Способ диагностики туберкулеза

 

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано при диагностике туберкулеза. Цель изобретения - повышение точности способа. Проводят забор крови у больных, выделяют лимфоциты. Затем их смешивают с эритроцитарным фосфатидным туберкулезным диагностикумом, инкубируют и подсчитывают число розеткообразующих клеток, при количестве розеткообразующих клеток 20% и меньше диагностируют туберкулез. По сравнению с прототипом точность диагностики возрастала на 17,5%.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СООИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (И) (5о 4 G Ol N 33/53

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ н явтоРСкомм СвидетильСтвм

l (21 ) 4338036/28-14 (22) 04 .1 2 ° 87 (46) 07.12.89. Бюл. В 45 (71) Ленинградский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток

11аучно-исследовательский институт фтизиопульмонологии и Ленинградский педиатрический медицинский институт (72) Э.А.Степанова, Е.И.Потапенко, M.fi.Кочорова, Б .И,Фейгельман, P.È.ØåHäåðîâà и И.П.Туманов (53) 615.373 (088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

М 904669, кл. А 6! К 39/00, 1982.

Изобретение относ ится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано при диагностике туберкулеза.

Цель изобретения — повышение точности способа.

Способ осуществляют следующим образом.

Для диагностики туберкулеза в качестве действующего начала в реакции розеткообраэования используют фосфатидный антиген микобактерий туберо кулеэа, иммобилизованный на эритроцитах, при этом в качестве диагностического признака учитывают концентрацию В-роэеткообразующих лимфоцитов (В-POK) и при значении В-POK не более 207. диагностируют туберкулез.

При постановке реакции розеткообразования с фосфатидным эритроцитар2 (54) СПОСОБ ДИАП1ОСТИКИ ТУБЕРКУЛЕЗА (57) Изобретение относится к медицине, а лченно к иммунологии, и мокет быть использовано при диагностике ту беркулеза. Цель изобретения — повышение точности способа. Проводят забор крови у больных, выделяют лимфоциты. Затем их сменивают с эритроцитарным фосфатидным туберкулезным диагно стикумом, инку 6ируют и подсчитывают число розеткообраэуюших клеток, при количестве роэеткообраэующих клеток 207 и меньше диагностируют туберкулез. По сравнению с прототипом точ— ность диагностики возрастает на

17, 57.. ным диагностикумом используют следующее соотношение ингредиентов реакционной смеси, мл: эритроцитарный фосфатидный диагностикум туберкулео эа 2 в концентрации 1,57;, комплемент

2; взвесь лимфоцитов О, 1; гемолитиФ ческая сыворотка с титром 1/2000 2.

Пример 1. Больная В ° 26 лет поступила с подозрением на туберкулез гениталий. В анамнезе бесплодие, опсоменорея. В 16 лет оперирована по поводу разрыва кисты яичника с резко выраженным спаечным процессом в брюшной полости. Туберкулезом ранее не болела.

Обследование проведено по следующей схеме. 5 мл гепариниэированной крови иэ вены больной отстаивают 1 ч при комнатной температуре, после чего отсасывают лимфоциты. К осадку лим1527593 фоцитов приливают среду У 199 в количестве, равном 0,7 объема лейкоцитарного слоя. Взвесь перемешивают.

Параллельно разводят комплемент добавлением к 0,2 мл сыворотки крови белой мьппи 1,8 мл физиологического раствора. Эритроцитарный фосфатидный диагностикум туберкулеза, представляющий собой эритроциты барана, сен- 10 сибилизированные фосфатидным антигеном микобактерий туберкулеза, разводят физиологическим раствором до

1,5 -ной взвеси. 2 мл этой взвеси смешивают с 2 мл гемолитической кро- 15 личьей сыворотки в субагглютинирующей концентрации, выдерживают при

37 C в течение 30 мин, дважды отмывают физиологическим раствором и центрифугируют 5 мин при 1000 об/мин. 20

Осадок растворяют в 2 мл среды 199, смешивают с 2 мл комплемента белой мьппи, выдерживают в течение 30 мин при 37 С, дважды отмывают физиологическим раствором и центрифугируют в 25 том же режиме.

Из осадка берут 0,1 мл эритроци-, тов (сенсибилизированных фосфатидным антигеном), смешивают с 0,1 мл лимфоцитов обследуемой (в данной смеси со- 30 держится 100 сенсибилиэированных эритроцитов на 1 лимфоцит) и инкубируют 30 мин при 37 С. Далее в смесь вносят 0,05 мл глютарового альдегида и 0,25 мл дистиплированной воды, пос. — 35 ле чего центрифугируют в течение

5 мин при 1000 об/мин, сливают надосадочную жидкость, добавляют 0,5 мл среды Р 199 и готовят мазок для микроскопии с окраской по Романовскому. 40

Под микроскопом просматривают розеткообразующие В-лимфоциты. Учитывают лимфоциты, присоединившие не менее 3 эритроцитов.

При обследовании предварительно 45 устанавливают концентрацию лимфоцитов крови по клиническому анализу крови для определения абсолютного содержания розеткообразующих В-лимфоцитов по общеупотребительной методике.

В данном примере В-РОК = 13 что меньше граничного значения, равного

20 .. Поэтому у обслецуемой диагностируют туберкулез. Этот диагноз подтвержден клинико-рентгенологически.

На рентгеновских снимках матки и придатков - облитерация и множественные обызвествленные лимфоузлы, Проба Коха с положительной очаговой реакцией °

Пример 2. Больная Б,22 лет.

При поступлении диагноз — туберкулезный спондипит поясничного отдела позвоночника, туберкулез легких.

Обследование проводят как в примере 1.

В результате установлено В-РОК/

8 ., что меньше граничного значения (20%) и позволяет диагностировать туберкулез.

После курса химиоретапии и соответствующей подготовки больная прооперирована. Произведена абсцессотомия, удалейие диска. Диагноз подтвержден бактериологически и рентгенологически.

Пример 3. Донор С. 26 лет, был обследован на донорском пункте

ЛПИИ, Обследование проведено как в приме ре

У данного донора установлено

В-YOK = 29, что больше граничного значения (20%) . Поэтому сделан вывод о том, что донор здоров, что подтверждается данными его клинического обследования на донорском:;пункте.

Использование предлагаемого способа позволяет повысить точность способа. Так, вероятность правильного диагноза при обследовании 34 больных туберкулезом в предлагаемом способе составляет 97,1, тогда как в известном способе эта вероятность составляет 80,6%. Статистический анализ подтверждает значимость отличий в точности сравниваемых способов при уровне значимости не более 5, т.е. точность при использовании предлагаемого способа возрастает на 17,5 .

Определенность диагностики в предлагаемом способе характеризуется вероятностью отнесения здорового лица к категории больных лишь 0,05, что вполне соответствует требованиям для

t статистически обоснованного применения предлагаемого диагностического признака.

Формула изобретения

Способ диагностики туберкулеза, включающий забор крови, вьщеление лимфоцитов, инкубацию их с эритроцитарным диагностикумом, подсчет розеткообразующих клеток, о т л и ч а ю— шийся тем, что, с целью повьппения точности способа, используют

5 1527593 6 эритроцитарный диагностикум с иммо- барана и после подсчета розеткообрабипизацией фосфатидного антигена ми- зунхцих клеток диагностируют туберкукобактерий туберкулеза на эритроцитах лез по снижению их от 203 и менее.

Составитель В. Литовченко

Редактор И.Горная Техред М.Дидык Корректор А.Обручар

Заказ 7507/51 Тираж 789 Подписное

ВНИИПК Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,101