Способ определения антител разных классов иммуноглобулинов

 

Изобретение относится к медицине и может быть применено для количественного определения специфических антител, относящихся к разным классам иммуноглобулинов. Пель изобретения - упрощение способа путем инкубации сыворотки со специфическим антигеном с последующим определением концентрации иммуноглобулинов методом радиальной иммунодиффузии в этой интактной сыворотке. Для этого исследуемую сыворотку крови делят на две пробы, одну из них инкубируют в лунках микрокамер для иммунологических реакций с высущенным на их стенках корпускулярны.м антигеном . Затем в пробах сыворотки определяют концентрацию иммуноглобулинов G, М, А методом радиальной иммунодиффузии. По разнице содержания иммуноглобулинов в интактной и смешанной с антигеном пробах судят о концентрации специфических анти тел разных классов в исследуемой сыворотке.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

„„SU„„1274689

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3821 705/28-14 (22) 20.12.84 (46) 07.12.86. Бюл. № 45 (71) Киргизский государственный медицинский институт (72) В. Л. Морозов и М. А. Сабодаха (53) 615.373 (088.8) (56) Кам форин Л. E. Иммуноферментный метод. В кн.: Современные методы иммунологической диагностики вирусных инфекций.

Обзорная информация ВНИИМИ. Сер.:

Эпидемиология и инфекционные болезни. !

981, ¹ 44, с. 30 — 36. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИТЕЛ

РАЗ HbIX КЛАССОВ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ (57) Изобретение относится к медицине и может быть применено для количественного (д1) с(А 61 К 39/00, J 01 N 33 558 определения специфических антител, относящихся к разным классам иммуноглобулинов.

Цель изобретения — упрощение способа путем инкубации сыворотки со специфическим антигеном с последующим определением концентрации иммуноглобулинов методом радиальной иммунодиффузии в этой интактной сыворотке. Для этого исследуемую сыворотку крови делят на две пробы, одну из них инкубируют в лунках микрокамер для иммунологических реакций с высушенным на их стенках корпускулярным антигеном. Затем в пробах сыворотки определяют концентрацию иммуноглобулинов G, М, А методом радиальной иммунодиффузии.

По разнице содержания иммуноглобулинов в интактной и смешанной с антигеном пробах судят о концентрации специфических антител разных классов в исследуемой сыворотке.

1274689

Формула изобретения

А

М

Составитель М. Васильев

Texpe,i И. Верес Корректор 1 . Колб

Тираж 660 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж вЂ” 35, Гаушская наб., д. 4/5

Филиал l11! I. «Патент», г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Редактор С. Патрушева

Заказ 6507/3

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для количественного определения специфических антител, относящихся к разным классам иммуноглобулинов.

Цель изобретения — упрощение способа путем инкубации сыворотки со специфическим а 1тигеном с последующим определением концентрации имму ноглобулинов методом радиальной иммунодиффузии B этой и интактной сыворотке.

Способ осуществляется следующим образом.

Исследуемую сыворотку крови делят на две пробы, одну из которых инкубируют в лунках микрокамер для иммунологических реакций с высушенным на ее стенках корпускулярным антигеном. Затем в обеих пробах сыворотки определяют концентрацию иммуноглобулинов G, М, А методом радиальной иммунодиффузии.

По разнице содержания иммуноглобулинов в интактной и смешанной с антигеном пробах судят о концентрации специфических антител разных классов в исследуемой сыворотке.

Пример 1. Больная Г., поступила в отделение туберкулеза 16.10.84 г.; кровь взята а анализ 23.10.84 r.

Сыворотку крови разделили на две части и развели изотоническим раствором хлористого натрия для определения количества иммуноглобулинов А в соотношении 1:2; иммуноглобулинов G 1:5; для определения иммуноглобулинов М была взята неразведенная сыворотка. Затем поместили эту сыворотку в микрокамеры для иммунологических реакций, на стенках которых была предварительно высушена вакцина БЦ)К в разведении 1:8 при 56 С в течение 30 мин (опыт). Контрольную сыворотку инкубировали в камерах без БЦЖ. Сыворотку инкубировали при комнатной температуре в течение 30 мин, после чего поместили ее в лунки, проделанные в агаре, смеп1анном со специфической антисывороткой против имму ioглобулинов классов А, М, G соответственно.

Чашки Петри помещали во влажную камеру и инкубировали при 4 С в течение 24 ч, для определения иммуноглобулинов классов А и

G; и 48 ч для определения иммуноглобулинов класса М. Диаметр преципитата измеряли с помощью окуляр-микрометра /микроскоп МБС-1) .

Результаты измерения:

Контроль

4,3

2,8

4,5

По калибровочной кривой определяли содержание иммуноглобулинов, г/л:

Контрольная проба А 19,2

М 3,7

G 42,0

Опытная проба А 17,6

М 2,3

G 37,5

Результат реакции. Содержание антител в сыворотке крови данной больной равно, г/л: А16;М14;G45.

Пример 2. Больной К. поступил в отделение туберкулеза 18.07.85; кровь взята на анализ 18.07.85 г.

Сыворотку крови разделили на две части и развели изотоническим раствором хлористого натрия в указанных соотношениях.

Затем поместили эту сыворотку в микрокамеры для иммунологических реакций, на стенках которых была предварительно высушена стафилококковая вакцина в разведении 1:4 при 56 С в течение 30 мин (опыт). Дальнейший ход реакции аналогичен описанному.

Результаты измерения диаметра преципитата:

Контроль Опыт

25 А 4,1 2,8

М 2,45 2,2

G 4,2 4,0

По калибровочной кривой определяли содержание иммуноглобулинов

Контрольная проба, г/л: А 7,9; М 2,35;

30 C 1775

Опытная проба, г/л: А 7,5; М 1,58; G 3,75.

Результат реакции. Содержание противостафилококковых антител в сыворотке крови данного больного равно, г/л: А 0,4, М 0,77, G 4,0.

Способ определения антител разных к 1 ассов H >1 Mi ноглоб ;tHIIQB tl Tcit доба в,lcния сыворотки, содержащей антитела, к соответствующему антигену с последующим инкубированием, отличающий с