Вещество, стимулирующее регенерацию тканей при комбинированном радиационном поражении и действии цитостатиков

 

Изобретение относится к медицине, а именно к химико-фармацевтической промышленности касается вещества, получаемого из высшего дереворазрушающего гриба, обладающего способностью ускорять регенерацию тканей при комбинированном лучевом поражении и действии цитостатиков. Целью изобретения является усиление специфической активности. Сущность изобретения заключается в применении водного экстракта высшего дереворазрушающего гриба ложного дубового трутовика в качестве вещества, стимулирующего регенерацию клеток и тканей при комбинированном радиационном поражении и действии цитостатиков. Положительный эффект: предлагаемое средство превосходит по своей активности прототип и не обладает андрогенной активностью. сл

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (si)s А 61 К 35!78

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4836766! 14 (22) 08,06.90

; (46) 15,07.93. Бюл, ¹ 26 (71) Минский государственный медицинский институт (72) В.А,Переверзев, А,И.Кубарко, А.И.Хоменко, А,В.Стрельников, Е.B.Ïåðåâåðçåâà, Г.Е.Иванов, А.А.Семенович, Л,А,Мелентович, Е.В.Юшкевич и И,Н.Семененя (56) Машковский М.Д. Лекарственные средства. М,; Медицина, 1972, т, 2, с. 134-135.

Авторское свидетельство СССР

М 1473140, кл. А 61 К 35/78, 1988. (54) ВЕЩЕСТВО, СТИМУЛИРУЮЩЕЕ РЕ: ГЕНЕРАЦИЮ ТКАНЕЙ ПРИ КОМБИНИРОВАННОМ РАДИАЦИОННОМ ПОРАЖЕНИИ

И ДЕЙСТВИИ ЦИТОСТАТИКОВ

Изобретение относится к медицине, а именно к химико-фармацевтической промышленности, и касается вещества, получа. емого иэ высшего дереворазрушающего гриба, обладающего способностью ускорять регенерацию тканей при комбинированном лучевом поражении (КРП) и действии цитостатиков, Целью изобретения является усиление специфической активности, Способ получения предлагаемого средства заключается в следующем: высушенное плодовое тело ложного дубового трутовика размельчают до грубодисперсного состояния, а полученный порошок переносят в колбу и заливают кипящей водой в различных соотношениях от 1:10 до 1:500, закрывают крышкой и ставят на кипящую водяную ба„„Я3 „, 1827258 А1 (57) Изобретение относится к медицине, а именно к химико-фармацевтической про мышленности,и касается вещества, получаемого из высшего дереворазрушающего гриба, обладающего способностью ускорять . регенерацию тканей при комбинированном лучевом поражении и действии цитостатиков.

Целью изобретения является усиление.специфической активности. Сущность изобретения заключается в применении водного экстракта высшего дереворазрушающето гриба ложного дубового трутовика в качестве вещества. стимулирующего регенерацию клеток и тканей при комбинированном радиационном поражении и действии цитостатиков.

Положительный эффект; предлагаемоесредст- а во превосходит по своей активности прототип и не обладает андрогенной активностью. ню в течение 30 мин. Полученный отвар ох- а лаждают до комнатной температуры и фильт- О руют через несколько слоев марли. Оставшуюся массу отжимают. Полученное средство представляет собой прозрачный или слегка опалесцирующий раствор коричневого цвета. Сухой остаток на 1 мл такого раствора при соотношении сырье:зкстрагент 1:10 со- CO ставляет 13,68 0,56 мг.

Пример 1. Белых беспородных крыс обоего пола облучали на универсальной гамма-установке "УГУ-420" в дозе 4 ГР при мощности излучения 5 сГР С (1,64х10

А/кг), а затем под эфирным рауш-наркозом производили перелом средней трети диафиэа большеберцовой кости. Контрольным животным в течение 10 дней подкожно (и/к) вводили стерильную воду для иньекций в

1827258 объеме 2,0 мл/кг. Животным опытных групп вводили: метиландростендиол (250 мг/кг один раз в день в желудок в течение первых четырех суток) плюс ретаболил (15 мг/кг один раз и день внутримышечно на 1, 7, 15 сут) — прототип, или предлагаемое средство а дозе 2,0 мл/кг и/к один раз в день в течение 10 сут подряд после КРП, Эксперименты показали, что на 15 день после КРП у контрольных животных на всех рентгенограммах поврежденной конечности четко прослеживается линия излома и края отломков. К 30 дню периостальная мозоль хорошо различима. Лишь на одной рентгенограмме концы отломков соединены муфтообразным периостом, в остальных случаях щель между отломками четко прослеживается на всем протяжении, На 45 сутки отломки соединены хорошо выраженным муфтообразным регенератором, хотя тень 20 регенерата нежная, а щель между отломками прослеживается в трех случаях из шести, Степень консолидации костных отломков возрастает с 1,5 + 0,2 единиц (15 день) до

3,8 +. 0,2 (р< 0,001) единиц на 60 день после

КРП. К 60-м суткам наблюдается также возрастание содержания Са и Р в костной мозоли на 38 и 34 lo соответственно (р<0,01).

Введение животным анаболических стероидных препаратов вызывает нормали- 30 зацию содержания фосфора в поврежденной кости уже на 15 сутки. Однако значительное. повышение содержания фосфора в костях (на

44-727 (p<0,01) по сравнению с контролем), которое сохраняется на всем протяжении лечения, не сопровождается столь выраженным нарастанием уровня кальция. В связи с этим выраженное усилие регенера ции костной ткани отмечается лишь к 60-м суткам после КРП, При этом костные отломы 40 соединены плотным однородным регенератором, а на ряде рентгенограмм можно проследить костно-мозговой канал. Степень консолидации костных отломков в этот период составляет 4,3 4 0,3 единицы при

3,8 +. 0,2 единицы в контроле.

Проведение у животных 10-дневного курса терапии предлагаемым средством вызывает усиление регенерации уже в первые сроки исследования, Через 15 дней после 50

КРП на рентгенограммах „прослеживается изломанная линия перелома. Края отломков не четкие и на них видна тень периостальной реакции, которая на некоторых рентгенограммах соединяет концы отломков.

Степень консолидации костных отломков возрастает при этом на 43$ (р<0,01) по сравнению с контрольными животными и на

21 по сравнению с крысами, у которых проводили лечение анаболическими стероидами. К 30-м суткам периостальная мозоль хорошо выражена и плотно соединяет концы отломков. Щель между отломками прослеживается с трудом, На 45-е сутки после травмы концы отломков соединены плотной периостальной мозолью, К 60-у дню периостальная мозоль четко определяется, а края отломков мало различимы, Усиление регенерации костной ткани, которое особенно выражено в первые сроки после проведенного лечения, обусловлено нормализацией содержания кальция и фосфора в поврежденных конечностях, Особеннозначительноеувеличение содержания этих веществ в костях наблюдается на 15 и 30 сутки по сравнению с контролем. При этом следует отметить равномерное возрастание содержания как кальция, так и фосфора, что значительно улучшает оссификацию костной ткани. В связи с этим эффективность консолидации костных отломков на ранних этапах после перелома при лечении предлагаемым средством выше, нежели прототипом. Учитывая высокую эффективность действия прототипа на поздних фазах регенерации можно, вероятно, усилить его действие в комплексном применении с предлагаемым средством.

Таким образом, по данным рентгенограмм, степени консолидации костных отломков, содержанию в них кальция и фосфора и их отношению в травмированных костях видно, что эффективность лечебного применения предлагаемого средства на ранних этапах после КРП значительно выше, чем применение анаболических стероидов (прототипа), Пример 2, Известно, что угнетающим действием на органы и ткани обладает не только ионизирующее излучение, но и цитостатики. В связи с этим было изучено влияние водного экстракта ложного дубового трутовика на действие цитостатика-антиметаболита 5-фторурацила.

Эксперименты проведены на белыхбеспородных крысах обоего пола массой 150200 г,5-фторурацил (5-ФУ) вводился животным подкожно s дозах 120 и 200 мг/кг в виде 57-ного водного раствора. Экстракт из ложного дубового трутовика давали пить животным без ограничения вместо воды в течение 10 суток после введения 5-ФУ (через 8 ч) в виде 0,02 и 0,05/-ного раствора, После введения цитостатика за животными осуществляли общеклиническое наблюдение, биохимическими, морфологическими и физиологическими методами исследовали динамику изменения основных параметров системы крови и системы мета1827258 ного влияния на обезвоживание организма крыс при введении 5-ФУ, то нормальные цифры гематокрита указывает на отсутствие угнетения эритропоэза. Данное средство нв препятствовало развитию лейкопении, хотя выраженность ее была меньшей по сравнению с контролем.

Влияние 5-ФУ на кроветворение сопровождалось также изменениями массы тимуса и селезенки. Так, масса тимуса была

10 сниженной в 1,3-3,9 раза (р< 0,05) во все сроки наблюдения. Масса селезенки снижалась на 28-33% в первые сроки исследования (через 3 и 6 дней после введения 5-ФУ) и повышалась на 46% (р<0,05) на 12 сутки после применения цитостатика. Применение препарата гриба не влияло на уменьшение массы тимуса и селезенки после введения

5-ФУ, но стимулировало репаративные процессы в этих органах о чем свидетельствует более выраженное возрастание массы этих органов на 12 сутки исследования по сравнению с контрольными животными.

В целом применение препарата гриба

25 уменьшает токсичность 5-ФУ, увеличивая продолжительность жизни и выживаемость мого средства стимулировать эритропоэз и репаративные процессы в тимусе и селезен30 ке, Таким образом, предлагаемое средство превосходит по своей активности прототип и может с успехом применяться с целью стимуляции репаративных процессов в организме млекопитающих при КРП и действии цитостатиков. В отличие от прототипа оно не обладает андрогенной активностью и менее трудоемко при получении, Формула изобретения

Применение водного экстракта высшего дереворазрушающего гриба ложного ду40 тканей при комбинироваином радиационном поражении и действии цитостатиков.

Составитель И.Петришек

Техред М.Моргентал Корректор В.Петраш

Редактор

Заказ 2339 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35. Раушская наб., 4/5 .

Производстве н но-издательский комбинат "Патент"; г. Ужгород, ул. Гагарина, 101 болизма на 3,6 и 12 сутки после введения

5-ФУ.

Установлено, что 5-ФУ в дозе 200 мг/кг вызывает 100% гибель животных, средняя положительность жизни составила 5,4 +. 0,4 сут. ФУ в дозе 120 мг/кг вызывает гибель

60-95% крыс (в среднем 80,0 8,9%), Продолжительность жизни погибших животных составила в среднем 7,0 0,6 сут. Максимальная летальность животных наблюдалась с 5 до 9 день после введения 5-ФУ.

Применение на этом фоне средства, полученного из ложного дубового трутовика, увеличивало продолжительность жизни опытных животных s 1,3-1,5 раза (р<0,01) по сравнению с контрольными, а также их выживаемость при действии цитостатика.

Установлено, что механизм цитостатического и побочных эффектов 5-ФУ связан с угнетением активности тимидилатсинтетазы и подавлением синтеза ДНК во многих тканях и в первую очередь в быстро профилирующих; костном мозге и эпителии кишечных ворсинок. Изучение системы крови при введении 5-ФУ показало развитие состояния выраженной интоксикации, которое сопровождалось анемией (число эритроцитов снижалось в 1,3-1,5 раза (р<0,01) лейкопенией (на 6 сутки количество лейкоцитов снизилось в 2,2 раза (р<0,61)) прогрессирующим нарастанием скорости оседания эритроцитов (СОЭ), Несмотря на потерю массы тела, связанную с выраженной диареей, гематокрит почти s 2 раза ниже нормы (р< 0.01), что указывает на ведущую роль угнетания кроветворения в патогенезе интоксикации 5-ФУ.

Комбинированное применение 5-ФУ и препарата гриба не изменяет содержания эритроцитов, концентрацию гемоглобина (при введении одного 5-ФУ содержание гемоглобина снижено с 1 41,8 + 0,4 г/л (интактные крысы) до 106,5 : 8,8 г/л (р<0,01) и гематокрит по сравнению с нормой. При этом 5-ФУ не изменяет физико-химических свойств эритроцитов, о чем свидетельствует нормальный уровень СОЭ. Поскольку предлагаемое средство не оказывало существенопытных животных. Этот эффект, по-види-. мому обусловлен способностью предлагаебового трутовика (Phelflnvs robustos

45 /Р.Karsten/ Boured et Galz) в качестве вещества, стимулирующего регенерацию клеток и