Штамм микобактерий мyсовастеriuм снеlоnеi, используемый для аллергологической идентификации микроорганизмов

 

Использование: медицинская и ветеринарная микробиология, штамм микобактерий, туберкулиногенность, аллергологическая идентификация микобактерий. Сущность изобретения: новый штамм Mycobacterium chelonei ГИСК № 424 обладает туберкулиногенностью. Штамм выделен из мокроты человека с микобактериозом легких. Морфология. Клетки имеют вид палочек длиной 2,0-3,0 мкм. Окрашиваются по Граму, по Цилю-Нильсону окрашиваются в красный цвет. Культуральные характеристики . На плотной яичной среде образует мелкие , сухие, шероховатые колонии кремового цвета. На плотной яичной среде Левенштейна-Йенсена при 37°С вырастает за 3-5 дней. На картофельно-глицериновой среде Павловского вырастает за 4-5 дней. Размножается при 22-40°С, не растет при 45°С, оптимум роста - 30-38°С. На жидкой питательной среде растет на поверхности в виде толстой морщинистой пленки кремового цвета, оставляя среду прозрачной. Через 4- 5 недель роста,среда становится светло-коричневого цвета, оставаясь прозрачной. Физиологические свойства. Растет на плотной питательной среде Левеншгейна-Йенсена с добавлением 5% хлористого натрия или салицилата натрия, не ферментирует арабинозу, рамнозу, инозит, манниг, дульцит, сорбит, не утилизирует цитрат натрия и малонат, не имеет/3-галэктозидазу и нитратредуктазу. Туберкулиногенность. Накопление в среде туберкулина начинается с трех-четырехнедельного возраста. Максимальное количество сенситина в среде образуется через 5-6 недель роста. В 1 л культурального фильтрата содержится 0,820-1,100 г сенсити (в среднем 0,910 г). Биологическая активность составляет 0,00003 мг в 1 ТЕ. (Л :оо о со оо vi

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (5t)5 С 12 N 1/20 р м:,, ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

СО ,С

ОО

00 (21) 4905990/13 (22) 28.01.91 (46) 15,04.93. Бюл, ¹ 14 (71) Научно-исследовательский ветеринарный институт Нечерноземной зоны РСФСР (72) А.Л,Лазовская, M.Ë.Òèõîìèðîâà, Л,M.Ïèí÷óê, Е.М.Максимова и Д,Т.Леви (56) Bergey s manual sistematic bacteriol.—

Bg,Clime L. 1984, р. 1472-1481.

Кассич Ю.Я. и др. Ветеринария, — 1985, № 2, с.29-30. (54) ШТАММ МИКОБАКТЕPИЙ

MYC0BACTERlUM CHEL0NE l, ИСПОЛ ЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ АЛЛЕРГОЛОГИЧЕСКОЙ

ИДЕНТИФИКАЦИИ МИКРООРГАНИЗМОВ (57) Использование; медицинская и ветеринарная микробиология, штамм микобактерий, туберкулиногенность, аллергологическая идентификация микобактерий. Сущность изобретения: новый штамм

Mycobacterium chelonei ГИСК ¹ 424 обладает туберкулиногенностью, Штамм выделен из мокроты человека с микобактериозом легких. Морфология. Клетки имеют вид палочек длиной 2,0-3 0 мкм, Окрашиваются по

Граму, по Цилю-Нильсону окрашиваются в красный цвет. Культуральные характеристики. На плотной яичной среде образует мелИзобретение относится к медицинской и ветеринарной микробиологии и представляет собой новый штамм Mycobacterium

cheIonei, характеризующийся активным ростом на синтетической среде и туберкулиногенностью и может быть использовано для аллергологической идентификации микроорганизмов.

„.,5U „„18088? 1 А l кие, сухие, шероховатые колонии кремового цвета, На плотной яичной среде Левенштейна-Йенсена при 37 С вырастает за 3-5 дней, На картофельно-глицериновой среде Павловского вырастает за 4-5 дней. Размножается при 22-40 С, не растет при 45 С, оптимум роста — 30-38 С. Нэ жидкой питательной среде растет на поверхности в виде толстой морщинистой пленки кремового цвета, оставляя среду прозрачной. Через 45 недель роста, среда становится светло-коричневого цвета. оставаясь прозрачной.

Физиологические свойства. Растет на плотной питательной среде Левенштейна-Йенсена с добавлением 5% хлорисгого натрия или салицилата натрия. не ферментирует эрабинозу, рамнозу, инозит, манниг, дульцит, сорбит, не утилизирует цитрат натрия и малонат, не имеет j3-галэктозидазу и нитратредуктазу. Туберкулиногенность. Накопление в среде туберкулина начинается с трех-четырехнедельного возраста. Максимальное количество сенситинэ в среде образуется через 5-6 недель роста. В 1 л культурального фильтрата содержится

0,820-1,100 г сенсити (в среднем 0,910 г).

Биологическая активность составляет

0,00003 мг в 1 ТЕ.

Целью изобретения является штамм

Mycobacterium chelonei, характеризующийся активным ростом на синтетической среде и туберкулиногенностью.

Штамм Mycobacterium cheionei N.. 424 выделен из мокроты человека, больного микобактериозом легких, в 1987 голу.

1808871 методом осаждения трихлоруксусной кислоты с последующей очисткой ацетоном, зтиловым спиртом, эфиром, представляет собой порошок белою цвета, в состав которого входит белок (72,0-82,0 ) и липополисахэриды. В 1 литре культурального фильтрата содержится от 0,820 до 1,100 г туберкулина (в среднем 0,910 г/л). БиологиШтамм Mycobacterium chelonei N. 424 депонирован в коллекции государственного научно-исследовательского института с1андартизации и контроля медицинских и биологических препаратов им.Л.А.Тарасевича под М 37, Штамм Mycobacterlum chelonel й. 424 характеризуется следующими свойствами.

Морфологические свойства, Бактерии штамма — тонкие палочки длиной 2,0-3,0 мкм.. Окрашиваются по Граму, по ЦилюНильсену окрашиваются в красный цвет, Культуральные свойства. На плотной питательной среде Левенштейна-Йенсена штамм растет в виде сухих мелких шероховатых колоний кремового цвета, На жидкой синтетической среде Линниковой-Могилевского клетки штамма образуют на поверхности толстую морщинистую пленку кремового цвета, оставляя среду прозрачной. Через 4-5 недель роста среда становится светло-коричневой, ос1.аваясь прозрачной.

Биохимические свойства. Штамм растет на среде Левенштейна-Йенсена с добавлением 5 хлорида натрия и с салицилатом натрия. Не ферментирует арабинозу, рамнозу, инозит, маннит, дульцит, сорбит, не утилиэирует цитрат натрия и мальнат натрия, обладает активной уреазой и не имеет — галактозидазы и нитратредуктаэы.

Состав жирных кислот, определенный методом сопиролитической газовой хроматографии соответствует спектру

Mycobacterium chelonei. Нуклеотидный состав штамма — 65 ГЦ, Вирулентность. Внутримышечное заражение морских свинок в дозе 1,0-1,5 мг бактерийной массы (вес влажной массы) не приводит к развитию микобактериоза в течение срока наблюдения (2 месяца), Туберкулиногенность. В процессе роста штамма на синтетической среде Линниковой-Могилевского, начиная с 3-4-недельного возраста, происходит накопление туберкулина. Максимальное количество туберкулина в среде накапливается через 5-6 недель роста. Выход сухой бактерийной массы 0,700-0,820 на 1 литр среды. Туберкулин, полученный из культурэльного фильтра ческая активность изучена на гомологично сенсибилизированных морских свинках и

10 составляет 0,00003 мг в 1 ТЕ, Пример, Аллергологическая идентификация видом микобактерий 5 мг бактерийной массы некроматогенного свежевыделенного штамма собирают ме15 таллической лопаточкой с поверхности твердой питательной среды (например, Левенштейн-Йенсена) и помещают в коническую центрифужную пробирку с 3,0 раствором фенола. Через 6 часов раствор фенола осторожно сливают, добавляют 2-3 мл изотонического раствора хлорида натрия и центрифугируют в течение 20 мин при

5000 об/мин. К осадку добавляют 0,2 мл стерильного вазелинового масла, растирают стеклянной палочкой и вводят шприцем в 2-3 места на спине морской свинки внутрикожно. Через 3 недели после сенсибилизации шерсть на обоих боках морской свинки депилируют полосой в 3 см и на следующий день вводят строго внутрикожно по 0,1 мл растворов сенситинов и туберкулинов по 5 ТЕ. На одной морской свинке одномоментно ставят 8-10 кожных проб с антигенными препаратами, изготовленными из некромогенных микобактерий различных видов (M.avium, M,intracellulare, M.bovis, М.tuberculosis, М.fortuitum, М.kansasii, M,gastri, M,smegmatis, М,chelonei). Наибольшая кожная проба на один из препаратов указывает на сенсибилизацию гомологичным штаммам, Чтение результатов реакций проводят через 48 часов.

Формула изобретения

Штамм микобактерий Mycobacterium

chelonel N 424 ГИСК Q 37, используемый для аллергологической идентификации микроорганизмов.

Соста вител ь А.Л азо в ска я

Редактор В,Трубченко Техред М,Моргентал Корректор M.Ïåòðoaa

Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина, 101

Заказ 1258 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5