Способ определения степени тяжести гемофилии а
Изобретение относится к медицине, а именно к гематологии, и касается способов определения степени тяжести гемофилии А. Целью изобретения является повышение точности определения. Для достижения поставленной цели определяют концентрацию дезоксирибонуклеиновой кислоты в плазме крови и при ее уровне, равном 7,4 мкг/мл и меньше, определяют легкую степень тяжести заболевания, а при ее уровне, равном 8.1 мкг/мл и более, определяют тяжелую степень заболевания. Способ позволяет повысить достоверность определения.
СОНэз СОВЕ TCKVIX
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК (п)з G 01 N 33/50
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
С1 фь
О
СО
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4209432/14 (22) 11.03.87 (46) 07.01.92. Бюл, М 1 (71) Кировский научно-исследовательский . институт гематологии и переливания крови и Центральный научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови (г. Москва) (72) В.И.Паньков, С.А.Мадков и Н,А.Федоров (53) 615.475(088.8) (56) Руководство по гематологии./Под ред.
А.И.Воробьева — М.: Медицина, 1985, т. 2, с.
233-242.
\ ." °
Изобретение относится к медицине, а именно к гематологии, и касается способов определения степени тяжести гемофилии А.
Целью изобретения является повышение точности способа.
Способ осуществляют следующим образом.
После клинико-лабораторного обследования больного с целью повышения точности определения степени тяжести гемофилии А дополнительно определяют концентрацию дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) в плазме крови. К 0,4-0,5 мл плазмы крови добавляют равный объем
20 -ного раствора NaCI, перемешивают и помещают в кипящую водяную баню. Затем охлаждают и центрифугируют. Концентрацию ДНК в супернатанте определяют по флуоресценции комплекса ДНК вЂ” бисбензимид при длине волны возбуждения 365 нм и эмиссии 470 нм. 8 кювету вносят 2,5 мл 0.05,, Я2,, 1704081 А1 (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СТЕПЕНИ
ТЯЖЕСТИ ГЕМОФИЛИИ А (57) Изобретение относится к медицине. в именно к гематологии. и касается способов определения степени тяжести гемофилии А.
Целью изобретения является повышение точности определения. Для достижения поставленной цели определяют концентрацию дезоксирибонуклеиновой кислоты в плазме крови и при ее уровне, равном 7,4 мкгlмл и меньше, определяют легкую степень тяжести заболевания, а при ее уровне. равном 8,1 мкг/мл и более, определяют тяжелую степень заболевания. Способ позволяет повысить достоверность определения.
M фосфатного буфера. содержащего 1,3
NaCl и 25 мкл раствора бисбензимида с концентрацией 60 мкгlмл. Затем в кювету вносят 3 раза по 20 мкл супернатанта исследуемой плазмы и производят измерение флуоресценции. В эту же кювету вносят
3 раза по 20 мкл раствора ДНК (внутренний стандарт) с концентрацией 20 мкг/мл, ДНК, используемую в качестве внутреннего стандарта. предварительно прогревают в кипящей водяной бане в течечие 5 мин.
Концентрацию ДНК в супернатанте рассчитывают по формуле:
В хГХБ
АXD
Х вЂ” концентрация ДНК в супернатанте. мкг/мл;
А — объем супернатанта, добавляемого в кювету, мкл;
à — концентрация стандартного раствора ДНК. мкг/Mll;
1704081
Составитель 3. Цыганов
Техред М.Моргентал Корректор С.Шевкун
Редактор О.Христа
Заказ 60 Тираж Подписное
ВНИИПИ Гг.судлрственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб.. 4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород. ул.Гагарина. 101
Б — уровень флуоресценции супернатанта, усл. ед;
 — обьем добавляемого в кювету раствора ДНК, используемого в качестве внутреннего стандарта, мкл; 5
Д вЂ” уровень флуоресценции раствора после добавления внутреннего стандарта, усл. ед.
Производят перерасчет концентрации
ДНК в 1 мл плазмы крови. При концентра- 10 ции ДНК в плазме крови, равной 7,4 мкг/мл и меньше, определяют легкую степень тяжести заболевания, а при концентрации
ДНК в плазме крови, равной 8,1 мкг/мл и более, определяют тяжелую степень забо- 15 левания.
Пример 1. Больной С, 24 г. Поступил в клинику по поводу гемофилии А с деформирующими остеоартрозами обоих колен- 20 ных суставов и гемартрозом левого локтевого сустава. Ранее неоднократно лечился в связи с гемартрозами различной локализации. При поступлении жаловался на боли в суставах и ограничения движений. 25
При лабораторном обследовании обнаружена относительно высокая активность фактора УШ (47Ц, При обследовании по предлагаемому способу концентрация ДНК в плазме крови составляла 8,1 мкгlмл. что ЭО соответствует тяжелой степени заболевания. Полученные данные подтвердили результаты клинико-лабораторного обследования.
Пример 2. Больной Г, 21 r. Поступил в клинику с синовиобурситом правого коленного сустава. При поступлении жаловался на умеренные боли в правом коленном суставе при ходьбе. Правый колленный сустав отечен и немного увеличен. Активность фактора УШ-2ф,, что соответствует тяжелой степени заболевания. Однако при обследовании по предлагаемому способу концентрация ДНК в плазме крови составляла 7,4 MKгlмл, что соответствует легкой степени тяжести заболевания. Полученные данные позволили уточнить степень тяжести заболевания.
Определение концентрации ДНК в плазме крови позволяет повысить достоверность определения степени тяжести гемофилии А.
Формула изобретения
Способ определения степени тяжести гемофилии А путем клинико-лабораторно о обследования, о т л и ч а ю щ и R с я тем, что, с целью повышения точности способа. дополнительно определяют концентрацию дезоксирибонуклеиновой кислоты в плазме крови и при ее величине, равной 7,4 мкг/мл и менее, определяют легкую степень тяжести заболевания, а при величине
8,1 мкгlмл и более определяют тяжелую степень заболевания.
