Штамм бактерий vibrio nag 075 серовара, используемый для приготовления моноварной диагностической сыворотки
Изобретение относится к медицинской микробиологии, а именно к серологической идентификации патогенных вибрионов. Цель изобретения - штамм Vibrio Nag КМ N 45 (3792) ранее неизвестного серовара 075, используемый для приготовления моноварной диагностической сыворотки, применяемой при идентификации патогенных для человека вибрионов. Штамм депонирован в коллекции Музея живых культур Всесоюзного научно-исследовательского противочумного института "Микроб" под регистрационным N 45 (3792) и обладает всеми присущими для рода Vibrio свойствами. Штамм может быть использован для изготовления сыворотки, позволяющей усовершенствовать диагностику кишечных заболеваний, вызываемых энтеропатогенными вибрионами. 1 табл.
Изобретение относится к медицинской микробиологии, а именно к серологической идентификации патогенных вибрионов. Целью изобретения является штамм Vibrio Nag КМ N 45 (3792) ранее неизвестного 075 серовара, служащий для приготовления моноварной диагностической сыворотки для идентификации вибрионов 075 серовара. Штамм выделен во Всесоюзном научно-исследовательском противочумном институте "Микроб", депонирован в коллекции Музея живых культур этого же института под регистрационным N 45 (3792) и обладает всеми свойствами, характерными для рода Vibrio. Морфологические признаки. Подвижные слегка изогнутые палочки, спор и капсул не образуют, грамотрицательные. Культуральные признаки. На плотном агаре образует гладкие, круглые, прозрачные, плоско-выпуклые с ровным краем колонии диаметром 2-2,5 мм. В жидких питательных средах вызывает равномерное помутнение, на поверхности образует пленку. Ферментативные свойства. Оксидазоположительный, ферментирует и окисляет глюкозу до кислоты без газа, относится к 1 группе Хейберга, не ферментирует лактозу, инозит и салицин, ферментирует маннит, крахмал, образует индол и сероводород, имеет декарбоксилазу лизина и орнитина и не обладает дигидролазой аргинина, не растет в 1%-ной пептонной воде с добавлением 7 и 10% хлорида натрия. Антигенные свойства. Штамм Vibrio Nag КМ N 45 (3792) агглютинируется холерными диагностическими сыворотками О, Огава, Инаба в разведении 1:100. Не лизируется холерными бактериофагами С, эльтор, ХДФ 3,4, ТЭПВ 1-7. Лизируется фагом ХДФ 5 в разведении 10-2. Обладает специфическим О-антигеном. При иммунизации животных О-антигеном данного штамма происходит образование специфических антител. П р и м е р 1. Для приготовления моноварной диагностической сыворотки 075 серовара используют 0-антиген штамма Vibrio Nag KM N 45 (3792). Культуру штамма КМ N 45 высевают в 1% -ную пептонную воду, рН 7,6 выращивают при 37oС в течение 4 ч, затем пересевают на свежескошенный агар из настоя сердечной мышцы, рН 7,6. Посевы инкубируют при 37oС в течение 8-20 ч. С поверхности агара смывают культуру физиологическим раствором рН 7,2. Полученную микробную взвесь кипятят при IOOoC в течение 2 ч с момента закипания в 10%-ном растворе хлорида натрия. Затем взвесь дважды отмывают физиологическим раствором, рН 7,2, путем центрифугирования. После контроля на специфическую стерильность микробную взвесь используют для иммунизации кроликов. Кроликов породы шиншилла весом 2-2,5 кг иммунизируют с трехдневными интервалами: первую и вторую инъекции делают подкожно по 20 млрд. м.т. третью внутривенно, 5 млрд. м.т. На седьмые сутки после последней инъекции кроликов обескровливают. Сыворотку консервируют путем добавления мертиолата натрия в концентрации 1: 10000. Титры сывороток составляют 1: 3200. После адсорбции сывороток гетерологические антитела полностью удаляются. За диагностический титр принято разведение сыворотки 1:400. П р и м е р 2. Сыворотку используют для идентификации вибрионов, выделяемых от больных людей и из объекта окружающей среды. Реакцию агглютинации ставят объемным методом в одном разведении диагностическом титре. Для приготовления сывороток и взвесей культур используют физиологический раствор, рН 7,2. Положительной считают реакцию с оценкой 2-4 "+". Сыворотка против вибрионов нового 075 серовара строго специфична и активна. Положительная реакция отмечается только с гомологичным штаммом (таблица). Диагностическая сыворотка против вибрионов 075 серовара имеет большое практическое значение при диагностике кишечных заболеваний. Она позволяет более широко дифференцировать патогенные вибрионы.
Формула изобретения
Штамм бактерий Vibrio Nag KM N 45 (3792) 075 сеpоваpа, используемый для пpиготовления моноваpной диагностической сывоpотки.РИСУНКИ
Рисунок 1MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе
Номер и год публикации бюллетеня: 8-2000
Извещение опубликовано: 20.03.2000
