Этеносодержащие растворы и их применение в способах терапии или профилактики

 

Стабильный при хранении раствор содержит этен, растворенный в подходящей водной жидкости со сниженной реактивностью. Жидкость представляет собой водную деионизированную жидкость. Способы терапии и профилактики с использованием этеносодержащих растворов включают прямое и непрямое действие против заболевания и микроорганизмов, а также способы улучшения метаболических функций и инициации или индукции организма-хозяина к усилению защитного ответа против заболевания или от микроорганизмов. Новые этеносодержащие растворы проявляют повышенную химическую устойчивость и стабильность при хранении. Уровень этена в растворе не изменяется существенно в течение более одного месяца с момента его приготовления. Этеносодержащие растворы обеспечивают стерилизующее действие и/или подавляющее действие на микроорганизмы в организме-хозяине, даже если конкретный микроорганизм непосредственно не чувствителен к этену. 5 с. и 31 з.п. ф-лы, 2 ил., 1 табл.

Область техники Это изобретение относится в основном к этеносодержащим растворам и их применению в способах терапии или профилактики.

Предпосылки изобретения Современное состояние знаний о метаболической роли этена для млекопитающих наилучшим образом описано в монографиях Международной организации по исследованиям рака (International Agency for Research on Cancer) Monographs of the Evaluation of Carcinogenic Risks to Humans, Vol. 60, 1994, Ethylene, которые опубликованы Всемирной организацией здравоохранения. Из этой публикации можно заключить, что этен не играет полезной метаболической роли для млекопитающих (за исключением использования в качестве анестетика) и что его выработка млекопитающими или его прием, по-видимому, происходит без какой-либо полезности для метаболизма.

Современный уровень техники был усовершенствован в описании изобретения PCT/NZ94/00151 (опубликованном как WO 95/17214 и в отношении которого данный заявитель является изобретателем) путем предположения, что выработка этена млекопитающими может быть механизмом защиты, направленным против проникающих микроорганизмов. Поэтому в нем было описано использование этена в качестве нового стерилизующего вещества. В частности, были описаны стерилизующие или подавляющие микроорганизмы растворы, содержащие этен, растворенный в соответствующей жидкости.

Было показано, что растворы из PCT/NZ94/00151 должны обладать полезным действием в профилактике и/или терапии посредством прямого антимикробного действия на инфицирующие или вызывающие заболевание возбудители.

В настоящее время установлены недостатки, связанные с применением растворов, описанных в PCT/NZ94/00151. Эти растворы проявляли недостаточную химическую стабильность и имели ограниченный срок хранения. Отсутствие стабильности, как предполагается, является результатом способности этена вступать в реакцию с другими компонентами раствора.

Более конкретно, было обнаружено, что этен может реагировать с другими компонентами в жидкости, приводя к одному или более из следующих явлений: снижение количества этена в растворе, изменение рН раствора или появление нежелательных продуктов реакции. Было неожиданно обнаружено, что содержание этена в растворе может снижаться на 50%, например, путем реакции с такими компонентами. Было обнаружено, что такие реакции полностью непредсказуемы и находятся в противоречии с описанием PCT/NZ94/00151.

Эти компоненты могут включать ионы, например, Н⁺ и ОН^- ионы, ионы кальция или другие примеси, такие как микроскопические частицы растительного материала, твердые кальциевые частицы или поглощенные газы, например воздух, кислород или хлор.

Хотя и не связанное с последующим, это наводит на мысль, что, например, одна реакция может быть между гидроксильными ионами и этеном с образованием 2-гидроксиэтена. Подобным же образом кислород, поглощенный содержащим этен раствором, может также реагировать при ультрафиолетовом облучении и даже при неоновом освещении с образованием озона, который затем реагирует с этеном с образованием этиленоксида. Присутствие канцерогена, такого как этиленоксид, значительно снижает применение этеносодержащих жидкостей для приема. Кроме того, все эти реакции могут снижать количество этена, растворенного в жидкости.

Попутно, например, было обнаружено, что этен, добавленный в соответствующую жидкость, в этом случае в воду питьевого стандарта, содержащую компоненты, дающие проводимость 148 микромо (единица, обратная микроом или микросименс) на сантиметр, реагировал с получением повышения рН, которое может продолжаться в течение дней и месяцев хранения. Подобная же реакция не наблюдалась, когда используемая вода была деионизирована путем дистилляции до по существу нулевой проводимости перед добавлением этена. Отсутствие стабильности при хранении особенно неблагоприятно для этого этенового продукта, если он проходит через длительные транспортные операции, или когда желательно продолжительное хранение.

Как отмечено выше, в настоящее время неожиданно обнаружено, что этеносодержащий раствор, успешно проявляющий повышенную химическую устойчивость и стабильность при хранении, может быть получен путем растворения этена в жидкости со сниженной реактивностью. Полученный раствор применим в качестве тоника.

Поэтому объектом этого изобретения является получение стабильного при хранении раствора, содержащего этен, растворенный в соответствующей жидкости, или по меньшей мере предоставление обществу полезной альтернативы.

Следующим объектом изобретения является обеспечение способов профилактики и/или терапии, при которых применяются раствор, стабильный при хранении, и в качестве непосредственно действующего антимикробного средства или опять по меньшей мере предоставление обществу полезной альтернативы.

Также предполагается, что растворы по PCT/NZ94/00151 должны быть полезны при профилактике и/или терапии благодаря прямому антимикробному действию на инфицирующие или вызывающие заболевания возбудители. Однако было обнаружено, что содержащие этен растворы не могут оказывать прямой стерилизующий/подавляющий эффект на ряд микроорганизмов in vitro. Некоторые виды микроорганизмов, которые, как обнаружено, не могут быть стерилизованы in vitro растворенным этеном, представляют собой: вирус Influenza A (H3N2), полиовирус типа 1 (Sabin) и вирус Нerpes simplex. В дополнение к этим вирусам испытание на восьми штаммах бактерий, представляющих четыре рода бактерий (Staphylococcus, Pseudomonas, Klebsiella, Enterococcus) важных возбудителей заболеваний человека, прошло без видимого стерилизующего эффекта.

Неожиданно обнаружено, что, несмотря на очевидное отсутствие антимикробного действия этена in vitro на некоторые микроорганизмы, этен, более конкретно, растворенный этен, может обеспечивать профилактическое и/или терапевтическое действие in vivo в организме хозяина, которому вводится этен. Это происходит даже в отношении микроорганизмов, таких как Herpes simplex, которые этен не подавляет или на которые не оказывает стерилизующего действия in vitro. Другими словами, вызываемый этеном стерилизующий/подавляющий эффект на микроорганизмы может наблюдаться в организме-хозяине даже несмотря на то, что микроорганизм(ы), находящиеся в этом организме-хозяине, могут быть непосредственно нечувствительны к этену. Настоящее изобретение также частично базируется на этих совершенно неожиданных данных.

Поэтому дополнительным объектом данного изобретения является обеспечение способов профилактики и/или терапии, при которых этен используется иначе, а не как непосредственно действующее антимикробное вещество, или по меньшей мере предоставление обществу полезной альтернативы.

Краткое изложение изобретения В первом аспекте данное изобретение, как можно сказать в широком смысле, состоит в получении стабильного при хранении раствора, содержащего растворенный в соответствующей жидкости этен. Стабильный при хранении раствор предпочтительно является тонизирующим раствором, содержащим этен, растворенный в жидкости со сниженной реактивностью.

Желательно, чтобы жидкость была очищена. Наиболее предпочтительно, жидкость представляет собой деионизированную жидкость.

В основном аспекте данное изобретение обеспечивает способ улучшения метаболических функций в организме-хозяине, причем этот способ включает введение в организм-хозяин эффективного количества устойчивого при хранении стабильного раствора этого изобретения.

В дополнительном аспекте данное изобретение обеспечивает способ профилактики и/или терапии для лечения заболеваний или инфекций в организме-хозяине путем непосредственного антимикробного воздействия, и который включает стадию введения в организм хозяина эффективного количества стабильного при хранении раствора этого изобретения.

В связанном с этим аспектом данное изобретение обеспечивает использование стабильного при хранении раствора этого изобретения для изготовления медикамента для использования при профилактике и/или терапии против микробной инфекции, причем медикамент оказывает прямое антимикробное действие.

В еще одном дополнительном аспекте данное изобретение, говоря в широком смысле, представляет способ профилактики и/или терапии для лечения заболеваний или инфекций в организме-хозяине иным путем, а не оказанием прямого антимикробного действия, причем этот способ включает стадию введения в организм-хозяин эффективного количества этена.

В более общем смысле, это изобретение обеспечивает способ улучшения метаболических функций в организме-хозяине, причем этот способ включает введение в организм хозяина эффективного количества этена при условии, что улучшение метаболических функций достигается иначе, а не путем проявления прямого антимикробного действия.

В дополнительном аспекте данное изобретение обеспечивает способ инициации и/или индукции в организме-хозяине защитной реакции, более конкретно, защитного иммунного ответа, против заболевания или инфицирующих микроорганизмов, который включает стадию введения в организм хозяина эффективного количества этена.

В еще одном дополнительном аспекте это изобретение обеспечивает способ введения этена в организм-хозяин, причем этен обеспечивает непрямое стерилизующее или подавляющее микроорганизмы действие, причем такое действие является профилактическим и/или терапевтическим, и такое действие вызывается системными факторами организма-хозяина, например Т-лимфоцитами или лейкоцитами, действие которых усиливается введением этена.

В еще одном дополнительном аспекте данное изобретение может обеспечивать способ терапии и/или профилактики микробной инфекции в организме-хозяине, который включает стадии: (а) введения эффективного количества этена указанному хозяину для потенциирования и/или инициации иммунной системы организма-хозяина, чтобы вызвать в организме-хозяине защитный иммунный ответ против указанной микробной инфекции, и (б) введения количества активного вещества, которое обладает прямым антимикробным действием, достаточным для стерилизации или по меньшей мере подавления микроорганизмов.

В контексте этой заявки организм-хозяин предпочтительно является человеком, но может быть и животным.

В еще одном предпочтительном осуществлении способов этого изобретения с непрямым действием иммунный ответ, вызванный введением этена, является гуморальным ответом.

Обычно введение этена вызывает продукцию системных факторов, например в случаях ВИЧ инфекции клеток, участвующих в повышении гуморального иммунного ответа, который должен быть усилен.

Наиболее благоприятно, например, то, что введение этена может способствовать тому, что популяция Т-лимфоцитов CD4 увеличивается, остается стабильной или снижается более медленно, чем было бы в противном случае без введения этена.

Защитный ответ в организме-хозяине, вызываемый с помощью введения этена, может быть также лечебным действием в пораженной ткани организма-хозяина, участвующей в усилении иммунного ответа, например ткани печени или лимфатической ткани, и таким образом дает возможность таким тканям функционировать с лучшим общим, метаболическим и иммунологическим эффектом.

В частности, предпочтительным, но не ограничивающим осуществление непрямых способов действия, микроорганизмом, в отношении которого должно быть усилено терапевтическое действие, является ВИЧ. Терапевтический эффект может быть направлен также и на другие микроорганизмы, например Нerpes simplex или микроорганизмы, вызывающие гепатит или инфекционный мононуклеоз. Более предпочтительно, но не принципиально, что терапевтическое введение этена может производиться в сочетании или вместе с другими антимикробными веществами, например, зидовудином (АЗТ) или антибиотиками, такими как пенициллин.

В способах этого изобретения, когда этен необходимо вводить для оказания непрямого действия, удобно, чтобы он был представлен в форме композиции, содержащей этен, растворенный в соответствующей жидкости, такой как вода. Наиболее желательно, чтобы этен более соответственно вводился в форме стабильного при хранении раствора этого изобретения.

В другом аспекте данное изобретение обеспечивает применение этена при изготовлении медикамента для использования при профилактике и/или терапии микробной инфекции, причем медикамент вызывает непрямое антимикробное действие посредством способности инициировать и/или индуцировать в организме-хозяине повышение защитного ответа, в частности защитного иммунного ответа в отношении инфекции.

Это изобретение выше определено в общих чертах. Однако специалисты в этой области поймут, что это изобретение не ограничивается только теми аспектами, которым дано определение, но что оно также включает осуществления, для которых в описании далее представлены примеры.

Кроме того, данное изобретение будет более понятно с помощью ссылок на сопровождающие чертежи, на которых: фиг. 1 иллюстрирует эффект от введения этена индивидуумам, инфицированным ВИЧ/СПИД; фиг. 2 иллюстрирует сравнительное действие при введении этена и интерферона индивидууму, инфицированному вирусом гепатита С.

Подробное описание Как изложено выше, обнаружен ряд данных, которые лежат в основе данного изобретения.

Первым основным открытием является то, что содержащий этен раствор, который проявляет повышенную химическую устойчивость и стабильность при хранении, может быть получен путем растворения этена в подходящей жидкости.

Вторым основным открытием, которое лежит в основе данного изобретения, является то, что этен, более предпочтительно, растворенный этен, в качестве стерилизующего вещества/ингибитора для микроорганизмов, может обеспечивать стерилизующее действие и/или подавляющее действие на микроорганизмы в организме-хозяине, даже если конкретный микроорганизм непосредственно не чувствителен к этену. Это происходит потому, что, как неожиданно обнаружено, этен способен индуцировать реакцию организма-хозяина, продукты которой могут обладать действием против заболевания и/или инфицирующего микроорганизма путем стерилизации и/или подавления его роста. Поэтому этен находит применение при способах профилактики и/или терапии заболеваний и/или против микроорганизмов.

Под термином "тонизирующее средство" подразумевается продукт, который оказывает полезное действие на метаболизм (исключая общую анестезию) в организме животного-хозяина, которому его вводили.

Термин "микроорганизм" или тому подобное используется здесь в широком смысле для обозначения бактериального, вирусного или грибкового заболевания, вызываемого возбудителями инфекций и их метаболитами, а также инфекционными частицами, такими как вирусная РНК.

Под "деионизированной" в одном из осуществлений подразумевается жидкостная часть, освобожденная от ионов, или жидкость, обладающая уровнем ионизации, для использования при производстве стабильного при хранении раствора этого изобретения. В другом осуществлении подразумевается жидкость, обработанная до приемлемого удаления или снижения в ней содержания ионов. Предпочтительно, отношение ионов, присутствующих в обработанной жидкости, к ионам в этой самой жидкости до обработки составляет 5:10, предпочтительно, менее 2,5: 10, более предпочтительно, менее 1:10, и наиболее предпочтительно, 3: 1000000 или ниже. Для точности уровни ионизации предпочтительно определяют в жидкостях после удаления любого количества захваченной угольной кислоты. Уровни ионизации предпочтительно определяют в миллиграммах на литр, присутствующих в растворе, но могут быть измерены в единицах проводимости (микроом/см).

Термин "заболевание" используется в его классически широком смысле: расстройства, патологического отклонения, включая заболевания, вызываемые микроорганизмами, а также заболевания, в которых не участвуют микроорганизмы, такие как рак, травмы, недомогание, порок, нарушение или неблагоприятное состояние в организме или психике.

Термин "примеси", "загрязнения", как он используется здесь, относится к любому компоненту в жидкости, который реагирует с этеном, непосредственно или опосредованно, включая ионы.

Под термином "очищенная" подразумевается в одном из воплощений жидкость, обработанная до приемлемого удаления присутствующих примесей, соответственно при этом удалялось до пятидесяти процентов (50%), предпочтительно по меньшей мере до семидесяти пяти процентов (75%), и наиболее предпочтительно, более чем девяносто пять процентов (95%) примесей. При другом воплощении подразумевается жидкость, имеющая относительно высокую степень чистоты (или относительно низкий уровень примесей), которая может использоваться для получения стабильного при хранении раствора этого изобретения.

Термин "жидкость со сниженной реактивностью", как он использован в этом описании, означает жидкость, которая была очищена до такой степени, что очистка приемлемо подавляет скорость разложения этена, добавленного к жидкости. Термин также относится к жидкости, вязкость которой была повышена до уровня, который приемлемо сдерживает скорость разложения этена, добавленного к жидкости.

Поэтому первый аспект данного изобретения заключается в растворе, содержащем этен, растворенный в подходящей жидкости, который стабилен при хранении. Этот термин будет легко понят специалистом в данной области. В широком смысле он относится к содержащему этен раствору, причем уровень этана остается относительно постоянным в течение какого-то периода времени. При одном воплощении он относится в основном к содержащему этен раствору с устойчивостью при хранении, превосходящей ранее достигнутые результаты. В другом воплощении он относится к содержащему этен раствору, в котором уровень этена не изменяется значительно в течение срока в один месяц. Причем, предпочтительно, значительного изменения уровней этена в растворе не происходит в течение шести месяцев, и более предпочтительно, в течение двенадцати месяцев.

Жидкость, используемая для раствора, может быть любой жидкостью, пригодной для обеспечения необходимой стабильности при хранении. Сюда могут быть включены любые жидкости с уровнями проводимости, очистки или ионизации, которые могут использоваться для получения раствора этого изобретения, стабильного при хранении.

Предпочтительно, устойчивый при хранении раствор, содержащий этен, растворенный в жидкости со сниженной реактивностью, предпочтительно очищенной жидкости, и наиболее желательно, деионизированной жидкости - таких, которые известны в этой области или же охарактеризованы здесь.

В дополнительном аспекте данное изобретение заключается в получении тонизирующего раствора, содержащего этен, растворенный в жидкости со сниженной реактивностью.

Неожиданно обнаружено, что нежелательные химические реакции, связанные с разложением этена в жидкости, и тенденция для этена подвергаться реакциям в жидкости с течением времени, могут быть существенно ограничены растворением этена в жидкости со сниженной реактивностью. Предпочтительно, жидкость со сниженной реактивностью является очищенной жидкостью, и наиболее желательно, является деионизированной жидкостью.

Жидкость со сниженной реактивностью может быть получена рядом способов. Хорошо известно, что ионная подвижность обратно пропорциональна вязкости среды (закон Уолдрена (Waldren)). Из этого следует, что химическая устойчивость и/или стабильность при хранении раствора солюбилизированного этена может быть дополнительно повышена путем увеличения вязкости. Неожиданно обнаружено, что этот закон может быть с пользой применен к жидкостям для использования при получении растворов этена путем включения в жидкости веществ для увеличения вязкости жидкости. Этому может удовлетворять любое подходящее вещество, способное повысить вязкость жидкостей. Сахар особенно предпочтителен по причине вкуса и свойства неэлектролита, то есть сахар не диссоциирует на ионы, которые могут реагировать с этеном или другими ионами в растворе.

Может быть использован любой подходящий сахар. Однако более предпочтительны глюкоза и/или сахароза. Количество сахара на литр раствора в жидкости может быть отрегулировано так, чтобы удовлетворять любым конкретным обстоятельствам в отношении желаемого вкуса и/или подавления ионной реакции, необходимых для жидкости. Сахара, и в частности очищенная сахароза, в среднем могут содержать примеси и ионные вещества в соотношении 1:1000 сахара по массе, так что поэтому должны быть, предпочтительно, дополнительно очищены и/или деионизированы перед использованием в растворе, стабильном при хранении. Также предпочтительно, чтобы жидкость, подготовленная таким образом, была простерилизована известными методами перед добавлением этена. Подходящей методикой стерилизации является УФ облучение.

Относительную вязкость раствора этена, содержащего тростниковый сахар, по сравнению с водой можно определить обычным образом с помощью вискозимметра или альтернативно измерить путем определения удельной массы. При 20^oС уд. масса воды = 0,998234. Предпочтительным является раствор солюбилизированного этена с уд. массой между 1,00250 и 1,08462. Более предпочтительным является раствор солюбилизированного этена с уд. массой 1,03985.

При альтернативном воплощении жидкость со сниженной реактивностью может быть получена путем повышения степени очистки жидкости. Поэтому при предпочтительном осуществлении жидкость со сниженной реактивностью является очищенной жидкостью.

Очищенную жидкость можно получать, подвергая выбранную жидкость известным процессам очистки, таким как фильтрование, центрифугирование, осаждение, флокуляция, дистилляция, дегазирование и/или деионизация путем анионного и катионного обмена. Могут использоваться предварительно полученные жидкости с относительно высоким уровнем чистоты (или относительно низким уровнем примесей), подходящие для использования при получении стабильного при хранении раствора этого изобретения.

Ионизация может быть измерена с помощью определения проводимости жидкости. Жидкости, предпочтительные для использования, будут обычно обладать проводимостью менее 50, предпочтительно менее 15, и наиболее предпочтительно, равной 3 микромо/см или менее. Обнаружено, что реактивность этена при добавлении к жидкости снижается пропорционально снижению проводимости жидкостей. Большинство жидкостей содержит угольную кислоту, которая влияет на определение уровней ионизации. Для точности результатов поэтому желательно удалить какое-то присутствующее в жидкости количество угольной кислоты перед определением уровней ионизации.

При еще одном воплощении жидкость со сниженной реактивностью, используемая в этом изобретении, является деионизированной жидкостью. Деионизация может быть выполнена путем пропускания жидкости через катион- или анионообменные среды, известные в этой области. В данном случае предпочтительны для использования ионообменные смолы.

При одном из воплощений соответственно деионизированная жидкость является жидкостью, в которой содержание ионов снижено до уровня ниже по массе в мг уровня этена, который нужно добавить к жидкости в расчете мг на мг.

Жидкости, подходящие для использования при получении стабильного при хранении раствора данного изобретения, многочисленны и разнообразны. Например, могли бы использоваться безалкогольные напитки, сок, крепкие стимулирующие напитки, вино или вода.

Как отмечено выше, жидкости обычно очищают и/или деионизируют перед использованием при приготовлении стабильного при хранении раствора этого изобретения. Могут также использоваться подходящие предварительно подготовленные жидкости.

Также предпочтительно, чтобы жидкость была простерилизована известными способами перед добавлением этена. Подходящей методикой стерилизации является УФ облучение.

Жидкостью, предпочтительной для использования в настоящее время, является вода, и наиболее предпочтительно, очищенная вода. Желательно, чтобы проводимость воды была снижена с проводимости 148 микромо/см до 3 микромо/см или менее. Снижение проводимости в этих значениях обеспечивает жидкость, которая имеет очень существенно сниженную реактивность. Обнаружено, что в такой деионизированной воде при добавлении этена если и происходит какая-то химическая реакция, то она несущественна.

По определению деионизированной воды, такая вода должна обычно иметь содержание ионов, равное или менее 1260 миллиграмм на литр (мг/л), более предпочтительно, менее 500 мг/л, и наиболее предпочтительно, менее 14 мг/л при 10^oС и атмосферном давлении.

Газы могут вовлекаться в жидкость при использовании известных процедур. Особенно подходящим является вовлечение с использованием патентованного газа для жидкостного сатуратора, такого, который обычно используется для производства газированных безалкогольных напитков, но предусматривается и любой газ, подходящий для устройства для насыщения жидкостей. Смесь двуокиси углерода и газообразного этена может быть даже заморожена, а затем введена в жидкость для введения в раствор без обращения к использованию газа в устройстве для насыщения жидкости.

Для вовлечения этен, предпочтительно, смешивается с другим(и) газом или газами для получения газообразной смеси, более растворимой, чем этен, но менее растворимой, чем примешиваемый(е) газ или газы. Подходящим примешиваемым газом для получения этой смеси является, предпочтительно, двуокись углерода в соотношении 2:1 объем/объем к этену. Однако может использоваться любой подходящий состав смеси, пригодный для технических целей этого изобретения и применения для тонизирующего раствора.

Обнаружено, что когда газы, такие как этен и двуокись углерода, проходят через смешивающий газы/регулирующий клапан в трубку, предназначенную для переноса газовой смеси в жидкость, газы имеют тенденцию выделяться из смеси, делая более трудным достижение растворения смеси. Для решения этой проблемы заявитель выбрал использование диафрагменного устройства в газовом трубопроводе для обеспечения адекватного смешивания. Диафрагма должна быть помещена в газовом трубопроводе так близко к месту, в котором смесь должна растворяться, как это осуществимо. Можно использовать любые обычные диафрагмы, пригодные для этой цели. Особенно подходит камера, заполненная стеклянными шариками.

Обнаружено также, что этеносодержащие растворы для перорального приема человеком могут иметь неприятный для потребителя вкус, вплоть до тошнотворного, срывая тем самым предназначенное использование раствора.

Чтобы преодолеть эту проблему, было определено, что включение одного или более улучшающих вкус и/или подкрашивающих веществ в этеносодержащий раствор может значительно увеличить его пригодность для питья. Улучшающее вкус и/или подкрашивающее вещество предпочтительно смешивается с выбранной подходящей жидкостью перед очисткой и/или деионизацией жидкости и добавлением этена.

Для этой цели можно использовать любые известные улучшающие вкус вещества. Предпочтительные улучшающие вкус вещества включают, например, сахара, мяту или лимон.

В другом воплощении стабильный при хранении раствор может дополнительно включать диетические добавки. Известно много таких диетических добавок. Они могут включать, например, витамины, минералы, жирную(ые) кислоту(ы) (масла), биотип, селен и тому подобное.

Особенно предпочтителен витамин С. Помимо того, что oн представляет собой полезную диетическую добавку, он может устранять нежелательное реактивное вещество, кислород, из раствора этена в жидкости. Витамин С может также повышать биодоступность этена у принимающего его человека.

В еще одном воплощении стабильный при хранении раствор может также содержать одно или более дополнительных активных веществ. Эти другие вещества могут действовать с повышением эффекта стабильного при хранении раствора аддитивным или синергическим образом. Они могут включать соединения или вещества, которые дают полезный метаболический, физиологический, профилактический и/или терапевтический эффект. Они могут включать противоинфекционные средства, другие вещества с антимикробной эффективностью, препараты для облегчения боли и органические экстракты. Примеры этих активных веществ включают хинин, аспирин, кофеин, глюкозу и другие сахара, интерфероны и настойки (например, эхинацеи).

Стабильный при хранении раствор данного изобретения дает полезный метаболический эффект в организме животного-хозяина, которому он вводится. Полезный метаболический эффект может включать стимуляцию иммунной системы, подавление или снижение уровней размножения (присутствия) нежелательных микроорганизмов или другие профилактические или терапевтические эффекты, такие как снижение температуры тела или снятие депрессии. Все эти полезные эффекты улучшают метаболические функции организма-хозяина.

Например, одним из метаболических эффектов, который может наблюдаться при использовании методов данного изобретения и который может обеспечивать терапевтический эффект в организме-хозяине с высокой лихорадкой, является снижение температуры тела у организма-хозяина. Это может быть особенно важным при текущем состоянии с высокой лихорадкой у организмов-хозяев. Другим терапевтическим эффектом, который может наблюдаться, является уменьшение опухания лимфатических узлов. При использовании способов данного изобретения наблюдалось облегчение симптомов при инфекциях, вызванных вирусами бородавок и ветряной оспы. Интересные данные, полученные у участников испытаний с инфекцией ВИЧ и гепатитом С, также наводят на мысль о применимости этена и этеносодержащих растворов этого изобретения для облегчения депрессии.

Поэтому в основном аспекте данное изобретение обеспечивает способ улучшения метаболических функций в организме-хозяине, который включает введение в организм-хозяин эффективного количества стабильного при хранении раствора этого изобретения.

Из-за высокой реактивности этена также ожидается, что растворы этого изобретения найдут применение в качестве детоксикаторов. Однако этеносодержащие растворы в первую очередь предназначены для использования в качестве тонизирующего раствора для потребления человеком.

Одним из свойств, которое проявляет стабильный при хранении раствор, является непосредственное антимикробное действие на многие микроорганизмы. Поэтому в одном из воплощений раствор является непосредственно действующим антимикробным веществом. Применение содержащих этен жидкостей в качестве непосредственно действующих антимикробных веществ в основном показано в PCT/NZ94/00151, который включен сюда в виде ссылки. Поэтому их можно использовать в качестве стерилизующего вещества или сурфактанта для любых целей, которые изложены в PCT/NZ94/00151.

Исходя из этого, в дополнительном аспекте это изобретение обеспечивает способ профилактики и/или терапии для лечения заболеваний или инфекций организма-хозяина путем оказания непосредственного антимикробного действия, причем этот способ включает введение в организм-хозяин эффективного количества стабильного при хранении раствора этого изобретения.

Микроорганизмы, которые проявили чувствительность к прямому антимикробному действию стабильного при хранении раствора этого изобретения, включают вирусы, такие как риновирусы, бактерии, такие как подвижные формы бацилл и кокки, грибы, такие как Candida albicans.

Стабильный при хранении раствор в основном предназначается для перорального приема. После приема этен из раствора может проникать в кровоток через кишечный тракт. Это может, в свою очередь, стимулировать выработку этена из пищевых веществ в кишечном тракте или может стимулировать выработку этена в организме.

Также предполагается, что раствор будет изготавливаться для введения непероральным путем, таким как внутривенное введение. Установлено, что этен более легко растворим в этиловом спирте. Непероральное введение может быть особенно приемлемо для больных, которые не способны принимать (проглотить) раствор.

Такой непероральный раствор может содержать, например, этен, растворенный в деионизированной воде, и этиловый спирт, но не содержит двуокись углерода. Приемлемым может быть следующий состав: 950 мл деиониэированной воды плюс 50 мл этилового спирта, в целом содержащий 150 мл (объем/объем) этена. Опытным специалистом легко могут быть получены другие подходящие составы.

Стабильный при хранении раствор может также использоваться в способах терапии сам по себе или в комбинации и/или в сочетании с другими активными веществами, как отмечено выше. Конкретно, предусматривается последовательное введение стабильного при хранении тонизирующего раствора и других активных веществ.

Этот раствор будет вводиться в количестве, достаточном для того, чтобы вызвать желаемый метаболичесский, профилактический или терапевтический эффект. В этой заявке все количества рассчитаны на средний вес взрослого человека в 70 кг. Особенно приемлемым количеством раствора является количество, которое обеспечивает абсорбцию организмом-хозяином 300 мл газообразного этена на суточную дозу. Могут также применяться более низкие количества, например 25 мл в сутки. Суточная дозировка может определяться в соответствии с такими факторами, как вес пациента и клиническая эффективность, наблюдаемая от назначаемого размера дозы.

Суточное количество раствора может, предпочтительно, вводиться один раз в день. Однако введение может быть кумулятивным, путем многократного введения дозы в течение суточного курса или даже в виде введения одной дозы на протяжении несколько дней. Например, для лечения инфекционного мононуклеоза может быть достаточна суточная доза 1х300 мл газообразного этена, даваемая в течение двух дней.

Срок, в течение которого вводится раствор (т.е. число дней), будет зависеть от характера эффекта, который нужно достичь, или от инфекции или болезни, в отношении которых желательны профилактика и/или терапия. Можно применять также и прерывистые режимы дозирования, например через день, в течение недели через неделю, или в течение месяца через месяц.

Во всяком случае, размер дозы и режим лечения будут разработаны так, чтобы обеспечить любую желаемую клиническую эффективность. Поэтому предусматриваются различные размеры доз и режимы лечения.

Как указано выше, этен также находит применение в: способах терапии и/или профилактики при лечении заболеваний или инфекций организма-хозяина или для улучшения метаболических функций, иначе, а не через оказание непосредственного антимикробного действия; способах инициации и/или индукции организма-хозяина к повышению защитного ответа, более конкретно, защитного иммунного ответа против заболевания или инфицирующих микроорганизмов; способах введения этена в организм-хозяин, в котором этен обеспечивает непрямую стерилизацию или подавляющее микроорганизмы действие, причем такое действие является профилактическим и/или терапевтическим и такое действие вызывается системными факторами организма-хозяина, например Т-лимфоцитами или лейкоцитами, потенцированными в организме-хозяине путем введения этена; способах терапии и/или профилактики от микробных инфекций организма-хозяина, которые включают стадии:
(а) введение эффективного количества этена указанному организму-хозяину для потенцирования и/или инициации имунной системы организма-хозяина с целью создания у хозяина защитного иммунного ответа от указанной микробной инфекции; и
(б) введение количества активного вещества, которое обладает прямым антимикробным действием, достаточным для стерилизации или по меньшей мере подавления микроорганизмов.

Существенная стадия этих последних аспектов изобретения состоит во введении этена в организм-хозяин, нуждающийся в метаболическом, профилактическом или терапевтическом лечении. Чтобы облегчить это, этен можно вводить в любой удобной форме. Наиболее удобно вводить этен в форме композиции, в которой этен растворен в любой подходящей жидкости, такой как вода. Подходящей может быть композиция, содержащая этен в воде, о которой сообщается в PCT/NZ94/00151. Устойчивый при хранении раствор данного изобретения особенно приемлем по причине повышенной стабильности и/или чистоты по сравнению с раствором, содержащим неочищенную жидкость.

Будет также приемлемо, чтобы этен мог вводиться непосредственно хозяину путем ингаляции, предпочтительно в смеси с другим газом. Желательно, чтобы могло использоваться количество этена, равное 5,6% или менее в воздухе, но воздух может быть заменен другими подходящими газами или газом, таким как кислород. Может использоваться любой обычный путь введения, например вдыхание через легкие. Абсорбцию у реципиента можно рассчитать на основе того, что средняя максимальная степень при ингаляции для взрослого человека составляет 25 л газообразного этена в час, и что степень вентиляции легких взрослого человека составляет в среднем 450 л в час. Размеры доз можно поэтому легко рассчитать на основании времени/концентрации этена/степени вентиляции. Обычно вдыхание является менее предпочтительным способом введения.

Этен будет вводиться в количестве, достаточном, чтобы вызвать желательный метаболический, защитный или иммунный ответ. Как отмечено выше, в этой заявке все количества рассчитаны на средний вес взрослого человека, равный 70 кг. Особенно подходящее количество составляет 300 мл газа, абсорбированного организмом-хозяином в сутки, но могут применяться более низкие количества, например 25 мл в сутки. Будет необходимо определение суточной дозировки в соответствии с факторами, такими как вес организма-хозяина и наблюдаемая клиническая эффективность от какого-либо размера получаемой дозы.

Суточное количество этена может вводиться однажды в сутки, и это фактически предпочтительно, когда используется композиция, которая описана в PCT/NZ94/00151, или раствор данного изобретения. Однако введение может быть кумулятивным путем использования многократного введения дозы в течение курса в один день или даже одной дозы за несколько дней.

Период времени, в течение которого вводится этен (т.е. число дней) будет зависеть от результата, которого хотят достигнуть и/или от природы инфекции или заболевания, терапия или профилактика которых желательна. При ВИЧ/СПИД, например, режим лечения может соответственно состоять из 42 дней при введении 300 мл ежедневно, и за этим может следовать период отказа от введения, например, в 28 дней, с последующим дополнительным периодом лечения этеном. При некоторых обстоятельствах может быть необходимо вводить этен ежедневно в течение неопределенного периода времени.

Как отмечено выше, для способов прямого действия предполагается, что размер дозы и режим лечения будет отработан так, чтобы обеспечить любую данную клиническую эффективность, которая может быть желательна. Предусмотрены различные размеры доз и режимы лечения.

Этен можно вводить как единственное активное вещество или в комбинации и/или в соединении с другими активными веществами. Например, при лечении ВИЧ/СПИД введение этена в сочетании и/или в комбинации с одним или более веществ, например с АЗТ, обладающим прямым антивирусным действием, может давать синергический эффект и может обеспечивать терапевтическую эффективность, общий уровень которой превышает сумму эффективностей от отдельных веществ, когда они используются при монотерапии. При этом применении этен может действовать так, что повышает эффект вещества, обладающего прямым антимикробным действием. Это усиленный эффект может быть не только повышенной антимикробной эффективностью, но может включать способность снижать токсичность в организме-хозяине любого вводимого активного (включая токсичное) вещества, например АЗТ.

Способность реактивного этена снижать токсичность для организма-хозяина другого активного вещества может вызываться, например, способностью этенов к трансметилированию метильных групп. Такая метильная группа обнаружена в активном соединении АЗТ. Токсичность метильных групп может быть снижена или устранена путем действия удлинения молекулярной цепи, такого, которой может обеспечить этен.

Как описано более детально в экспериментальном разделе ниже, специфическая терапия с использованием двух активных веществ, этена и АЗТ, в соответствии с которой этен вводился в течение 6 недель с последующим введением АЗТ в течение 6 недель, как было обнаружено, дает поразительное восстановление числа Т-клеток CD4, причем восстановление в течение периода времени, который значительно выше (в соответствии с опубликованными данными) того, который ожидался бы при монотерапии АЗТ.

Как для прямого, так и непрямого способов профилактики и терапии этого изобретения прогнозируется, что этен или этеносодержащие растворы могут иметь большую эффективность, если будут применяться с самого начала инфекции, когда микробная нагрузка (обсемененность) низка. Это, в частности, может быть особенно в случае ВИЧ инфекции, когда вирусная нагрузка относительно низка на ранних стадиях по сравнению с терминальными стадиями, когда вирусная нагрузка очень высока и имеет место недостаточность иммунной системы.

Профилактический и/или терапевтический эффект этена, что касается непрямых методов этого изобретения, предположительно повышается с помощью способности этена индуцировать в организме-хозяине повышенную продукцию системных факторов, участвующих в усилении иммунного ответа, в частности тех факторов, которые участвуют в усилении гуморального иммунного ответа. Примером клеточной популяции, которая, как обнаружено, увеличивается, является популяция Т-лимфоцитов CD4 у людей. Другие факторы включают лейкоциты, такие как базофилы и нейтрофилы, фагоциты и ферменты, такие как аланинаминотрансфераза.

Сделано теоретическое предположение о том, что повышенная продукция иммунных клеток является частью общего воздействия этена, которое он оказывает на организм-хозяин в повышении/стимуляции аминокислотного/протеинового синтеза (включая ферменты, такие как аланинаминотрансфераза). Однако изобретение никоим образом не ограничивается этой теорией.

Кроме того, сделано предположение, что микроорганизмы могут быть подавлены путем реакции этена с АТФ, что препятствует репликации этой АТФ в микроорганизме. И опять изобретение никоим образом не ограничивается этой теорией.

Изобретение будет теперь проиллюстрировано путем обращения к следующими неограничивающим примерам.

Неограничивающие примеры применения изобретения
Три ВИЧ+ добровольца, закодированные под именами Том, Ян и Джон, слепым образом участвовали в испытании композиции, содержащей растворенный этен. Подсчет количества Т-лимфоцитов CD4 использовали в качестве показателя, причем любое увеличение числа клеток или замедление их потери свидетельствует о пользе применения.

Композицию готовили, используя стерильную профильтрованную дехлорированную воду, которую затем охлаждали до 3^oС и пропускали через карбонатор, содержащий этен и примесь двуокиси углерода, чтобы осуществить абсорбцию этена в жидкость на уровне примерно 40% газообразного этена по объему в жидкости при обычном давлении. Эту композицию затем упаковывали в 745-миллилитровые флаконы, давая 300 мл этена на флакон объем/объем жидкости.

В этих примерах число клеток дано в клетках на микролитр крови, чаще выражаемый как мм³.

Пример 1
Участник испытания Том принимал один флакон ежедневно в течение четырех недель - срока, во время которого наблюдалось очевидное (3,6%) снижение скорости падения числа клеток СВ4. Через 18 ч от начала терапии непрерывная диарея, от которой он страдал, прекратилась, и инфекция, вызванная оральной Candida albicans, исчезла. Во время терапии он набрал 2 кг веса. Шесть недель спустя он получил еще один двухнедельный курс пероральной терапии. Во время шестинедельного интервала он болел. Во время последнего двухнедельного испытания число клеток CD4 у него повышалось на 20 на мм и он набрал еще 2 кг веса. Это улучшение показало полное обращение потери клеток CD4 в существенное достижение. Во время курса введения АЗТ (зидовудина) по 500 мг в сутки сразу после финальных двух недель приема композиции с этеном число клеток CD4 у него повышалось на 210 через восемь недель, причем повышение примерно на 150 клеток свыше и выше максимальной степени улучшения, обычно наблюдаемого при монотерапии АЗТ. Это восстановление числа Т-клеток CD4 превышало на 23,5% результат более поздней комбинированной терапии АЗТ/ЗТЦ, которую он получил.

Пример 2
Участник испытания Ян принимал один флакон ежедневно в течение непрерывного шестинедельного периода. В течение этого срока не было никакого снижения числа клеток CD4, что является показателем стабилизации от их потери. В последующий восьминедельный срок число клеток CD4 у него повышалось на количество, равное 290. У Яна сохранялся неизменным обычный стиль жизни, например, курил, что могло отрицательно повлиять на степень улучшения его состояния, однако полезность этого изобретения снова была продемонстрирована этим результатом.

Пример 3
Участник испытания Джон также принимал один флакон в день в течение шести недель. Во время этого периода число клеток CD4 у него снизилось с 145 до 70. Среднее снижение числа клеток CD4 у него в течение предшествующих 11 недель, включающих 6 недель терапии, составляло 10,9 клеток в неделю (ч/н). Во время этого периода у него наблюдалось облегчение симптомов акне. При продолжении ежедневного режима дозирования в течение следующих четырех недель в конце десятой недели число клеток CD4 повысилось до 120, прирост 12,5 к/н, и было очевидным существенное снижение опухания лимфатических узлов во время медицинского обследования (опухание лимфатических узлов является симптомом ВИЧ инфекции, который становится более выраженным, когда заболевание прогрессирует). Продолжая этот режим введения до 17 недель, снизили число клеток CD4 у него до 80, снижение 5,7 к/н. В конце 26 недели число клеток CD4 у него снизилось до 40, снижение 4,4 CD4 к/н. В конце 31 недели число клеток CD4 у него стабилизировалось на 40, нулевая потеря к/н, и он набрал 2 кг веса. Во время последующих 8 недель лечения этеном он набрал еще 3 кг веса.

По данным на 1 мая 1997 г. этот участник испытания находился на ежедневной терапии этеном в течение 20 месяцев в сочетании с антибактериальной. Во время этого периода у него не было каких-либо инфекций, за исключением имеющейся ВИЧ. У него не было проявлений, связанных со СПИД, он набрал вес и сохранял хорошее состояние здоровья. Можно было наблюдать, что скорость потери клеток CD4 у него существенно снизилась во время терапии и, без сомнения, число клеток существенно повысилось в один из моментов.

На фиг. 1 представлена диаграмма течения болезни у испытуемых и показан иммунный ответ в отношении восстановления числа лимфоцитов CD4 и/или снижения скорости потери, в качестве примеров полезности этого изобретения.

Терапия (если таковая была), получаемая испытуемыми, показана как:
ЕН=Растворенный этен, АZT=зидовудин, ЗТЦ=ламивудин.

Пример 4
В качестве дополнительного примера было предпринято испытание на страдающем гепатитом С (неизвестный генотип). Суточную дозу в 230 мл газообразного этена растворяли в 745 мл очищенной воды без примеси двуокиси углерода.

Показателем инфекции было значение аланинаминотрансферазы (АЛТ). АЛТ является ферментом, в норме присутствующим в сыворотке крови и тканях, особенно в печени. Она выделяется в сыворотку в результате повреждения ткани и поэтому является хорошим показателем повреждения клеток (уровень инфекции) при гепатитной инфекции.

Во время первичной 18-дневной терапии наблюдалось облегчение симптомов инфекции. Действия кишечника оставались нормальными. Моча сохраняла нормальный цвет, вялость снижалась и функция печени улучшалась, участник испытания также сообщил, что он испытывает значительное снижение своей депрессии. К концу 4 недели показатель АЛТ снижался с 242 до 218 ед/л, показывая снижение инфекции. С 4 недели до конца 6 недели показатель АЛТ повышался с 218 до 303 ед/л. Подобный процент повышения показателя АЛТ мог наблюдаться у неинфицированных лиц, которые получали этен в том же самом соотношении доз. Стимулированный этеном (или заболеванием) синтез АЛТ, по-видимому, является промежуточным системным, иммунным ответом. В тканях и клетках, подвергшихся поражению, как при патогенной атаке, заметно повышается продукция этена. С 6 недели до конца 14 недели происходило существенное снижение показателя АЛТ с 303 до 93 ед/л. В течение недель с 14 по 16 снижение АЛТ ослабевало, снижаясь до 89 ед/л.

На фиг. 2 представлен в виде диаграммы ход терапии в сравнении с более ранней терапией интерфероном (9 млн ME еженедельно), полученной испытуемым. Что касается снижения показателя инфекции, этен в этом примере снизил показатель АЛТ на 153 ед/л по сравнению с 35 ед/л для интерферонов за тот же самый 16-недельный период испытания. В этом примере этен обеспечивал эффективность против гепатита С на 337% лучше, чем при терапии интерфероном. Этот пример дополнительно демонстрирует полезность этого изобретения.

Пример 5
В попытке определить какое, если оно существует, действие это изобретение имело бы на белые клетки крови (иммунные клетки), испытуемый получал четырехдневный курс тонизирующего напитка, содержащего 300 мл этена, растворенного в очищенной жидкости, на основе ежедневного приема. Образцы крови отбирали непосредственно перед и сразу же после курса препарата. Было отобрано пять образцов крови в течение шестимесячного периода для определения обычного среднего (О.С.) числа клеток у добровольцев, и нормальные пределы показателя у взрослых людей также представлены в виде числа клеток на микролитр (см. таблицу в конце описания).

Можно видеть, что имело место очень сильное увеличение числа фагоцитарных клеток (2) и (3).

Этот пример дополнительно представляет данные о пользе этого изобретения для стимуляции защитного ответа in vivo.

Пример 6
Этот пример демонстрирует наблюдаемый эффект приема тонизирующего напитка на снижение температуры тела. Добровольцу ставили реактивный термометр с жидкокристаллическим индикатором, калиброванный в десятых долях градуса Цельсия, и через 5 мин давали 745 мл тонизирующего раствора, содержащего 300 мл растворенного газообразного этена. Температура у добровольца была стабильной на уровне 37,2^oС в течение 5 мин перед началом испытания, и комнатная температура поддерживалась на уровне 25^oС. Наблюдались следующие изменения температуры тела:
Истекшие минуты - Температура
Начало - 37,2
3 - 37,1
12 - 36,9
24 - 37,1
35 - 37,2
В этот момент было предпринято несколько шагов по восстановлению циркуляции.

37 - 36,8
40 - 37,1
45 - 37,2
Температура снова стабилизировалась на 37,2^oС и доброволец принимал еще 300 мл растворенного газообразного этена тонизирующего напитка.

Начало - 37,2
1 - 37,1
43 - Внезапное понижение до 36,7
45 - 36,9
55 - Внезапное повышение до 37,1
140 - 37,2
В то время как требовалось только 45 мин для того, чтобы температура тела восстановилась после первой дозы, после второй дозы для восстановления температуры до 37,2 С требовалось 140 мин, на 211% больше. Этот пример демонстрирует реакцию между этеном и выделяющей энергию (тепло) молекулой аденозинтрифосфата (АТФ). Этот феномен наблюдался на активно ферментирующих дрожжах.

Пример 7
Этот пример демонстрирует, что удаление примесей, включая ионы, из соответствующей жидкости (в этом примере питьевой воды из городской магистрали водоснабжения) дает жидкость, которая при добавлении этена остается более химически устойчивой и стабильной при хранении по сравнению с таким же или подобным раствором, получаемым с использованием неочищенной водопроводной воды.

В этом примере использовали высокоочищенную водопроводную воду (некипяченую воду), имеющую проводимость, равную 148 микромо на сантиметр при 20^oС, рН 7,2 и рН 7,6 после удаления двуокиси углерода путем кипячения. Проводимость показывает высокое содержание ионов, тогда как рН показывает избыток гидроксильных ионов.

2 х 1-литровые колбы, содержащие 500 мл воды (1 х кипяченую и 1 х некипяченую) и 500 мл газообразного этена технической марки, энергично встряхивали, чтобы растворить этен, и затем сразу же определяли рН. В каждой наблюдалось повышение рН на 0,1.

В дополнительной колбе, содержащей 500 мл воды, которая была деионизирована, примеси из которой были удалены путем однократной дистилляции, с получением рН 7,0 и проводимостью, равной 0,1+ или -0,1 микромо на сантиметр, растворяли таким же образом 500 мл этена. Определение рН сразу же после этого не выявило изменений показателя. Это показывает реактивность этена в ионизированной воде, содержащей примеси, которые не выявляются в деионизированной воде. Примерно через 5 мин наблюдалось, что рН недеионизированных образцов возвращался к их соответствующему рН перед добавлением этена, что показывает, что произошла вторичная реакция.

Пример 8
380 л воды непосредственно из водопроводной сети кипятили, чтобы удалить примесь кислорода и угольной кислоты. Полученный рН был равен 7,6. 380 л газообразного этена и 760 л газообразной двуокиси углерода растворяли в воде, используя патентованный аппарат для насыщения жидкости газом "СЕМСО", а затем полученный раствор разливали в запечатываемые сверху бутыли, используя автоматическую установку для заполнения и укупорки.

В день розлива (1 день) рН растворов составляла 4,2 благодаря образованию угольной кислоты при добавлении двуокиси углерода и присутствию реактивного гидроксида кальция в жидкости. На 6 день рН упал до его ионного равновесия и стабилизировался на 4,1. Эти реакции не вовлекали этена. На 12 день рН повышался до 4,2, а на 40 день рН повышался до 4,3. Это повышение рН показывает химическую нестабильность в растворе и продолжающееся образование гидроксильных ионов. Через 9 месяцев хранения рН повышался до 4,9. При условии буферного действия сопутствующей угольной кислоты общее повышение рН означает значительную химическую нестабильность и нестабильность при хранении этого раствора. Часть раствора затем кипятили для удаления угольной кислоты и определяли рН. Показатель рН был равен 8,7 по сравнению с первоначальным, без угольной кислоты, рН, равным 7,6. Это общее повышение рН на 1,1 показывает большое повышение количества гидроксильных ионов в растворе во время срока хранения из-за химической нестабильности раствора. Было обнаружено, что в подобном растворе, приготовленном без включения этена в качестве иона-акцептора, рН оставался очень стабильным, повышаясь как максимум на 0,1 рН. Было обнаружено, что если соответствующую жидкость, в этом примере воду, подвергнуть процессу удаления примесей, особенно ионов, перед использованием для получения раствора этена в жидкости, то полученный таким образом раствор сохранял бы очень стабильный рН, с повышением рН через 6 месяцев хранения самое большее на 0,1, что дает, таким образом, химически более устойчивый и более стабильный при хранении раствор.

Пример 9
В этом примере показано, как соответствующая жидкость, вода, может быть переработана для удаления загрязнений. Воду пропускали через песчаный фильтр, содержащий песок соответствующего качества, для удаления взвешенных веществ, таких как растительный материал и т.д., затем пропускали через фильтр из активированного угля соответственных размеров и марки для удаления реактивных веществ, таких как хлор. Эффективность угольного фильтра должна регулярно контролироваться с помощью соответствующих реагентов для подтверждения полного удаления хлора из воды. В зависимости от типа и уровня растворенных веществ в воде, фильтрование через песок и активированный уголь может деионизировать воду на рН примерно 1,1. Если добавляются вспомогательные вещества, такие как улучшающие вкус вещества, их можно добавлять на этой стадии.

Воду затем пропускали через листовой или другой подходящий фильтр или фильтры, которые могут быть положительно заряженными или незаряженными. Предпочтительно, используется последовательность фильтров, причем номинальная характеристика задерживания начинается с 8 мкм и заканчивается при 0,2 мкм. По выходе из этих фильтров воду затем пропускали через слой смешанной ионообменной смолы до полного, насколько это возможно, удаления любых остающихся избыточных ионов. Выходящая после ионообменного слоя вода должна быть с нейтральным рН, то есть рН 7,0. Проводимость воды должна быть после этого менее 1 микромо на сантиметр. Чистота воды для любой данной проводимости будет нуждаться в определении путем лабораторного анализа. Например, прорыв угольной кислоты может повышать проводимость воды, но играет роль слабого реагента, если вообще играет такую роль, в растворах этена. Затем воду, предпочтительно, снова пропускают через фильтры, начиная с 1,2 и заканчивая 0,2 мкм.

Воду затем предпочтительно дегазировали для удаления реактивных веществ, таких как кислород и воздух, например. Для этого, при небольшом масштабе, например, воду переносят в цилиндрический конический резервуар из нержавеющей стали соответствующего размера, снабженный синтерированным элементом из нержавеющей стали в его основании. Резервуар и его содержимое подвергают давлению газообразного азота в 2 атм. Газообразный азот вводится в жидкость через синтерированный элемент, чтобы он проходил через жидкость в виде мелких пузырьков, которые вытесняют из жидкости кислород, затем он выпускается в атмосферу через снижающий давление клапан. Выпускаемый газ может быть возвращен, очищен и использован снова. Обычно такой способ может снизить уровни кислорода до 0,1 части на миллион. Жидкость затем, предпочтительно, стерилизуют с помощью УФ облучения. После этого вода готова для добавления этена и/или других газов.

Использование этого или похожих методов для получения очищенных и/или деионизированных жидкостей дает в результате растворы, которые при хранении в течение 12 месяцев, как было показано, не имеют значительного изменения рН в течение срока хранения, что указывает на превосходную химическую устойчивость и стабильность при хранении по сравнению с растворами, получаемыми без использования этого метода.

Промышленная применимость
Стабильные при хранении растворы этого изобретения могут найти широкое применение при подавлении микроорганизмов в жидкостях или их устранении из них. Более конкретно, это изобретение обеспечивает тонизирующие растворы для использования человеком. Они могут быть использованы в способах терапии и/или профилактики в качестве непосредственно действующего в человеческом организме антимикробного вещества. Представлены также другие непрямые способы терапии и профилактики, или усиления иммунной системы, включающие введение этена.

Также понятно, что объем изобретения не ограничивается вышеприведенными примерами и что могут быть произведены многочисленные модификации этих примеров без выхода из объема изобретения, который представлен в этом описании.

Формула изобретения

1. Стабильный при хранении раствор, содержащий этен, растворенный в подходящей водной жидкости со сниженной реактивностью, в котором уровень этена не изменяется существенно в течение более одного месяца с момента его приготовления.

2. Раствор по п.1, в котором уровень этена в растворе не изменяется существенно в течение более шести месяцев.

3. Раствор по п.1, в котором уровень этена в растворе не изменяется существенно в течение 12 месяцев.

4. Раствор по любому из пп.1-3, в котором жидкость является очищенной жидкостью.

5. Стабильный при хранении раствор, содержащий этен, растворенный в водной деионизированной жидкости.

6. Раствор по п.5, в котором жидкость имеет проводимость менее 50 микромо/см при 20^oС.

7. Раствор по п.6, в котором жидкость имеет проводимость менее 15 микромо/см при 20^oС.

8. Раствор по п.7, в котором жидкость имеет проводимость менее 3 микромо/см при 20^oС.

9. Раствор по п.5, в котором жидкость имеет содержание ионов около 500 мг/л или меньше при 10^oС и атмосферном давлении.

10. Раствор по п.9, в котором жидкость имеет содержание ионов около 14 мг/л или меньше при 10^oС и атмосферном давлении.

11. Раствор по любому из пп.1-10, в котором этен объединен с другим газом.

12. Раствор по п.11, в котором другой газ является диоксидом углерода.

13. Раствор по п. 12, в котором отношение этена к двуокиси углерода в газовой смеси составляет 1:2 (об/об).

14. Раствор по любому из пп.1-13, в котором жидкость является водой.

15. Раствор по любому из пп.1-14, который дополнительно включает одно или несколько других активных веществ, пищевых добавок или улучшающих вкус веществ.

16. Раствор по любому из пп.1-15, который дополнительно включает вещество, повышающее вязкость.

17. Раствор по п.16, который приготовлен для обеспечения 25-300 мл этена в качестве суточной дозы для взрослого пациента.

18. Способ улучшения метаболических функций в организме-хозяине, который включает стадию введения в организм-хозяин эффективного количества этена, характеризующийся тем, что улучшение метаболической функции достигается путем, отличным от оказания прямого антимикробного действия.

19. Способ по п.18, в котором улучшение метаболических функций представляет собой усиление иммунной системы.

20. Способ по п.18, в котором улучшение метаболических функций включает один или несколько из перечисленных эффектов, таких, как понижение температуры тела, снятие депрессии и уменьшение набухания лимфатических узлов.

21. Способ профилактики и/или лечения заболеваний или инфекций в организме-хозяине, отличный от оказания прямого антимикробного действия, который включает стадию введения в организм-хозяин эффективного количества этена.

22. Способ по п.21, в котором заболевание представляет собой ВИЧ, гепатит, инфекционный мононуклеоз, рак и простой герпес.

23. Способ по п.22, в котором заболеванием является ВИЧ.

24. Способ инициации и/или индукции организма-хозяина к усилению защитного ответа, который включает стадию введения в организм-хозяин эффективного количества этена.

25. Способ по п.24, в котором усиление ответа направлено против заболеваний и инфицирующих микроорганизмов.

26. Способ по п.24 или 25, в котором ответ является иммунным ответом.

27. Способ по п.26, в котором ответ является гуморальным иммунным ответом.

28. Способ по п.24, в котором защитный ответ представляет собой эффект заживления поврежденной ткани.

29. Способ по п.24, в котором защитный ответ представляет собой увеличение синтеза ферментов.

30. Способ по п.25, в котором защитный ответ включает увеличение фагоцитов и/или увеличение количества CD4 клеток.

31. Способ по любому из пп.18-30, в котором вводимый этен представляет собой раствор, содержащий этен, стабильный при хранении, охарактеризованный в любом из пп.1-17.

32. Способ по любому из пп.18-31, в котором одно или несколько других активных веществ или пищевых добавок вводятся отдельно или вместе.

33. Способ по п. 32, в котором активное вещество выбрано из группы, состоящей из 3'-азидо-3'-деокситимидина, пенициллина, (2R-цис)-4-амино-1-(2-гидроксиметил)-1,3-(оксатиолан-5-ил)-2-(1Н-пиримидинона).

34. Способ по любому из пп.18-33, в котором суточную дозу для взрослого, составляющую 25-300 мл этена, вводят указанному организму-хозяину.

35. Способ по п.34, в котором суточную дозу для взрослого, составляющую 300 мл этена, вводят указанному организму-хозяину.

36. Способ по любому из пп.18-35, в котором организм-хозяин является организмом человека.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3