Фильтрующий материал для очистки раствора дезоксирибонуклеиновой кислоты

 

) Изобретение относится к фильтрующим материалам для очистки растворов ДНК от белков, может быть использова - но в производстве ДНК из селезенки и рыбных молок, а также в биохимических и медицинских исследованиях и в генетике и позволяет повысить скорость фильтрации, степень регенерации материала , а также увеличить степень очистки раствора. Фильтрующий материал состоит из чередующихся слоев целлюлозы и полиамидов, вьтолненных в -виде тканей. Количество каждого слоя равно 4. При фильтрации раствора ДНК, содержащего в качестве твердой фазы 3% белка, достигнута скорость фильтрования 993 мл/м Ч при 100%-ной степени очистки .раствора. При этом степень регенерации фильтрующего материала 1,05. 2 з.п. ф-лы, 2 табл. (Л с

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛ ИСТИЧЕСНИХ

PECllYEiËÈH

09) S< (11) А1 (59 4 3 0) D 39/00 С 07 Н 21/00

ГОСУДАРСТ8ЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ

®Cf ). g, ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ. „-,.

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ E1 " (21) 4102000/23-26 (22) 30.07.86 (46) 23.06.88. Бюл. У 23 (71) Научно-производственное объединение "Биолар" (72) В.И. Головлев, Ю.П. Эглитис, Т.Ф. Фридман, О.Л. Дудинская и В.В. Велика (53) 66.067.12(088.8) (56) Лейчкис И.М. Фильтрование с применением вспомогательных веществ:

Киев: Техника, 1975, с. 20.

Скоупс P. Методы очистки белков.

М.: Мир, 1985, с. 14. (54) ФИЛЬТРУЮЩИЙ MATEPHAJI ДЛЯ ОЧИСТКИ

РАСТВОРА ДЕЗОКСИРИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ (57) Изобретение относится к фильтрующим материалам для очистки растворов

ДНК от белков, может быть использовано в производстве ДНК из селезенки и рыбных молок, а также в биохимических и медицинских исследованиях и в генетике и позволяет повысить скорость фильтрации, степень регенерации материала, а также увеличить степень очистки раствора. Фильтрующий материал состоит из чередующихся слоев целлюлозы и полиамидов, выполненных в виде тканей. Количество каждого слоя равно 4. При фильтрации раствора ДНК, содержащего в качестве твердой фазы

3Х белка, достигнута скорость фильтрования 993 мл/м ч при 1002-ной степе2 ни очистки .раствора. При этом степень регенерации фильтрующего материала

1 05. 2 з.п. ф-лы, 2 табл.

1404095 Таблица 1

Параметры процесса фильтрования

Показатели для способа известного

1 2 предлагаемого

1 2 3

Скорость.фильтрования суспензии бел— ков в растворе ДНК, мл/м ° ч

630 782 692

1080 993 1055

Степень очистки раствора ДНК, твердой фазы — белка в фильтрате

0,40 0„26 0,34

0,09 Нет 0,04

Степень регенерации фильтрующего материала (отношение веса фильтщ атериала после регенерации к весу нового материала)

Содержание белка (твердой фазы) в осадке, мас.

1,35 1,16 1,03 1,05 1,04

1,12

?,4 8,8 7,6 36,2 42,1 40,5

Изобретение относится к фильтрующим материалам для очистки растворов дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК), которая находит широкое применение в биохимии, медицине, генной инженерии.

Цель изобретения — увеличение скорости фильтрования и степени регенерации материала, а также увеличение степени очистки раствора.

Пример 1. Воронку Бюхнера с крышкой для подачи давления экипируют фильтрующим материалом, состоя% щим из чередующихся слоев целлюлозы в виде бязи и полиамидов в виде капрона. Количество каждого слоя 4, нижний слой капрон. а

Поверхность фильтрования 0,01 M

Через фильтрующий материал фильтруют р0 под давлением азота 1,01"10 Па рас5 твор ДНК, содержащий в качестве твердой фазы 1% белка. Скорость фильтрования 1000 мл/м . ч, твердая фаза в фильтрате отсутствует. ДНК из раствора15 на фильтрующем материале не адсорби руется.

Фильтрующий материал регенерируется пропусканием в обратном направлении 1500 мл раствора соды с концент-. 30 рацией 15 . !

Пример 2. Воронку экипируют фильтрующим материалом, состоящим из чередующихся слоев целлюлозы байки и полиамида нейлона. Количество каждого слоя 4. Нижний слой нейлон.

Методика опыта аналогична описанной в примере 1.

Содержание белка 5%, скорость фильтрования 800 мп/м : ч, твердая. фаза в фильтрате отсутствует.

ДНК на фильтрующем материале не адсорбируется. Фильтрующий материал регенерируется полностью.

Пример 3. Воронку экипируют фильтрующим материалом, состоящим из чередующихся слоев целлюлозы в виде фланели и полиамидов в виде капрона.

Количество каждого слоя 4,Нижний слой капрон.

Содержание белка в растворе ДНК З .

Методика опыта аналогична описанной в примере 1.

Скорость фильтрования 960 мл/м . ч, твердая фаза в фильтре отсутствует, ДНК на фильтрующем материале не адсорбируется. Фильтрующий материал, регенерируется полностью.

Результаты опытов представлены в табл.l.

Таблица 2

Количество слоев

Скорость фильтрования раствора ДНК, содержащего ЗЖ белка, 20 мл/м ч

Формула изобретения

387

I 2

860

920

1050

642

214

Составитель И. Токарева

Редактор А.. Козорез Техред А.Кравчук Корректор M. Макснмишинец

Заказ 3015/5, Тираж 642 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Рауиская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

3 140409

Содержание осадка белка в исходной суспензии ЗЖ. В качестве известного фильтрующего материала взяты фильтрующие листы из модифицированной целлюлозы фирмы "Милипор",в качестве

5 предлагаемого — чередующиеся слои тканей: бязь и капрон, количество каждого слоя 4. Давление фильтрования 1,01 10 Па.

В табл. 2 показана зависимость скорости фильтрования суспензии бел.ков в растворе ДНК от количества чередующихся слоев целлюлозы и полиамидов.

Максимум скорости фильтрования при 35 числе слоев 4 объясняется периодическим изменением знака электростатичес5

4 кого потенциала по мере прохождения раствора через слой, состоящий из элементарных слоев целлюлозы и полиамидов.

Таким образом изображение увеличивает скорость фильтрования, повышает степень очистки раствора ДНК, улучшает регенерацию фильтрующего материала, а также повышает содержание белка в осадке, т.е. степень разделения суспензии.

Наиболее целесообразно использование изобретения при получении ДНК из животного сырья: селезенки крупного рогатого скота, рыбных молок.

1. Фильтрующий материал для очистки раствора дезоксирибонуклеиновой кислоты на основе целлюлозы, о т л ич а ю шийся тем, что, с целью увеличения скорости фильтрования и степени регенерации материала, а также увеличения степени очистки раствора, материал состоит из чередующихся слоев волокон целлюлозы и полиамидов, причем слои выполнены в виде тканей.

2. Материал по п. 1, о т л и ч а ю. шийся тем, что количество каждого слоя равно 4.

3. Материал по и. 1, о т л и— ч а ю шийся тем, что в качестве целлюлозы применяют бязь, байку или фланель, а в качестве полиамидов капрон или нейлон.