Штамм гриба реniсilliuм снrysоgеnuм тном как тест-культура для оценки микробиологической стойкости смазочных материалов
Изобретение относится к области биотехнологии и представляет собой новый штамм гриба, который может быть использован в качестве тест-культуры при проверке на грибостойкость масел и смазок. Цель изобретения - получение более активного штамма грибабиодеструктора для определения грибостойкости различных марок масел и смазок, используемых в конструкционных изделиях техники. Штамм микроскопического гриба PENICILLIUM chrYSOGENUM FHOM ВМК F-3067D(6К-14) выделен из авиационного масла МН-7,5У, находящегося на хранении в умеренно теплом климатическом районе в течение полугода. Новый штамм отличается более высокой агрессивностью по отношению к горючесмазочным материалам различной номенклатуры, используется в качестве микроорганизма биодеструктора, повреждающего широкий спектр углеводородного состава смазочных материалов. Изобретение позволяет повысить достоверность оценки устойчивости смазочных материалов к воздействию микроскопических грибов. 2 табл.
СОЮЗ СОВЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ABTOPCKOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР
1 (21) 4415987/31 — 13 (22) 26 ° 04.88 (46) 30.11.89. Бюл. Р 44 (72) Е.Г.Торопова, Г.В.Матюша, А:A.Ñàìóíèíà и Т.П.Сизова (53) 663.15 (088.8) (56) Масла и смазки. Методы лабораторных испытаний на устойчивость к воздействию плесневых грибов. ГОСТ
Г
9.052-75. (54) ШТАММ ГРИБА PENICILLIN CHRYSOGENUN ТНОМ КАК ТЕСТ-КУЛЬТУРА ДЛЯ
ОЦЕНКИ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ СТОЙКОСТИ
СМАЗОЧНЬ Х МАТЕРИАЛОВ (57) Изобретение относится к области биотехнологии и представляет собой новый штамм гриба, который может быть использован в качестве тест-культуры при проверке на грибостойкость масел и смазок. Цель из<обретения — полуИзобретение относится к биотехнологии и представляет собой новый штамм гриба, который может быть использован в качестве тест-организма при проверке лабораторных методов испытаний на устойчивость масел и смазок к воздействию микроскопических грибов.
Целью изобретения является получение более активного штамма гриба биодеструктора различных марок технических смазочных материалов, использование которого в качестве тесткультуры повысит достоверность оцен(58 4 С 12 N 1/14; С 12 R 1/18//
//(С 12 N 1/14, С 12 R 1:82) 2 чение более активного штамма гриба— биодеструктора для определения грибостойкости различных марок масел и смазок, используемых в конструкционных иэделиях техники. Штамм микроскопического гриба Penicillium chrysogenum Thorn BMK F-3067D (6К-14) выделен из авиационного масла МН-7,5У, находящегося на хранении в умеренно теплом климатическом районе в течение полугода. Новый штамм отличается более высокой агрессивностью по отношению к горючесмазочным материалам различной номенклатуры, используется в качестве микроорганизма-биодеструктора, повреждающего широкий спектр углеводородного состава смазочных материалов. Изобретение позволяет повысить достоверность оценки устойчивости смазочных материалов к воздействию микроскопических грибов. 2 табл. ки при определении грибоустойчивости технических масел и смаэок.
Штамм Penicillium chrysogenum
Thorn ВКМ F-3067D (6K-14) выделен из масла МН-7,5У, которое находилось на хранении в течение полугода на складе нефтепродуктов в умеренно теплом климатическом районе. Штамм депонирован во Всесоюзной коллекции микроорганизмов ИБФМ АН СССР под номером BKMF-3067D и обладает следующими свойствами.
Культурально-морфологические свойства.
1525207
На агариэованной среде Чапека через 7 дней роста при 25 С колонии е гриба имеют диаметр 30 мм. Колонии бархатистые, интенсивного голубоватозеленого цвета с растущим белым краем шириной 1 мм. У некоторых колоний окраска в центре светло-бежевая. Окраска обратной стороны колоний от светло-желтой до желто-коричневой.
Желтый пигмент диффундирует в агар °
Колонии радиально-складчатые, в центральной части выпуклые, с многочисленными каплями желтого эксудата.
При рассматривании колоний на месте роста (x80) видны асимметричные кисточки с цепочками конидий, соединенных в довольно длинные колонки на каждой метуле, Конидиеносцы отходят от субстратных гиф, длинные (120-350 мкм, диаметр 3-3, 5 мкм), гладкие, несущие большей частью одну веточку (реже
2-3) 15-25 х 2-3 мкм. Иетул в мутовке 2-5, размером большей частью
2-3-10 мкм. Фиалид на каждой метуле 3-5, размер их 8-10 х 2-2,5 мкм.
На среде сусло- агар через 7 дней роста при 25 С колонии гриба имеют диаметр 35-40 мм. Колонии гладкие, бархатистые, в центре приподнятые, шерстистые голубовато-зеленого цвета с растущим белым краем шириной 1 мм.
Окраска обратной стороны колоний желтая с оранжевым оттенком. Эксудата и складчатости нет. Цепочки конидий расходящиеся. Конидии шаровидные и широко-эллипсоидальные,гладкие, диаметром 3,5-4 мкм. Конидиеносцы гладкие, гранулированные, отходят от субстратного мицелия, длинные (500 мкм), шириной до 10 мкм, кисточки асимметричные. Веточки длиной
30 мкм, шириной 5-7 мкм. Метулы разные, их размер 15-20 х 4 мкм. 5 фиалид на каждой метуле, размер фиалид
8-10 х 2-2, 5 мкм.
На масляно-минеральной среде в соотношении масло:среда 1:3 и инкубировании в пробирках в термостате при 25-28 С на 5-8-е сутки появляю ется видимый рост на границе раздела водно-масляного слоя, который со временем становится более обильным. Состав минеральной среды, 7:
КаМО -0,2-0,35; MgSO< 0,35-0,6;
КН РО -0,07-0,15; КС1 0,15-0,25; вода водопроводная — остальное.
Температурный минимум роста составляет 5 С, оптимум 25-30 С, мако симум — 45 С. В оптимальных условиях растет намного быстрее, чем штамм
P. chrysogenum BKMF-245.
Физиолого-биохимические свойства.
Штамм способен активно расти на авиационных, судовых, автотракторных смазочных материалах.
Отношение к источникам углерода: хорошо усваивает глюкозу, сахарозу, маннит, сорбит, крахмал, глицерин, глюкозу усваивает лучше, чем сахарозу, маннит лучше, чем сорбит. На целлюлозе не растет.
Отношение к источникам азота: хорошо растет на oC, — глутаминовой кислоте, L-глутамине,о4-аспарагине, 20
DL-аспарагиновой кислоте азотнокисУ лом аммонии, хуже усваивает DL+алании, DL-О ;лейцин, мочевину и азотнокислый натрий. Органический азот усваивает лучше, чем неорганичес25
Штамм хорошо растет на сусло-агаре, масляно-минеральной среде с рН среды 6,8-7,2 при 25-30 С.
Антибиотическая активность на сре30 де Чапека у P.chrysogenum Thorn BKM
F-3067D выражена слабее, чем у P.chrysogenum Thorn BKMF-245, который используется в составе тест-организмов при оценке грибостойкости масел и смаэок. При испытании методом перпендикулярных штрихов подавляет рост
Chaetomium globosum Kunze, Trichoderma viride Pers. ex Fr., S.F.Gray.
Его развитие не подавляется другими видами грибов.
На образцах различных марок смазочных материалов P.chrysogenum Thorn
BKMF-3067D чаще всего развивается совместно с Aspergillus niger van
Tiegh, Phialophora fastigiata (Làgerb. et Melin) Conant, Scopulariopsis brevicaulis (Sacc.) Bain и бактериями рода Bacillus.
При лабораторных испытаниях грибостойкости различных технических смазочных материлов проведены сравнения штамма P.chrysogenum Thorn
BKMF-245 со штаммом P ° chrysogenum
Thorn BKMF-3067D. Из 100 исследуемых
55 смазочных материалов рост штамма
P.chrysogenum Thorn BKMF-3067D от 1 до 3 баллов отмечен на 90 иэ них.
На 70 смазочных материалах этот
Таблица
1525207
Марка масла
Агрессивность штамма баллы
Penic il l йш
chrysogenum
Thorn BKMP3067D
Penicillium
chrysogenum
Thorn
ВКМГ-245
О
О
П р и м е ч а н и е. Испытания проводят по
ГОСТ 9.052-.75 на минеральном агаре в чашках Петри в течение 28 сут. Балл среднее значение из
5 повторностей.
Таблица 2
Масло марки
МК-8+10X Акор-1
МН-7,5У
Вязкость киКислотное число мг КОН на 1 г масла
Вязкость кинематичесКислотное число, мг КОН на
1 г масла нематическая при 100 С, мм /с кая при
100 С,мм /с
0,47
1,29
35,27
48,36
0,13
0,45
BKMF-245
BKMF-3067D
Контроль (масло без заражения штаммом гриба) 7,95
7,21
0,09
34,27
0,03
8,05 штамм развивается более активно, чем на 20 остальных.
Данные о более высокой агрессивности штамма P chrysogenum Thorn
BKMF-3067D по сравнению со штаммом
Р. chrysogenum Thorn ВКИР-245 приведены в табл. 1 и 2, Иэ табл. 1 следует, что штамм
Р. chrysogenum Thorn BKMF-3067D активнее штамма P. chrysogenum Tham
ВКМР-245.
Результаты, приведенные в табл.2, показывают, что развитие штамма гриба P.chrysogenum Thorn ВКМР-3067D, выделенного из масла МН-7,5У, приводит к значительному изменению физико-химических показателей масел (к изменению вязкости и кислотного числа) по сравнению со штаммом
P, chrysogenum Thorn BKMF-245. Это свидетельствует о том, что штамм
BKMF-3067D.более активно использует (повреждает) масла, чем штамм
BKMF-245.
Таким образом, штамм гриба наиболее часто и интенсивно развивается на испытанных смазочных материалах и значительнее изменяет физико-химические показатели масел.
Формула и з о б р е т е н и я
Штамм гриба Penicillium chrysogenum Thorn BKMF-3067D как тест-культура для.оценки микробиологической стойкости смазочных материалов.
Номер штамма гриба
Penicillium chrysogenum Thorn
АМГ-10
МК-8
5 А«р
МК-8+ 107
Акор-1
ВНИИЫП-501-4Ф
ИПМ-10
MH-7, 5У
MH-7,5 PK
MC-8п
МС-8РК
25 К-17
МС-20п
М-14ГБ
АС-8
ДС-8
3 ГТ К 22РК
3
3
3
2
1
2
2
1
0
О
О
