Способ определения изотипа антител

 

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологической диагностике. Цель изобретения - повышение точности способа за счет повышения чувствительности иммунологической реакции. При этом антигенный эритроцитарный диагностикум после экспозиции с исследуемой сывороткой отмывают и в концентрации 0,05-0,1% добавляют к 0,5%-ноМу антиизотиповому эритроцитарному диагностикуму. Повышается точность за счет повышения чувствительности иммунологической реакции в 4-5 раз. 4 табл.

союз советских

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)5 6 01 N 33/53

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ V

Ы

С)

С)

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4778119/14 (22) 04.01.90 (46) 15.03;92. Бюл. ¹ 10 (71) Научно-исследовательский институт эпидемиологии, микробиологии и инфекционных болезней (72) EO.À.Êóçüìèí и Б.В.Каральник (53) 615.373(088.8) (56) Coombs R.R.À, Fiset МЛ. — Brit.J.exp.

Path, 1954, v.35, р.471-472., (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИЗОТИПА

АНТИТЕЛ

Изобретение относится к иммунологии и может быть использовано для определения изотипов антител.

Цель изобретения — повышение точности способа за счет повышения чувствительности иммунологической реакции..

П р и и е р 1. Сыворотку больного эхинококкозом титруют на 0,85%-ном растворе хлористого натрия в пробирках в объеме 2,0 мл с разведением 1;200. В каждую пробирку вносят по 0,5 мл 0,5%-ного эхинококкового антигенного эритроцитарного диагностикума, смешивают содержимое пробирок и выдерживают их в течение 1 ч при комнатной температуре. Затем пробирки центрифугируют при 3000 об/мин в течение 5 мин. Надосадок сливают, а осадок эритроцитов трижды отмывают 0,85%-ным раствором хлористого натрия, содержащим 0,05%-ного твина-20, После этого к осадку добавляют

0,85%,-ного раствора хлористого натрия, который содержит 0,03% бычьего сывороточного альбумина, до концентрации эритроцитов 0,1%. По. 25 мкл этой взвеси переносят в ячейки планшета. содержащие

50 мкл 0,85% ного раствора хлористого на„„Я2 „„1720010 А1 (57) Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологической диагностике.

Цель изобретения — повышение точности способа за счет повышения чувствительности иммунологической реакции. При этом антигенный эритроцитарный диагностикум после экспозиции с исследуемой сывороткой отмывают.и в концентрации 0,05 — 0,1% добавляют к 0,5%-нойу антиизотиповому эритроцитарному диагностикуму. Повышается точность за счет повышения чувствительности иммунологической реакции в 4 — 5 раз. 4 табл. трия с 0,03% бычьего сывороточного альбумина. Для каждой исследуемой пробы сыноротки делают несколько одинаковых рядов обработанного последовательными разделениями пробы антигенного эритроцитарного диагностикума - по числу применяемых антиизотиповых диагностикумов. Во все ячейки одного ряда вносят по 25 мкл 0,5%ного антительного эритроцитарного диагности кума к одному изотипу иммуноглобулина, второго ряда — к другому изотипу иммуноглобулина и т.д, Учет осуществляют по агглютинации через 2 ч, В табл. 1 представлены результаты по обоснованию используемой концентрации эритроцитарного диагностикума.

Из табл. 1 видно, что оптимальным вариантом является концентрация эритроцитарного диагностикума 0,1-0,05%.

В табл. 2 представлены результаты по сравнению чувствительности определения разных классов антиэхинококковых антител предлагаемым и известным способами.

Из табл. 2 следует, что чувствительность определения антител каждого изотипа в 4-5

1720010

Таблица1

Таблица2

ТаблицаЗ раз выше при использовании предлагаемого способа в сравнении с известным.

В табл. 3 и 4 представлены результаты по изучению специфичности предлагаемого способа. 5

Как видно из табл. 3 и 4, при большей чувствительности предлагаемого способа, продемонстрированной в примере 2, его специфичность хуже, чем известного способа, 10

Формула изобретения

Способ определения изотипа антител путем взаимодействия исследуемой сыво. * Спонтанная гемагглютинация ротки со специфическим антигенным эритроцитарным диагностикумом с последующим определением титра антител в реакции гемагглютинации, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа за счет повышения чувствительности иммуно= логической реакции, дополнительно после взаимодействия реагентов осуществляют отмывание эритроцитов и добавление их в концентрации 0,05-0,1 к 0,5;4-ному анти-. изотиповому антительному эритроцитарному диагностикуму.

Та бл и ца4

Составитель Г,Крюкова

Редактор М.Недолуженко Техред М.Моргентал Корректор М.Демчик

Заказ 770 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r, Ужгород, ул.Гагарина, 101