом.

Фракционирование белков плазмы производится путем поэтапного отделения каждой фракции.

Стадии ТП 1.5, ТП 1.7, ТП 1.8, ТП 1.9 проводятся на одном оборудовании.

Плазма (на стадии 1.5), а затем центрифугаты на стадиях ТП 1.7 и ТП 1.8 загружаются в котел фракционного стола (1). Создаются условия, необходимые для выделения и созревания осадка определенной фракции белков. Затем вся смесь подается в центрифугу и после центрифугирования осадок утилизируется, а центрифугат снова подается в котел (1).

Полученный центрифугат на стадии ТП 1.9 утилизируется, а сырой осадок альбумина растворяется и подается на осветляющий фильтр (3). Процесс ультрафильтрации проводится на аппарате "Sartakon-II" (4).

Готовый раствор альбумина подается в установку для стерильной фильтрации (5) и розлива раствора во флаконы. Обкатка колпачков производится на закаточном станке (6). В термостатах (7) готовый продукт проходит пастеризацию и термостатирование. Пример.

I. Выделение фракции I.

В качестве сырья была взята плазма, предварительно проверенная на отсутствие антител к вирусу иммунодефицита человека (ВИЧ), вирусу гепатита С и поверхностного антигена вируса гепатита В.

В четыре котла, расположенных в двух фракционных столах с охлаждающими рубашками (по два в каждом), загрузили по 20 л плазмы - итого 80 л плазмы.

Плазма охлаждается до +1oС и к ней прибавляется охлажденный в малой ванне до -20oС 96% этиловый спирт, из расчета 90 мл спирта на 1 л плазмы. К концу осаждения температура смеси понижается до -3oС. По окончанию добавления спирта смесь перемешивается 2 ч и затем оставляется на два часа. В данных условиях в осадок выпадает фракция 1 белков плазмы, содержащая в основном фибриноген. Осадок отделяется на стаканчиковых рефрижераторных центрифугах Sorvall RC 3С Plus при t = -3oC и 3000 об/мин в течение 30 мин. Осадок не используется II. Выделение фракции II+III.

Центрифугат I загружается в котел фракционного стола. Отбирается проба для определения исходного рН (6,8-7,4). После того, как температура центрифугата достигнет -5 -6oС, буфером 1 рН доводится до 5,8-5,9. Затем, из расчета 150 мл/л центрифугата I, добавляется 96%-ный этиловый спирт, охлажденный до -20oС, со скоростью 15 мл/мин. Осадок созревает 12 ч. Отделение осадка проводится на центрифугах Sorvall RC 3С Plus при температуре -6oС и 3200 об/мин в течение 30 мин. Осадок не используется.

III. Выделение фракции IV.

Центрифугат II помещается в котел фракционного котла и охлаждается до температуры -7oС. К нему со скоростью 15 мл/мин добавляется 96%-ный этиловый спирт, предварительно охлажденный до температуры -20oС, из расчета 450 мл/л центрифугата II. После добавления спирта смесь оставляется для созревания осадка на 12 ч. Осадок отделяется на центрифугах Sorvall RC 3С Plus при температуре -7oС и 3500 об/мин в течение 45 мин. Осадок не используется.

IV. Выделение фракции V (альбумин).

Прежде чем выделить фракцию V, центрифугат III подвергается осветляющей фильтрации с помощью напорного бака и фильтра с порами 0,8+0,65 м в котел фракционного стола при температуре -7oС. После фильтрации проводится забор пробы для определения рН. Затем с помощью буфера 2 рН доводится до 4,7-4,9. Для полноты выделения осадка альбумина смесь остается во фракционном столе при температуре -7-9oС и непрерывном перемешивании на 16 ч. Осадок отделяется на центрифугах Sorvall RC 3С Plus при температуре -7oС и 3700 об/мин в течение 60 мин. Надосадочная жидкость не используется. Осадок взвешивается и хранится при температуре -20oС не более 30 дней. Таким образом, идет накопление осадка.

V. Обработка сырого осадка альбумина. Для дополнительной очистки от глобулинов осадок альбумина растворяется в апирогенной дистиллированной воде, предварительно охлажденной до +5oС, в соотношении 1:3. Растворение производится в котле, помещенном во фракционный стол, при постоянном перемешивании при температуре +5oС в течение 2 ч. При этом альбумин растворяется, а нестабильные примеси выпадают в осадок. Отделение осадка нестабильных примесей проводится с помощью осветляющей фильтрации на фильтрах с порами 0,8+0,65 м.

VI. Ультрафильтрация раствора альбумина.

Освобождение раствора альбумина от спирта проводится на аппарате "Sartakon-II" в емкости из нержавеющей стали при температуре +4 +6oС. К одному объему раствора альбумина добавляется один объем апирогенной дистиллированной воды и начинается ультрафильтрация при входном давлении 2 бара, выходном 1,3-1,5 бара. По мере убывания раствора добавляется еще пять объемов апирогенной дистиллированной воды. По окончанию ультрафильтрации добавляют 30%-ный раствор каприлата натрия (консервант) из расчета 10 мл/л раствора альбумина и производят коррекцию рН раствора (рН должно быть 6,5-7,2).

VII. Получение готового продукта.

Готовый 10%-ный раствор альбумина передается на стерилизующую фильтрацию. Стерилизующая фильтрация и розлив альбумина во флаконы производится в стерильных условиях в ламинарном боксе с помощью фильтра с порами 0,45+0,2 м и напорного бака. Флаконы укупориваются резиновыми пробками и обкатываются алюминиевыми колпачками. Вся серия препарата прогревается в термостатах при температуре 601oС в течение 10 ч для инактивации вируса инфекционного гепатита (пастеризация). После пастеризации препарат выдерживается при температуре +37oС в течение 2 недель (стабилизация белков), а затем подвергается всем видам контроля, маркировке и упаковке.

Был получен раствор альбумина со следующими показателями (аналитический паспорт прилагается).

Заявляемый способ позволяет получить раствор альбумина с более высокими качественными показателями (увеличивается содержание альбумина, снижаются цветность, содержание полимеров, натрий-иона и калий-иона). Значительно снижается трудоемкость процесса, т.е. уменьшаются производственные площади, сокращается расход электроэнергии, облегчаются условия труда, сокращается время получения альбумина. На получение раствора альбумина заявляемым способом выдана лицензия.

Формула изобретения

1. Способ получения раствора альбумина, включающий стадии фракционирования плазмы на фракционных столах с выделением сырого осадка альбумина и растворением его в апирогенной дистиллированной воде с последующей фильтрацией, розливом во флаконы и пастеризацией препарата, отличающийся тем, что после стадии осветляющей фильтрации проводят ультрафильтрацию.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что ультрафильтрацию проводят на установке Sartakon-II.

РИСУНКИ

Рисунок 1



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к циклическому связывающемуся с интегрином пептиду длиной 7-11 аминокислотных остатков, включающему в себя аминокислотную последовательность (RKK)

Изобретение относится к группе новых индивидуальных химических соединений - циклическим аминосоединениям, представленным следующей формулой: где R1 представляет собой фенильную группу, которая может быть необязательно замещена, по меньшей мере, одним заместителем, представляющим собой атом галогена; R2 представляет собой С1-С8 алифатическую ацильную группу или (С1-С4 алкокси) карбонильную группу; и R3 представляет собой насыщенную циклическую аминогруппу, которая имеет всего от 2 до 8 атомов углерода в одном или нескольких циклах, причем наибольший азотсодержащий цикл имеет от 3 до 7 атомов в цикле, и при этом указанная насыщенная циклическая аминогруппа замещена группой, имеющей формулу -S-Х-R4, где R4 и Х имеют такие значения, как определено ниже, и указанная насыщенная циклическая аминогруппа присоединена через свой циклический атом азота к соседнему атому углерода, к которому присоединены заместители R2 и R1; R4 представляет собой фенильную группу, которая может быть необязательно замещена, по меньшей мере, одним заместителем, выбранным из группы, состоящей из атомов галогена, С1-С4 алкильных групп, С1-С4 алкоксильных групп и нитрогрупп; С1-С6 алкильную группу, которая может быть необязательно замещена, по меньшей мере, одним заместителем, выбранным из группы, состоящей из аминогрупп, карбоксильных групп, (С1-С4 алкокси)карбонильных групп, заместителей, имеющих формулу -NH-A1 (где А1 представляет собой -аминокислотный остаток), и заместителей, имеющих формулу -СО-А2 (где А2 представляет собой -аминокислотный остаток); или С3-С8 циклоалкильную группу, и Х представляет собой атом серы, сульфильную группу или сульфонильную группу, и упомянутая циклическая аминосодержащая группа может быть необязательно дополнительно замещена группой, имеющей формулу = CR5R6, где R5 и R6 являются одинаковыми или различными, и каждый независимо представляет собой атом водорода, карбоксильную группу, (С1-С4 алкокси)карбонильную группу, карбамоильную группу, (С1-С4 алкил) карбамоильную группу или ди-(С1-С4 алкил)карбамоильную группу; или их фармакологически приемлемым солям, фармацевтической композиции, обладающей ингибирующим действием в отношении агрегации тромбоцитов; лекарственному препарату, содержащему аминосоединение формулы I, и способу профилактики заболевания, выбранного из группы, состоящей из эмболии и тромбоза у теплокровного животного

Изобретение относится к животноводству и пушному звероводству

Изобретение относится к производным циклических пептидов общей формулы I цикло (Arg-X-Asp-R1), где Х обозначает Gly, Ala; R1 - остаток формулы II где R2, R3 обозначают Н; R4 = R5 - Ar или R4 = Ar; где R5 - алкилен (С1-С6); Ar - незамещенный фенил; или R4 = А, где А = (С1-С6)алкил, причем, если имеются в виду остатки оптически активных аминокислот, указанные соединения включают как D-, так и L-формы, а также их солям, способу их получения, фармацевтической композиции, обладающей способностью ингибировать интегрин, содержащей в качестве активного ингредиента соединение формулы I

Изобретение относится к новым орто-сульфонамидобициклическим гетероарильным гидроксамовым кислотам формулы где W и Х оба являются углеродом, Т является азотом, U представляет собой CR1, где R1 представляет собой водород, или алкил, содержащий 1-8 атомов углерода, Р представляет собой -N(CH2R5)-SO2-Z, Q представляет собой -(C=O)-NHOH, при этом является бензольным кольцом или является гетероарильным кольцом с 5-6 атомами в цикле, которое может содержать 0-2 гетероатома, выбираемых из азота, кислорода и серы, в дополнение к гетероатому азота, обозначенному как W; где бензольное или гетероарильное кольцо может необязательно содержать один или два заместителя R1, где это допустимо; Z является фенилом, который необязательно замещен фенилом, алкилом с 1-8 атомами углерода, или группой OR2; R1 представляет собой галоген, алкил с 1-8 атомами углерода, алкенил с 2-6 атомами углерода, перфторалкил с 1-4 атомами углерода, фенил, необязательно замещенный 1-2 группами -OR2, группу -NO2, группу -(СH2)nZ, где Z является фенилом и n=1-6, тиенил и группу -OR2, где R2 представляет собой алкил с 1-8 атомами углерода; R2 представляет собой алкил с 1-8 атомами углерода, фенил, необязательно замещенный галогеном, или гетероарильный радикал, содержащий 5-6 атомов в цикле, в том числе 1-2 гетероатома, выбираемых из азота, кислорода и серы; R5 представляет собой водород, алкил с 1-8 атомами углерода, фенил, или гетероарил, содержащий 5-6 атомов в цикле, в том числе 1-2 гетероатома, выбираемых из азота, кислорода и серы; или их фармацевтически приемлемым солям

Изобретение относится к производным N-(4-карбамимидофенил) глицинамида формулы (I), где Е обозначает водород или ОН, Q обозначает водород или алкил, R обозначает арил, циклоалкил или алкил, замещенный радикалами R1, R2, R3, R1 обозначает водород, СООН, СОО-алкил или арил, R2 обозначает водород, арил, циклоалкил или гетероарил, R3 обозначает водород, арил или ОН (в положении, отличном от -положения по отношению к атому азота, к которому присоединена алкильная группа R), или необязательно замещенную аминогруппу, три из радикалов X1-X4 обозначают группу C(Ra), C(Rb) или C(Rc), а четвертый обозначает С(Rd), Ra-Rd обозначают Н, ОН, NO2, диалкиламиногруппу, галоген, алкил, алкокси, арилокси, аралкилокси, гетероарилалкилокси, гетероциклилалкилоксигруппу, СООН, СОО-алкил, NH-SO2-алкил, NH-SO2-арил, две соседние группы Ra-Rb обозначают алкилендиоксигруппу, G1 и G2 обозначают водород, ОН, также изобретение относится к промежуточным соединениям формулы (IV), (V), (VI), которые используются в способах получения соединений формулы (I), и заключаются во взаимодействии альдегида формулы (II) с изонитрилом формулы R1NC и аминобензамидином формулы (III), а также цианогруппу CN, в нитриле формулы (IV) превращают в амидиногруппу C(N-G1)NH-G2

Изобретение относится к области медицины, конкретно к фармацевтической композиции, включающей в качестве действующего вещества индапамид, и может найти применение при лечении артериальной гипертонии и для предотвращения задержки натрия и воды в организме при хронической сердечной недостаточности

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, связано с получением водорастворимых препаратов кислоты ацетилсалициловой (АСК), относящихся к нестероидным противовоспалительным препаратам и обладающих противотромботическим, анальгетическим, противовоспалительным и жаропонижающим действием, основным из которых является влияние на адгезию и агрегацию тромбоцитов [Бокарев И.Н., Ивлева А.Я

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии и касается лечения герпетических поражений глаз

Изобретение относится к медицине, а именно к терапии, и может использоваться при лечении алиментарной дистрофии

Изобретение относится к медицине, а именно к производству медицинских биологических препаратов, и может быть использовано при получении альбуминов из неиспользуемых, балластных альбуминсодержащих фракций

Изобретение относится к медицине, а именно к способу получения альбумина

Изобретение относится к области медицины, а именно к онкологии, клинической иммунологии, и может быть преимущественно использовано для лечения онкологических заболеваний

Изобретение относится к области медицины, а именно к оториноларингологии и аллергологии

Изобретение относится к медицине, а именно к способам лечения реактивных артритов

Изобретение относится к медицине и касается способа получения получения основных протеинов плацентарной гемолизированной крови
Изобретение относится к медицине, к получению лечебных препаратов крови, и касается способа получения альбумина

Изобретение относится к медицине и касается конъюгата, содержащего D-энантиомер антагониста фолиевой кислоты и носитель, используемого для терапии опухолей
© Патентный поиск, поиск патентов на изобретения - FindPatent.RU 2012-2024
Политика конфиденциальности 2013-03-19T08:12:40
Наверх