Состав для радиоиммунологического определения тироксинсвязывающего глобулина (тсг) в сыворотке крови человека

 

Изобретение относится к медицинским иммунохимическим микроанализам в клинической биохимии, биотехнологии и медицине и предназначено для измерения концентрации тироксинсвязывающего глобулина (ТСГ) в сыворотке крови человека. Цель изобретения - расширение диапазона концентраций ТСГ, определяемых с помощью радиоиммунологического состава, содержащего следующие компоненты, мас. % : антитела к ТСГ (3.6-4.4)·10^{-6 125}J ТСГ (1.3-4.8)·10^-8; общий сывороточный белок (7.9-11.0)·10^-2 ; трис (6.4-59.0)·10^-2 CaCl₂ (3.7-34.0)·10^-2; полиэтиленгликоль (6,6 - 12,6); дистиллированная вода - остальное. Продолжительность иммунохимической реакции 1 ч при комнатной температуре. Для разделения свободной и связанной с антителами фракций ТСГ состав центрифугируют при 1500 g 20 мин, надосадок удаляют и измеряют активность (¹²⁵J) ТСГ радиометрией осадки. Предложенный состав увеличивает диапазон определяемых концентраций ТСГ по сравнению с известным и возможности использовании в анализе различных объемов сыворотки.

Изобретение относится к области медицинского иммунохимического микроанализа и может быть использовано в клинической биохимии, медицине и биотехнологии для измерения концентрации тироксинсвязывающего глобулина в сыворотке крови человека. Целью изобретения является расширение диапазона концентраций ТСГ, определяемых с помощью радиоиммунологического состава. П р и м е р 1. Для проведения анализа используют состав, содержащий компоненты в оптимальном соотношении, мас. % : Антитела к ТСГ 4,0 ˙10^{-5 125}J ТСГ 3,2˙ 10^-8 Общий сывороточный белок 0,1 Трис 0,15 CaCl₂ 7 ˙ 10^-2 Полиэтиленгликоль 9,6 Дистиллированная вода 90,1
Общая масса анали-
тической смеси, г 1,555
Реагенты прибавляют в следующей последовательности. Калибровочные пробы (0,02 мл) 5, 10, 40, 80 и 120 мкг/мл или пробы анализируемой сыворотки (0,02-0,1 мл), ¹²⁵J ТСГ (0,2 мл), антитела в растворе буферной соли, содержащей CaCl₂ (0,2 мл), раствор полиэтиленгликоля (1,0 мл). Продолжительность иммунохимической реакции 1 ч при комнатной температуре. Для разделения свободной и связанной с антителами фракций ТСГ состав подвергают центрифугированию при 1500 g в течение 20 мин. После центрифугирования надосадочную жидкость удаляют и измеряют активность ¹²⁵J ТСГ радиометрией осадка. График зависимости отношения В/В_о от концентрации ТСГ в калибровочных пробах строят в координатах "logitlog". Если объемы использованных в анализе проб сыворотки и калибровочных проб были одинаковыми (по 0,02 мл) то концентрации ТСГ в пробах сыворотки определяют прямо из калибровочного графика. Если же эти объемы не одинаковы, то найденную по калибровочному графику концентрацию ТСГ умножают на коэффициент, равный отношению объемов калибровочной пробы и пробы сыворотки. П р и м е р 2. Радиоиммунологическое определение ТСГ при нижних граничных значениях содержания ингредиентов состава. Для проведения анализа используют состав с нижними граничными значениями содержания компонентов. Общая масса аналитической смеси 1,503 г. Эксперимент, обработку данных и оценку качества анализа проводят по примеру 1. Форма калибровочного графика та же, что и в примере 1. П р и м е р 3. Радиоиммунологическое определение ТСГ при верхних граничных значениях содержания ингредиентов состава. Для проведения анализа используют состав с верхними граничными значениями содержания компонентов. Общая масса аналитической смеси 1,627 г. Эксперимент, обработку данных и оценку качества анализов проводят по примеру 1. Форма калибровочного графика та же, что и в примере 1. Положительный эффект использования состава состоит в увеличении диапазона определяемых концентраций ТСГ (5-120 мкг/мл) по сравнению с известным (10-80 мкг/мл) и возможности использования в анализе различных объемов сыворотки (20-100 мкл). (56) Инструкция к набору RIA-Gnost TBG фирмы Beringwerke - Haechst AG, 40 с.

Формула изобретения

СОСТАВ ДЛЯ РАДИОИММУНОЛОГИЧЕСКОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТИРОКСИНСВЯЗЫВАЮЩЕГО ГЛОБУЛИНА (ТСГ) В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА, включающий специфические антитела, меченый ¹²⁵J ТСГ, общий сывороточный белок, трис, полиэтиленгликоль и дистиллированную воду, отличающийся тем, что, с целью расширения диапазона определяемых концентраций, он дополнительно содержит хлористый кальций при следующем соотношении компонентов, мас. % :
Антитела к ТСГ (3,6 - 4,4) · 10^-5
125J ТСГ (1,3 - 4,8) · 10^-8
Общий сывороточный белок (7,9 - 11,0) · 10^-2
Трис (6,4 - 59,0) · 10^-2
Хлористый кальций (3,7 - 34,0) · 10^-2
Полиэтиленгликоль 6,6 - 12,6
Дистиллированная вода Остальное