Питательная среда для культивирования микоплазм

 

Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано для выделения микоплазм и накопления биомассы. Цель изобретения - упрощение состава среды при сохранении ее ростовых свойств. В качестве питательной основы перевар сгустков крови человека (триптический перевар), в качестве стимулятора роста - сыворотку крови человека 0(I) группы, истощенную механизмами, 10-20 мас.%. В состав среды входят, мас.%: 50%-ный дрожжевой экстракт 8-15

глюкоза 0,5-1

хлористый натрий 0,5-1. Все компоненты перемешивают и объем среды доводят до 10 мл переваром сгустков крови. PH среды 7,4-7,8. Рост микоплазм - на 3-4-е сутки.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН

А1 (19) (11) (51)4 С 12 N 1/20, С 12 О 1/04//

//(С 12 N 1/20Э С 12 R 1235) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АBTOPGHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 3383508/30-13 (22) 21.01.82 (46) 07.12.89, Бюл.М 45 (71) 1-й Ленинградский медицинский институт им. акад, И.П.Павлова (72) В.Н.Чеботкевич и С.С.Автушенко (53) 576.8.093.1(088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

У 560909, кл. С 12 N 1/20, 1975. (54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ИИКОПЛАЗМ (57) Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано для выделения микоплазм и накопления биомассы. Цель

Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано для накопления биомассы микоплазм и их выделения из исходного материала.

Цель изобретения — упрощение состава среды при сохранении ее ростовых свойств.

Пример 1. Сгустки крови человека, являющиеся отходами серологических лабораторий, разрезают на мелкие кусочки, разводят дистиллированной водой в соотношении 1:1 (вес:

:объем) и кипятят 20 мин на водяной бане. Затем сгустки удаляют, перемалывают и вновь переносят в бульон.

После охлаждения к смеси прибавляют трипсин из расчета 5 r на 1 л, доводят рН до 8,0 и инкубируют 2 ч при 37 С. Затем корректируют рН и вносят хлороформ из расчета 20 мл/л.

2 изобретения — упрощение состава среды при сохранении ее ростовых свойств.

Для приготовления среды используют перевар сгустков крови человека (триптический перевар) в качестве питательной основы. В качестве стимулятора роста используют сыворотку крови человеака О(?) группы, истощенную механизмами 10-20 мас. В состав среды входят, мас.X: 50K-ный дрожжевой экстракт 8-. 15; глюкоза 0,5-1; хлористый натрий 0,5-1. Все компоненты перемешивают и объем среды доводят до

100 мл переваром сгустков крови. рН среды 7,4-7,8. Рост микоплаэм на

3-4-е сутки.

С:

Переваривание ведут до содержания аминного азота 100 мг.Х ° Перевар кипятят и фильтруют, устанавливают рН 7,4-7,8, стерилиэуют в автоклаве гри 115 С (0,75 ати) 15 мин, хранят при 4 С до 3 мес. Сл

Для получения сыворотки крови соби- Ю рают сыворотки доноров O(Z) группы ) и стерилиэуют фильтрованием. Для осво- Я бождения сыворотки от возможно присут- ф ствующих антител к микоплаэмам ее ар» истощают взвесью микоплазм.

Для получения питательной среды компоненты смешивают в следующем соотношении, мас.Ж: 50Х-ный дрожжевой экстракт 8; сыворотка крови чело- д, века 0(I) группы 10; глюкоза 0,5; хлористый натрий 0,5; перевар сгустков крови человека остальное.

Коррекции рН в готовой среде не требуется.

1527256 по чувствительности питательная среда не уступает классической среде.

Использование среды позволяет упростить ее приготовление, удешевить процессы вьщсления и накопления биомассы микоплазм без изменения антигенных свойств.

Ф о р м у л а и з о б р е т е н и я

l0 — 20

0,5 — 1

0,5 — 1

Составитель Г,Смирнова

Техред M.ÄHäûê

Корректор Т.Палий

Редактор В.Данко

Заказ 7481/34 Тираж 501 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж 35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.Ужгород, ул. Гагарина,101

Пример 2. Готовят среду в соответствии с примером 1, но компоненты берут в следующем соотношении, мас.7: 50Х-ный дрожжевой экстракт 10; сыворотка крови человека 0(I) группы

15; глюкоза 0,75; хлористый натрий

0,75; перевар сгустков крови человека остальное.

Пример 3. Готовят среду в соответствии с примером 1, но компоненты берут в следующем соотношении, Mac.X: 50/-ный дрожжевой экстракт

15, сыворотка крови человека 0(I) группы 20, глюкоза 1, хлористый натрий15

1, перевар сгустков крови человека остальное.

Пример 4. Микоплазму пневмонии штамм 13В выращивают на среде указанного состава при 36 С в течение 0

3 дн. На 4-е сутки слой микоплазм снимают 10 мл физиологического раствоЯ ра и подсчитывают количество микоплазм (КОЕ/мл). В данном опыте урожай микоплазм составляет 7,0 Ig KOE/мл.

Пример 5. Используют среду в соответствии с примером 4, но используют штамм FH. Урожай микоплазм

6,5 Ig KOE/мп °

Пример 6 ° При исследовании

180 проб отделяемого носа и зева и

80 проб отделяемого цервикального канала вьщелено 8,3У. и 23,7 соответственно микоплазм на среде PPLO 8,3Ж и 21,27. соответственно. Таким образом, Питательная среда для культивирования микоплазм, содержащая питательную основу, 50Х-ный дрожжевой экстракт, стимулятор роста, глюкозу, хлористый натрий, о т л и ч а ю щ а я с я тем, что, с целью упрощения состава среды при сохранении ее рос,товых свойств, в качестве питательной основы она содержит перевар сгустков крови человека, в качестве стимулятора роста — сыворотку крови человека 0(Z) группы при следующем количественном соотношении компонентов, мас.7.:

50Х-ный Дрожжевой экстракт 8 — 15

Сыворотка крови человека

O(I) группы

Глюкоза

Хлористый натрий

Перевар сгустков крови человека Остальное