Способ получения дигаплоидов картофеля sоlаnuм тuвеrоsiuм l

 

СОЮЗ СОВЕТСНИХ сОциАлистичесних

РЕСПУБЛИН (l9! (И) (5l)5 С !2 И 5 00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ,1

/ лампы дуговые ртутные высокого давления с иодидами металлов, например

ДРИ-2000-6. Для усиления эффе к та осведения обрабатывают бутоны растенийдоно ров пыльников в фазу мейо за

0,00152-ным водным раствором 6-бен> е зилгмиггогтурина или 0,00107.-ным вод- М пым раствором гиббереллина, Сп

Способ осуществляется следующим

iбразом. ОЪ

Клубни сортов или форм картофеля, QQ дигаплоиды которых полаган т получить, нь севают в сосуды (объемом 10-)2 л) с грунтом, заделывая их на глубину 3-5 см. Грунт увлажнен. Режим культивирования до появления всходов:

O температура 10-12 С без освещения. 3

Растения, после того как они достигнут высоты 5-10 см, выращивают при

IS-20 С днем, 12-15 С «очью, фотопео о риод l6 ч, освещенность 15 1 тыс.лк, источник освещения — лампы луговые

ГОСУДАРСТ8БННЫЙ НОМИТЕТ пO изОБРетениям и ОтнРытиям пРи Гннт сссР (46) 15.01.91, Бюл. У 2 (2I) 4439956/13 (22) 03.05.88 (7!) Институт генетики и цитологии

АН БССР (72) А,П. Ермишин и Е.В. Воронкова (53) 578.085.23(088.8) (56) Маруненко И.М. Условия, способствующие,развитию микроспор по спорофитному пути, и получение гаплоидон в культуре пыльников картофеля. Автореф. канд. дис. М., 1986, с. 22. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕ11ИЯ /(ИГАПЛО!!ДОВ

КАРТОФЕЛЯ SOLANO TUBегоSIUM

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к селекции растений, и может применяться н сельском хозяйстве. ((елью изобретения является повью!ение выхода регенерантов.

Способ состоит в том, что осущесTвляют нырнщинг«ие растений †донор пыльников, иэолировангге бутонов, содержащих пыл««èêи с микрос«орами на средней и поздней стадии после освобождения из тетргд, холодовую обработку бутонов низкими положительггыми температурами, культивирование пыльников для и«пук«èè каллюсообрàзонг— ния на питательной среде, содержащей

6-бензилами«о«урин и (-нафтипуксус— ную кислоту, получение дигаплоидных растений-регенерантов из каллюса на питательной среде, содержащей зеатин, растения-до«орш пыльников выращивают в условиях искусственного климата, используя н кг«естне источника света

2 (57) Изобретение относится к биотехнологии, в частности к генетике и гелекции растений, и может использоваться в сельском хозяйстве. Целью иэобретения является повь шение выхода регенерантов. Способ состоит в том, что растения-доноры пыльников выращи" вают в условиях искусственного клим".— та при использовании н качестве источника света дуговых ртутных ламп нысокого давления с иодидами металлов, при этом бутоны растенггй-доноров пыльников обрабатывают B фазу мейоза фитогормонами. 2 з.п. ф-лы, 2 табл.

<>; . с,, i; i; r if>i 1!(>д((<т(a t ill

„,,<,, », в» i> t„, г!> /> . ! т . i>fib>, (д< р. a!((»e ?)ЬВ)Ь!«?(КИ) и фа— зе и< й<>3.: збр батывают 0) ОО! 77-ным

f1<>rill(!и 1>агтвор: .— < f >ила:>ииопурина и>п! 0 11О1 < -!> с!с< i < Ji! i м раст)3(р<>м гиббер< J)JIIГ работку произ во)>ят

ПРИ <.ВЕ>ЦЕНИИ ПУТЕМ nrip?1(. хи i > I! цч " . 3 I I у)! f. я < p i)я а 1 i i !», Я>1?!

J)Э< <Ш< l О i Ма <3(I>;3 ill! (! 13 р <1 С ТВО р ЦО(7 l j«JI ß

<>т >3. «:ni(<(è <е ) 3 3 Т(, ге(i 60 (в копи<(<.1 вс Г!,,> — <с), l > /t! j т

1<1(гти с Гу . >н .I»() годе! )шими п((льН>(,1(И((с> < il Р:- !, И 3 СРЕДН и И IIO3 (1> 1> с<г 3,<(iii! <>с (се«обожд<31(ия из г >i< ;: .>(:.>к т 1 . >;I f1)(bit f1) с; . ott ржив;сх т

t .В« ";. "..:: )с- Г<:с,<. -Ii !R

>бр;,ГО;Kli бу l!>i!bi

6 -1(: О, !7,— с(, > < t i,; j< tl t !, ; >((с!,> 1> r(.>< <<< \ < r(р(\-! в,> >г 1-. >1 г< - !:> I>!>17-»>.,3>(ftnA

<; .;; ..:: .;,«> r t > ° <1», ",« Х (Л 13 Ы> <3< т< т» 3>с<с3 И Пс>

3<>" - <-<

i,tв:,;-.;. ri:if> >(ые < г 1!i по 11ичI i >: ... : и> e — Ск уl v тиа>>и»,ä >(«(п(11С (I c i сti iitr . с,;ttlrl ! /J) с . .. ) !(3 с< )3<! <, t,ir>(t i \ (7(! I /Ji с

i>-, ...:,i!;- . t t::tv(>:,r>., "«г, », ».— Нафтjf>I .

>! Ими(! . 1!и! апл< )(дные растения-ре "el!< i, >нтьl извлекают из. пробирок и выса7K»I3aI> r I1 грунт (торфос)(егь Двина ) .

11 р и .i e p !. О<.у)цествляют полу< 13!(< диг эпл<>идол Kартофеля по схеме, »!>III«< дс!II«>й ньиве. В качестве растеIIIII« дон<>ров используют сорт Орленок, 1(ри этом проводят сравнение воздейгтвия <)бработки бутонов фи-.огармонами и вырап<ивания без Обработки.

Лналогичио осуществляют другие примеры, НО в работу включают другие сорта картофеля. Результаты представлены

17 табл .

В табл. 2 пр?(водится состав исполь:«у< »,(х питательных сред. !!(>(< ль 3<>f«;»lite предлагаемого спосо .:1 >:>зволяе1 (:ущес7 пенно по(«ысить вых .Jl, диг«3(IJ(<>I()(<7(3 <)!7тофелн за счет

311:! чи ге:Ii llo i < ув <.Jli! . ения количества

>я >3(И>11(Х<7В, Об!>азушщИХ Капнуе В КУЛЬтУ(>е l ll vi tl 0. (!> (> р м у»

1, Спог Об пол уч<.и>>я лига плоид<эв картофепя )olanum tubегоsij.i!1) 1„включ;(юший выра(цивани«растений-доноров

IiI!..(t»3vKnt3) изо )!f«a!«le бутонов, содержащих пь(3)ьники с микроспорами на с(>< д!3 и и поздней О: д(н(!>! из тетр, д, холодовую обработК бутс>НОВ НИЗКИМИ ПОЛОжнтЕЛЬНЫМИ т(!I><

ЛИК»В (, « ; it i! (О 3! .1(>

<сс,! с> i, <>K 1!!

1>17. =3 „

,< .-< — >i

<3>! !. 7 > Г >3<.t

<т с .с с 3, .,„ti t i!r)i it><< (paò-Лс (!

111ц>

t iij,,3- <>! 3! 11(. (3

i Г с" Г!

УЧ И 1 <,i>t, >с

В;3 >3(ii)37< г> T .и улью по)>I IIUeljèÿ выхода регенерантов, рас.l ения-доноры пыльников выращивают в у<:ло виях искусс твенно го хпима та, используя н качестве источников света лампы дуговые ртутные )«blc

Ра< ГЕН (й-ДОНОРОВ i.bi)btii(K<>rl В фаЗУ МЕ1(О «а .,Орабатывают водными растворами

2, с .>(<С б <О и. 1, О т и H u a Ющ !! г с 4:-см, ч <<7 f« K «чес <ве источ1(И К<3 С ВЕ l а И(. >I OJ! b 3 V>OT .. и 2, о т л и ч а ю шийся гем) !тэ бутоны рас I "itill: ДОН;. р 7>! (i. IЬ>!>!К(В <;С>р )бат!)>ВЯЮТ

О„А!57.-ным ь. Дним р, с13><>р<>м 6-бен. »<<,1:с>(>((7(ly) i:ii",: 3, t, ii. — >31»! Вадимы

<>.>Г "> T) .РГ>М Г>if i - 3. !<>>i: .

1 е и)!1! pe реду следу((73 I?1 ) и) е )i Ску>1)1,! М(<Н О?(i /jl) и! /л, 3> <а с рeд

; у3(ьтиви><ри 22 С

: св: щенм. <;(i a от->г гу » t Jii )1 <)<(!»,>tin (! О . «Tii )Ilej«

i r it <к . !><()ffllа

« 3 ,.: . 4t ", во (пll)i,fiji><. >в, О6Ра.

K,tJ>J(> сг . 11(:сэlе 3 )nf О ОС>I l,.>:> ir <3<>)(У ЧЕ>31(Я Ра< генер if! тов н, пи тат(iльную <: ющег(> < (!(Г i в J кl>lне17 11(ьные

Fe ЕДА <7. и >3>(>;3;;>i>II < >в> !1у р i(: с

Г y С,>Х «1 О(3;1 2((с < 31, (>-б .;() пурин ; мг/л, беат>гн О, г"-нафl jL)уксусli,)H к)((31(>т><3 (J бак1:-агар Г г<.л. р(1 (p< JJbi с(В 1 i r K Ji i Ti ji j » . i . .>: ; . с I: 1< 1. I J I IO tl (!

РУ"7 »> 3>Р "- "> ": !(И> )Jill "< .r («а С); ",. ° тх ...tilt (!i .<> u» т с

Сс<ж»(3 "К с (> !. » I <«Ч) j. !С 1 < !ЛЬИЦ! На

<; сp<> (у (i .;р tt ° ii,. к уг,> б< 3,"i> го! ярмо

H i > H li !, Ó "i т,:: : .; ., . 13 (с<, . ((<т 3 - < > fi ÅДЕЛ. Ii i(p . .. I, >OJI(Ь;>с .:, tip(i КОт<>РЫК >>3(),;:(!с,>:., .: Н Р:3 (i(IO (<>Ill!(t

Р;!т " (са".((1) кУJ)I тини!>ОВание пыль»

r! диф!3>(ировав>!Ой < реде !!<)ггО<(е(>ж:3(ц и 6 — бгизила((инопурии аф ги>(уксусную к((гь» >ту, получЕх<>ллу(i дигаплоидных растений<1;«нтов на модифицирс ванной срер,«гиге-Скуга, содержащей зеатин, Й! 554368

Таблица I

Каллюсообраэование в культуре пыльников (X от числа эксплантированных пьц ьников) сортов картофеля

Сорт Без обработки бутонов

Обработ.— ка буто" нов гиббереллином

Обработка бутонов

6-бензиламинопурином

44,6

72,0

23,4

75,2

66,!

59,6

Орленок

Ласунак

Ирис

Отрада

53,9

71,5„

71,3

Средняя по сортам

65,6 58,3

49,9

Таблица 2 т

Составы использованных в предлагаемом способе питательных сред концентрации компонентов сред, мг/л

Среда для культивирования пыльников

Среда для получения регенерантов иэ

Среда для микроклонального

Компонент среды размножения регенерантов каллюс а

5,8 к 1о3 ин+ио, VI,SO 7Н,О

КН IO

CaCI< 2i 0

МпБО,! 4Н О

Н ЗВОэ

ZnSO ° 4I1 O

2п ЯО < 7нуо

Ыа МоО 21! 0

CuSOq 5Н О

СоС1 бн 0

На, ЕРТЛ 2Н О

FeSO 7Н О

К1

Никотиновая кислота

Тиамин НС!

Пиродоксин HCI

Меэо-иноэит

Сахароза

g-НУК

Ь-БАП

Зеатин

Агар рН

950

720!

68

166

10

0,25

О, 025

37,3

27,8

0„5

0,5

200

60000

7000

5,8

370 !

22,3

6,2

8,6

0,25

0,025

0,025

37,3

27,8

0,83

0,5

О,!

0,5

0,5

1,5

0,5

5,8

17Р

22,3

6,2

8 6

0,25

0,025

0,025

37,3

27,8

0,83

0,5

0,1

0,5

20000