Способ дифференциации биоваров холерного вибриона

 

Изобретение относится к микробиологии , в частности к дифференциации холерных вибрионов. Цель изобретения - повышение точности дифференциации. Изобретение заключается в том, что исследуемые культуры холерных вибрионов высевают на питательную среду, содержащую полимиксин, и на контрольную среду, содержащую полимиксин и додецилсульфат натрия. Дифференциацию проводят путем сравнения наличия роста культур на опытной и контрольной средах. Этот способ повышает достоверность идентификации исследуемых культур холерных вибрионов. 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ЗОБРЕТЕНИЯ .":-::-"- -""„

К АВТОРСКОМУ СВИ4ЕТЕЛЬСТВУ (21) 4786910/13 (22) 30.01.90 (46) 23.11.91. Бюл. М 43 (71) Научно-исследовательский противочумный институт Кавказа и Закавказья (72) Т. А. Аболина (53) 576.8.078:576.851.31(088.8) (56) Инструктивно-методические указания по лабораторной диагностике холеры. M., 1984, с. 40. (54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ БИОВАРОВ ХОЛЕРНОГО ВИБРИОНА

Изобретение относится к микробиологии, в частности к дифференциации холерных вибрионов.

Цель изобретения — повышение точности дифференциации.

Пример 1. Расплавляют и охлаждают до 45-50 С питательный агар (рН 7,0-7,2), в одну часть которого добавляют полимиксин из расчета 30 едlмл среды, в другую — такое же количество полимиксина и 0,1-0,5 г додецилсульфата натрия на 1 мл среды. После тщательного перемешивания среду разливают в чашки Петри. На застывшие агаровые пластинки наносят обычной бактериологической петлей 3- или 18-часовую бульонную культуру. Посевы инкубируют в течение 18 ч при 37 С, Спустя это время проводят учет результатов, Если на питательной среде, содержащей только полимиксин, регистрируется рост холерного вибриона. то исследуемая культура относится к биовару эльтор, отсутствие роста говорит об отношении микроорганизма к биовару classica.

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ И

„„Я „„1693039 А1 (я)з С 12 N 1/00, С 12 0 1/04 (5?) Изобретение относится к микробиологии, в частности к дифференциации холерных вибрионов. Цель изобретения— повышение точности дифференциации. Изобретение заключается в том, что исследуемые культуры холерных вибрионов высевают на питательную среду, содержащую полимиксин, и на контрольную среду, содержащую полимиксин и додецилсульфат натрия, Дифференциацию проводят путем сравнения наличия роста культур на опытной и контрольной средах. Этот способ повышает достоверность идентификации исследуемых культур холерных вибрионов. 1 табл.

Сравнительный анализ результатов ро ста на среде с полимиксином и среде, содержащей полимиксин с додецилсульфатом натрия, позволяет выявить специфическое подавление роста V. cholerae classica именно полимиксином и исключить угнетающее влияние побочных факторов. Полноценный рост биовара classlca на средах с полимиксином и додецилсульфатом натрия подтверждает факт. угнетения роста этого биовара полимиксином на средах, содержащих только антибиотик, при сохраненном росте холерных вибрионов биовара эльтор, Полученные результаты приведены в табли-. це.

Пример 2. Культуры V. cholerae eltor и Ч. cholerae classica выращивают в течение

3 ч при 37 С на бульоне Хоттингера (рН 7,2).

В расплавленный и охлажденный до 45 С агар Хоттингера (рН 7,2) добавляют полимиксин из расчета 30 ед/мл. Разделяют на две порции, в одну из которых добавляют додецилсульфат натрия из расчета 0,1 г/мл.

Тщательно перемешивают и разливают в

1693039 чашки Петри. Культуру после инкубирования наносят бактериологической петлей в виде бляшек на застывший агар двух чашек

Петри:одной с полимиксином (опытной), другой с полимиксином и додецилсульфатом натрия (контрольной). Посевы инкубируют при 37 С в течение 18 ч. При учете результатов на первой чашке отмечался только рост культур биовара эльтор, на контрольной чашке выросли культуры как биовара эльтор, так и биовара classica.

Пример 3. Культуры V. cholerae eltor и V. cholerae classica выращивают в течение

18 ч при 37 С на бульоне Хоттингера (рН

7,2), добавляют полимиксин из расчета 30 ед/мл. Разделяют на две порции, в одну из которых добавляют додецилсульфат натрия из расчета 0,3 г/мл. Тщательно перемешивают, разливают в чашки Петри. Культуру после инкубирования наносят бактериологической петлей в виде бляшек на застывший агар двух чашек Петри: одной с полимиксином (опытной), другой с полимиксином и додецилсульфатом натрия (контрольной). Посевы инкубируют при 37 С в твчение 18 ч. При учете результатов на опытной чашке выросли только культуры биовара эльтор, на контрольной — культуры обоих биоваров.

Пример 4. Культуры V. cholerae eltor и V, cholerae classlca выращивают в течение

3 ч при 37 С на бульоне Хоттингера (рН 7,2).

Расплавленный и охлажденный до 45ОС агар Хоттингера (рН 7,2) разделяют на две

Части, предварительно внеся в него полимиксин из расчета 30 ед/мл. В одну из

Частей добавляют додецилсульфат натрия из расчета 0,5 г/мл, тщательно перемешивают и разливают в чашки Петри, Культуру после инкубирования наносят бактериологической петлей в виде бляшек на застывший агар двух чашек Петри: одной с полимиксином (опытной), другой C полимик5 сином и додецилсульфатом натрия (контрольной). Посевы инкубируют при 37 С в течение 18 ч. При учете результатов на опытной чашке обнаружен только рост биовара эльтор на контрольной выросли культуры

10 биоваров эльтор и classica.

Полноценный рост биовара classlca на средах, содержащих додецилсульфат натрия и полимиксин, подтверждает факт угнетения роста этого биовара полимиксином

15 на средах только с антибиотиком при сохраненном росте в обоих случаях холерных вибрионов биовара эльтор.

Таким образом, в результате использования способа контроля определения био20 вара холерного вибриона повысилась достоверность индентификации выделяемых культур за счет исключения влияния неучтенных побочных факторов, которые могут дать искаженную картину лаборатор25 ной диагностики.

Формула изобретения

Способ дифференциации биоваров холерного вибриона путем посева исследуемой бульонной культуры на.питательную

30 среду с полимиксином с последующей инкубацией и дифференциацией биовара эльтор от биовара classica по наличию роста, о тл и ч а ю шийся тем, что. с целью повышения точности дифференциации, исследуе35 мую культуру параллельно сеют на среду с полимиксином, дополнительно содержащую 0,1-0,5 додецилсульфата натрия, и при наличии роста на обоих средах дифференцируют биовар зльтор.