Способ получения иммуносорбентов

Авторы патента:

C12H1/02 - в сочетании с удалением осадка или введенного материала, например адсорбента

A61K39 - Лекарственные препараты, содержащие антигены или антитела (материалы для иммунологического анализа G01N 33/53)

ОП ИСАН И Е

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

2I0336

Союэ COBBTCKMl

Социалистических

Республик

Зависимое от авт. свидетельства №

Кл. 30h, 6

Заявлено 26.1.1967 (№ 1129229/30-15) с присоединением заявки №

Приоритет

Опубликовано 06.II.1968. Бюллетень № 6

Дата опубликования описания З.IV.1968

МПК А 61k

3 Д К 615.373.34.002.2 (088.8) Комитет по делам иаооретеиий и открытий при Совете Министров

СССР

Авторы изобретения

К. Л. Шаханина и Н. И. Манько

Заявитель

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИММУНОСОРБЕНТОВ

Известные способы получения иммуносорбентов путем пространственной поликонденсации молекул антигена не обеспечивают приготовления поликонденсационных иммуиосорбентов из полисахаридных антигенов.

Предлагаемый способ получения иммуносорбентов отличается тем, что в качестве конденсирующего агента используют диизоцианаты, например, гексаметилендиизоцианат, м- и

Il-ксилилендиизоцианаты.

Это отличие позволяет приготовлять поликонденсационные иммуносорбенты не только из белковых, но и из полисахаридных антиге,!! îâ.

Сущность описываемого .способа получения иммуносорбентов наглядно видна из следую:цих примеров.

Пример 1. В гомогенизатор помещают

12 мл 2%-,ного раствора гаммаглобулина быка и 1 2 мл 0,5 М боратного буфера с рН 7,4вЂ”

7,6, после чего добавляют при энергичном растирании в тонком слое 25 мг гексаметилендиизоцианата и продолжают растирание в гомогенизаторе еще 1 час. Образовавшуюся суспензию переносят в:склянку емкостью

250 л л, ополаскивают гомогенизатор 25вЂ”

50 мл физраствора, который переносят в ту же склянку. К полученной смеси добавляют

5 мл 1%-ного раствора углекислого аммония и встряхивают смесь на механической качалке при температуре +2 +4 С в течение 6 ча ..

Осадок отделяют центрифугпрованием, промывая при этом физраствором с рН 7,2 вЂ” 7,4 до исчезновения в надосадочной жидкости ионов аммония и растворимых белков. Готовый иммуносорбент хранят I103, слоем физраствора при температуре 2 вЂ” 4 С.

Пример 2. В колбу с мешалкой и капельной воронкой помещают 40 мл 2% -ного

10 раствора гаммаглобулина белка и 40 мл

0,15 М боратного буфера с рН 7,4 вЂ” 7,6. При энергичном перемешивании в течение 20 мин добавляют из капельной воронки 80 мг раствора гексаметилендиизоцианата в 40 лтл

15 хлороформа, не содержащего спирта, Смесь продолжают перемешивать в течение 2 час, затем добавляют 15 мл 1%-ного раствора углекислого аммония и перемешивают еще в течение 1 час. Все перечисленные операции

20 проводятся при комнатной температуре.

Реакционную;смесь переносят в перегонную колбу и о1гоняют хлороформ и часть во,jbl в вакууме водостройного насоса при температуре 25 вЂ” 30 С.

25 Полученный остаток обрабатывают, как описано выше.

Пример 3. В колбу с мешалкой и капельной воронкой помещают 40 мл 2%-ного раствора гаммаглобулина быка и 40 мл

30 0,15 М боратного буфера с рН 7,6 вЂ” 7,8. Смесь

210336

Составитель П. Мурый

Текред Л. Я. Бриннер

Редактор В. С. Сорокин

Корректоры: Е. Н. Гудзона и В. В. Крылова

Заказ 571/!9 Тираж 530 Подписное

ЦИИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР

Москва, Центр, пр. Серова, д, 4

Типография, пр. Сапунова, 2 перемешивают, охлаждают до 4 С и добавляют к ней по каплям при,непрерывном перемешивании 10 лл диоксана, не содержащего перекисей. В течение 2 час при перемешивании прикапывают 90,ил раствора м-ксилилендиизоцианата в 10 мл диоксана. Смесь перемешивают cpm температуре 4 С в течение

6 час, отделяют образовавшийся осадок центрифугированием, смешивают с 40 мл физраствора и 10 ил 1о7о-ного раствора углекислого аммония и оставляют при комнатной температуре на 1 час, затем центрифугируют. Надосадочную жидкость отбрасывают, а обработку осадка ведут как и в примере 1.

Свойства иммуносорбентов, получаемых описываемым способом, можно менять, изменяя соотношение между количествами антигена и конденсирующего агента.

5 Предмет изобретения

Способ получения,иммуносорбентов путем пространственной поликонденсации молекул антигена, отличающийся тем, что, с целью

10 приготовления поликонденсационных иммуносорбентов из белковых и полисахаридных антигенов, в качестве конденоирующего агента используют диизоцианаты, например, гексаметилендиизоцианат, м- и п-ксилилендиизоци15 анаты.