Штамм бактерий vibrio nag 077 серовара, используемый для получения диагностической моноварной сыворотки

 

Изобретение относится к медицинской микробиологии, а именно к серологической идентификации патогенных вибрионов. Цель изобретения - штамм Vibrio Nag нового 077 серовара, используемый для приготовления моноварной агглютинирующей сыворотки, что позволяет усовершенствовать диагностику кишечных заболеваний. По морфологическим, культуральным и физиологическим свойствам относится к роду Vibgio. штамм Vibrio Nag КМ-47(8/1398) обладает специфическим О-антигеном. При иммунизации животных образуется специфические антитела. Полученная сыворотка агглютинирует вибрионы только гомологичного серовара и не реагирует с вибрионами гетерологических сероваров. Штамм КМ-47 (8/1348) имеет практическое значение для получения монорецепторных сывороток, используемых при диагностике кишечных заболеваний и идентификации вибрионов. 2 табл.

Изобретение относится к медицинской микробиологии, а именно к серологической идентификации патогенных вибрионов. Целью изобретения является штамм Vibrio Nag нового 077 серовара, используемый для приготовления моноварной агглютинирующей сыворотки, что позволяет усовершенствовать диагностику кишечных заболеваний. Штамм Vibrmo Nag КМ-47 (8/1398) 077 серовара хранится в коллекции Музея живых культур Всесоюзного научно-исследовательского противочумного института "Микроб" под номером КМ-47 (8/1398). Штамм Vibrio Nag КМ-47 (8/1398) обладает всеми свойствами, характерными для рода Vibrio (табл.1). Морфологические признаки. Подвижные слегка изогнутые палочки, спор и капсул не образуют, грамотрицательные. Культуральные признаки. На плотном агаре образует гладкие круглые прозрачные с ровным краем колонии диаметром 2 25, мм. В жидких средах вызывает равномерное помутнение, образует на поверхности пленку. Физиологические свойства. Оксидазоположительный, относится к 1 группе Хейберга, ферментирует глюкозу, маннит до кислоты без газа, не ферментирует инозит, салицин, лактозу, образует индол и сероводород, имеет дикарбоксилазу лизина и орнитина и не имеет дигидролазы аргинина, не растет в 1%-ной пептонной воде с добавлением 7 и 10% хлорида натрия, не фосфоресцирует. Агглютинируется холерными диагностическими сыворотками Огава и RO в разведении 1: 100. Лизируется холерными бактериофагами эльтор в разведении 10^-3, ТЭПВ 3 цельным, ТЭПВ 4 10^-4, ТЭПВ 7 цельным. Обладает специфическим O-антигеном. При иммунизации кроликов O-антигеном данного штамма образуются специфические антитела. Пример. Для приготовления моноварной сыворотки используют O-антиген штамма Vibrio Nag КМ-47 (8/1398) 077 серовара. Культуру штамма Vibrio Nag КМ-47 (8/1398) высеивают в 1%-ную петонную воду, рН 7,6, и выращивают при 37^oC в течение 4 ч, затем пересевают на свежескошенный агар, содержащий настой сердечной мышцы pH 7,6. Посевы инкубируют при 37^oC в течение 18 - 20 ч. Выросшую культуру смывают с агара физиологическим раствором, pH 7,2. Полученную микробную взвесь кипятят при 100^oC в течение 2 ч с момента закипания в 10% -ном растворе хлорида натрия. Затем взвесь дважды отмывают физиологическим раствором, pH 7,2, путем центрифугирования. После контроля на специфическую стерильность микробную взвесь используют для иммунизации кроликов. Кроликов породы шиншилла весом 2 2,5 кг иммунизируют трехкратно с трехдневным интервалом: первую и вторую иммунизации делают подкожно по 20 млрд. м.т. третью инъекцию 5 млрд.т. внутривенно. На седьмые сутки после последней инъекции кроликов обескровливают. Сыворотку консервируют путем добавления мертиолата натрия 1:10000. Титры сывороток оставляют 1-3200. За диагностический титр принято разведение сыворотки 1-400 Сыворотку применяют в реакции агглютинации с вибрионами. Реакцию агглютинации ставят объемным метолом в пробирках. Сыворотку используют в одном разведении диагностическом титре. Для разведения сывороток и приготовления взвесей культур используют физиологический раствор pH 7,2. Положительной считают реакцию с оценкой 2 4"+". Сыворотка против вибрионов 077 серовара строго специфична и высокоактивна. Положительная реакция отмечалась только с гомологичным штаммом (табл.2). Использование предлагаемой сыворотки при диагностике кишечных заболеваний имеет большое практическое значение, так как расширяет возможности дифференцирования патогенных вибрионов.

Формула изобретения

Штамм бактерий Vibrio Nag 077 серовара КМ-47 (8/1398), используемый для получения диагностической моноварной сыворотки.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2

MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Номер и год публикации бюллетеня: 8-2000

Извещение опубликовано: 20.03.2000        

---