Способ определения 3,4,5-тригидроксибензойной кислоты

 

Изобретение относится к анали- . : тической химии, а именно хроматогра-. фическому определению 3,4,5-тригидроксибензойной кислоты в присутствии таннина. Для этого анализируемую пробу растворяют в -ацетоново-водном растворе и полученный раствор капилляром наносят на хроматографическую бумагу FN-3 и опускают в водно-t,4-диоксановый рабтвор (45-45):1 для развития хроматограммы. Пики проявляют 0,02-0,ОЗХ-ным раствором бромхлорфенолового синего. По высоте образующихся пиков определяют содержание 3,4,5-тригидроксибензойной кислоты в образце. Способ более чувствителен, селективен5 менее длителен и позволяет определять 3,4,5-тригидроксибензойную кислоту с меньшей погреяно. стью. 2 табЛо ел

1434364

Изобретение относится к аналитической химии, в частности к определенИю кислот ароматического ряда методрм бумажной хроматографии, и может использоваться для определения 3,4,5тригидроксибензойной кислоты в химических и аналитических лабораториях.

Цель изобретения — повышение точности, чувствительности и селективно- 10 с ги.

Способ осуществляют следующим обpylon, Навеску образца, содержащего триг дроксибензойную кислоту 3,4,5-ТГОБК 15 астворяют в смеси (4:1), отбирают

s полученного раствора аликвотную асть и наносят ее на стартовую линию роматографической бумаги, развивая атем хроматограмму элюентом, предтавляющим собой смесь вода — 1,4-диксан, при объемном соотношении комонентов (35-45):1. Подъем фронта люента превращает пятно в пик, высоа которого пропорциональна конценрации 3,4.5-тригидроксибензойной. килоты в пробе. Высота подъема фронта люента должна быть на 20 мм выше саrx высоких ников, что обеспечивает орошее формирование пиков. После

30 одъема жидкой фазы хроматограмму одсушивают на воздухе и пики проявлят 0,02-0 03%-ным раствором бромхлоренолового синего. Высоту окрашенного ика измеряют от линии старта до верфины пика с помощью циркуля и линейки 35 точностью +0,1 мм. По полученным анным, используя метод наименьших вадратов, строят калибровочный. граик в координатах концентрация три идроксибензойной кислоты 3,4,5 (мкг/ ,коробе) — высота пика (мм), по которому и определяют содержание кислоты

s анализируемых пробах.

Для построения калибровочного графика на хроматографическую бумагу без предварительной обработки на стартовую линию (10 мм от линии погружения) наносят 10 проб стандартных растворов с содержание 3,4,5-тригидроксибензойной кислоты 0,90; 2,70; 3,60; 5,40 50 и 6,30 мкг/пробе (по 2 пробы каждой концентрации). Хроматограмму высушивают на воздухе и опускают до линии погружения в кювету с элюентом вода—

1,4-диоксан (40:1). После подъема 55 фронта элюента хроматограмму вынимают из кюветы, высушивают на воздухе и окрашивают 0,02-0,03 -ным раствором цветореагента. Измеряют высоты пиков и строят калибровочный график.

В табл.1 приведены результаты определения 3,4,5-тригидроксибензойной кислоты (3,4,5-ТГОК) в стандартных растворах.

Пример 1. Для анализа промышленных образцов готовят раствор с концентрациями 3,4,5-тригидроксибензойной кислоты порядка 2,40-3,0 мг/мл, Для этого навеску в количестве ?5,0 Mr растворяют в 20 мл ацетона в мерной колбе и доводят до 25 мл водой, концентрация анализируемого раствора

3,0 мг/мл или 4,50 мкг/пробе. Íàõðîматограмму рядом с пробами, предназначенными для построения калибровоч ного графика, капилляром емкостью

0,0015 мл наносят 3-5 проб анализируемого раствора. Хроматограмму высушивают на воздухе и опускают до линии погружения в кювету с водно-1,4-диоксановым раствором (40:1). После развития хроматограммы пики проявляют 0,025%-ным раствором бромхлорфенолового синего. Измеряют высоты пиков, определяют содержание кислоты в образце, пользуясь калибровочным графиком, рассчитанным по методу наи--. меньших квадратов.

В табл,2 представлены результаты определения содержания кислоты в ана- . лизируемых объектах, Пример 2. Раствор, содержащий

3,4,5-тригидроксибензойную кислоту в количестве 3,0 мг/мл или 4,50 мкг/ пробе, наносят на стартовую линию хроматографической бумаги капилляром емкостью 0,0015 мл (3-5 проб). После развития хроматограммы в смеси вода1,4-диоксан (35:1) ее высушивают на воздухе и пики проявляют 0 025Х-ным раствором реактива. Измеряют высоты пиков и определяют содержание кислоты в образце (4,49 мг/пробе) по калибровочному графику.

Пример 3. 3-5 проб раствора, содержащего 3,0 мг/мл (4,5 мкг/пробе) кислоты, наносят на стартовую линию хроматографической бумаги посредст- вом капилляра емкостью 0,0015 мл. Хроматографируют в смеси вода †- 1,4-ди- . оксан (45; 1). Развитую хроматограмму высушивают и пикк проявляют 0 025 -ным раствором цветореагента. Измеряют высоту ников н определяют содержание кислоты в образце .(4,54 мкг/пробе) по калибровочному графику.

1434364

П р и и е р 4. На стартовую линию хроматографической бумаги наносят

3-5 проб анализируемого раствора (4,50 мкг/пробе кислоты) рядом с пробами стандартных растворов. Хромато5 графируют в смеси вода — 1,4-диоксан (40: 1). После развития хроматограммы ее высушивают и пики проявляют 0,03%ным раствором бромхлорфенолового синего. По среднему значению высоты пиков рассчитывают содержание кислоты в образце. Содержание ее 4,49 мкг/пробе.

Пример 5. Наносят 3-5 проб анализируемого раствора рядом с пробами, предназначенными для построения калибровочного графика (концентрация кислоты 4,50 мкг/пробе). Хроматографируют в кювете в подвижный фазе вода — 1,4-диоксан (40:1). После развития хроматограммы, ее высушивают и проявляют пики 0,02%-ным раствором бромхлорфенолового синего.

По среднему значению высот полученных25 пиков определяют содержание кислоты в образце по калибровочному графику.

Содержание кислоты 4,52 мкг/пробе.

1I р и м е р 6. Хроматограмму развивают в смеси вода — 1,4-диоксан (50:1). Пики проявляют 0,0257-ным раствором цветореагента. Вершины пиков кислоты размыты и не имеют четких границ. Количественное определение невозможно.

Пример 7. Пики проявляют 35

0,0257.-ным раствором цветореагента.

Средняя высота пиков кислоты 21,8 мм, Погрешность определения более 57.

Пример 8. Раствор, содержащий 3,4,5-тригидроксибензойную кисло-40 ту и таннин в равных количествах по

75 мг каждого (1:1) готовят, раство-, ряя навеску (150 мг) в 20 мп ацетона, и доводят до 25 мл водой. На стартовую линию наносят 3-5 проб стандартного раствора кислоты (приготовление .раствора по примеру 2) (3,0 мг/мл или

4,50 мкг/пробе) и 3-5 проб раствора смеси кислоты и таннина. После развития хроматограммы в смеси вода — 50

1,4-диоксан (40: 1) ее вынимают из кюветы, высушивают на воздухе и проявляют 0,0257-ным раствором бромхлорфенолового синего. Измеряют высоты .пиков и определяют содержание кислоты по калибровочному графику. Средние высоты пиков кислоты и таннина при вышеуказанных условиях 22,2

22,4 мм соответственно, что ствует содержанию кислоты в ном и исследуемом растворах

4,54 мкг/пробе ° Погрешность ния не превьппает 2,77, мм и соответстандарт4.,49 и определеФормула изобретения

Способ определения 3,4,5-тригидроксибензойной кислоты путем хроматографирования анализируемой смеси на бумаге в подвижной фазе, представляющей собой смесь вода — органический растворитель, с последующим детектированием развитой хроматограммы цветореагентом, отличающийся тем, что, с целью повьппения точности, чувствительности и селективности, используют в качестве органического растворителя 1,4-диоксан при объемном соотношении 1,4-диоксан : вода, равном 1:35-45, а в качестве цветореагента 0,02-0,037.-ный раствор бромхлорфенола синего.

Таблица

Расчетная высота пиВыведено Средняя

3,4,5-ТГОБК, измеренная мкг/пробе высота пиков, мм ков мм

9,8

0,90

9,82

16,1

2,70

16., 03

3,60

18,9

19, 13

25,35

28, 45

5,40

25,3

6,30

28,6

Таблица2 огешость

Измеренная выВведено

3,4,5ТГОБК, мкг пробе

Рассчитано

3,4,5-ТГОБК по калибровочному графику, мкг/пробе сота пиков, мм елеияе

22,4

4,54

4,50

4,49

2,7

22,2

4,50.4,52

22,3

4,50