Способ моделирования интерстициального нефрита

 

Использование: медицина, патофизиология , нефрология. Сущность изобретения: кроликам-самкам породы шиншила вводят ежедневно внутримышечно масляный раствор прогестерона 1-2,5% по 1,0-0,5 мл 2 мг/кг массы животного в течение 3-4 недель , в ток крови вводят по 7-10-109 микробных т-ел в 1 мл взвеси культуры непатогенного штамма кишечной палочки троекратно с интервалом 3-4 дня, с последующим облучением почек электромагнитными дециметровыми волнами частотой 460 МГЦ от аппарата Ромашка или Ранет плотностью мощностью 83,7 мВт/см2 излучателем диаметром 4,4 см контактным методом после соприкосновения датчика с выбритой кожей поясничной области животного .

ПОЛОЗ СОВЕ ТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (ч)5 G 09 В 23/28

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМС13O СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ЬЭ

4д

О ,О V (21) 4927858/14 (22) 19.04.91 (46) 23.06.93. Бюл. N 23 (71) Московская медицинская академия им.

И.М. Сеченова (72) Ю.М. Есилевский, А.М,Пальцев, Э,С.Севергина, А,Г.Уфимцева, В.А.Кияткин, В.А,Рогов, В.А.Фокас, Н.Д,Игумнова, С,П,Мясковская и Е.Ю. Есилевская (56) Авторское свиде-, ельство СССР

М 511621, кл. С 09 В 23/00, 1974. (54) СПОС06 МОДЕЛИРОВАНИЯ ИНТЕРСТИЦИАЛЬНОГО НЕФРИТА (57) Использование: медицина, патофизиология, нефрология. Сущность изобретения:

Изобретение относится к медицине, в частности к патофизиологии и нефрологии, и предназначено для моделирования иммунокомпе гентного нефрита.

Цель изобретения — повышение воспроизводимости иммунокомпетентного интерстициального нефрита за счет увеличения юкстамедуллярного кровотока.

Указанная цель достигается тем, что в способе моделирования интерстициального нефрита, включающем введение прогесте-, рона и инфицирование организма; отличительной особенностью является то, что кровообращение дополнительно нарушают проведением курсового облучения почек электромагнитными дециметровыми волнами слаботепловой мощности. При этом облучение проводят волнами частотой460 Мгц . плотностью потока мощности до 83.7 мВт/см излучателем диаметром 4,4 см (площадью 15,3 см2) контактным методом по. >0,» 1823007 А1 кроликам-самкам породы шиншила вводят ежедневно внутримышечно масляный раствор прогестерона 1 — 2,57. по 1,0-0,5 мл 2 мг/кг массы животного в течение 3 — 4 недель, в ток крови вводят по 7-10 — 10 микро9 бных тел в 1 мл взвеси культуры непатогенного штамма кишечной палочки троекратно с интервалом 3-4 дня, с последующим облучением почек электромагнитными дециметровыми волнами частотой 460

МГЦ от аппарата "Ромашка" или "Ранет" плотностью мощностью 83,7 мВт/см излучателем диаметром 4,4 см контактным методом после соприкосновения датчика с выбритой кожей поясничной области животного.

8-20 мин ежедневно 10-14 процедур на курс моделирования.

Способ проводят следующим образом.

Кроликам-càèкам породы шиншила вводят ежедневно внутримышечно масляный раствор прогестерона 1-2,4;(,-ный по

1,0-0,5 мл в течение 3 — 4 недель (2 мг/кг массы животного), Затем вводят в ток крови по 10 -10 микробных тел в 1 мл взвеси культуры непатогенного штамма кишечной палочки троекратно с интервалом 3 — 4 дня.

Далее дополнительно проводят облучение почек электромагнитными дециметровыми волнами частотой 460 МГц от аппарата "Ромашка" или "Ранет" плотностью мощности 83,7 мВт/см контактным

2 методом излучателем диаметром 4,4 см (площадью 15,3 см ) после соприкосновения

2 датчика с выбритой кожей левой пояснич18?3007 ной области животного. Курс облучений ? недели (10-14 процедур) по 8-20 минут ежедневно. После создания модели проводя1 острый опыт, при этом определяют с по мо цью реографии уровни кровенапол нения коркового, мозгового вещества и интермедиарной эоны. затем почки извлекают и подвергают комплексному морфологическому исследованию, при котором выявляют иммунокомпетентный интерстициальный нефрит.

Пример конкретного выполнения способа.

Пример 1. Кролик N. 45 (самка, масса

3 кг). Вводят ежедневно внутримышечно масляный раствор прогетерона 1 -ный 0,6 мл в течение 3 недель, затем вводили внутривенно 10 микробных тел взвеси культуры непатогенного штаммма кишечной палочки троекратно с интервалом 3 дня. Далее проводили облучение почек электромагнитными дециметровыми волнами от аппарата

"Ранет" частотой 460 МГц, излучателем диаметром 4,4 см плогностью потока мощно сти 83,7 мЗт/см с атгенуатором длинои 5 ? -> м, Излучатель устанавливали на поверхно сти выбритой кожи л вой поясничной области в проекции почки, облучение проводили ежедневно, кроме воскресенья, в гечение 2 недель (12 процедур по 10 мин каждая).

Далее повели острыи опыт под внутривенным наркозом (гексенал 1 -20,0 ). Ос ществили срединную лапаротомию. обнажили почки и провели их регионарнук1 полиреографию. Для регистрации poor рлмм использовали трехканальные игольчатые электроды, состоящие из иэолироьаiIfffIх проводников длиной соответственно 4 мм, 8 мм и 12 мм, которые при погружении в ткань почки находились соответственно в корковом веществе, интермедианой зоне и мозговом веществе. Электроды подключили к многоканальной безмостовой реографической приставке, соединенной с регистратором ЭЭГ-18 (Венгрия). При анализе 45 реограмм определяли реографические индексы в качестве показателей пульсового кровенаполнения отделов почки и коэффициенты распределения кровотока (КРК), то есть отношения неогранических индексов коркового вещества, интермедиарной зоны и мозгового вещества облученной и контралатеральной почек, Далее почки извлекли и подвергли комплексному морфологическому исследованию, Ткань почечных сосочков исследовали на содержание простагландина Ez радиоиммунным методом, При полиреографии облученной почки соотношение уровней коркового, юкстаме,IiYfIfI IpfIofo и медуллярного кровотока

2 4 3,6 (В норме это соотношение 5:3:2, а при моделировании по прототипу, то есть без облучения --2:3;4). В контрллатеральной очке это отношение — 2:4:3, То ес гь отмечено увеличение юкстамедуллярного кровотока на фоне уменьшения коркового и возрастания мозгового крояенаполнения.

При гистологическом исследовании облученных почек QTMBчен резчайший отек стромы, дистрофия канальцевого эпителия, спазм артерий, гиалиноз артериол полнокровие венул, Выраженная лимфогистицитарная инфильтрация интерстиция.

При электронно-микроскопическом исследовании — небольшие участки некроза; в некоторых канальцах (петли Генле) - деструктивно измененные нефроциты, в просвете - компактно клеточный детрит, Ичагово выражена лимфоцитарно-моноци13рная инфильтрация. В некоторых капиллярах — пролиферация эндотелия. Участки отека интерстиция с небольшими вкрапле ниями разнонаправленных коллагеновых волокон. Интерстициальные клетки - окпухлыI;, KOHT3êòoH с сосудами и канальцами !

Iel, перинуклеарый отек Нефроциты прокс 1ма II,IIbix канальцев в состоя««и fиалиI I 0 B O K 3 f I P fl I Н О И ДИСтРОфИИ

Заключение: явление хронического ингерстициального нефрита. При рад«симмунном анализе вытяжки иэ ткани почечного сосочка концентрация простагландина Eg б Iffo соответственно, 1,73 мкг/г

I ";,23 мкг/. TK;Ií«слева и справа.

Г1 р и м е р 2. Кролик N 43. Создана . 1одель но предлагаемс,му способу (см. пример 1).

При гис1ологическом исследовании поен отмечены резчайший отек, дистрофия канальцевпго эпителия, выраженная инфильтрация интерстиция. Хроническое воспаление.

При электронно-микроскопическом исследовании обн- ужены участки отека интерстиция, разнонаправленные коллагеновые волокна. Имеются очаги инфильтрации лимфоцитами, моноцитами, макрофагами, много плазмэтических клеток, соседствующих с лимфоцитами. Проксимальные канал ьцы в состоянии гиалиновокапельной дистрофии, В клубочках депозитов нет. Заключение; активный интерстициальный нефрит.

При радиоиммунном анализе вытяжки из ткани почечного сосочка концентрация простангландина Ez была соответственно

4.34 мкг/г и 7,80 мкг/г ткани слева и справа, Пример 3. Кролик hl. 47 (Контроль: здоровое животное, облучение ДМВ М 12). с, ! l pl! Mt>f> »<< r > n>< и<,(tii !) n Bà >4 ии

Ь4Р BЛР>I() (!>Р >»г К>l(j(Р» >Л(> VL! Р 3(I((Р(IП(.

><ич, ИС т()!4 I(><>i<> <>;> 3;эг> ьfl(iL» к!Ел)()1>>)н .ь> В

ИНTP(»Г! L»ljliL > г)>I )ПЬ(((! Ii >K!BT К(>МП 3KTtln, I pфро>(и тах < ди <ич»>. е B <при it

МЫ, B (I (> ><. I)!! Т" г гг)(14 <> I >4 I <Р V 43 P) КИ ДРС К Ва

t 1 i 1 P i ) l3:3 >i > I A f < i 1 П » Т >l l 1 »I .! Л>г л к > > Г> i I >»", i i(,i>;I (1 ò! B! НОГО п P03(P!.,;3 Н< »Т

f1pL> 1 3.",LB<»1>1< i,) II >»(>> l а ><и ll<> i" itin! (i сосо < Ijel> Tf>B IQL1>3

r>f)ljcxB r а><дина (-, .; ><) (>Р<стпен><о 4,19

t1KT/r и .1, >2;.;К>/г Tv )i т "> .> (Контроль

Л<П>1»ЗЛИ(><)<3,»<(1(4>С> rlf)(» ПТИП) f>e;3 (>блуЧЕНИя, (М f3).

flpLI Морфолп>И <(Ск<>М Lf(.CËeäoBBHL<È выявлен,> (. Г>(у>г»4(е> i, i-.r v>1 <>if.v, ) интерстиция с едини«н>„ми д "трукгипнп измененными интеpcl>iljllлл! >I>it. » клетками. В

K!lnèëïÿf>Bõ ин ..рсl>1!(Ия»дини«ные»еитрофиль>. IIf)nv< .èM;I »,t<(,.3> кл> алоij в с.ncioBнии гиапинопокапс пьной д>1(.трофии.

Клубочки f>i.з >со()eii>«> т(>и

3;>ключ(>Iльный tie<(>p(,1T з(>спроизгз(><.(и >! . удал< с.ь. иммунг>компетентного во-.п;3>>игельно«-. пр;>цессe в почке

>4;4 кл ii;) <ап(,н;>я реакljèB ><а ин<1>ек!.

При радиои> 1(1 ><но(! анализе вытяжки иэ ткани llu e flin(n сосс)чкл концентрация проста<>;3 Е ., сс>03 вс. Тс гвенно 0,27 мкг/г L1 0,80 t vl/, I ани с I BB ll <-права.

От(>ичие з,зянпе><нг)го с(3,>со()л от известного эаклк>чае>с я B 30<1. что кровооборащение в пс>яках наруша>(!> дог>опнительно проведением курсового обг>учения почек электромагнитными децил.e Tf>oeuMvt волнами (час)отой 180 ГЛГIj, слабогепловой Mogности плотностью nnioKа до 8>,7 мВтlсм, контактным л)етодо<л излучателем пло » щадью 15,8 см, по 8-20,линут ежедневно, 10 — 14 процедур на курс >лоделирования).

Нарушение кровообра(4(е(<ия выражается в стимуляции юкстамедуплярного кровотока, ; ограниченных резервов, приводит к усугублению патологического перераспределения кровотока через корковое и >лоэговое вещество, к спазму сосудов корково< о вещества Li флебостазу медуллярного вещества.

При воздействии ДМВ-процедурой слаботепловои )лощности на пораженную воспалительным процессом почку отмечается стереотипная реакция (3 виде увеличения юкстамедул lÿf)íого кровnTGка и уменьшения кровотока через корковое вещество, <Ледуллярныи vpoen)ок:>ри этол! остается на прежнем уровне (увели <енно)1). Э контр, 3!i;i I » f)3t>I,>»П41 П >«К il ri f>li Воэпг";й(rI (> >>4 p!j)! f>Г»1 > f4êæ(, (> (!()!»г, г>г

>Р г . > 3 t <Р, i t Л 41:1 p I I Р Г U V р П!! ." > О . П i P > e >< > < n < L; Г> Е Эз,г(П < 0 Г< > < L» т (> i o

<> 1. > i.Ð)"!j(»)le>

> t.о. 4 о -:ого BPlljec f BB. (озмс»-;нп з. (>,)б>.

i «(>с > ос:п >блением дейст BL) f.jf . В .) > от расстоян)>я MQ>vдv изпу«ат< пеf< Li орr;34,лк

I(1 < Рре: я a>nr L>«>4»e перерас,пред-<пи)< л,нып -»14 к>ы и rin«e«(Bnnl!f;i,с i:;L>, c(iя.>л>«ые, r< ncf« Bi<0M с увел<;«е» >i!M .)v <:-! Лt IP. 4»>i>)l<> f>t4<)r n KP(>Bn Гока, г3С>ЗРЛС > )it)i! 1 дп;»» к(и>вотпка через л<пзговос Bi«tf!ci: o L<

1!> (..r,Г т >» .т .>B< ><>1 у>1(зн(,<с(г;>- ив(< ",ровс:" лilni>!if 4<<>Я KnpKO(30f n Bell(i с (3. Дг>!» ln< . ».»"", Л(. ><" Е КПОВОТОК»4 >»0>КС ) И(."Г! Ь fi", I >!Ii 4I1

:3 l f т llf)li хроничес:0(л и<)(:4>л IL!т(:I! I о,-:

Ро>4 СС; B ПОЧЕЧНОМ ИНГЕРСГИ jl"<гс ", )О H « ; > ». уме> Ь(>(г«><31(,M ) f))!)pll 34)ьt><» i»>lli >

>4 fin lvу од><ако r)pLi увели: 4,<,, м к(>;.Н(>нл(3<>л<<ении L1 огранич(>нии с 3(f)f>ul

<. >(.",д>lс > ОГО f)усла ч(Зл>1ется ri )Р(> п<><..ыл > (,>:» : уcó, убпе Il1K) емодина>личо< кой НP>c г,>25> 40 <н (:т>1 >>с><с)дстс>ие е<о г>ерегрузки..> (>

f» >i>ÏÅ Т П pl l B K < И Г»Н0r)ЛИ Т гзп (< >(1 l f>(.

В!.44!>Рсг,)»;3>i>г)>с)сус»тс»4 с >1 >ьР<; !»0 (>оп ь»c>li f)nil« ioKста «p>(>0«ec(:- Kotir)e,<сац 1>i и пда;,—

8П i )I(L»li KI)OBO»>бp!34(jeãlич. 0 <РBИггj(I!), >>у1В возд>. >»с I (3»/>()i >3 пеf> >s>t>»> Оче()с)дь

cine (>уело интермедиарной зоны, H зг:м возд < сгпии принимает у -ц.r>1,,3!;;() ринныи аппарат почки регулиру )04) и,pnBeiiB

35 4)>

С)а< Лп>4ДИНа Е2 ИНТРРС! Ициг»ЛЬ><(»>l >И К >С) Ка

>1<еф()оци Тами cof)L>pB» Tei> t->>û>, > рубОК).

Эт<). в <:по>0 очередь. Лызывае уве,i i«e! tile;1

ile;)ераспредепе,<ие кровеl>B(:о Iл fl ск-40 д<>п,i г>очки. При уменьi>)e>4>-р ! о 1 . ригоке это воэдеистпи. 0(л;д(13 пе«еб>ным эффек <ом (до ог>р()дс.:с| пр. „;епов), так к;<к происходит 3 ре<,(<роька сс судис<о о русла и комг>енсато(зное усип,45 ние функции за с <ет вкп<очения клубочков

>0> с.

Bni.паления, воздействие ДМЗ усугубляет сосуд<>стую реакци 0, сопровождающую

50 воспаление, что Ll приводит, B коне <но 10 <.*.— те. к yc»ee>аления L! 4>оявпе<<ию > ul4cpll !л)ун(<ых реакций. Об;nfl же свиде) ельствует анализ пок;>эл(< леи ко><— центрации просгагпанд) нл Е-, B > -н;1 . :.55 чечных сосочков как л;l1 моделир". ), I;,, Х))0 1«i- CKOTO И uCTPOro (3i. L!f3>iorC < "М> <, ) кОл»>с .0><òHorñ) инtepc(31> i>B ььс гc! 4;, ) .1 та, так и при пости >ппол;ж, ( возд;: >ств<,пх - облуче>;и., i; и . л»агнитными дециметровыми f 0,;

182 ((!0 1 в()еде(<ии блока(ора синтеза Ilpo(: (if(i эн

ДИНО(3 Пиф)ОК(ИКРАМИ.

Обоснование предлэгэеглых (арям()) ров. 5

Аппараты для проведения ДМВ-терэ пии Ромашка, Ранет, Волна генерируют дециметровые волны частотой 460 МГц. При подборе доз испольэовали излучение как сильно-тепловой мощности 395 мВт/см, 10

) ак и слабо(епловой мощности 84 г1Р>т/см, В эксперименте на кроликах

? уме((ьшэли мощность излучения с помощью атгенуатора диной 5 м и уменьшением диаметра излучателя от 10 до 4 см. Количество 15 процедур по аналогии с клиническими условиями - 10- 14, т.е. в течение 2-х недель с перерывами в выходнь:е дни. Экспозиция одной процедуры, кэк и в клинических условиях, от 8 до 20 мин, обычно 10 15 )ин. 20

Ранее ус;ановлено неблагоприятное повреждающее URèÿíèå сильно-тепловои

2 мощнос-иДМБ -395мВт/см напаренхиму почки и прямая зависимость между дозой ,Ц1(ЛВ и степенью повреждения. Наимег(ь- 25 шим повреждающим влиянием обладала ) доза слэботе((човой мощности 84 мВ)/см экспоз()цией 8-20 (1, >- 15) минут количес(вом сеансов "0 14 (B среднем 12), которая нами и с(эла использ;)вэ-ься в последу(о- 30 щих экспериментах. )

Слэботепловэя доза ДМ — 84 мВ)/см стимулирует юкстамедуллярный и кс рковый кровоток. "тренируег кровеносное русло почек, а сильнотепловэя доза ДМ — 395 35 мВт/см — угнетает кровоток в этих наруж2 ных слоях почки и увеличивает кровенэполнение, а следовательно, и флебостаэ медуллярного вещества, Это нарушение кровотока является, по нашему мнению, ос- 40 новой для развития воспалительного процесса. При проведении сопоставления с результатами морфологических исследованийй нами установлена прямая зависимость между увеличением дозы ДМВ (по мощно- 45 сти, экспозиции сеанса и продолжительности курса) — и токсическим, повреждающим действием на паренхиму почки. Поэтому с точки зрения исследователя — клинициста эти дозы являются неоп2оавданно большими 50 (мощность 395 мВт/см, экспозиция более

20 минут и курс более 14 сеансов) — и не применялись нами для моделирования, т.к. не являются близкими к естественным условиям, возникающим при лечении воспали- 55 тельного процесса в почках.

Клин че(кое значение cffncoba моделирования с использованием слэботепловой дозы ДМВ (84 мВт/см, площадь излучателя

4 10 гм в диаметре, экспозиция 8 20 мин, курс 10 14 сеансов) заключается в ToM. Ifo доже терапевтические режимы, не вызывающие токсического повреждэк)ще(о дейс(вия, могут вызвать эктивизэци о интерстициального нефрита с гипериммунным компонентом.

Преимущество предлагаемого crlocnhB заключается в использовании взаимосвязи между увеличением юкстамедуллярно(о крово ока и вîзниKHoвениегл имMóffoкof I(lе тен(ного интерстициального нефрита.

Положительный эффект предлагаемого способа состоит в повышении воспроизводимости иммунокомпетентного интерстициэльного нефрита, что позволяет раскрыгь и изучать одну из сторон па(огенеза иммун((компетентного интерстициального нефрита, связанного с особой формой рэсстройс(вэ почечной If)ìoäèíàìèêè. Создание данной модели предоставляет инф()рмэц IK) о про()оспэлител(,ном эффекте электромагHитных дециметровых BQRH слабîтеf! Rовoй мощности нэ имMóHoлогическую кле to IHóþ реакцию в почечном интерсffföèè. Такая информация является полезной и побуждает учитывать данный эффект при назначении ДМВ-терапии больным хроническим воспалительным процессом в почках

Формула изобретения

1. Способ моделирования интерстициэльного нефрита, включающий нарушение кровообращения в почке путем введения гормонально-активного препарата с последующим инфицированием штаммом кишечной палочки, о тл ич а ю щи и с ятем, что, с целью повышения воспроизводимости иммунокомпетентного интерстициального нефрита за счет увеличения юкстамедуллярного кровотока, кровообращение нарушают проведением дополнительного курсового облучения почек электромагнитными дециметровыми волнами слэботепловой мощности.

2. Способ по и. 1, отличающийся тем, что облучение проводят волнами частотой 460 МГц плотностью потока мощности до 83,7 мВт/см контактным методом излучателем диаметром 4,4 см по 8 — 20 мин ежедневно 10-14 процедур на курс моделирования.