Устройство для флуоресцентного анализа отдельных микрочастиц в потоке

 

Изобретение предназначено для счета и анализа отдельных микрочастиц б потоке транспортной среды путем регистрации флуоресценции объек-: та. Изобретение представляет собой, устройство, состоящее из источника света, оптической системы, проточной камеры, устройства, создающего постоянное давление струи исследуемой жидкости, и детектора флуоресценции . Проточная кювета выполнена в виде трубки, сужающейся книзу в капилляр с выходньм отверстием 80- 100 мкм. К другому концу кюветы приварено оптическое окно таким образом что позволяет направлять свет, возбуждающий флуоресценцию по оси жидкости , вытекающей через капилляр и транспортирующей анализируемые частицы . Изобретение позволяет практически полностью исключить рассеяние возбуждающего света, в объеме струи, где измеряется флуоресценция детектором , что приводит к возрастанию чувствительности определения. Отсутствие рассеянной компоненты возбуждающего излучения позволяет снизить требование к запиракицим фильтрам, что также влияет на увеличение флуоресцентного сигнала, а следовательно на повьшение чувствительности уста- HoekHi 1 ил. i (Л iNd О) о 00

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН (gD 4 G 01 N 21/64

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И OTKPblTPM (46) 30.09.86. Бюл. № 36 (21) 3882874/28-2 ) (22) 31.01. 85 (71) Центральный научно-исследовательский рентгено-радиологический институт (72) А.С.Ягунов и С.В.Токалов (53) 543.426(088.8) (56) Fulwyler И.1. Flow Cytometry

and Cell Sorting. J. Automation in .Hematology, 1981, v. 12, рр.69"80.

Horan. P.Ê. and L.L. Wheeles. guavititativ Singl Cell Analysis and Sort1ng, J. Science, 1977, v.198, р.149157.

D.Pinkel, P.Dean, S. Lake, D.Peters, M.Mendelson, J.Gray, М.Van

Diella and В.Gledhill. Flow Cytometry of Mammalian Sperm Progress in

DNA and Morphology, Measurement. J.of Histochem and Cytochem, 1979, v. 27, № 1, р.р. 353-358. (54) УСТРОЙСТВО ДЛЯ ФЛУОРЕСЦЕНТНОГО

АНАЛИЗА ОТДЕЛЬНЫХ МИКРОЧАСТИЦ В ПОТОКЕ (57) Изобретение предназначено для счета и анализа отдельных микрочастиц и потоке транспортной среды путем регистрации флуоресценции объек-:

„„SU„„1260778 А 1 та. Изобретение представляет собой. устройство, состоящее из источника света, оптической системы, проточной камеры, устройства, создающего постоянное давление струи исследуемой жидкости, и детектора флуоресценции. Проточная кювета выполнена в виде трубки, сужающейся книзу в капилляр с выходным отверстием 80100 мкм. К другому концу кюветы приварено оптическое окно таким образом, что позволяет направлять свет, возбуждающий флуоресценцию по оси жидкости, вытекающей через капилляр и транспортирующей анализируемые частицы. Изобретение позволяет практически полностью исключить рассеяние возбуждающего света,в объеме струи, где измеряется флуоресценция детектором, что приводит к возрастанию чувствительности определения. Отсутствие рассеянной компоненты возбуждающего излучения позволяет снизить требование к запирающим фильтрам, что также влияет на увеличение флуоресцентного сигнала, а следовательно на повышение чувствительности устано йси. 1 ил.

1260778

Изобретение относится к биологическим и медицинским исследованиям и предназначено для счета и анализа отдельных микрочастиц в потоке транс» портной среды путем регистрации флуо,ресценции объекта.

Цель изобретения — повышение чувствительности устройства.

l ""

На чертеже изображено устройство.

Устройство содержит источник 1 возбуждающего света, оптическую систему в виде поворотной призмы 2, проточную кювету 3 с оптическим окном 4 на входе и каналами 5 для поступления частиц пробы. Каналы 5 для поступления частиц пробы соединены с системами доставки 6 и 7 исследуемых объектов, проточная кювета 3,,выполненная в виде трубки, суживающейся в капилляр с выходным отверстием 8, равным 80-100 мкм.

Исследуемые частицы 9, приготовленные в виде взвеси, в результате давления, создаваемого устройством 7, поступают иэ системы доставки 6 по каналам 5 в проточную кювету 3. На выходе проточной камеры формируется струя 10, поочередно траспортирующая частицы в информационно-измеритель- ную зону. Свет, возбуждающий флуоресценцию от источника 1 с помощью поворотной призмы 2 направляется через оптическое окно 4 внутрь проточ ной кюветы по оси .струи 1О. Далее вплоть до объема, где проводятся измерения, свет проходит в оптически однородной среде (жидкости) при углах, превышающих "предельный угол" полного отражения. Возбуждающий свет инициируя флуоресценцию исследуемого объекта, не выходит за ее пределы и равномерно освещает информационноизмерительный обьем. Флуоресцентное излучение 11 улавливается оптичес- . кой фокусирующей системой 12, направляется на детектор 13 и регистрируется устройством 14..

Изобретение практически полностыд исключает расеяние возбуждающего

5 света в информационно-измерительном объеме, что приводит к возрастанию его интенсивности и увеличивает чувствительности устройства. Отсутствие рассеянной компоненты возбуждающего

10 света позволяет снизить требования к запирающим светофильтрам. Сигнал флуоресцентции возрастает, что также повышает чувствительность установки.

Равномерное освещение информацион15 но-измерительного объема уменьшает разброс показателей, что приводит к повышению воспроизводимости результатов измерений и позволяет исключить сложную систему гидрофокусировки

20 частиц, что, в свою очередь, упрощает конструкцию и повышает ее надежность.

Ф о р м у л а и з о б р е т.е н и я

Устройство для флуоресцентного анализа отдельных микрочастиц в потоке, состоящее из последовательно расположенных источника света, воз31 оуждающего флуоресценцию, оптической системы, проточной кюветы, в ко- . торой канал поступления пробы сьединен с устройством, создающим постоянное давление струи исследуемой жидкости, системы фокусировки и детектора света флуоресценции, о т л ич а ю щ е е с я тем, что, с целью повышения чувствительности устройства, проточная кювета, выполненная в

40 виде трубки, суживающейся в капилляр с выходным отверстием 80-100 мкм снабжена оптическим окном, расположенным в ее входной части для направления света, возбуждающего флуоресденцию, по оси струи жидкости, 1260778

Составитель Н. Зоров

:Редактор И. Сегляник Техред М.Xоданич Корректор В. Бутяга

Эаказ 5220/41 Тираж 778 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 . Производственно-полиграфическое предприятие,г. Ужгород.ул. Проектная, 4