Способ определения активности мезофильных молочнокислых стрептококков,используемых для приготовления бакконцентрата

 

Изобретение относится к молочной промышленности. С целью повьшения точности н ускорения процесса, приготовление рабочего раствора резазурина осуществляют путем разбавления основного раствора водой в соотношении 1:15, обесцвечивание проводят при температуре 28-32°С, а подсчет количества бактериальн лх клеток в биомассе мезо тьных молочно-кислых стрептококков осуществляют по формуле К«42 :п, К - количество бактериальных клеток, содержащееся в 1 г исследуемой биомассы; 42 количество клеток, содержащееся в 1 г стандартной биомассы при обесцвечивании ее в течение 1 мин; п - время обесцвечивания исследуемой биомассы, по которому оценивают активность мезофильных молочно-кислых стрептококков. кл с оо оо ел СП о 00

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕ@ЪЬЛИН

„„SU„„1335568 А1

Ц11 4 С 12 1/02

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР по делАм изОБРетений и ОтнРытий

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 3826201/30-13 (22) 31.08.84 (46) 07.09.87. Бюл. У 33 (7l) Всесоюзный научно-исследовательский институт молочной промьппленнос(72) И. В. Лагода, Н. А. Бавина и Г. В. Косарева (53) 577, 15(088. 8) (56) Богданов В. М. и др. Инкробиологическкй контроль на предприятиях молочной проиииленностн. — И., 1967.

Молоко н молочные продукты, Методы микробиологического исследования.

ГОСТ 9225-68. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ

ЖЗОФИЛЬНЫХ ЮЛОЧНО-KHCJlbK СТРЕПТОКОККОВ, ИСПОЛЬЗУЕ%И ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ БАККОНЦЕНТРАТА (57) Изобретение относится к молочной промышленности. С целью повышения точности и ускорения процесса, приготовление рабочего раствора резазурина осуществляют путем разбавления основного раствора водой в соотношении 1:1-5, обесцвечивание проводят при температуре 28-32 С, а подсчет количества бактериальных клеток B биомассе мезофильных молочно-кислых стрептококков осуществляют по формуле К 42"

x10 ":n, К вЂ” количество бактериальных клеток. содерщащееся в 1 г исследуемой биомассы; 42 10" — количество клеток, содержащееся в 1 г стандартной биомассы при обесцвечиванин ее в течение 1 мин; n — время обесцвечивания исследуемой биомассы, по которому оценивают активность меэофильных молочно-кислых стрептококков..

1335568

Изобретение относится к молочной промышленности и может быть использовано для .быстрого определения активности биомассы путем подсчета количе5 ства клеток мезофильных молочно-кислых стрептококков в ней. .Цель изобретения — повышение точности и ускорение процесса, Способ осуществляется следующим 1О образом, Из основного раствора резазурина готовят рабочий раствор разбавлением последнего прокипяченной и охлажденной дистиллированной водой в соотно- !5 шении 1:15 Это соотношение подобрано в результате опытов, как наиболее оптимальное для быстрого и точного определения активности именно меэофильных молочно-кислых стрептококков, 20

Только при таком разведении основного раствора резазурина определено оптимальное количество клеток в 1 г биомассы, а именно 42 10", вошедшее в формулу для подсчета, Процент ошиб- 25 ки при данном разведении наименьший, 42 IQ"

Ф и

50 где К вЂ” количество клеток, содержащееся в 1 r исследуемой биомассы; — количество клеток, содержащееся в 1 г стандартной биомассы при обесцвечивании ее в течение 1 мин.; — время обесцвечивания 1 г исследуемой биомассы.

42 10ю

Для определения количества клеток в биомассе берут две пробирки с .1О мл стерильной воды> подогретой до 30 о

28-32 С. В одну пробирку помещают 1 г биомассы, хорошо ее перемешивают с водой так, чтобы не было комочков.

В другую пробирку наливают 1 мл рабочего раствора резазурина, Содержимое двух пробирок соединяют в одну, закрывают резиновой пробкой, смешивают путем медленного трехкратного переворачивания пробирки для более полного смешивания, Пробирку помещают в 40 водяную баню с температурой 28-32 С, оптимальной для развития мезофильных молочно-кислых стрептококков, замеряют время обесцвечивания содержимого пробирки, Определив время обесцвечи- 4 вания, определяют количество клеток в биомассе по формуле

Пример 1, Берут две пробирки с 10 мл стерильной воды при 28 С, В одну пробирку помещают 1 г биомассы симбиоза Р 440а, состоящего из Streptococcus lactis (16+20,)„, Str, acetoinicus 82б, Str, cremoris 11В „, хорошо перемешивают ее с водой так, чтобы не было комочков, В другую пробирку наливают 1 мл рабочего раствора резазурина. Содержимое двух пробирок соединяют в одну, закрывают резиновой пробкой и смешивают путем медленного трехкратного переворачивания пробирки. Последнюю помещают в водяную баню с температурой 28 С и включают секундомер.

Обесцвечивание содержимого пробирки происходит за 0,8 мин, По формуле подсчитывают количество бактериальных клеток в 1 г биомассы К = 52,5 10 .

Таким образом, в 1 r исследуемой биомассы содержится 525 млрд мезофильных молочно-кислых стрептококков, Активность исследуемой биомассы вы сокая, поэтому ее смешивают с защит-. ной средой в соотношении 1:4, Пример 2, Берут две пробирки с 10 мл стерильной воды при 32 С, В одну пробирку помещают 1 г биомассы, полученной с использованием двухвидовой закваски У 32, состоящей из

Str, lactis (3548+4385+8546+3516)

Str, acetoinicus 254 и хорошо ее перемешивают с водой, В другую пробирку наливают 1 мл рабочегб раствора резаэурина, Содержимое обоих пробирок соединяют в одну, закрывают резиновой пробкой и смешивают, Пробирку помещают в водяную баню с температурой о

32 С и включают секундомер, Обесцвечивание содержимого пробирки происходит за. 3,5 мин, Количество бактериальных клеток в 1 г биомассы

1Q î

Таким образом, в r исследуемой биомассы содержится 120 млрд клеток.

Активность ее невысокая, поэтому ее смешивают с защитной средой в соотношении I:2, По предлагаемому способу результат получают за 1-5 мин, в то время как при определении количества клеток и их активности чашечным методом или посевом биомассы по пределам результаты получают через 3 сут.

Если обесцвечивание реэазурина происходит за время до 1,5 мин, в

1335568

42 10"

К и

t вах, 2Р

Формула изобретения

Составитель И, Привалова

Редактор И. Горная Техред В.Кадар Корректор А, ОбРУчаР

Заказ -4018/22 Тираж 499 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4 биомассе содержится до 240 млрд бактериальных клеток высокой активности, 1 г биомассы свертывает 1 л молока за 3 ч после высушивания, бакконцентрат в 1 порции содержит до 20 !О" бактериальных клеток и свертывает 1л молока за 4,5-5 ч, Качественные показатели сухого бактериального концентрата зависят !ð от соотношения биомассы и защитной среды, что определяется количеством и активностью клеток в биомассе, Быстрое и точное определение количества клеток в биомассе позволяет !5 установить правильное соотношение биомассы и защитной среды и получить сухой бактериальный концентрат высокого качества и в больших количестСпособ определения активности меэофильных молочно-кислых стрептокок- 25 ков, используемых для приготовления бакконцентрата, предусматривающий приготовление основного раствора резазурина, получение рабочего раствора растворением его в воде, отбор иссле- Зр дуемых проб, смешивание с рабочим раствором резазурина, выдержку в водяной базе до обесцвечивания, установление продолжительности обесцвечивания и последующий подсчет количества жизнеспособных бактериальных клеток, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и ускорения процесса, в качестве исследуемой пробы используют биомассу меэофильных молочно-кислых стрептококков, смешивание ее с рабочим раствором резазурина ведут в соотношении 1:15, обесцвечивание проводят при 28-32 С, подсчет количества бактериальных клеток осуществляют по формуле где К вЂ” количество клеток, содержащееся в 1 r исследуемой биомассы;

42 -10"о — количество клеток, содержащееся в 1 г стандартной биомассы при обесцвечивании ее в течение 1 мин;

n — время обесцвечивания 1 г исследуемой биомассы, по которому оценивают активность мезофильных молочнокислых стрептококков,