Способ дифференциальной диагностики сепсиса и локализованной гнойной инфекции у новорожденных

 

Изобретение относится к области медицины , в частности, к педиатрии. Целью изобретения является повышение точности способа. Для этого в сыворотке крови больного определяют содержание гексоз, связанных с белками, путем добавления абсолютного этанола, перемешивают и через 10 мин центрифугируют. Надосадочную жидкость сливают, а осадок растворяют в растворе едкого натрия, перемешивают и добавляют антроновый реактив. Пробу помещают в кипящую водяную баню и после охлаждения измеряют оптическую плотность на ФЭК при красном светофильтре. При уровне содержания гексоз в сыворотке крови у детей первой недели жизни 45-51 мг %, у детей второй недели жизни 52-59 мг % диагностируют сепсис, а при значении соответственно 57-65 и 66-77 мг % - локализованную гнойную инфекцию. При обследовании 198 детей в динамике получены статистически высокодостоверные данные (P*980,001) точности способа, а также подтверждена возможность диагностики той или иной патологии в первые 2 недели жизни новорожденного.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

А1 (19) (1И (504 С 01 N 33 66

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А ВТОРСКОМУ СВИД=ТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

1 (21) 4081235/28-14 (22) 25.06.86 (46) 30.08.89. Бюл. М 32 (71) Актюбинский государственный медицинский институт (72) Л.Б.Вагапова (53) 616.07.(088.8) (56) Гаврюшов В.В. и др. Гнойно-воспалительные заболевания новорожденных. — Неонтология, 1985, с. 244-246. (54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ СЕПСИСА И ЛОКАЛИЗОВАННОЙ ГНОЙНОЙ

ИНФЕКЦИИ У НОВОРОЖДЕННЫХ (57) Изобретение относится к области медицины в частности, к педиатрии.

Целью изобретения является повышение точности способа. Для этого в сыворотке крови больного определяют содержание гексоэ связанных с белками путем добавления абсолютного этанола, Изобретение относится к области медицины, в частности, к педиатрии.

Целью изобретения является повышение точности способа.

Способ осуществляют следующим образом.

К 0,1 мл сыворотки крови добавляют 10 мл абсолютного этанола, перемешивают и ((ерез 10 мин центрифугируют при 3000 об/мин в течение 10 мин.

Надосадочную жидкость сливают, а осадок растворяют в 0,5 мл 01 н. раствора едкого натрия, перемешивают, добавляют 5 мл антронового реактива.

Пробы осторожно перемешивают и помещают в кипящую водяную баню на 5 мин

2 перемещивают и через 10 мин центрифугируют. Надосадочную жидкость сливают, а осадок растворяют в растворе едкого натрия, перемешивают и добавляют антроновый реактив. Пробу помещают водяную баню и после охлаждения измеряют оптическую плотность на ФЭК при красном светофильтре. При уровне содержания гексоз в сыворотке крови у детей первой недели жизни 45-51мг%, у детей второй недели жизни 52-59мг7. диагностируют сепсис, а при значении соответственно 57-65 и 66-77 мг 7. локазилованную гнойную инфекцию. При обследовании 198 детей в динамике получены статически высокодостоверные данные (р (0,001) точности способа, а также подтверждена воэможность диагностики той или иной патологии в первые 2 недели жизни новорожденного. точно по секундомеру, затем охлаждают. Оптическую плотность измеряют на ФЭК при красном светофильтре ((8):в кювете толщиной 10 мм против контроля (0,5 мл 0,1 н.едкого натрия и 5 мл антронового реактива, далее та же обработка, что и опытных проб). Количество гексоэ, связанных с белками, определяют по каблировочной кривой, построенной по стандартному реактиву галактозы (или маннозы, 10 - 100 мкг в пробе).

При снижении содержания гексоэ у новорожденных первой недели жиэни от

57 до 65 мгХ, а у новорожденных второй недели — от 66 до77мгЖ диагности3 150459 руют локализованную гнойную инфекцию, а при снижении их содержания у детей первой недели жизни от 45 до 51 мг7., у детей второй недели от 52 до 59 мг7. сепсис.

Предлагаемый способ диагностики применим при обследовании новорожденных первых двух недель жизни„ поскольку при сравнении показателей гексоз у здоровых и больных разными формами гнойно-воспалительных заболеваний выявлены четкие различия диапазона колебаний содержания гексоз: у здоровых новорожденных первой недели жизни он в пределах 77.67 — 99 ° 33 мг7.. у новорожденных с локализованными формами гнойно-воспалительных заболеваний — 57.32 — 64,42 мг ; еще более резкое снижение содержания гексоз 20 в пределах 45,83 — 51,99 мг% отмечено у детей, страдающих сепсисом.

Аналогичные результаты выявлены при обследовании детей второй недели жизни. Пределы колебаний содержа- 25 ния гексоэ у здоровых детей 88,57

112,09 мг7., у больных локализованными формами гнойной инфекции — 66,9777.13 мг7., у больных сепсисом -51,02—

59,06 мг7.. 30

Пример 1. Новорожденная Ж. была отправлена в отделение новорожденных и недоношенных детей по поводу ателектатической пневмонии, серозно-гнойного омфлита, гипоксической энцефалопатии, Девочка от пожилой (43 года много рожавшей матери, от

XV беременности, XV родов. Мать страдает хроническим пиелонефритом, кариесом зубов, анемией, кольпитом. Де- 40 вочка иэ двойни, масса тела 200 г, рост

39 см, оценка по шкале Апгар — 6 баллов, через 5 мин — 7 баллов. Осуществлялась реанимационная терапия.

Во время наблюдения в роддоме состо- 4 яние ее оставалось тяжелым за счет пневмопатии внутриутробной гипотрофии, гипоксической энцефалопатии, На 5-й день жизни девочка была переведена в отделение новорожденных.

При поступлении выявлена следующая симтоматика: общее состояние тяжелое. Головка запрокинута, крик .слабый, тонус мьппц резко снижен, физиологические рефлексы не вызываются;

55 большой родничок 3 х 2 см, не напряжен; цианоэ носогубного треугольника, дыхание аритмичное, в дыхании участвует вспомагательная мускулатура меж7 4 реберий, над легкими выслушиваются рассеянные влажные хрипы и крепитирующие; тоны сердца приглушены, нерезкая тахикардия, пульс 150 в 1 мин; живот умеренно вздут, пальпируется тонкий эластичный край печени; пуповина толстая, мокнет, пупочное кольцо гиперемировано, стул со слизью, зеленоватый, Периферическая кровь: красная кровь без особенностей, лейкопения — 5,0 ° 10 /л, незначитель0 ный относительный нейтрофилез — 53% (палочкоядерные — 57, сегментоядер ные — 487), лимфоциты — 427, моноциты — 57, СОЭ нормальная — 3 мм/ч.

Общий анализ мочи: вЂ, единичные лейкоциты и клетки плоского эпителия, много бактерий — +++. Копрограмма: ! слизь +, жиры ++, лейкоциты — 1- 2 в поле зрения. Бактериологический посев кала отрицательный. На рентгенограмме легких отмечено некоторое усиление сосудистого рисунка.

Был выставлен клинический диагноз: гнойный омфалит, гипоксическая энцефа" лопатия, внутриутробная гипотрофия.

Этот диагноз бып подтвержден при исо следовании содержания углеводных компонентов в сыворотке крови, мг 7.; гек" созы 60,5; гексоэамины — 51,5 ; нейраминовая кислота 22,8,-т.е. было выявлено нерезкое снижение содержания гексо3 (в норме 88,7 + 3,0 мг7.), гексозаминов (в норме 73,1 + 4,0 мг%) и повышение содержания нейроминовой кислоты (в норме 16,3 + +1,0 мг7).

На протяжении первой недели наблюдения и лечения состояние девочки несколько ухудшилось: после отпадения пуповины появилось гнойное отделяемое из пупочной ранки, стул оставался слизистым, с непереваренными комочками пищи, ухудшилась периферическая кровь: число лейкоцитов оставалось низким — 6,7 10 1 /л, но возросло количество клеток нейтрофильного рода до 577 из них палочкоядерных—

107, сегментоядерных — 477, т.е. появился нерезкий относительный нейтрофилез, СОЗ оставалась низкой -2 мм/ч .

Общий анализ мочи: клетки плоского эпителия — 10-15 в поле зрения, лейкоциты — 3-4 в поле зрения. Копрограмма: жиры +++.

Был заподозрен сепсис, сделан бактериологический посев крови, исследованы углеводные компоненты гликопротеидов в сыворотке крови, при этом

5 1 фотмечено, что содержание гексоэ снидо 45мг7 (в норме 102+3,0 мг7.), содержание гексозаминов составляло

75,5 мг7.(норма), почти прежним оставался уровень нейраминовой кислоты—

20,8 мг7..

По совокупности клинических данных был выставлен клинический диагноз: сепсис, септикопиемическая форма, подострое течение, В последующем этот диагноз был подтвержден торпидным течением гнойного омфалита, присоединением стафилококкового энтереколита, положитель ным результатом высева из крови золотистого стафилококка.

За время пребывания в стационаре проведено 4 курса антибиотикотерапии (2 курса лечения пенициллином, метициллином, гентамицином,) курс лечения фуразолидоном. Была перелита плазма в том числе антистафипококковая, кров заменители плазмы. Была проведена деэинтоксикационная и симптоматическая терапия.

Девочка завершила свое лечейие уже в грудном отделении и была выписана через 50 дней стационарного лечения. В периоде новорожденности уровень гексоэ и гексоэаминов оставался ниже нормального.

Пример 2. Новорожденный К. поступил в отделение новорожденных на

7-день жизни иэ роддома с диагнозом: гипоксическая травматическая энцефалопатия с расстройством гемоликвородинамики II ст. Мальчик от Ч беременности, протекающей с длительным токсикозом, преэклампсией. В родах было наложение щипцов, роды стремительные, безводный период 1,5 ч. Масса тела при рождении 3,2 кг, рост 51 см. В роддоме находился на режиме травмированного, некоторое улучшение началось с 5-ro дня.

При поступлении отмечалось тяжелое состояние за счет неврологической симптоматики, серость кожи, субиктеричность, элементы пиодермии на грудной клетке, гнойное отделяемое из глаз. Большой родничок 3.5 х 3,5 см, расхождение сагиттального шва. Умеренное повышение мышечного тонуса, тремор конечностей при плаче, опущение угла рта справа. Физиологические рефлексы новорожденного снижены, быстро истощаются. Тонны сердца приглушены. Пальпируются пупочные сосуды, 504597 6 пупочная ранка влажная. Периферическая кровь: красная кровь — без особенностей, лекопения — 5,0 10 /л, нерезкий нейтрофилез относительный

537 (палочкоядерные — 67. сегментоядерные — 477), лимфоциты — 397, моноциты — 37, эоэинофилы — 57, СОЭ— нормальная,. 2 мм/ч. Общем анализ мочи

5-6 лейкоцитов в поле зрения, бактерии ++.

При поступлении кроме гипоксической энцефалопатии диагностирована локализованная гнойная инфекция: гнойный -конъюктивит, пиодермия. Сделан посев материала из пупочной ранки на флору, бактериологический посев кала. При исследовании содержания углеводных компонентов в сыворотки крови обнаружено резкое снижение содержа20 ния гексоз-до 45 Mr7, снижение содержания гексозаминов — 43 мг7. (в норме 86,7+3 и 73.1+4,0 мг7. соответственно), повышение содержания нейрар5 миновой кислоты до 22,2 мг7..

Был получен отрицательный результат бактериологических посевов материала иэ пупочной ранки и кала.

При повторном исследовании содерЗ0 жания углеводных компонентов в сыворотке крови отмечено низкое содержание гексоэ-49,5 мг7., некоторое снижение содержания нейраминовой кислотыдо 15,25 мг7., нормализация гексоэаминов.

На третьей неделе наступила смерть.

Патанатомический диагноз — внутриутробный сепсис, катарально — фибриноэный энтерит, начинающийся перитонит, септическая инфарктоподобная пневмония на фоне атрофии вилочковой железы и всей лимфоидной ткани, что свидетельствует об иммунодефицитном синдроме и объясняет неэффективность

45 лечения (в клинике сепсис заподозрен на 5-й день поступления в отделение), хотя ввиду тяжести состояния ребенок получал терапию, как при сепсисе °

Таким образом, анализ приведенных клинических примеров с самого начала

50 наблюдения,показывает, что содержание углейодных компонентов при сепсисе снижается рано, тогда как показатели периферической крови часто

55 на протяжении всего времени наблюдения не отражают течения тяжелого заболевания, а бактериологические посевы материала не всегда оказываются положительными, требуют боль1504597 ших затрат времени и трактуются клиницистами только в совокупности с другими клиническими симптомами.

Пример 3. Новорожденная А.

5 поступила в отделение патологии новорожденных в день рождения иэ роддома по поводу врожденной пиодермии.

Девочка.от матери 19 лет, от первой нормально протекающей беременности, от первых срочных благополучных родов. Масса тела при рождении

3350 r, рост 52 см. У матери накануне родов отмечалось пиодермия кожи лица. Девочка Закричала сразу после 15 рождения. Обращало внимание при рождении наличие элементов врожденной пиодермии, преимущественно на левом предплечье. По внутренним органам патологии не выявлено, Неврологичес— ки — небольшой тремор подбородка при плаче, оживления всех физиологических рефлексов, рефлексы шаговый и опоры несколько вялые. Периферическая, кровь при поступлении в отделение: красная кровь без особенностей, небольшой лейкоцитоз на грани с физиологическим — 20,0 10 /л, клетки ней9 трофильного ряда — 747. (палочкоядерные — 327, сегментоядерные — 42 ), лимфоциты — 207, моноциты — 67, С03 3 мм/ч. Выполненные в день поступления бактериологические посевы крови и кала дали в последующем отрицательный результат, посев кала на кишечную флору также оказался отрицательным. Общий анализ мочи: большое количество клеток плоского эпителия и единичные лейкоциты. Копрограмма в норме. При исследовании содержания в сыворотке крови гексоэ, гексоэаминов и нейроминовой кислоты обнаружено некоторое снижение содержания гексоз — до 69 MrX (норма 86,7 3,0 мг7), снижение содержания гексоэаминов до

54,5 мг . (норма 73,1+4,0 мг7), нор45 мальное содержание нейраминовой кислоты 11,3 мг7.. По поводу диагностированной локализованной гнойной инфекции было проведено лечение антибиотиками (ампициллин),парентерально пере- 50 ливали 3 раза антистафилококковую плазму, вводили антистафилококковый гаммаглобулин (2 раза через день по

40 МЕ в/м). был проведен курс лечения антистафилококковым бактериофа- 55 гом.

При повторном исследовании через неделю периферическая кровь с явным улучшением показателей: лейкоцитоз снизился до 10,0 10 /л, клетки нейтрофильного ряда — 397 (палочкоядер- ные — 27, сегментоядерные — 377). лимфоциты — 487., моноциты — 137.

СОЭ вЂ” 3 мм/ч, Содержание гексоз в сыворотке крови немного повысилось (до 72 MrX.), содержание гексозаминов повысилось до 67 мг7.. содержание нейраминовой кислоты — до 16,6 мг7.. Через 13 дней стационарного лечения девочка выписана под наблюдение участкового педиатра в связи с выздоровлением.

Нерезкое снижение содержания гексоэ и гексоэаминов и возрастание показателей в динамике наблюдения позволили исключить генерализованную инфекцию (сепсис), а течение заболевания и быстрое выздоровление подтвердили правильность диагноза.

Пример 4. Новорожденная Д., в двухнедельном возрасте была направлена в отделение патологии новорожденных на лечение по поводу локализованной гнойной инфекции (катаральный омфалит и острый катаральный отит ), развивавшейся на фоне гигоксической энцефалопатии.

Девочка от V беременности, протекающей на фоне гриппа (при сроке

25-26 недель), во II половине — с токсикозом (нефропатия) и на фоне анемии. В анамнезе матери — выкидыши.

Девочка родилась с проявлениями внутриутробной гипотрофии (масса тела при рождении 2800 г, рост — 51 см).

После отделения пуповины появились сероэно-геморрагические выделения иэ пупочной ранки, амбулаторное .лечение оказалось безрезультатным и девочку направили в стационар. При стационарном обследовании был выявлен отит.

При поступлении отмечено пониженное питание, шелушение кожи на ручках и боковых поверхностях грудной клетки, сукровичные выделения из пупочной ранки. По внутренним органам беэ патологии. Отит установлен

ЛОР-осмотром. Периферическая кровь: красная кровь без особенностей, лейкопения — 5,7 ° 10 /л, эоэинофилы -27, клетки нейтрофильного ряда — 227, т.е. норма (палочкоядерные — 67, сегментоядерные — 167), лимфоциты70Х, моноциты — 6X. Общий анализ мочи: 5-8 клеток плоского эпителия, 1504597

10-15 лейкоцитов в поле зрения.Копрограмма — нормальная. Два бактерилогических посева кала на флору дали отрицательный результат. Содер5 жанке гексоз в сыворотке крови при поступлении 62.0 мг7.,(норма

102,0+3,0 мг7), гексозаминов 63,5 мгЖ (норма 78,9+5,4 мг .), нейраминовой кислоты 13,85 мг . (норма).

На основании имеющихся клинических данных, включая умеренное снижение в сыворотке крови гексоз и гексоэаминов, был подтвержден диагноз локализованной (малой) гнойной ин5 фекции, проведен курс соответствующей терапии.

Содержание отдельных углеводных компонентов в сыворотке крови через неделю, Mr : гексоэы 69,5; гексозамины 66; нейраминов кислота 15.5.

Через 9 дней в связи с выздоровлением девочка была выписана под наблюдение участкового педиатра.

Таким образом, снижение содержа ния гексоэ (главным образом) и гексоэаминов при локализованной гнойной инфекции менее выражено и позволяет тем самым исключить сепсис, тогда как резкое снижение содержания гек- 3р соз, наблюдающееся при сепсисе, уже в доклинической стадии заболевания позволяет своевременно распознать это тяжелое заболевание и начать своевременное лечение, 35

Основанием для разработки данного способа диагностики гнойно-воспалительных заболеваний новорожденных послужили результаты обследования 198 новорожденных, иэ которых 106 — здо- 4о ровые дети, обследованные с целью изучения нормального содержания углеводных компонентов гликопротеидов с учетом быстрого изменения их уровня в течение периода новорожденности 45 (27 детей первой недели жизни, 21 ребенок 2-й недели жизни, 21 ребенок

3 и недели жизни, 27 детей 4-й недели жизни) и 92 ребенка первых двух недель жизни, поступившие на лечение в отделение патологии новорожденных и недоношенных детей по поводу разных гнойно-воспалительных заболеваний: 46 детей с локализованными формами (25 детей первой недели жизни, 21 ребенок второй недели жизни), 46 детей, страдающих сепсисом (26 детей первой недели жизни, 20 - второй).

У больных детей определение содержания углеводных компонентов гликопротеидов производилось еженедельно на протяжении всего времени наблюдения в рамках периода новорожденности.

Дети (198) распределены на 3 подгруппы: 1 — здоровые дети, II — больные локализованными гнойно-воспалительными заболеваниями, III — больные сепсисом.

Результаты динамического опреде-. ления содержания углеводных компонентов-гликопротеидов у новорожденных с раз1Ь|ми формами гнойно-воспалительных заболеваний в сопоставлении с показателями у здоровых детей соотнетствующего возраста представлены в таблице.

Ня основании обследования 198 детей в динамике и получения статически высоко достоверных (р (0,001) данных предложен способ диагностики сепсиса путем исследования содержания гексоэ в сыворотке крови, показаны изменения содержания гексоз при разнообразной гнойно-воспалительной патологии, установлены пределы колебаний содержания гексоэ, позволяющие при выявлении определенного их уровня в рамках названных пределов диагностировать как локализованную, так и генералиэованную инфекцию/сепсис/ ° Сепсис у новорожденных развивается внутриутробно или в первые дни жизни, поэтому своевременная лабораторная диагностика его у детей первых двух недель жизни — один из путей снижения высокой смертности детей периода новорожденности.

Формула изобретения

Способ дифференциальной диагностики сепсиса и локализованной гнойной инфекции у новорожденных путем биохимического исследования сыворотки крови, отличающийся тем, что, с целью повьппения точности способа,у детей первых двух недель жизни определяют содержание гексоэ и при их уровне у детей первой. недели жизни

45-51 мг Е, а у детей второй недели жизни.— 52-59 мг 7. диагностируют сепсис, а при значении соответственно

57-65 мг 7. и 66-77 мг % диагностируют локализованную гнойную инфекцию.

1504597

tl - пт

III группа (сепсис) P й-и

II группа (локализованные гнойновоспалнтельные заболевания) I группа (здоровые) Возраст, недели

Гексоэы, мг Х

48,9611,01 <0,001 (45,83-51,99)

55,04+ 1,34 <0,001 (51,02-59,06)

62,613,42 <0,001 (52,34-72,86)

6021 3,48 (49,76-70,64) 88,5+3,61 (77,67-99,33) 100,3313,92 (88,57-112,09) 92,4i3,56 (8 1,72-103,08) 89,01i1,85 (83,46-94,56) Гексоза

73, 1643, 72 (62,0-84, 32) 80,5234,79 (66, 15-94,89) 94 22+4,8 (79,82-108,82) 86 ь 24 5 е 18 (70, 7-101, 78) 61, 37+4, 35 (57,32-65,42) 72,0541, 71 (66,92-77, 18) 79,65+2,02 (73,59-85)71) (0,001 (0,001

<0,001 мины, мг Й

72,24-3,15 (62,75-81,65)

66,912,6 (59, 1-74, 7)

74, 15»1,81 (68, 72-79, 58) >О, 05 (0,05

<0,001

59, 68+ 1, 9 7 <0, 01 (53,77-65,59)

65,07+ 2,94 с0,05 (56,25-73,89)

66,3 .3,3 с0,05 (56,4-76,2)

67,6713,09 (58,4-76,94) Составитель Л.Шилина

Редактор Л.Веселовская Техред И.Дидык Корректор М.Васильева

Заказ 5247/46 Тираж 789 Подписное

BHHHIIH Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина, 101