Гепатопротекторное средство для профилактики тетрациклиновых поражений печени

 

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии и гепатологии Цель - повышение гепатопротекторной активности при снижении токсичности. В качестве такого средства используют дихлор-бис-N-, N-диметилкарбодецоксиметин-М-этиленаммония сульфид 2 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛ ИСТИЧ Е С К ИХ

РЕСПУБЛИК

А 61 К 31/14

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4216992/14 (22) 25.03.87 (46) 23.06.93. Бюл. М 23 (72) Г.Т.Писько, О.В.Гудэь, В.И.Коркач и

АЛ.Самойлов (56) И.Х.Пасечник и др. Влияние этония на функции печени при экспериментальном гепатите// — в сб. "Актуальные вопросы фармакологии и токсикологии", Тернополь, 1981. с. 96.

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии.

Цель - повышение гепатопротекторной активности при снижении токсичности. указанная цель достигается применением дихлор-бис-N-N-диметилкарбодецоксиметил-N-этиленаммония сульфида для профилактики тетрациклиновых поражений печени.

Пример 1. Дистрофию печени воспроизводят на 80 белых крысах обоего пола массой 180-200 г, которых подразделяют на

4 группы: по 20 животных в каждой группе.

Животным первой группы ежедневно в течение 5 дн вводят в желудок тетрациклин в токсической дозе (0.5 гlкг) в 1 -ном растворе крахмального клейстера. Животным второй группы — тетрациклин в токсической дозе (0,5 гlкг) в сочетании с дихлор-бис-NN-диметилкарбодецоксиметил-N-этиленаммония сульфидом в дозе 30 мг/кг. Животным третьей группы — тетрациклин в токсической дозе (0,5 гlкг) в сочетании с дихлор-бис-N-,N-диметилкарбодецоксиметил-N-этиленаммония сульфидом. в дозе 5 мг/кг; животным четвертой группы (конт„„. Ж „„1822772 А1 (54) ГЕПАТОПРОТЕКТОРНОЕ СРЕДСТВО

ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ ТЕТРАЦИКЛИНО-

BblX ПОРАЖЕНИЙ ПЕЧЕНИ (57) Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии и гепатологии.

Цель — повышение гепатопротекторной активности при снижении токсичности. В качестве такого средства используют дихлор-бис-N-. N-диметилкарбодецокси метил-N-зтиленаммония сульфид. 2 табл. роль) — 1%-ный раствор крахмального клейстера.

Через 24 ч после последнего введения препаратов белых крыс выводят иэ опыта методом декаптации, О степени поражения печени судят по активности аланинаминотрасферазы (ANAT), аспартатиминотрасферазы (АсАТ), интенсивности перекисного окисления липидов (ПОЛ) в гомогенатах печени и морфологическим изменениям в ткани печени. Активность трансаминаэ определяют по Рейтману и Френкелю интенсивность ПОЛ вЂ” по скорости образования малонового диальдегида. Для излучения морфологического строения ткани печени участки органа помещают в 1012%-ный раствор нейтрального формалина, проводят через спирт этиловый возрастающий крепости, заключают в парафин, готовят срезы и окрашивают их классическими гистологическими методами.

Результаты проведенных исследований представлены в табл. 1.

Как видно иэ табл.1, повторное введение в желудок крыс тетрациклина в токсической дозе (0,5 гlкг) приводит к развитию

1822772 дистрофических процессов в печени и нарушению ее функционального состояния. о чем свидетельствует достоверное повышение активности АлАТ и интенсивности ПОЛ в гомогенатах печени. При микроскопии гистологических препаратов отмечается вакуольная и зернистая дистрофия цитоплазмы гепатоцитов. По периферии долек в участках с наиболее выраженной вакуольной дистрофией нарастает содержание липидов и заметно уменьшается количество гликогена, вплоть до полного его исчезновения, Часть дистрофически измененных клеток содержат пикнотические ядра. Наряду с этим, преимущественно, по периферии долек обнаруживаются очаги некробиоза, являющиеся свидетельством глубокого повреждения клеток печени. Помимо дистрофических изменений паренхимы печени обнаруживаются повсеместные расширения вокруг синусоидных пространств, а также очаговый периваскулярный отек в районе "триад", десквамация эндотелиоцитов и наличие нитей фибрина в центральных венах.

В группе животных, получавших в течение 5 дн тетрацикл»» в токсической дозе (0,5 г/кг) в сочетании с дихлор-бис-N-,N-диметилкарбодецоксиметил-N-этиленаммония сульфидом в дозе " мг/кг токсическое поражение печени менее выражено, чем у животных первой группы. При микроскопии гистологических срезов печени животных этой группы определяются небольшие очаги вакуольной и зернистой дистрофии цитоплазмы гепатоцитов, расположенных в периферических. отделах долек. Значительно реже, чем у животных с тетрациклиновым поражением печени. обнаруживаются гепатоциты с признаками некробиоза. У гепатоцитов с дистрофическими изменениями цитоплазмы ядра имеют обычные контуры, умеренно окрашиваются гематоксилином.

Функциональное состояние печени нормализуется медленно. Через 24 ч после отмены препаратов активность АлАТ достоверно, чем у контрольных крыс.

При выполнении дозы дихлор-бис-N,Nдиметилкарбодецоксиметил-N-этиленамм— ония сульфида до 30 мг/кг гепатопротекторная активность препарата возрастает. В группе животных, получавших в течение 5 дн тетрациклин в токсической дозе (0,5 г/кг) в сочетании с дихлор-бис-N,N-диметилкарбодецоксиметил-N-этиленаммония сульфидом в дозе 3 мгlкг через 24 ч и после последнего введения препаратов отмечается нормализация функционального состояния печени. Активность АлАТи интенсивность ПОЛ в гомогенатах печени у

55 животных этой группы соответствуют аналогичным показателям у животных контрольных групп и достоверно ниже, чем в группе животных с тетрациклиновым поражением печени. Гепатопротектор«ое действие дихлор-бис-N.N-диметилкарбодецоксиметил-N-этиленаммония сульфида подтверждается и при изучении гистологических срезов печени. Выявленные изменения в структуре ткани печени у крыс этой группы не превышают таковые у животных контрольной группы. Сопоставление сроков нормализации функционального состояния печени у крыс этой группы (24 ч после отмены ксенобиотика) с таковыми при применении этония (15-21 сут) позволяет считать, что заявленный препарат обладает более выраженной гепатопротекторной активностью, чем этоний.

Пример 2. Комбинированное действие тетрациклина и дихлор-бис-N,N-диметилкарбодецоксиметил-N-этиленаммония сульфида изучают в опытах in vitro в отношении культур кишечной палочки, синегнойной палочки и золотистого стафилококка методом последовательных серийных разведений в жидкой питательной среде. В пробирки с серийными разведениями тетрациклина вносят суббактеристатические для каждого штамма микроорганизмов концентрации дихлорбис-N, N-диметилкарбодецоксиметил-N-эти ленаммония сульфида и культуру микроорганизмов (250000 колониеобразующих ед/мл). Результат комбинированного действия препаратов оценивают как синергидный, если минимальная ингибирующая концентрация (МПК) антибиотика снижается в 4 и более раз, аддитивный — в 2 раза, индифферентный — не изменяется, антагонистический — снижается в 2 и более раз, Результаты проведенных исследований представлены в табл.2.

Как видно из табл,2 тетрациклин в сочетании дихлор-бис-N,N-диметилкарбодецоксиметил-N ýтиленаммония сульфидом оказывает синергидное действие на культуры кишечной и синегнойной палочек, а также аддитивное действие на культуру золотистого стафилококка. Это свидетельствует о сохранении тетрациклином, выраженным противомикробных свойств при совместном применении с дихлор-бис-N,Nди метил ка рбодецокс иметил-N-этиленаммон ия сул ьфидом.

Пример 3. Острую токсичность дихлор-бис-N,N-диметил карбодецоксиметилN-этиленаммония сульфида и этония изучают на белых крысах массой 180 — 200 r, Среднесмертельную дозу (ЛД о) препаратов

1822772

Таблица1

Гепатопротекторная активность дихлор-бис-N.N-диметилкарбодецоксиметилен-N-этиленаммония сульфида при тетрациклиновом гепатите

АсАТ. мкмоль пировиноградной кислоты/г

ПОЛ. мкмоль малонового диальдегидэ/г за 30 мин

Доза, мгlкг

АлАТ, мкмоль пировиноградной кислоты/г

Препарат

390,50+ 81,10, р<0,05

538.80 18,90, р<0,05

133,50 17,70

500

Тетрациклин

500

Тетрациклин в сочетании с дихлор-бис-N,N-диметилкарбодецоксиметил-N ýòèëû аммон . ия сульфидом

202,50 23,70

172,80 +. 31,01

401,404- 32,10

Тетрациклин в сочетании с дихлор-бис-N,N-диметилкарбодецоксиметил-N-этиленаммония сульфидом

500

102,60 +10,01

503.00 42,10, р<0,05

182,40 15,40

140.85 27.30

362,80 13,00

Контроль определяют по методу Прозоровского при введении препаратов внутрь.

ЛД о дихлор-бис-N,N-диметилкарбодецоксиметил-N-этиленаммония сульфида и этония при однократном введении внутрь составляет, соответственно 2665 мг/кг и

450 мг/кг, т.е. заявленное средство менее токсично при введении внутрь, чем этоний в 5,9 раэ.

Таким образом гепатопротекторная активность вещества изучена на модели тетрациклинового гепатита белых крыс.

Животным ежедневно в течение 5 дн вводили тетрациклин внутрь в дозе 0,5 гlкг(контроль), а также тетрациклин в дозе 0,5 г/кг в сочетании с дихлор-бис-N,N-диметилкарбодецоксиметил-N-этиленаммония сульфидом в дозах 5 и 30 мг/кг. Профилактическую эффективность препарата оценивали по активности аланин-, аспартатаминотрасфераз, интенсивности перекисного окисления липидов и изучению гистологического строения ткани печени.

Установлено, что введение тетрациклина в дозе 0,5 г/кг в желудок крыс в течение

5дн приводит к развитию гепатита. Дихлорбис-N,N-диметилкарбодецоксиметил-N-эт—

5 иленаммония сульфид в дозе 30 мг/кг при совместном введении внутрь с тетрациклином предотвращает развитие тетрациклинового гепатита не изменяет активности аланин- аспартатаминотрасфераз. интен10 сивности перекиснпго окисления липидов, а также гистологического строения тканей печени в сравнении с исходными показателями.

Вещество может найти применение в

15 медицине для профилактики поражения печени ксенобиотиками.

Формула изобретения

Применение дихлор-бис-N,N-диметил20 карбодецоксиметил-N-этиленаммония сульфида в качестве гепатопротекторного средства для профилактики тетрациклинового поражения печени.

1822772

Таблица 2

Составитель, В. Кручинкина

Техред М.Моргентал Корректор М. Самборская

Редактор С. Кулакова

Заказ 2168 Тираж Подписное . ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Рэушскэя нэб.. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент, г. Ужгород, ул. Гагарина, 101

Комбинированное действие тетрэциклина и дихлор-бис-N,N-диметилкарбодецоксиметил-Nэтиленаммония сульфида на культуры микроорганизмов