Штамм микобактерий мyсовастеriuм снеlоnеi, используемый для аллергологической идентификации микроорганизмов

 

Использование: медицинская и ветеринарная микробиология, штамм микобактерий Mycobacterium chelonei туберкулиногенность, аллергологическая идентификация микроорганизмов. Сущность. изобретения: штамм Mycobacterlum chelonei ГИСК №409, обладающий туберкулиногенностью, выделен из лимфоузла коровы, положительно ре агировавшей на туберкулин. Накопление в среде туберкулина начинается с четырех-пятинедельного возраста. В одном литре культурального фильтрата содержится 0,820-1,100 г туберкулина (в среднем 0,920 г/л). Биологическая активность составляет 0,0003 мг в ЮТЕ. 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕспуБлик (Я)5 С 12 N 1/20

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ОГ)ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ :

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) . К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛ6СТВУ (21) 4905991/13 (22) 28.01,91 (46) 23.08.93. Бюл. № 31 (71) Научно-исследовательский ветеринарный институт Нечерноземной зоны РСФСР (72) А.Л.Лазовская, M.Ë.Òèõîìèpîâà, О.Ф.Рачкова, А.А.Бондаренко, З.Г.Воробьева и М.Л.Рухамина (56) Вегдеу s manual of Sistematlc bacter., BeltImor, ., 1989.

Wagne L.G., Krlchevsky Е.1., Love бЛ.//Intern, J. on System. Bacteriol., 1980, ч.30, № 3, Р,528-538.

З.Ю.Я.Кассич и др.//Ветеринария, 1985, № 2, с. 29-30. (54) ШТАММ МИКОБАКТЕРИЙ MYCOBACTERIUM CHEL0NEI, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ

Изобретение относится к медицинской и ветеринарной микробиологии, предНавляет собой новый штамм Mycobacterlum

chelonei, характеризующийся активным ростом на синтетической среде и туберкулиногенностью и может быть использовано для аллергологической идентификации микроорганизмов.

Целью изобретения является штамм

Mycobacterium chelonei, характеризующийся активным ростом на синтетической среде и туберкулиногенностью.

Штамм Mycobacterium chelonel ¹ 409 выделен из лимфоузла положительно реагирующей на туберкулин коровы в 1986 году.

Штамм Mycobacterlum chelonel ¹ 409 депонирован в коллекции Научно-исследовательского института стандартизации и контроля медицинских и биологических препаратов им. Л.А,Тарасевича под № 38.

4 Ы 1835427 А1

ДЛЯ АЛЛЕРГОЛОГИЧЕСКОЙ ИДЕНТИФИКАЦИИИ МИ КРОО Р ГАН И 3 МО В (57) Использование: медицинская и ветеринарная микробиология, штамм микобактерий

Mycobacterium chelonei туберкулиногенность, аллергологическая идентификация микроорганизмов, Сущность. изобретения; штамм Mycobacterlum chelonel ГИСК ¹ 409, обладающий туберкулиногенностью, выделен из лимфоузла коровы, положительно ре-. агировавшей на туберкулин. Накопление в среде туберкулина начинается с четырех-пятинедельного возраста. В одном литре культурального фильтрата содержится 0,820-1,100

i туберкулина (в среднем 0,920 г/л). Биологическая активность составляет 0,0003 мг в l0 TE. 1 табл.

Штамм Mycobacterium chelonei N 409 характеризуется следующими свойствами, е

Морфологические свойства. Клетки име- «а ют вид тонких палочек длиной 1,5-2,5 мкм.

Окрашивается по Граму, по Цилю-Нильсену окрашивается в красный цвет.

Культуральные свойства. На ptJIQTHoA яичной среде Левенштейна-Йенсена образует мелкие влажные блестящие колонии белого цвета. На среде Левенштейна-Йенсена при температуре 37 вырастает за

15 — 17 дней. Размножается при температуре

22 — 450С; не 1 астет при температуре 50 С.

Оптимум роста отмечен при температуре

30 — 40 С, На жидких питательных средах растет на поверхности в виде тонкой влажной складчатой пленки, оставляя среду прозрачной. Через 4-6 недель роста среда окрашивается в светло-коричневь и цвет, оставаясь прозрачной.

1835427

Физиологические свойства. Растет на плотной питательной среде ЛевенштейнаЙенсена с добавлением 1 мг/мл салицината натрия, не растет при добавлении в среду

5%-ного хлористого натрия..не обладает ферментами: уреазой, /3 -галактозидазой, нитратредуктазой, не образует ниацина, Обладает активными пиразинамидазой. никотинамидазой, не гидролизует Твин-80 за

10 дней. 10

Состав жирных кислот, определенный методом. сопиролитической газовой хроматографии, соответствует видовому составу.

Штамм Mycobacterium chelonel N. 409 агглютинируется кроличьей антисыворот- "5 кой к серотипу 2 М.chelonei, не агглютинируется антисыворотками к серотипами 1 и 3, что дает основание отнести его к серотопу 2

М.cheionei, После заражения двух морских свинок 20 бактериальной массой в количестве 1,0 — 1,5 мг у одного животного в печени обнаружены два мелких туберкулезных очага, в селезенке незначительно увеличена.

Туберкулиногенные свойства. В про- 25 цессе роста штамма M.chelonel N 409 на жидкой среде, начиная с четырех-пятинедельного возраста, происходит накопление в среде туберкулина, сенситина); Максимальноее количество туберкулина в среде образуется через 6 — 8 недель роста. Выход сухой бактериальной массы составляет 0,8—

1,0 r на 1 л среды. Туберкулин (сенситин); полученный из культурального фильтрата методом осаждения трихлоруксуной кисло- 35 той с последующей очисткой ацетоном, этиловым спиртом и эфиром, представляет собой порошок светло-серого цвета, в состав которого входят белок (75,0 — 82,0 ) и липополисахариды. B 1 л культурального 40 фильтрата содержится от 0 82 до 1,12 г туберкулина (в среднем 0,98 г/л).

Биологическая активность сенситина изучена на гомологично сенсибилизированных морских свинках и составляет 0,0003 мг 45 в 10 ТЕ.

Изобретение иллюстрируется примерами, Пример 1. Получение туберкулина.

Штамм Mycobacterium chelonel N. 409 засевают на жидкую питательную среду

Линниковой-Могилевского (3 серии по 2Q колб с 500 мл среды), выращивают в термостате при 37 С в течение 6-8 недель, Затем колбы с культурой стерилизуют в автоклаве при 120 в течение 30 минут, Бактерийную массу отфильтровывают, высушивают, взвешивают. Туберкулин осаждают трихлоруксусной кислотой с последующей очисткой ацетоном, этиловым спиртом и эфиром, Полученный туберкулин представляет собой порошок светло-серого цвета. Химический состав характеризуется содержанием белка в количестве 75,0-82,0 и полисахаридов — 10,0-12,0 . Выход туберкулина в трех сериях составляет 0,900,.0,950 и 1,120 г на 1 л среды соответственно.

П р.и м е р 2, Определение биологической активности, 24 светлокожих беспородных морских свинок весом 300-350 r сенсибилизируют внутрикожным введением 5,0 мг бактериальной массы, убитой фенолом, в неполном адъюванте Фрейнда. Через месяц после сенсибилизации морским свинкам внутрикожно вводят исследуемый туберкулин в дозе

0,000075, 0,00015 и 0,0003 мг в О, l мл растворителя для туберкулина млекопитающих.

Биологическая активность сенситина из штамма Micobacterium chelonei М409 дана в таблице.

Одновременно 16 морским свинкам вводят полный адъювант Фрейнда, содержащий 5,0 мг микобактерий штамма БЦЖ, убитого фенолом, Через месяц на них ставят кожные пробы со стандартным туберкулином из ГИСК им. Л.А.Тарасевича в дозах 2

ТЕ, 5 ТЕ и 10 ТЕ. Биологическую активность выявляют методом гетерологичных аналогий при сравнении известного с новым гетерологичным, Биологическая активность туберкулина из штамма М. chelonei М409 составляет 0,000035 мг в 1 ТЕ, Формула изобретения

Штамм микобактерий Mycobacterium

chelonei ГИСК N. 409, используемый для аплергологической идентификации микроорганизмов, 1S35427

Продолжение таблицы

Составитель А. Лазовская

Техред М.Моргентал Корректор H. Ревская

Редактор Т. Куркова

Производственно-издательский комбинат "Патент", r Ужгород, ул.Гагарина. 101

Заказ 2977 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5