Питательная среда для выявления тиолзависимых гемолизинов энтеробактерий
Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано в практике бактериологических лабораторий для выявления штаммов энтеробактерий, способных продуцировать важный фактор патогенности - тиолзависимые гемолизины . Цель изобретения - удешевление среды. Навеску сухого питательного агара в количестве 30-40 г вносят в 1 л дистиллированной воды. После расплавления и стерилизации добавляют 0,01-0,1 г L-цистеина, перемешивают и вносят 30-50 г отмытых эритроцитов кролика. Среду перемешивают и разливают в чашки Петри. Посев на чашки культуры производят уколом и инкубируют 24-48 ч. В положительных случаях вокруг выросших колоний отмечается зона гемолиза. 1 табл.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ ПРИ ГКНТ СССР ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4757979/13 (22) 25,09.89 (46) 23.11,91. Бюл. N. 43 (71) Кабардино-Балкарский государственный университет (72) О.С. Якушенко, И.М, Габрилович, В.М. Бондаренко и И.А. Руднев (53) 576.8.093.31(088.8) (56) 1, Canad. l. Microbiology, 1985, ч, 31, р, 297-300. (54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ ТИОЛЗАВИСИМЫХ ГЕМОЛИЗИНОВ ЭНТЕРОБАКТЕРИЙ (57) Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано в практике бактериологических лабораторий для выявления штаммов энтеробактерий, способных продуцировать важный фактор патогенности — тиолзависимые гемолизины. Известна питательная среда для выявления тиолзависимых гемолиэинов, содержащая триптиказо-соевый а ар "Дифко" с 3-5 (, взвеси эритроцитов кролика (11, Однако известная среда для выявления тиолзависимых гемолизинов является дорогой и малодоступной для микробиологических лабораторий, Целью изобретения является удешевление среды, Пример 1, Питательную среду готовят следующим образом, Навеску сухого питательного arapa в количестве 30 г вносят в 1 л дистиллированной „„!Ж„„1693062 А1 в практике бактериологических лабораторий для выявления штаммов энтеробактерий, способных продуцировать важный фактор патогенности — тиолзависимые гемолизины. Цель изобретения — удешевление среды. Навеску сухого питательного агара в количестве 30-40 г вносят в 1 л дистиллированной воды. После расплавления и стерилизации добавляют 0 01 — 0,1 r L-цистеина, перемешивают и вносят 30-50 r отмытых эритроцитов кролика. Среду перемешивают и разливают в чашки Петри. Посев на чашки культуры производят уколом и инкубируют 24-48 ч, В положительных случаях вокруг выросших колоний отмечается эона гемолиза. 1 табл.. воды, кипятят до расплавления агара и стерилизуют. К расплавленной стерильной среде добавляют 0,01 г L-цистеина, растворенного в 1 мл стерильного физиологического раствора хлористого натрия. После перемешивания в охлажденный до 45 С агар вносят 30 г трижды отмытых в растворе Хенкса или среде 199 эритроцитов кролика. Среду перемешивают и разливают по 20 мл в чашки Петри. Посев бактерий производят бактериологической петлей уколом, при этом следует избегать прокалывания агара до стекла. Чашки инкубируют в термостате . при 37 С в течение 24 — 48 ч, после чего производят учет результатов. В положительных случаях вокруг выросших бактерий отмечается эона гемолиза. Из испытанных 10 штаммов 1 штамм Citrobacter freundll N. 1013 дал сливной гемолиз (при одновременном испытании на чашке нескольких колоний), 2 штамма С. freundii N 78 и N. 2591 не 1693062 Род бактерий Число испытанных штаммов Число положительных результатов на предлагаемой среде Число положительных результатов на триптиказо-соевом araе Число полож тельных резу татов на пред гаемой среде б цистеина 87 44 3 Citrobacter Klebsiella Escherichla Serratia Entегоbaeter Hafnla 87 44 3 37 Составитель Г.Смирнова Редактор О.Юрковецкая Техред М.Моргентал Корректор Э.Лончакова Заказ 4052 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 дали гемолиза, остальные 4 штамма С. freundll и все 3 испытанных штамма Klebsiella pneumoniae дали гемолиз, Пример 2. Питательную среду готовят, квк описано в примере 1, При этом берут 5 навеску сухого питательного агара 35 г, 1цистеин 0,02 г и эритроциты кролика 40 r на 1 л дистиллированной воды, Все 7 исследованных штаммов С. freundil и все 3 штамма К. pneumoniae дают гемолиз, 10 Пример 3. Питательную среду готовят, как описано в примере 1. Сухой питательный агар берут в количестве 40 г, L-цистеин 0,1 г и эритроциты кролика 50 г на 1 л дис- 15 тиллированной воды, 2 штамма С. freundil N 35 и М 1013 дали сливной гемолиз, остальные 5 штаммов С. freundii и все 3 штамма К. pneumoniae öàëè гемолиз. Пример 4. Предлагаемая питательная 20 среда испытана в сравнении с триптиказоосевым агаром фирмы "Дифко" на 328 штаммах, принадлежащих к различным родам семейства энтеробактерий. Контролем служат среда того же состава, но без цисте- 25 ина, на которой гемолиз заведомо отсутствует. Результаты испытаний знтеробактерий на триптиказосоевом агаре и предлагаемой среде представлены в таблице, Испытание на обеих питательных средах дало одинаковые результаты. Таким образом, предлагаемая питательная среда для выявления тиолзависимых гемолизинов не уступает триптиказо-соевому arapy фирмы "Дифко" по своей чувствительности, но является более доступной для широкого применения в лабораторной практике и более дешевой. Формула изобретения Питательная среда для выявления тиолэависимых гемолизинов знтеробактерий, содержащая питательный агар, эритроциты кролика и дистиллированную воду, о т л ич а ю щ а я с я тем, что, с целью удешевления среды, она дополнительно содержит L-цистеин, в качестве питательного агара она содержит сухой питательный агар при следующем количественном соотношении компонентов, г/л: Сухой питательный агар L-цистеи н Эритроциты кролика Дистиллированная вода
