Способ идентификации сортов тургидной пшеницы

 

Изобретение относится к способам генетико-селекцмонных исследований и м.б. использовано в биотехнологии, сельском хозяйстве, селекции и семеноводстве, биохимической генетике. Согласно предлагаемому способу проводят гибридизацию тургидной пшеницы с твердой пшеницей, имеющей в своем геноме глиадиновые маркеры , унаследованные от мягкой пшеницы, получают гибридные зерна Fa, проводят электро форетическое разделение глиадинов и по полученным белковым спектрам ведут идентификацию, 4 ил., 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РеспуБлик (я)5 А 01 Н 1/04

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ KOMMTET

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4839456/13 (22) 14,06,90 (46) 30.07,92. Бюл. Ь 28 (71) Научно-производственное объединение

"Дон" (72) M.M,Kortycb, Н .Е.Самофалова и

И,В,Евич (56) Доклады ВАСХНИЛ, 1975, Nh 11, с. 10-14. (54) СПОСОБ ИДЕНТИФИКАЦИИ СОРТОВ

ТУРГИДНОЙ ПШЕНИЦЫ (57) Изобретение относится к способам генетико-селекционных исследований и м.б.

Изобретение относится к генетико-селекционным исследованиям, Известен способ идентификации сортов мягкой пшеницы по электрофореграммам глиадиновых белков зерна, включающий получение гибридов F2, проведение электрофореза глиадина, анализ электрофореграмм и запись генетических форм.

Недостатком этого способа является то, что он применим только для сортов мягких пшениц, так как у них.имеются анеуплоидные и абберантные линии сорта мягкой пшеницы Чайниз Спринг. По твердым и тем более по тургидным пшеницам таких линий нет, Цель изобретения — повышение точности идентификации.

Поставленная цель достигается тем, что тургидную пшеницу скрещивают с твердой, а в качестве тестера на аллельность исполь,, ЯЦ„„1750554 А1 использовано в биотехнологии, сельском хозяйстве, селекции и семеноводстве, биохимической генетике, Согласно предлагаемому способу проводят гибридизацию тургидной пшеницы с твердой пшеницей, имеющей в своем геноме глиадиновые маркеры, унаследованные от мягкой пшеницы, получают гибридные зерна Fz, nроводят электрофоретическое разделение глиадинов и по полученным белковым спектрам ведут идентификацию, 4 ил., 1 табл. зуют сорт твердой пшеницы, имеющий в своем геноме четкие глиадййоййе маркеры, унаследованные от мягкой пшеницы.

Изробретение базируетя на основании филогенетического родства;

Т.aestivum L (n=21) - А, В, Д

Т.durum Оем. (п=14) — А, В

Т.т9Ы L(n=14) — A, В и межвидовых скрещиваний между

Т.eestivum L. и Т.durum Dest. В качестве примера можно привести сорт Черномор, у которого есть аллели глиэДйна, перенесенные в геном твердых от мягких. Известно, что Т.durum Dest и Тлог91бцгп L легко скрещиваются между собой без генетической депрессии. Следовательно, если в качестве сорта-тестера взять Черномор или другой сорттвердой пшеницы, несущий аллели глиадина, унаследованные от мягкой пшеницы, то его можно скрещивать с любым сортом тургидной пшеницы и в системе гибридоло1750554

20

45 гического анализа проводить идентификацию различий по глиадиновым аллелям.

Способ осуществляется следующим образом.

Берут два гомозиготных сорта или биотипа пшеницы. В качестве матери (или отца) используют сорт. твердой пшеницы, имеющий четкие электрофоретичеркие маркеры

1А, 15, 6А и 6Б хромосом, а именно Глд 1А1, Глд 1Б2; Глд 6А3, Глд 6Б2. В качестве отца (или матери) берут новый сорт или биотип тургидной пшеницы, у которого нужно идентифицировать кластеры (блоки) глиадина, 1

Полученные гибриды Fz высевают для получения растений Р1, на которых берут зерна

Fz — первое расщепляющееся потомство.

Проводят электрофорез отдельных зерен по, 80-100 штук и по тесту на аллельность (используется критерий хи-квадрат), определяют аллеломорфы блокам Глд 1Л1, Глд i52, Глд 6А3, Глд 6Б2). Новый идентифицированным аллелям (блоком компонентов присва-. ивают соответствующий номер по аналогии . с номенклатурой блоков мягких пшениц. Если в каталоге идентифицированных блоков мягких пшениц нет аналогичного полиаллеля, то ему присваивается номер с буквой "т" (тургидная).

Пример, Нужно идентифицировать аллельные блоки (полиаллели) глиадина у тургидной пшеницы сорта Губице и записать их генетическую формулу, Среди сортов озимых твердых пшениц имеются сорта, в спектре глиадина которых есть четкие маркеры 1А (Глд 1А1), 1Б (Глд

1Б2), 6А (Глд 6АЗ) и 6Б (Глд 6Б2) хромосом.

Из этих сортов в качестве сорта-тестера взяли сорт селекции Черномор. Он унаследовал эти аллели от мягкой пшеницы. Аллели (блоки) глиадина Глд 1А1, Глд 152 были идентифицированы у мягких пшениц впервые у сорта,Цнепровская-521. На фиг.1 показаны электрофореграммы глиадина сортов мягких, твердых и тургидных пшениц и их маркерные блоки (аллели).

Зерна этих сортов высеяли и провели их гибридизацию (нет принципиальной разницы, кого из них брать в качестве матери или отца), Зерна F< вновь высеяли, Получили растения F>, на них получили зерна Fz— первое расщепляющееся потомство. Эти зерна использовали в качестве материала для идентификации различий по электрофоретическим спектрам глиадина. Провели электрофорез отдельных зерен, примерно по 80 штук по прописи Копусь М,М, Электрофореграммы гибридов Fz сортировали по классам Глд 1А1 (сорт Черномор) и его аллеломорфу от Губице — Глд 1А4, Глд

1Б2 (сорт Черномор) и Глд 1Б1т (Губице), Глд

6Б2 (Губице) и Глд 6Б2 (Черномор), фиг.2. По компонентам 6А хромосомы в данной комбинации различий не было,: оба сорта в зоне быстроподвижных компонентов, в которой находятся компоненты локуса 6А хромосо мы, имели идентичные аллели, представленные блоком Глд 6АЗ, Осталась не идентифицированной группа минорных компонентов Х. Вероятно, это дополнительные локусы по 1А или 1Б хромосомам, которые также имеются у мягких пшениц и были идентифицированны.

С помощью хи-квадрата определяли аллельность выделенных групп блоков по ка>кдой хромосоме (многогибридная схема) или по 2 хромосомам (гибридная схема).

Предлагаемый способ позволяет идентифицировать глиадиновые белки тургидных пшениц в системе обычного гибридологического анализа без применения анеуплоидных и абберантных линий, которые еще не созданы для тургидных пшениц. Это дает возможность изучать генетические различия между сортами тургидных пшениц по данному признаку и влияние этих различий на качество зерна и другие хозяйственно-ценные свойства макаронных пшениц.

Формула. изобретения

Способ идентификации сортов тургидной пшеницы, включающий гибридизацию, получение гибридных зерен Fz, злектрофоретическое разделение глиадина, анализ полученных электрофореграмм и запись глиадиновых формул, отличающийся тем, что, с целью повышения точности идентификации, гибридизацию проводят с твердой пшеницей, имеющей в своем геноме глиадиновые маркеры, унаследованные от мягкой пшеницы.

1750554

Расщепление по блокам компонентов глиадина в Fz при скрещивании сортов твердой пшеницы Черномор и тургидной Губице

Формула глиадина сорта тургидной пшеницы Губице; Глд 1А4, 1Б1 т(Х), 6АЗ 661.

Аналогично проводим идентификацию различий и в других комбинациях гибрйдов от скрещивания, например:

Черномор X ¹ 321 (2-й биотип) фиг.3

Черномор X N 390 фиг.4

1750554

1750554

1 " (Ф ф)

Й,1 (f фф фиг t

Корректор М.Максимишинец

Заказ 2632 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва., Ж-35, Раушская наб„4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 о

% о

Составитель В,Тутарова

Редактор Л.Пчолинская Техред M.Ìîðãåíòàë

1, Д 1(У(