Способ количественного определения аминокислот
Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано в химической промышленности для количественного определения аминокислот и пестицидов методом жидкостной хроматографии. Цель изобретения - повышение чувствительности определения. Пробу аминокислот обрабатывают 2-(2-нафтокси) этилхлорформиатом, что обеспечивает превращение анализируемых компонентов пробы в детектируемые производные. Затем осуществляют разделение полученных производных в хроматографической колонке с последующим спектрофотометрическим детектированием. 1 табл.
СОЮЗ СОВЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК (19) (!1) (59 4 С 01 И 30/90
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИД
Н А BTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ
IlO ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР (21) 4272425/23-25 (22) 01 ° 07.87 (46) 23.05.89. Бюл. Р 19 (71) Ленинградский научно-исследовательский институт лесного хозяйства (72) Д.А. Симонов, О.Ф. Кузнецова, О.К. Власова и А.В. Жарков (53) 54 3. 544 (088. 8) (56) Девени Т., Гергей Я. Аминокислоты, пептиды и белки. M.: Мир, 1976, с. 174-176.
Bruton С. Fully automated amino
acid analysis using pre-column derivatization. — International Laboratory, 1986, рр.30-38.
Изобретение относится к аналитиI ческой химии и может использоваться в химической промышленности для количественного определения аминокислот и пестицидов методом жидкостной хроматографии.
Цель изобретения — повышение чувствительности определения.
Способ осушествляется следующим образом.
Пробу аминокислот обрабатывают 2-(2-нафтокси)этилхлорформиатом, что обеспечивает превращение анализируемых компонентов пробы в детектируемые производные. Затем осуществляют разделение полученных производных в хроматографической колонке с после(54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ АМИНОКИСЛОТ (57) Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано в химической промышленности для количественного определения амино;<ислот и пестицидов методом жидкостной хроматографии. Цель изобретения — повышение чувствительности определения. Пробу аминокислот обрабатывают 2-(2-нафтокси)этилхлорформиатом, что обеспечивает превращение анализируемых компонентов пробы в детектируемые производные. Затем осуществляют разделение полученных производных в хроматографической колонке
Ю с последующим спектрофотометрическим детектированием. 1 табл. дующим спектрофотометрическим детектированием.
Синтез 2 †(2-нафтокси)этилхлорформиата проведен в две стадии по следующей схеме. Первая стадия представляет собой взаимодействие 2-нафтилата калия с этиленхлоргидрином (реакция Вильямсона). Полученный продукт охарактеризован как 2-(2-нафтокси)-этанол по температуре плавления 76о 0
-77 С, Т. пл., лит. = 76, 7 С.
Вторая стадия — хлорформилирование полученного спирта фосфогеном. Продукт данной реакции 2-(2-нафтокси)-этилхлорформиат, которыи очищен двукратной перекристаллизацией из абсоо лютного гексана.(Т.пл. = 68-69 С).
1481678
Формула и з обретения
Степень определения, 7.
Внесено, мкг
Глифосат АМФ Глицин Глутамин Аспарагин
100 99 104
100 91 101
104 94 100
104 97 101
103 102 101
106 106
99 JОО
103 102
101 100
100 100
0,09
0,18
0,27
0,36
0,45
Среднее значение степени определения
Стардартное отклонение
97 101
4 2
102
102
102
Составитель В, Толстых
Техред М.Дидык Корректор М.Самборская
Редактор А, Козориз
Заказ 2682/46
Тираж 790
Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, R-35, Раушская наб., д. 4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент", r.Óæãîðîä, ул. Гагарина,101
Пример, Аминокислоты извлекают из пробы водой или водно-щелочным буфером. Экстракт подвергают очистке методом ионно-обменной хроматографии.
Очищенный экстракт, содержащий по
0,1-50 мкг каждого определяемого компонента, упаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 1 мл 0,025 M боратного буфера (pH 9) и смешивают с
7 мг 2-(2-нафтокси)этилхлорформиата, растворенного в 1 мл ацетона. Смесь выдерживают 30 мин и экстрагируют избыток реагента тремя порциями диэтилового эфира по 2,5 мл; 20 мкл полученного раствора вводят в жидкостной хроматограф, снабженный УФ-детектором (Ъ „ = 226 нм) . Разделение осуществляют на колонке, заполненной обращенной неподвижной фазой. Подвижной фазой служит смесь ацетонитрила со слабокислым фосфатным буфером.
Полученные результаты анализа сведены в таблицу.
Метрологическая характеристика предлагаемого способа согласно данным таблицы может быть представлена
5 следующими величинами. Средняя степень определения составляет 97-102Х при стандартном отклонении 2-47, что подтверждает достоверность результатов анализа. Нижний предел определения 0,09 мкг, а чувствительность детектирования 2 нм.
Способ количественного определения аминокислот, включающий обработку анализируемой пробы реагентом и разделение полученных производных пробы в хроматографической колонке с последующим детектированием, о т л и ч аю шийся тем, что, с целью повышения чувствительности определения, в качестве реагента используют 2-(2-
-нафтокси)этилхлорформиат. е
