Система доставки лекарств для гидрофобных лекарственных препаратов

Изобретение относится к области фармации. Сущность его заключается в разработке композиций, включающих микроагрегаты, содержащие гидрофобные лекарственные препараты, а также способы их производства. Такие микроагрегаты включают мицеллярные структуры или их комбинацию с микросомами, составляющие эффективный носитель доставки для гидрофобного агента. Способы производства микроагрегатов включают использование предпочтительных липидных соединений и условий обработки, способствующих улучшенной фильтрационной стерилизации. Технический результат - повышение эффективности доставки лекарственного средства, усиления фильтрационной стерилизации. 5 н. и 31 з.п. ф-лы, 1 ил.

 

Область изобретения

Изобретение относится к растворимым в воде микроагрегатам из нерастворимых в воде, плохо растворимых или иным образом гидрофобных агентов и фосфолипидов или липидов, которые можно применять в фармации, сельском хозяйстве или в промышленности. Указанные микроагрегатные композиции могут применяться для доставки гидрофобных препаратов в виде фармацевтической композиции, гидрофобных соединений, относящихся к росту растения, являющегося продуктом сельского хозяйства, и гидрофобных реагентов для промышленного материала. Кроме того, микроагрегаты изобретения включают комбинации естественных и/или синтетических фосфолипидов, которые обеспечивают возможность агрегации с гидрофобными агентами для получения мицелл, липосом и их смесей. Определенные комбинации гидрофобных агентов и фосфолипидов или липидов продуцируют микроагрегаты, которые представляют собой эффективные носители доставки указанных соединений.

Кроме того, изобретение относится к способам получения указанных микроагрегатов в качестве системы доставки. Данные способы включают микрофлюидизацию (измельчение струей жидкости), смешивание с высоким сдвигом и обработку ультразвуком. Конкретные способы, включающие применение определенных комбинаций гидрофобных агентов и фосфолипидов или липидов, обеспечивают возможность широкомасштабного получения эффективных носителей для доставки гидрофобных агентов.

Уровень техники

В данной области известно широкое множество активных гидрофобных или иначе нерастворимых в воде агентов. Аналогичным образом осознается необходимость в доставке таких активных агентов в основанные на воде или другие водные окружающие среды. Поэтому было разработано множество систем в качестве носителей для доставки таких агентов. Они включают применение органических растворителей, смеси воды и диспергирующих средств, смеси воды и органического растворителя (такие как совместные растворители), эмульсии, липосомы и мицеллы. Однако каждая из указанных систем имеет ограничения, возникающие из соображений, таких как степень нерастворимости в воде и окружающая среда, в которую желательна доставка.

Гидрофобные агенты в липосомах представлены, например, в патенте США № 4776991, выданном Farmer et al., в котором раскрыта широкомасштабная инкапсуляция гемоглобина. Kappas et al. в патенте США № 5010073 описывают получение липосом, содержащих металлопорфирин с яичным фосфатидилхолином ("ЕРС"), используемым в качестве липида. Schneider et al. в патенте США № 5270053 раскрывают липосомные композиции, которые, как сказано, лишены твердых частиц и крупных липидных агрегатов. Parikh et al. в патенте США №5922355 раскрывают микрочастицы, включающие нерастворимые вещества. Lasic (Nature, Vol.355, pp.379-380, (1992)) описывает применение смешанных мицелл, включающих лекарственное средство и биологические липиды.

Аналогичным образом, мицеллы также применялись для доставки лекарственных средств пациентам (Brodin et al., Acta Pharm. Seuc. 19 267-284 (1982)), и мицеллы применялись в качестве носителей препаратов и для целевой доставки лекарственных препаратов (Supersaxo et al., Pharm. Res. 8:1286-1291 (1991)), включая противораковые лекарственные средства (Fung et al., Biomater. Artif. Cells. Artif. Organs 16:439 et.seq. (1988) и Yokoyama et al., Cancer Res. 51:3229-3236 (1991)).

Гидрофобные агенты, представляющие большой интерес, включают основанные на полипиролловом макроцикле фотосенсибилизирующие соединения и, в частности, зеленые порфирины, такие как BPD-MA (кольцо А одноосновной кислоты производного бензопорфирина, также известное по его родовому названию как вертепорфин). В течение некоторого времени было известно, что указанные соединения можно применять в комбинации со светом для лечения и диагностики разнообразных состояний, включая опухоли, ангиогенез и неоваскуляризацию, рестеноз и атеросклеротические бляшки и ревматоидный артрит. Порфирины имеют естественную тенденцию "локализоваться" в злокачественной или пролиферирующей ткани, где они поглощают свет при определенных длинах волн при облучении. Поглощенный свет может привести к цитотоксическому эффекту в клетках и соседних клетках, в которых локализовались порфирины (см., например, Diamond et al., Lancet, 2:1175-77 (1972). Dougherty et al., "The Science of Photo Medicine", 625-38 (Regan et al. eds. 1982); и Dougherty et al., "Cancer: Principles and Practice of Oncology"' 1836-44 (DeVita Jr. Et al. eds. 1982)). Предполагается, что цитотоксический эффект порфиринов связан с образованием синглетного кислорода при воздействии света (Weishaupt et al., Cancer Research, 36:2326-29 (1976)).

Соответственно, препараты, содержащие порфирины, можно применять при диагностике и выявлении важных клеток и ткани (см., например, "Porphyrin Photosensitization", Plenum Press (Kessel et al. eds. 1983)), такие как клетки и ткани, относящиеся к опухолям, растущей сосудистой сети, блокаде артерий и аутоиммунитету. Подобные фотосенсибилизаторы применяли при выявлении и лечении атеросклеротических бляшек, как раскрыто в патентах США № 4512762 и 4577636. В дополнение к системному применению для диагностики и лечения различных состояний порфирины можно применять при различных других видах терапевтического применения. Соединения порфирина применялись местно для лечения различных кожных заболеваний, как раскрыто в патенте США № 4753958.

Ряд фотосенсибилизирующих препаратов порфирина был раскрыт для терапевтических видов применения. Фотосенсибилизирующий препарат, широко применявшийся на заре фотодинамической терапии как для выявления, так для лечения, представлял собой неочищенное производное гематопорфирина, также называвшееся производным гематопорфирина ("HPD") или Lipson-производным, полученным, как описано Lipson et al., J. Natl. Cancer Inst., 26:1-8 (1961). Очищенная форма активного компонента (компонентов) HPD была получена Dougherty и сотрудниками доведением рН для того, чтобы вызвать агрегацию, с последующим выделением агрегата, как раскрыто в патентах США № 4649151, 4866168, 4889129 и 4932934. Очищенная форма данного продукта применяется клинически под торговой маркой Photofrin® (Axcan Pharmaceuticals), который представляет собой порфимернатрий.

Особый интерес представляет группа модифицированных порфиринов, известных как "зеленые порфирины" (Gp), имеющие один или более максимумов поглощения приблизительно от 670 до 780 нм. Было показано, что указанные соединения Gp придают цитотоксичность против клеток-мишеней при концентрациях ниже, чем концентрации, требуемые для гематопорфирина или HPD. Соединения Gp можно получить с использованием реакций Дильса-Альдера для порфирина с различными производными ацетилена в соответствующих условиях. Предпочтительными формами Gp являются производные гидромонобензопорфирина ("BPD"), а также, в частности, BPD-MA, EA6 и В3. Получение и использование соединений Gp и BPD раскрыты в патентах США № 4920143, 4883790 и 5095030, включенных в описание в качестве ссылки. Получение и использование ЕА6 и В3 раскрыты соответственно в патентах США № 6153639 и 5990149, также включенных сюда в качестве ссылки.

Многие желательные гидромонобензопорфириновые фотосенсибилизаторы, такие как BPD-MA, являются не только нерастворимыми в воде при физиологических значениях рН, но также являются нерастворимыми в (1) фармацевтически приемлемых водно-органических совместных растворителях, (2) водных полимерных растворах и (3) растворах поверхностно активных веществ/мицелл. Недавно было показано, что инкапсуляция определенных лекарственных препаратов в липосомы перед введением оказывает заметный эффект на фармакокинетику, тканевое распределение, метаболизм и эффективность терапевтического средства. С целью увеличения опухолевой избирательности порфириновых фотосенсибилизаторов соединения порфирина включали в однослойные липосомы, что приводило к большему накоплению и более продолжительной задержке фотосенсибилизатора как в культивируемых злокачественных клетках, так и в экспериментальных опухолях in vivo (Jori et al., Br.J.Cancer, 48:307-309 (1983); Cozzani et al., In Porphyrins in Tumor Phototherapy, 177-183, Plenum Press (Andreoni et al. eds. 1984). Указанное более эффективное нацеливание на опухолевые ткани порфиринов, ассоциированных с липосомами, может происходить частично вследствие специфической доставки фосфолипидных везикул к сывороточным липопротеидам, которые, как было показано, взаимодействуют предпочтительно с гиперпролиферативной тканью, такой как опухоли, через опосредованный рецепторами эндоцитоз. Таким образом, была увеличена избирательность захвата порфирина опухолями по сравнению с фотосенсибилизаторами, растворенными в водном растворе (см. Zhou et al., Photochemistry and Photobiology, 48:487-92 (1988).

Соответственно, были приготовлены композиции гематопорфирина и простых диметиловых эфиров гематопорфирина в однослойных везикулах дипальмитоилфосфатидилхолина (DPPC) и липосомах димиристоила (DMPC) и дистеароилфосфатидилхолина (DSPC) (Zhou et al., см выше; Richelli, New Directions in Photodynamic Therapy, 847:101-106 (1987); Milanesi, Int. J.Radiat. Biol., 55:59-69 (1989). Аналогичным образом были приготовлены композиции НР, порфимернатрия и тетрабензопорфиринов в липосомах, состоящих из яичного фосфатидилхолина (ЕРС) (Johnson et al., Proc. Photodynamic Therapy: Mechanisms II, Proc. SPIE-Int. Soc. Opt. Eng., 1203:266-80 (1990). Кроме того, BPD-MA может быть "солюбилизирован" в концентрации около 2,0 мг/мл в водном растворе с использованием соответствующей смеси фосфолипидов с образованием инкапсулирующих липосом. Такие "солюбилизированные" липосомные композиции пригодны для парентерального введения.

Далее были приготовлены лиофилизированные фармацевтические композиции, включающие порфириновый фотосенсибилизатор, дисахарид или полисахарид и один или более фосфолипидов (таких как EPG и DMPC). Данные композиции образуют липосомы, содержащие эффективное количество порфиринового фотосенсибилизатора после растворения в подходящем водном носителе, и описаны в патенте СЩА № 6074666, выданном Desai et al., который включен в качестве ссылки. Способы крупномасштабного производства липосом DMPC/EPG, содержащих фотосенсибилизатор, раскрыты в патенте США № 5707608, который включен в качестве ссылки в полном объеме.

Проблема заключалась в том, чтобы найти подходящие фармацевтические композиции для фотосенсибилизаторов на основе гидрофобного полипирролового макроцикла, которые могут стерилизоваться фильтрацией и лиофилизироваться, а также могут быть быстро растворены (восстановлены) в водной среде перед введением, в то же самое время сохраняя размер мелкой частицы после регидратации. Фоточувствительные соединения, такие как вертопорфин (BPD-MA) и QLT 0074 (EA6), должны быть лиофилизированы для хранения, потому что они лабильны в водной среде.

Сущность изобретения

Настоящее изобретение предоставляет фосфолипидную композицию, в которую могут быть включены гидрофобные фотосенсибилизаторы, которые могут перерабатываться в устойчивый липосомный продукт, достаточно маленький для того, чтобы быть стерилизованным фильтрацией, лиофилизированным для хранения и который быстро бы растворялся в водной среде для введения, в то же самое время сохраняя маленький размер частиц. Первоначально считалось, что фосфолипиды выбора должны содержать только насыщенные липиды, потому что насыщенные липиды более устойчивы, исключая необходимость в антиоксидантах в фармацевтическом препарате. Первоначальные попытки создания композиции с использованием насыщенных фосфолипидов не удались. К удивлению, было обнаружено, что присутствие, по меньшей мере, некоторого количества ненасыщенного липида в композиции было существенно для получения устойчивого, качественного продукта, который бы оставался интактным, перенеся процесс лиофилизации. Кроме того, было обнаружено, что присутствие, по меньшей мере, некоторых фосфолипидов, имеющих отрицательно заряженные полярные головные группы, способствовало устойчивости композиции.

Другим полностью неожиданным обнаруженным фактом было то, что образующие двухслойную мембрану фосфолипиды, включающие долю ненасыщенных заряженных липидов, были способны приобретать мицеллярную структуру (с включением гидрофобной молекулы или без включения ее), если материал был подвергнут высокоэнергетическому процессу, такому как микрофлюидизация. Считают, что производство мицелл из образующих двухслойную мембрану липидов является абсолютно новым и его нельзя было бы прогнозировать по данным литературы о липидах, образующих двухслойную мембрану.

Настоящее изобретение относится к микроагрегатам липидов и гидрофобных агентов. В частности, микроагрегаты получают комбинированием фосфолипидов и активных гидрофобных соединений. Такие композиции могут применяться в любой терапевтической, сельскохозяйственной или промышленной области, и они, по существу, являются носителями доставки для активных гидрофобных агентов. Предпочтительно, микроагрегаты включают мицеллы и/или маленькие липосомы, содержащие терапевтически приемлемое количество гидромонобензопорфиринового фотосенсибилизатора. Липиды, используемые для продуцирования микроагрегатов, включают ненасыщенные липиды и могут быть стабилизированы присутствием антиоксидантов. Предпочтительно, микроагрегаты включают смесь насыщенных и ненасыщенных липидов. Предпочтительно, микроагрегаты включают фосфолипиды, имеющие головную группу, которая отрицательно заряжена в диапазоне рН от 5 до 7. Альтернативно, микроагрегаты могут включать как мицеллы, так и липосомы, полученные из той же комбинации фосфолипидов, или содержащие ее.

Настоящее изобретение также относится к способам получения микроагрегатов, включающих липиды и гидрофобные агенты. Было обнаружено, что при соответствующем выборе липидов, солевых условий, температуры и способа уменьшения размера можно получить микроагрегаты, включающие различные количества липосом и мицелл.

Соответствующим образом отобранные комбинации липидов, низкосолевых условий и высокоэнергетического процесса, такого как микрофлюидизация, могут привести к получению преимущественно мицеллы, включающей микроагрегатные композиции.

Микроагрегаты изобретения обеспечивают почти 100% включение гидрофобного агента, такого как гидромонобензопорфириновый фотосенсибилизатор, который может быть дорогим и обычно требует для производства сложной процедуры синтеза. Таким образом, необходима небольшая переработка и имеется очень небольшой расход фотосенсибилизатора. Кроме того, ввиду маленького размера частиц, настоящие микроагрегаты проявляют улучшенную возможность фильтрации, которая важна при получении больших количеств содержащих фотосенсибилизатор носителей для доставки. Более того, микроагрегаты сохраняют свой маленький размер после лиофилизации и восстановления в водной среде для фармацевтической доставки. Такие фотосенсибилизирующие микроагрегатные композиции можно применять при опосредовании разрушения нежелательных клеток или тканей или других нежелательных материалов или для выявления их присутствия посредством флюоресценции после соответствующего облучения. Особенно предпочтительные гидромонобензопорфирновые фотосенсибилизаторы, применяемые в практике данного изобретения, включают указанные соединения, имеющие один или более максимумов поглощения света в диапазоне от 670 до 780 нм.

Другие цели, признаки и преимущества очевидны из следующих описаний различных вариантов реализации и сопровождающего чертежа, который дает графическое представление ³¹Р-ЯМР липосом и мицелл в присутствии Mn²⁺.

Подробное описание изобретения

Изобретение относится к растворимым в воде микроагрегатам (МА) гидрофобных агентов и фосфолипидов или липидов. Растворимые в воде микроагрегаты представляет собой те, которые могут смешиваться с водой или с другими водными растворами. Микроагрегаты относятся к агрегатам субмикронного размера, имеющим правильную или неправильную и сферическую или несферическую форму. Для агрегатов, формой близкой к сферической, приблизительные диаметры составляют менее чем 1 мкм. Для в значительной степени несферических агрегатов приблизительный диаметр вращения агрегата составляет менее чем 1 мкм. Агрегаты относятся к композициям, включающим любой агрегированный комплекс составляющих молекул. Гидрофобные агенты относятся к тем, которые плохо растворимы (менее, чем 5 мг/мл воды) или нерастворимы в воде или других водных растворах.

Гидрофобные агенты для получения композиций в МА по изобретению включают любые, которые можно применять в фармации, сельском хозяйстве или промышленности. Они включают биологически активные или другим образом полезные молекулы, фармацевтические препараты, агенты для визуализации и действующие, а также предшественники и пролекарства таких веществ. Предпочтительными гидрофобными агентами являются агенты с биологической активностью или возможностью другого применения для людей и других живых организмов. Они включают агенты, которые представляют собой лечебные препараты в медицине, ингредиенты в косметике и пестициды и гербициды в сельском хозяйстве. Примеры таких агентов включают агонисты и антагонисты, обезболивающие и противовоспалительные агенты, анестетики, антиадренергические и антиаритмические средства, антибиотики, антихолинергические и холиномиметические агенты, противосудорожные агенты, антидепрессанты, антиэпилептические средства, противогрибковые и противовирусные средства, антигипертензивные средства, антимускариновые и мускариновые средства, антинеопластические средства, антипсихотические средства, анксиолитики, гормоны, снотворные и седативные средства, иммуносуппрессивные и иммуноактивные средства, нейролептические средства, средства, блокирующие нейроны и питательные вещества. Особенно предпочтительные средства включают порфириновые фотосенсибилизаторы, такие как "зеленые порфирины", такие как BPD-MA, EA6 и B3. В целом, любое полипиррольное макроциклическое фоточувствительное соединение, которое является гидрофобным, можно применять в изобретении.

Примеры указанных и других фотосенсибилизаторов для применения в настоящем изобретении включают, но не ограничиваются, ангелицины, некоторые биологические макромолекулы, такие как липофусцин; реакционные центры фотосистемы II и реакционные центры фотосистемы II D1-D2-cyt b-559, халкогенапириллиевые красители, хлорины, хлорофиллы, кумарины, цианины, определенные ДНК и родственные соединения, такие как аденозин; цитозин; 2'-дезоксигуанозин-5'-монофосфат; дезоксирибонуклеиновая кислота; гуанин; 4-тиоуридин; 2'-тимидин-5'-монофосфат; тимидилил(3'-5')-2'-дезоксиаденозин; тимидилил(3'-5')-2'-дезоксигуанозин; тимин и урацил, определенные лекарственные препараты, такие как адриамицин; афлоквалон; амодиаквин дигидрохлорид; хлороквин дифосфат; хлорпромазин гидрохлорид; дауномицин; дауномицинон; 5-иминодауномицин; доксициклин; фуросемид; гилвокарцин М; гилвокорцин V; гидроксихлороквин сульфат; люмидоксициклин; мефлохин гидрохлорид; меквитазин; мербромин (меркурохром); примаквин дифосфат; хинакрин дигидрохлорид; хинин сульфат и тетрациклин гидрохлорид, определенные флавины и родственные соединения, такие как аллоксазин; флавин мононуклеотид; 3-гидроксифлавон; лимихром; лимифлавин; 6-метилаллоксазин; 7-метилаллоксазин; 8-метилаллоксазин; 9-метилаллоксазин; 1-метиллимихром; метил-2-метоксибензоат; 5-нитросалициловая кислота; профлавин и рибофлавин, фуллерены, металлопорфирины, металлофталоцианины, производные метиленового синего, нафталимиды, нафталоцианины, определенные естественные соединения, такие как бис(4-гидрокси-3-метоксифенил)-1,6-гептадиен-3,5-дион; 4-(4-гидрокси-3-метоксифенил)-3-бутен-2-он; N-формилкинуренин; кинуреновая кислота; кинуренин; 3-гидроксикинуренин; DL-3-гидроксикинуренин; сангвинарин; берберин; карман и 5,7,9(11),22-эргостатетраен-3β-ол, производные нильского синего, NSAID (нестероидные противовоспалительные препараты), периленхиноны, фенолы, феофорбиды, феофитины, димеры и конъюгаты фотосенсибилизаторов, фталоцианины, порфицены, порфирины, псоралены, пурпурины, хиноны, ретиноиды, родамины, тиофены, вердины, витамины и ксантеновые красители (Redmond and Gamlin, Photochem. Photobiol., 70(4):391-475 (1999)).

Иллюстративные ангелицины включают 3-ацето-ангелицин; ангелицин; 3,4'-диметилангелицин; 4,4'-диметилангелицин; 4,5'-диметилангелицин; 6,4'-диметилангелицин; 6,4-диметилангелицин; 4,4',5'-триметилангелицин; 4,4',5'-триметил-1'-тиоангелицин; 4,6,4'-триметил-1'-тиоангелицин; 4,6,4'-триметилангелицин; 4,6,5'-триметил-1'-тиоангелицин; 6,4,4'-триметилангелицин; 6,4',5'-триметилангелицин; 4,6,4',5'-тетраметил-1'-тиоангелицин и 4,6,4',5'-тетраметилангелицин.

Иллюстративные халкогенапириллиевые красители включают 4,4'-(1,3-пропенил)-бис[2,6-ди(1,1-диметилэтил)]-пирилийперхлорат; 2,6-бис(1,1-диметилэтил)-4-[1-[2,6-бис(1,1-диметилэтил)селенопиран-4-илиден]-3-пропенил-пирилийперхлорат; 2,6-бис-(1,1-диметилэтил)-селенопиран-4-илиден]-3-пропенил-пирилийгексафторфосфат; 2,6-бис-(1,1-диметилэтил)-селенопиран-4-илиден]-3-пропенил-пирилийгексафторфосфат; 2,6-бис(1,1-диметилэтил)-4-[1-[2,6-бис(1,1-диметилэтил)теллуропиран-4-илиден]-3-пропенил-пирилийперхлорат; 2,6-бис-(1,1-диметилэтил)-4-[1-[2,6-бис(1,1-диметилэтил)теллуропиран-4-илиден]-3-пропенил-пирилийгексафторфосфат; 2,6-бис(1,1-диметилэтил)-4-[1-[2,6-бис(1,1-диметилэтил)тиапиран-4-илиден]-3-пропенил-пирилийперхлорат; 2,6-бис-(1,1-диметилэтил)-4-[1-[2,6-бис(1,1-диметилэтил)селенопиран-4-илиден]-3-пропенил-селенопирилийгексафторфосфат; 2,6-бис-(1,1-диметилэтил)-4-[1-[2,6-бис(1,1-диметилэтил)селенопиран-4-илиден]-3-пропенил-селенопирилий; 2,6-бис-(1,1-диметилэтил)-4-[1-[2,6-бис(1,1-диметилэтил)-4-[1-[2,6-бис(1,1-диметилэтил) теллуропиран-4-илиден]-3-пропенил]-селенопирилийперхлорат; 2,6-бис-(1,1-диметилэтил)-4-[1-[2,6-бис(1,1-диметилэтил)теллуропиран-4-илиден]-3-пропенил]-селенопирилийгексафторфосфат; 2,6-бис-(1,1-диметилэтил)-4-[2-[2,6-бис(1,1-диметилэтил)селенопиран-4-илиден]-4-(2-бутенил)]-селенопирилийгексафторфосфат; 2,6-бис-(1,1-диметилэтил)-4-[2-[2,6-бис(1,1-диметилэтил)селенопиран-4-илиден]-4-(2-пентенил)]-селенопирилийгексафторфосфат; 2,6-бис-(1,1-диметилэтил)-4-[1-[2,6-бис(1,1-диметилэтил)теллуропиран-4-илиден]-3-пропенил]-теллуропирилийтетрафторборат; 2,6-бис-(1,1-диметилэтил)-4-[1-[2,6-бис(1,1-диметилэтил)теллуропиран-4-илиден]-3-пропенил]-теллуроперилийгексафторфосфат; 2,6-бис-(1,1-диметилэтил)-4-[1-[2,6-бис(1,1-диметилэтил)теллуропиран-4-илиден]этил-теллуроперилийгексафторфосфат; 2,6-бис-(1,1-диметилэтил)-4-[1-[2,6-бис(1,1-диметилэтил)теллуропиран-4-илиден]метил-теллуроперилийгексафторфосфат; 2,6-бис-(1,1-диметилэтил)-4-[1-[2,6-бис(1,1-диметилэтил)тиопиран-4-илиден]-3-пропенил]-тиоперилийгексафторфосфат; 2,6-бис-(1,1-диметилэтил)-4-[1-[2,6-бис(1,1-диметилэтил)селенопиран-4-илиден]-3-пропенил]-тиоперилийгексафторфосфат и 2,6-бис-(1,1-диметилэтил)-4-[1-[2,6-бис(1,1-диметилэтил)теллуропиран-4-илиден]-3-пропенил]-тиоперилийгексафторфосфат.

Иллюстративные хлориновые красители включают производное простого диметилового эфира 5-азахлорина; 5,10,15,20-тетракис-(м-гидроксифенил)бактериохлорин; кольцо А одноосновной кислоты производного бензопорфирина; кольцо-А одноосновной кислоты производного бензопорфирина; сложный 7-[2-диметиламино)-2-оксоэтил]-8-этилиден-7,8-дигидро-3,7,12,17-тетраметиловый, диметиловый эфир порфин-2,18-дипропаноевой кислоты; сложный 7-[2-диметиламино)-2-оксоэтил]-8-этилиден-8-этил-7,8-дигидро-3,7,12,17-тетраметиловый, диметиловый эфир Z порфин-2,18-дипропаноевой кислоты; сложный 7-[2-диметиламино)-2-оксоэтил]-8-этилиден-8-этил-7,8-дигидро-3,7,12,17-тетраметиловый, диметиловый эфир Z ECHL порфин-2,18-дипропаноевой кислоты; сложный 7-[2-диметиламино)-2-оксоэтил]-8-этилиден-8-н-гептил-7,8-дигидро-3,7,12,17-тетраметиловый, диметиловый эфир Z порфин-2,18-дипропаноевой кислоты; сложный 7-[2-диметиламино)-2-оксиэтил]-8-этилиден-8-н-гептил-7,8-дигидро-3,7,12,17-тетраметиловый, диметиловый эфир Z олово (II) порфин-2,18-дипропаноевой кислоты; хлорин е₆; сложный диметиловый эфир хлорина е₆; хлорин е₆ k₃; сложный монометиловый эфир хлорина е₆; хлорин е₆ Na₃; хлорин р₆; сложный триметиловый эфир хлорина р₆; хлориновое производное сложный 7-[2-диметиламино)-2-оксиэтил]-8-этилиден-8-н-гептил-7,8-дигидро-3,7,12,17-тетраметилового, диметилового эфира Z цинк (II) порфин-2,18-дипропаноевой кислоты; ди-трет-бутил аспартат 13¹-дезокси-20-формил-вик-дигидрокси-бактериохлорина; ди-трет-бутил аспартат 13¹-дезокси-20-формил-4-кето-бактериохлорина; ди-L-аспартилхлорин е₆; мезохлорин; 5,10,15,20-тетракис-(м-гидроксифенил)хлорин; мета-(тетрагидроксифенил)хлорин; метил-13¹-дезокси-20-формил-4-кето-бактериохлорин; моно-L-аспартилхлорин е₆; сложный диметиловый эфир фотопротопорфирина IX; сложный диметиловый эфир фикоцианобилина; протохлорофиллид а; олово(IV) хлорин е₆; олово хлорин е₆; олово L-аспартилхлорин е₆; олово октаэтил-безохлорин; олово(IV)хлорин; цинк хлорин е₆ и цинк L-аспартилхлорин е₆.

Иллюстративные хлорофилловые красители включают хлорофилл а; хлорофилл b; растворимый в масле хлорофилл; бактериохлорофилл а; бактериохлорофилл b; бактериохлорофилл с; бактериохлорофилл d; протохлорофилл; протохлорофилл а; производное 1 амфифильного хлорофилла и производное 2 амфифильного хлорофилла.

Иллюстративные кумарины включают 3-бензоил-7-метоксикумарин; 7-диэтиламино-3-теноилкумарин; 5,7-диметокси-3(1-нафтоил)кумарин; 6-метилкумарин; 2Н-селеноло[3,2-g][1] бензопиран-2-он; 2Н-селеноло[3,2-g][1]бензотиопиран-2-он; 7Н-селеноло[3,2-g][1]бензоселено-пиран-7-он; 7Н-селенопирано[3,2-f][1]бензофуран-7-он; 7Н-селенопирано[3,2-f][1]бензо-тиофен-7-он; 2Н-тиенол[3,2-g][1]бензопиран-2-он; 7Н-тиенол[3,2-g][1] бензотиопиран-7-он; 7Н-тиопирано[3,2-f][1]бензофуран-7-он; смесь каменноугольной смолы; хеллин; RG 708; RG277 и виснагин.

Иллюстративные цианины включают бензоселеназоловый краситель; бензоксазоловый краситель; 1,1'-диэтилоксакарбоцианин; 1,1'-диэтилоксадикарбоцианин; 1,1'-диэтилтиокарбоцианин; 3,3'-диалкилтиакарбоцианины (n=2-18); 3,3'-диэтилтиакарбоцианин йодид; 3,3'-дигексилселенакарбоцианин; криптоцианин; производное МС540 бензоксазола; производное МС540 хинолина; мероцианин 540 и мезо-этил,3,3'-дигексилселенкарбоцианин.

Иллюстративные фуллерены включают С₆₀; С₇₀; С₇₆; дигидрофуллерен; 1,9-(4-гидроксициклогексано)-букминстер-фуллерен; [1-метилсукцинат-4-метил-циклогексадиен-2,3]-букминстер-фуллерен и тетрагидрофуллерен.

Иллюстративные металлопорфирины включают кадмий (II) хлортексафириннитрат; кадмий (II) мезо-дифенилтетрабензопорфирин; кадмий мезо-тетра-(4-N-метилпиридил)-порфин; кадмий (II) тексафирин; кадмий (II) тексафириннитрат; кобальт мезо-тетра-(4-N-метилпиридил)-порфин; кобальт (II) мезо-(4-сульфонатофенил)-порфин; медь гематопорфирин; медь мезо-тетра-(4-N-метилпиридил)-порфин; медь (II) мезо-(4-сульфонатофенил)-порфин; европий (III) диметилтексафириндигидроксид; галлий тетрафенилпорфирин; железо мезо-тетра-(4-N-метилпиридил)-порфин; лютеций (III) тетра-(N-метил-3-пиридил)-порфиринхлорид; магний (II) мезо-дифенилтетрабензопорфирин; магний тетрабензопорфирин; магний тетрафенилпорфирин; магний (II) мезо(4-сульфонатофенил)-порфин; магний (II) тексафирингидроксид металлопорфирин; магний мезо-тетра-(4-N-метилпиридил)-порфин; марганец мезо-тетра-(4-N-метилпиридил)-порфин; никель мезо-тетра-(4-N-метилпиридил)-порфин; никель (II) мезо-тетра(4-сульфонатофенил)-порфин; палладий (II) мезо-тетра-(4-N-метилпиридил)-порфин; палладий мезо-тетра-(4-N-метилпиридил)-порфин; палладий тетрафенилпорфирин; палладий (II) мезо-(4-сульфонатофенил)-порфин; платина (II) мезо-(4-сульфонатофенил)-порфин; самарий (II) диметилтексафириндигидроксид; серебро (II) мезо-(4-сульфонатофенил)-порфин; олово (IV) протопорфирин; олово мезо-тетра-(4-N-метилпиридил)-порфин; олово мезо-тетра(4-сульфонатофенил)-порфин; олово (IV) тетракис(4-сульфонатофенил)-порфириндихлорид; цинк (II) сложный диметеиловый эфир 15-аза-3,7,12,28-тетраметил-порфиринато-13,17-диил-дипропионовой кислоты; цинк (II) хлортексафиринхлорид; цинк копропорфирин III; цинк (II) 2,11,20,30-тетра-(1,1-диметил-этил)тетранафто(2,3-b:2',3'-g:2''3''-1:2'''3'''-q)порфиразин; цинк (II) 2-(3-пиридилокси)бензо[b]-10,19,28-три(1,1-диметилэтил)тринафто[2',3'-g:2''3''1::2''',3'''-q]порфиразин; цинк (II)2,18-бис-(3-пиридилокси)дибензо[b,l]-10,26-ди(1,1-диметилэтил)динафто[2',3'-g:2''',3'''-q]порфиразин; цинк (II)2,9-бис-(3-пиридилокси)дибензо[b,g]-17,26-ди(1,1-диметилэтил)динафто[2'',3''-1:2''',3'''-q]порфиразин; цинк (II)2,9,16-трис-(3-пиридилокси)трибензо[b,g,l]-24-(1,1-диметилэтил)нафто[2''',3'''-q]порфиразин; цинк (II)2,3-бис-(3-пиридилокси)бензо[b]-10,19,28-три(1,1-диметилэтил(тринафто [2',3'-g:2'',3''1:2''',3'''-q]порфиразин; цинк (II) 2,3,18,19-тетракис-(3-пиридилокси)дибензо[b,l]-10,26-ди(1,1-диметилэтил) тринафто[2',3'-g:2''',3'''-q]порфиразин; цинк (II) 2,3,9,10- тетракис-(3-пиридилокси)дибензо[b,g]-17,26-ди(1,1-диметилэтил) динафто[2'',3''-1:2''',3'''-q]порфиразин; цинк (II) 2,3,9,10,16,17- гексакис-(3-пиридилокси)трибензо[b,g,l]-24-(1,1-диметилэтил)нафто[2''',3'''-q]порфиразин; цинк (II) 2-(3-N-метил)пиридилокси)бензо[b]-10,19,28-три(1,1-диметилэтил) тринафто[2',3'-g:2'',3''-1:2''',3'''-q]порфиразинмонойодид; цинк (II) 2,18-бис-(3-(N-метил)пиридилокси)дибензо[b,l]-10,26-ди(1,1-диметилэтил)динафто[2',3'-g:2''',3'''-q]порфиразиндийодид; цинк (II) 2,9-бис-(3-N-метил)пиридилокси)дибензо[b,g]-17,26-ди(1,1-диметилэтил)динафто [2'',3''-1:2''',3'''-q]порфиразиндийодид; цинк (II) 2,9,16-трис-(3-N-метил-пиридилокси) трибензо[b,g,l]-24-(1,1-диметилэтил)нафто[2''',3'''-q]порфиразинтрийодид; цинк (II) 2,3-бис-(3-(N-метил)пиридилокси)бензо[b]-10,19,28-три(1,1-диметилэтил) тринафто[2',3'-g:2'',3''-1:2''',3'''-q]порфиразиндийодид; цинк (II) 2,3,18,19-тетракис-(3-(N-метил)пиридилокси)дибензо[b,l]-10,26-ди(1,1-диметил)динафто[2',3'-g:2''',3'''-q] порфиразинтетрайодид; цинк (II) 2,3,9,10-тетракис-(3-(N-метил)пиридилокси)дибензо[g,g]-17,26-ди(1,1-диметилэтил)динафто [2'',3''-1:2''',3'''-q]порфиразинтетрайодид; цинк (II) 2,3,9,10,16,17-гексакис-(3-(N-метил)пиридилокси)трибензо[b,g,l]-24-(1,1-диметилэтил)нафто[2''',3'''-q]порфиразингексайодид; цинк (II)мезо-дифенилтетрабензопорфирин; цинк (II) мезо-трифенилтетрабензопорфирин; цинк (II)мезо-тетракис(2,6-дихлор-3-сульфонатофенил)порфирин; цинк (II) мезо-тетра-(4-N-метилпиридил)-порфин; цинк (II) 5,10,15,20-мезо-тетра-(4-октилфенилпропинил)-порфин; цинк порфирин с; цинк протопорфирин; цинк протопорфирин IX; цинк (II) мезо-трифенил-тетрабензопорфирин; цинк тетрабензопорфирин; цинк (II) тетрабензопорфирин; цинк тетранафталопорфирин; цинк тетрафенилпорфирин; цинк (II) 5,10,15,20-тетрафенилпорфирин; цинк (II) мезо(4-сульфонатофенил)-порфин и цинк (II) тексафиринхлорид.

Иллюстративные металлофталоцианины включают алюминий моно-(6-карбокси-пентил-амино-сульфонил)-трисульфо-фталоцианин; алюминий ди-(6-карбокси-пентил-амино-сульфонил)-трисульфо-фталоцианин; алюминий (III) окта-н-бутоксифталоцианин; алюминий фталоцианин; алюминий (III) фталоцианиндисульфонат; алюминий фталоцианиндисульфонат; алюминий фталоцианиндисульфонат (цис изомер); алюминий фталоцианиндисульфонат (клинический препарат); алюминий фталоцианинфталимидо-метилсульфонат; алюминий фталоцианинсульфонат; алюминий фталоцианинтрисульфонат; алюминий (III) фталоцианинтрисульфонат; алюминий (III) фталоцианинтетрасульфонат; алюминий фталоцианинтетрасульфонат; хлоралюминий фталоцианин; хлоралюминий фталоцианинсульфонат; хлоралюминий фталоцианиндисульфонат; хлоралюминий фталоцианинтетрасульфонат; хлоралюминий т-бутил-фталоцианин; кобальт фталоцианинсульфонат; медь фталоцианинсульфонат; медь (II) тетра-карбокси-фталоцианин; медь (II)-фталоцианин; медь т-бутил-фталоцианин; медь фталоцианинсульфонат; медь(II)тетракис-[метилен-тио[(диметил-амино)метилиден]]фталоцианинтетрахлорид; дихлоркремний фталоцианин; галлий (III) окста-н-бутоксифталоцианин, галлий (II) фталоцианиндисульфонат; галлий фталоцианиндисульфонат; галлий фталоцианинтетрасульфонат-хлорид; галлий (II) фталоцианинтетрасульфонат; галлий фталоцианинтрисульфонат-хлорид; галлий (II) фталоцианинтрисульфонат; GaPcS₁tBu₃; GaPcS₂tBu₂; GaPcS₃tBu₁; германий (IV)окта-н-бутоксифталоцианин; производное германий фталоцианина; производное кремний фталоцианина; октакис-алкокси-производные германий (IV) фталоцианина; железо фталоцианинсульфонат; свинец (II) 2,3,9,10,16,17,23,24-окстакис(3,6-диоксагептилокси)фталоцианин; магний т-бутил-фталоцианин; никель (II) 2,3,9,10,16,17,23,24-октакис(3,6-диоксагептилокси)фталоцианин; палладий (II) окста-н-бутоксифталоцианин; палладий (II) тетра(т-бутил)-фталоцианин; (диол)(т-бутил)₃-фталоцианат палладий (II); рутений (II) дикалий[бис(трифенил-фосфин-моносульфонат) фталоцианин; кремний фталоцианин бис(три-н-гексил-силокси)-; кремний фталоцианин бис(три-фенил-силокси)-; HOSiPcOSi(CH₃)₂(CH₂)₃N(CH₃)₂; HOSiPcOSi(CH₃)₂(CH₂)₃N(CH₂CH₃)₂; SiPc[OSi(CH₃)₂(CH₂)₃N(CH₃)₂]₂; SiPc[OSi(CH₃)₂(CH₂)₃N(CH₂CH₃)(CH₂)₂N(CH₃)₂]₂; олово (IV) окта-н-бутоксифталоцианин; ванадий фталоцианинсульфонат; цинк (II) окта-н-бутоксифталоцианин; цинк (II) 2,3,9,10,16,17,23,24-октакис(2-этокси-этокси) фталоцианин; цинк (II) 2,3,9,10,16,17,23,24-октакис(3,6-диоксагептилокси) фталоцианин; цинк (II) 1,4,8,11,15,18,22,25-окта-н-бутокси-фталоцианин; Zn(II)-фталоцианин-окстабутокси; Zn(II)-фталоцианин; цинк фталоцианин; цинк (II)-фталоцианин; цинк фталоцианин и пересыщенный дейтерием цинк фталоцианин; цинк (II) фталоцианиндисульфонат; цинк фталоцианиндисульфонат; цинк фталоцианинсульфонат; цинк фталоцианин тетрабром-; цинк (II) фталоцианин тетра-т-бутил-; цинк (II) фталоцианин тетра-(т-бутил)-; цинк фталоцианин тетракорбокси-; цинк фталоцианин тетрахлор-; цинк фталоцианин тетргидроксил; цинк фталоцианин тетрайод-; цинк ((I) тетракис-(1,1-диметил-2-фталимидо)этил фталоцианин; цинк (II) тетракис-(1,1-диметил-2-амино)-этил- фталоцианин; цинк (II) фталоцианин тетракис-(1,1-диметил-2-триметиламмоний)этил тетрайодид; цинк фталоцианин тетрасульфонат; цинк фталоцианин тетрасульфонат; цинк (II) фталоцианин тетрасульфонат; цинк фталоцианин трисульфонат; цинк (II)(т-бутил)₃-фталоцианиндиол; цинк тетрадибензобаррелено-октабутокси-фталоцианин; цинк (II) 2,9,16,23,-тетракис-(3-(N-метил)пиридилокси)фталоцианин тетрайодид и комплекс октайодид цинк (II) 2,3,9,10,16,17,23,24-октакис-(3-(N-метил)пиридилокси)фталоцианина; и цинк (II)2,3,9,10,16,17,23,24-октакис-(3-пиридилокси)фталоцианин.

Иллюстративные производные метиленового синего включают 1-метилметиленовый синий; 1,9-диметилметиленовый синий; метиленовый синий; метиленовый синий (16 мкмоль); метиленовый синий (14 мкмоль); метиленовый фиолетовый; бромметилен фиолетовый; 4-йодметиленовый фиолетовый; 1,9-диметил-3-диметил-амино-7-диэтиламино-фенотиазин и 1,9-диметил-3-диэтиламино-7-дибутил-амино-фенотиазин.

Иллюстративные производные нафталимидного синего включают N,N'-бис-(гидроперокси-2-метоксиэтил)-1,4,5,8-нафталдиимид; N-(гидроперокси-2-метоксиэтил)-1,8-нафталимид; 1,8-нафталимид; N,N'-бис-(2,2-диметоксиэтил)-1,4,5,8-нафталдиимид и N,N'-бис-(2,2-диметилпропил)-1,4,5,8-нафталдиимид.

Иллюстративные нафталоцианины включают алюминий т-бутил-хлорнафталцианин; кремний бис(диметилоктадецилсилокси)2,3-нафталоцианин; кремний бис(диметилоктадецилсилокси) нафталоцианин; кремний бис(диметилтексилсилокси)2,3-нафталоцианин; кремний бис(диметилтексилсилокси) нафталоцианин; кремний бис(т-бутилдиметилсилокси)2,3-нафталоцианин; кремний бис(трет-бутилдиметилсилокси) нафталоцианин; кремний бис(три-н-гексилсилокси)2,3-нафталоцианин; кремний бис(три-н-гексилсилокси)-нафталоцианин; кремний нафталоцианин; т-бутилнафталоцианин; цинк (II) нафталоцианин; цинк (II) тетраацетил-амидонафталоцианин; цинк (II) тетрааминонафталоцианин; цинк (II) тетрабензамидонафталоцианин; цинк (II) тетрагексиламидонафталоцианин; цинк (II) тетраметокси-бензамидонафталоцианин; цинк (II) тетраметоксинафталоцианин; цинк нафталоцианин тетрасульфонат и цинк (II) тетрадодециламидонафталоцианин.

Иллюстративные производные нильского синего включают 5-амино-9-диэтиламино-бензо[a]фенотиазиний; 5-амино-9-диэтиламино-6-йод-бензо[a]фенотиазиний; 5-бензиламино-9-диэтиламино-бензо[a]фенотиазиний; 5-амино-6,8-дибром-9-этиламино-бензо[a]феноксазиний; 5-амино-6,8-дийод-9-этиламино-бензо[a]феноксазиний; 5-амино-6-дийод-9-этиламино-бензо[a]феноксазиний; 5-амино-9-диэтиламино-бензо[a]феноксазиний (нильский синий А); 5-амино-9-диэтиламино-2,6-дийод-бензо[a]феноксазиний; 5-амино-9-диэтиламино-2-йод-бензо[a]феноксазиний; 5-амино-9-диэтиламино-6-йод-бензо[a]феноксазиний; 5-бензиламино-9-диэтиламино-бензо[a]феноксазиний (нильский синий 2В); 5-этиламино-9-диэтиламино-бензо[a]феноселеназиний хлорид; 5-этиламино-9-диэтиламино-аминобензо[a]фенотиазиний хлорид и 5-этиламино-9-диэтиламино-бензо[a]феноксазиний хлорид.

Иллюстративные NSAID (нестероидные противовоспалительные препараты) включают беноксапрофен; карпрофен; дехлорированный карпрофен (2-(2-карбазолил)пропионовая кислота); карпрофен (3-хлоркарбазол); хлорбеноксапрофен; 2,4-дихлорбеноксапрофен; циноксацин; ципрофлоксацин; декарбокси-кетопрофен; декарбокси-супрофен; декарбокси-беноксапрофен; декарбокси-тиапрофеновую кислоту; эноксацин; флероксацин; флероксацин-N-оксид; флюмехин; индопрофен; кетопрофен; ломелфлоксацин; 2-метил-4-оксо-2Н-1,2-бензотиазин-1,1-диоксид; N-диметилфлероксацин; набуметон; налидиксовую кислоту; напроксен; норфлоксацин; офлоксацин; пефлоксацин; пипемидовую кислоту; пироксикам; супрофен и тиапрофеновую кислоту.

Иллюстративные периленхиноны включают гиперицины, такие как гиперицин; одноосновная натриевая соль гиперицина; ди-алюминий гиперицин; ди-медь гиперицин; гадолиний гиперицин; тербий гиперицин; гипокреллины, такие как гипокреллин А; ацетоксигипокреллин В; ацетокси изо-гипокреллин А; ацетокси изо-гипокреллин В; 3,10-бис[2-(2-аминоэтиламино)этанол] гипокреллин В; 3,10-бис[2-(2-аминоэтокси)этанол] гипокреллин В; 3,10-бис[4-(2-аминоэтил)морфолин] гипокреллин В; н-бутиламинированный гипокреллин В; 3,10-бис(бутиламин) гипокреллин В; 4,9-бис(бутиламин) гипокреллин В; соединение карбоновой кислоты и гипокреллина В; цистамин-гипокреллин В; 5-хлор гипокреллин А или 8-хлор гипокреллин А; 5-хлор гипокреллин В или 8-хлор гипокреллин В; 8-хлор гипокреллин В; 8-хлор гипокреллин А или 5-хлор гипокреллин А; 8-хлор гипокреллин В или 5-хлор гипокреллин В; деацетилированный альдегид гипокреллина В; деацетилированный гипокреллин В; деацетилированный гипокреллин А; деацилированный альдегид гипокреллина В; деметилированный гипокреллин В; 5,8-дибром гипокреллин А; 5,8-дибром гипокреллин В; 5,8-дибром изо-гипокреллин В; 5,8-дибром[1,12-CBr=CMeCBr(COMe)]гипокреллин В; 5,8-дибром[1,12-CHBrC(=CH₂)CBr(COMe)]гипокреллин В; 5,8-дибром[1-CH₂COMe, 12-COCOCH₂Br]гипокреллин В; 5,8-дихлор гипокреллин А; 5,8-дихлор гипокреллин В; 5,8-дихлордеацитилированный гипокреллин В; 5,8-дийод гипокреллин А; 5,8-дийод гипокреллин В; 5,8-дийод[1,12-CH=CMeCH(COCH₂I₂)-]гипокреллин В; 5,8-дийод[1,12-CH₂CCH₂I)=C(COMe)-] гипокреллин В; 2-(N,N-диметиламино) этиламинированный гипокреллин В; 3,10-бис[2-(N,N-диметиламино)-этиламин] гипокреллин В; 4,9-бис[2-(N,N-диэтил-амино)-этиламин] изо-гипокреллин В; соединение дигидро-1,4-тиазинкарбоновой кислоты и гипокреллина В; дигидро-1,4-тиазин гипокреллин В; 2-(N,N-диметиламино)пропиламин гипокреллин В; диметил-1,3,5,8,10,12-гексаметокси-4,9-периленхинон-6,7-диацетат; диметил-5,8-дигидрокси-1,3,10,13-тетраметокси-4,9-периленхинон-6,7-диацетат; 2,11-дион гипокреллин А; этаноламин гипокреллин В; этаноламин изо-гипокреллин В; этилендиамин гипокреллин В; 11-гидрокси гипокреллин В или 2-гидрокси гипокреллин В; гипокреллин А; гипокреллин В; 5-йод[1,12-CH₂C(CH₂I)=C(COMe)-]гипокреллин В; 8-йод[1,12-CH₂C(CH₂I)=C(COMe)-]гипокреллин В; 9-метиламино изо-гипокреллин В; 3,10-бис[2-(N,N-метиламино)пропиламин] гипокреллин В; 4,9-бис-метиламин изо-гипокреллин В; 14-метиламин изо-гипокреллин В; 4-метиламин изо-гипокреллин В; метоксигипокреллин А; метоксигипокреллин В; метокси изо-гипокреллин А; метокси изо-гипокреллин В; метиламин гипокреллин В; 2-морфолино этиламинированный гипокреллин В; пентаацетокси гипокреллин А; производное PQP; тетраацетокси гипокреллин В; 5,8,15-трибром гипокреллин В; кальфостин С, церкоспорины, такие как ацетокси церкоспорин; ацетокси изо-церкоспорин; аминоцеркоспорин; церкоспорин; церкоспорин + изо-церкоспорин (молярное соотношение 1/1); диаминцеркоспорин; диметилцеркоспорин; 5,8-дитиофенол церкоспорин; изо-церкоспорин; метоксицеркоспорин; метокси изо-церкоспорин; метилцеркоспорин; норангидроцеркоспорин; элсинохром А; элсинохром В; флейхром и рубеллин А.

Иллюстративные фенолы включают 2-бензилфенол; 2,2'-дигидроксибифенил; 2,5-дигидроксибифенил; 2-гидроксибифенил; 2-метоксибифенил и 4-гидроксибифенил.

Иллюстративные феофорбиды включают феофорбид а; метил 13¹-дезокси-20-формил-7,8-вик-дигидро-бактерио-мезо-феофорбид а; метил-2-(1-додецилоксиэтил)-2-девинил-пирофеофорбид а; метил-2-(1-гептил-оксиэтил)-2-девинил-пирофеофорбид а; метил-2-(1-гексил-оксиэтил)-2-девинил-пирофеофорбид а; метил-2-(1-метокси-этил)-2-девинил-пирофеофорбид а; метил-2-(1-пентил-оксиэтил)-2-девинил-пирофеофорбид а; магний метил бактериофеофорбид d; метил бактериофеофорбид d и феофорбид.

Иллюстративные феофитины включают бактериофеофитин а; бактериофеофитин b; бактериофеофитин с; бактериофеофитин d; 10-гидроксифеофитин а; феофитин; феофитин а и протофеофитин.

Иллюстративные димеры и конъюгаты фотосенсибилизаторов включают конъюгат алюминий моно-(6-карбокси-пентил-амино-сульфонил)-трисульфофталоцианина с альбумином бычьей сыворотки; простой (сложный) эфир дигематопорфирина; простой эфир дигематопорфирина; сложный (простой) эфир дигематопорфирина-хлорина; сложный эфир гематопорфирина-хлорина; конъюгат гематопорфирина и липопротеина низкой плотности; конъюгат гематопорфирина и липопротеина высокой плотности; 13,13'-(1,3-пропандиил) бис[3,8,12,17-тетраметил]-порфин-2,7,18-трипропаноевая кислота; 13,13'-(1,11-ундекандиил) бис[3,8,12,17-тетраметил]-порфин-2,7,18-трипропаноевая кислота; 13,13'-(1,6-гександиил) бис[3,8,12,17-тетраметил]-порфин-2,7,18-трипропаноевая кислота; конъюгат SnCe6-Mab 1,7:1; конъюгат SnCe6-Mab 1,7:1; конъюгат SnCe6-Mab 6,8:1; конъюгат SnCe6-Mab 11,2:1; конъюгат SnCe6-Mab 18,9:1; конъюгат SnCe6-декстран 0,9:1; конъюгат SnCe6-декстран 3,5:1; конъюгат SnCe6-декстран 5,5:1; конъюгат SnCe6-декстран 9,9:1; конъюгат α-тертиенила-альбумина бычьей сыворотки (12:1); конъюгат α-тертиенила-альбумина бычьей сыворотки (4:1) и тетрафенилпорфин, связанный с 7-хлорхинолином.

Иллюстративные фталоцианины включают (диол)(т-бутил)₃-фталоцианин; (т-бутил)₄-фталоцианин; цис-октабутокси-дибензо-динафто-порфиразин; транс-октабутокси-дибензо-динафто-порфиразин; 2,3,9,10,16,17,23,24-октакис(2-этоксиэтокси)фталоцианин; 2,3,9,10,16,17,23,24-октакис(3,6-диоксагептилокси)фталоцианин; окта-н-бутокси фталоцианин; фталоцианин; фталоцианин сульфонат; фталоцианин тетрасульфонат; фталоцианин тетрасульфонат; т-бутил-фталоцианин; тетра-т-бутил-фталоцианин и тетрадибензобаррелено-октабутокси-фталоцианин.

Иллюстративные порфицены включают 2,3-(2³-карбокси-2⁴-метоксикарбонил-бензо)-7,12,17-трис(2-метоксиэтил)порфицен; 2-(2-гидроксиэтил)-7,12,17-три(2-метоксиэтил)порфицен; 2-(2-гидроксиэтил)-7,12,17-три-н-пропил-порфицен; 2-(2-метоксиэтил)-7,12,17-три-н-пропил-порфицен; 2,7,12,17-тетракис(2-метоксиэтил)порфицен; 2,7,12,17-тетракис(2-метоксиэтил)-9-гидрокси-порфицен; 2,7,12,17-тетракис(2-метоксиэтил)-9-метокси-порфицен; 2,7,12,17-тетракис(2-метоксиэтил)-9-н-гексилокси-порфицен; 2,7,12,17-тетракис(2-метоксиэтил)-9-ацетокси-порфицен; 2,7,12,17-тетракис(2-метоксиэтил)-9-капроилокси-порфицен; 2,7,12,17-тетракис(2-метоксиэтил)-9-пеларгонилокси-порфицен; 2,7,12,17-тетракис(2-метоксиэтил)-9-стеароилокси-порфицен; 2,7,12,17-тетракис(2-метоксиэтил)-9-(N-т-бутоксикарбонилглицинокси)порфицен; 2,7,12,17-тетракис(2-метоксиэтил)-9-[4-((β-апо-7-каротенил)бензоилоксил-порфицен; 2,7,12,17-тетракис(2-метоксиэтил)-9-амино-порфицен; 2,7,12,17-тетракис(2-метоксиэтил)-9-ацетамидо-порфицен; 2,7,12,17-тетракис(2-метоксиэтил)-9-глутарамидо-порфицен; 2,7,12,17-тетракис(2-метоксиэтил)-9-(метил-глутарамидо)-порфицен; 2,7,12,17-тетракис(2-метоксиэтил)-9-глутарамидо-порфицен; 2,7,12,17-тетракис(2-метоксиэтил)-3-(N,N-диметиламинометил)-порфицен; 2,7,12,17-тетракис(2-метоксиэтил)-3-(N,N-диметиламинометил)-порфицен гидрохлорид; 2,7,12,17-тетракис(2-этоксиэтил)-порфицен; 2,7,12,17-тетра-н-пропил-порфицен; 2,7,12,17-тетра-н-пропил-9-гидрокси-порфицен; 2,7,12,17-тетра-н-пропил-9-метокси-порфицен; 2,7,12,17-тетра-н-пропил-9-ацетокси-порфицен; 2,7,12,17-тетра-н-пропил-9-(т-бутилглутарокси)-порфицен; 2,7,12,17-тетра-н-пропил-9-(N-т-бутоксикарбонилглицинокси)-порфицен; 2,7,12,17-тетра-н-пропил-9-(4-N-т-бутокси-карбонил-бутирокси)-порфицен; 2,7,12,17-тетра-н-пропил-9-амино-порфицен; 2,7,12,17-тетра-н-пропил-9-ацетамидо-порфицен; 2,7,12,17-тетра-н-пропил-9-глутарамидо-порфицен; 2,7,12,17-тетра-н-пропил-9-(метил глутарамидо)-порфицен; 2,7,12,17-тетра-н-пропил-3-(N,N-диметиламинометил)порфицен; 2,7,12,17-тетра-н-пропил-9,10-бензопорфицен; 2,7,12,17-тетра-н-пропил-9-п-бензоил карбокси-порфицен; 2,7,12,17-тетра-н-пропил-порфицен; 2,7,12,17-тетра-т-бутил-3,6,13,16-дибензо-порфицен; 2,7-бис(2-гидроксиэтил)-12,17-ди-н-пропил-порфицен; 2,7-бис(2-метоксиэтил)-12,17-ди-н-пропил-порфицен и порфицен.

Иллюстративные порфирины включают сложный диметиловый эфир 5-азапротопорфирина; бис-порфирин; копропорфирин III; сложный тетраметиловый эфир копропорфирина III; дейтеропорфирин; сложный диметиловый эфир дейтеропорфирина IX; додекафенилпорфирин; гематопорфирин; гематопорфирин (8 мкмоль); гематопорфирин (400 мкмоль); гематопорфирин (3 мкмоль); гематопорфирин (18 мкмоль); гематопорфирин (30 мкмоль); гематопорфирин (67 мкмоль); гематопорфирин (150 мкмоль); гематопорфирин IX; мономер гематопорфирина; димер гематопорфирина; производное гематопорфирина; производное гематопорфирина (6 мкмоль); производное гематопорфирина (200 мкмоль); производное А гематопорфирина (20 мкмоль); дигидрохлорид гематопорфирина IX; дигидрохлорид гематопорфирина; сложный диметиловый эфир гематопорфирина IX; сложный диметиловый эфир гематопорфирина IX; сложный диметиловый эфир мезопорфирина; сложный диметиловый эфир мезопорфирина IX; сложный диметиловый эфир моноформил-моновинил-дейтеропорфирина IX; моногидроксиэтилвинил дейтеропорфирин; 5,10,15,20-тетра(о-гидроксифенил)порфирин; 5,10,15,20-тетра(м-гидроксифенил)порфирин; 5,10,15,20-тетракис(м-гидроксифенил)порфирин; 5,10,15,20-тетра(п-гидроксифенил)порфирин; 5,10,15,20-тетракис(3-метоксифенил)порфирин; 5,10,15,20-тетракис(3,4-диметоксифенил)порфирин; 5,10,15,20-тетракис(3,5-диметоксифенил)порфирин; 5,10,15,20-тетракис(3,4,5-триметоксифенил)порфирин; 2,3,7,8,12,13,17,18-октаэтил-5,10,15,20-тетрафенилпорфирин; Photofrin®; Photofrin®II; порфирин с; протопорфирин; протопорфирин IX; сложный диметиловый эфир протопорфирина; сложный диметиловый эфир протопорфирина IX; протопорфирин пропиламиноэтилформамид йодид; протопорфирин N,N-диметиламинопропилформамид; протопорфирин пропиламинопропилформамид йодид; протопорфирин бутилформамид; протопорфирин N,N-диметиламино-формамид; протопорфирин формамид; сапфирин 1,3,12,13,22-тетраэтил-2,7,18,23-тетраметил сапфирин-8,17-дипропанол; сапфирин 2,3,12,13,22-тетраэтил-2,7,18,23-тетраметил сапфирин-8-моногликозид; сапфирин 3; мезо-тетра-(4-N-карбоксифенил)-порфин; тетра-(3-метоксифенил)-порфин; тетра-(3-метокси-2,4-дифторфенил)-порфин; 5,10,15,20-тетракис(4-N-метилпиридил)-порфин; мезо-тетра-(4-N-метилпиридил)-порфин тетрахлорид; мезо-тетра-(4-N-метилпиридил)-порфин; мезо-тетра-(3-N-метилпиридил)-порфин; мезо-тетра-(2-N-метилпиридил)-порфин; тетра-(4-N,N,N-триметиланилин)-порфин; мезо-тетра-(4-N,N,N''-триметиламино-фенил)-порфин тетрахлорид; тетранафталопорфирин; 5,10,15,20-тетрафенилпорфирин; тетрафенилпорфирин; мезо-тетра-(4-N-сульфонатофенил)-порфин; тетрафенилпорфин тетрасульфонат; мезо-тетра(4-сульфонатофенил)-порфин; тетра(4-сульфонатофенил)-порфин; тетрафенилпорфирин сульфонат; мезо-тетра(4-сульфонатофенил)-порфин; тетракис(4-сульфонатофенил)-порфирин; мезо-тетра(4-сульфонатофенил)-порфин; мезо(4-сульфонатофенил)-порфин; мезо-тетра(4-сульфонатофенил)-порфин; тетракис(4-сульфонатофенил)-порфирин; мезо-тетра-(4-N-триметианилин)-порфин; уропофирин; уропорфирин I (17 мкмоль); уропорфирин IX и уропорфирин I (18 мкмоль).

Иллюстративные псоралены включают псорален; 5-метоксипсорален; 8-метоксипсорален; 5,8-диметоксипсорален; 3-карбетоксипсорален; 3-карбетокси-псевдопсорален; 8-гидроксипсорален; псевдопсорален; 4,5',8-триметилпсорален; аллопсорален; 3-ацето-аллопсорален; 4,7-диметил-аллопсорален; 4,7,4'-триметил-аллопсорален; 4,7,5'-триметил-аллопсорален; изопсевдопсорален; 3-ацетоизопсевдопсорален; 4,5'-диметил-изопсевдопсорален; 5',7-диметил-изопсевдопсорален; псевдоизопсорален; 3-ацетопсевдоизопсорален; 3,4',5'-триметил-аза-псорален; 4,4',8-триметил-5'-амино-метилпсорален; 4,4',8-триметил-фталамил псорален; 4,5',8-триметил-4'-аминометил псорален; 4,5',8-триметил-бромпсорален; 5-нитро-8-метокси-псорален; 5'-ацетил-4,8-диметил-псорален; 5'-ацето-8-метил-псорален и 5'-ацето-4,8-диметил-псорален.

Иллюстративные пурпурины включают октаэтилпурпурин; октаэтилпурпурин цинк; окисленный октаэтилпурпурин; восстановленный октаэтилпурпурин; восстановленный октаэтилпурпурин олово; пурпурин 18; пурпурин-18; сложный метиловый эфир пурпурина-18; пурпурин; олово этилэтиопурпурин I; сложный этиловый эфир Zn(II) этио-пурпурина и цинк этиопурпурин.

Иллюстративные хиноны включают 1-амино-4,5-диметоксиантрахинон; 1,5-диамино-4,8-диметоксиантрахинон; 1,8-диамино-4,5-диметоксиантрахинон; 2,5-диамино-1,8-дигидроксиантрахинон; 2,7-диамино-1,8-дигидроксиантрахинон; 4,5-диамино-1,8-дигидроксиантрахинон; моно-метилированный 4,5 или 2,7-диамино-1,8-дигидроксиантрахинон; антралин (кето форма); антралин; анион антралина; 1,8-дигидроксиантрахинон; 1,8-дигидроксиантрахинон (хризазин); 1,2-дигидроксиантрахинон; 1,2-дигидроксиантрахинон (ализарин); 1,4-дигидроксиантрахинон (хинизарин); 2,6-дигидроксиантрахинон; 2,6-дигидроксиантрахинон (антрафлавин); 1-гидроксиантрахинон (эритрокси-антрахинон); 2-гидроксиантрахинон; 1,2,5,8-тетра-гидроксиантрахинон (хинализарин); 3-метил-1,6,8-тригидроксиантрахинон (эмодин); антрахинон; антрахинон-2-сульфоновая кислота; бензохинон; тетраметилбензохинон; гидрохинон; хлоргидрохинон; резорцинол и 4-хлоррезорцинол.

Иллюстративные ретиноиды включают полный транс ретинал; С₁₇ альдегид; С₂₂ альдегид; 11-цис ретинал; 13-цис ретинал; ретинал и ретиналпальмитат.

Иллюстративные родамины включают сложный метиловый эфир 4,5-дибромродамина; сложный н-бутиловый эфир 4,5-дибромродамина; сложный метиловый эфир родамина 101; родамина 123; родамин 6G; сложный гексиловый эфир родамина 6G; тетрабромродамин 123 и сложный этиловый эфир тетраметилродамина.

Иллюстративные тиофены включают тертиофены, такие как 2,2':5',2''-тертиофен; 2,2':5',2''-тертиофен-5-карбоксамид; 2,2':5',2''-тертиофен-5-карбоновая кислота; 2,2':5',2''-тертиофен-сложный этиловый эфир 5-L-серина; 2,2':5',2''-тертиофен-5-N-изопропинил-формамид; 5-ацетоксиметил-2,2':5',2''-тертиофен; 5-бензил-2,2':5',2''-тертиофен-сульфид; 5-бензил-2,2':5',2''-тертиофен-сульфоксид; 5-бензил-2,2':5',2''-тертиофен-сульфон; 5-бром-2,2':5',2''-тертиофен; 5-(бутинил-3'''-гидрокси)- 2,2':5',2''-тертиофен; 5-карбоксил-5''-триметилсилил-2,2':5',2''-тертиофен; 5-циано-2,2':5',2''-тертиофен; 5,5''-дибром-2,2':5',2''-тертиофен; 5-(1''',1'''-дибромэтенил)-2,2':5',2''-тертиофен; 5,5''-дициано-2,2':5',2''-тертиофен; 5,5''-диформил-2,2':5',2''-тертиофен; 5-дифторметил-2,2':5',2''-тертиофен; 5,5''-дийод-2,2':5',2''-тертиофен; 3,3''-диметил-2,2':5',2''-тертиофен; 5,5''-диметил-2,2':5',2''-тертиофен; 5-(3''',3'''-диметилакрилоилоксиметил)-2,2':5',2''-тертиофен; 5,5''-ди-(т-бутил)-2,2':5',2''-тертиофен; 5,5''-дитиометил-2,2':5',2''-тертиофен; 3'-этокси-2,2':5',2''-тертиофен; этил-2,2':5',2''-тертиофен-5-карбоновая кислота; 5-формил-2,2':5',2''-тертиофен; 5-гидроксиэтил-2,2':5',2''-тертиофен; 5-гидроксиметил-2,2':5',2''-тертиофен; 5-йод-2,2':5',2''-тертиофен; 5-метокси-2,2':5',2''-тертиофен; 3'-метокси-2,2':5',2''-тертиофен;5-метил-2,2':5',2''-тертиофен; 5-(3'''-метил-2'''-бутенил)-2,2':5',2"-тертиофен; метил-2,2':5',2''-тертиофен-5-[3'''-акрилат]; метил-2,2':5',2''-тертиофен-5-(3'''-пропионат); N-аллил-2,2':5',2''-тертиофен-5-сульфонамид; N-бензил-2,2':5',2''-тертиофен-5-сульфонамид; N-бутил-2,2':5',2''-тертиофен-5-сульфонамид; N,N-диэтил-2,2':5',2''-тертиофен-5-сульфонамид; 3,3'-4',3''-тетраметил-2,2':5',2''-тертиофен; 5-т-бутил-5''-триметилсилил-2,2':5',2''-тертиофен; 3'-тиометил-2,2':5',2''-тертиофен; 5'-тиометил-2,2':5',2''-тертиофен; 5-триметилсилил-2,2':5',2''-тертиофен; битиофены, такие как 2,2'-битиофен; 5-циано-2,2'-битиофен; 5-формил-2,2'-битиофен; 5-фенил-2,2'-битиофен; 5-(пропинил)-2,2'-битиофен; 5-(гексинил)-2,2'-битиофен; 5-(октинил)-2,2'-битиофен; 5-(бутинил-4''-гидрокси)-2,2'-битиофен; 5-(пентинил-5''-гидрокси)-2,2'-битиофен; производное 5-(3'',4''-дигидроксибутинил)-2,2'-битиофена; производное 5-(этоксибутинил)-2,2'-битиофен и разнообразные тиофены, такие как 2,5-дифенилтиофен; 2,5-ди(2-тиенил)фуран; 2,6-бис(2-тиенил)-пиридин; 2,6-бис(тиенил)-пиридин; тиофен,2-(1-нафталенил)-; 2-(2-нафталенил)-; тиофен,2,2'-(1,2-фенилен)бис-тиофен; 2,2'-(1,3-фенилен)бис-тиофен; 2,2'-(1,4-фенилен)бис-тиофен; 2,2':5',2'':5'',2'''-кватертиофен; α-кватертиенил; α-тетратиофен; α-пентатиофен; α-гексатиофен и α-гептатиофен.

Иллюстративные вердины включают сложный триметиловый эфир копро (II) вердина; сложный метиловый эфир дейтеровердина; сложный метиловый эфир мезовердина и цинкметилпировердин.

Иллюстративные витамины включают эргостерол (провитамин D2); гексаметил-Со а Со b-дициано-7-де(карбоксиметил)-7,8-дидегидро-кобиринат (сложный пирокобэфир); сложный пирокобэфир и витамин D3.

Иллюстративные ксантеновые красители включают эозин В (4',5'-дибром,2',7'-динитро-флюоресцеин, дианион); эозин Y; эозин Y (2',4',5',7'-тетрабром- флюоресцеин, дианион); эозин (2',4',5',7'-тетрабром- флюоресцеин, дианион); сложный метиловый эфир эозина (2',4',5',7'-тетрабром- флюоресцеин, дианион); сложный п-изопропилбензиловый эфир эозина (2',4',5',7'-тетрабром- флюоресцеин, моноанион); производное эозина (2',7'-дибром- флюоресцеин, дианион); производное эозина (4',5'-дибром- флюоресцеин, дианион); производное эозина (2',7'-дихлор-флюоресцеин, дианион); производное эозина (4',5'-дихлор-флюоресцеин, дианион); производное эозина (2',7'-дийод-флюоресцеин, дианион); производное эозина (4',5'-дийод-флюоресцеин, дианион); производное эозина (трибром-флюоресцеин, дианион); производное эозина (2'4',5',7'-тетрахлор-флюоресцеин, дианион); эозин; ионная пара эозина и дицетилпиридиний хлорида; эритрозин В (2'4',5',7'-тетрайод-флюоресцеин, дианион); эритрозин; эритразин дианион; эритрозин В; флюоресцеин; флюоресцеин дианион; флоксин В (2'4',5',7'-тетрабром-3,4,5,6-тетрахлор-флюоресцеин, дианион); флоксин В (тетрахлор-тетрабром-флюорецеин); флоксин В; бенгальский розовый (3,4,5,6-тетрахлор-2'4',5',7'-тетрайод-флюоресцеин, дианион); бенгальский розовый; бенгальский розовый дианион; сложный О-метил-метиловый эфир бенгальского розового; сложный 6'-О-ацетил-этиловый эфир бенгальского розового; дифенил-дийодоновая соль сложного бензилового эфира бенгальского розового; триэтиламмониевая соль сложного бензилового эфира бенгальского розового; 2,4,6-трифенилпирилиевая соль сложного бензилового эфира бенгальского розового; бензилтрифенил-фосфониевая соль сложного бензилового эфира бенгальского розового; дифенил-йодоневая соль сложного бензилового эфира бенгальского розового; дифенил-метилсульфониевая соль сложного бензилового эфира бенгальского розового; дифенил-метил-сульфониевая соль сложного бензилового эфира бенгальского розового; триэтил-аммониевая соль сложного бензилового эфира бенгальского розового; трифенил-пирилиевая соль сложного бензилового эфира бенгальского розового; бис(триэтиламмониевая соль) бенгальского розового (3,4,5,6-тетрахлор-2'4',5',7'-тетрайодфлюоресцеин, бис(триэтиламмониевая соль); бис(триэтиламмониевая соль) бенгальского розового; бис(бензил-трифенил-фосфониевая соль) бенгальского розового (3,4,5,6-тетрахлор-2'4',5',7'-тетрайодфлюоресцеин, бис(бензил-трифенил-фосфониевая соль); бис(дифенил-йодная соль) бенгальского розового (3,4,5,6-тетрахлор-2'4',5',7'-тетрайодфлюоресцеин, бис(дифенил-йодная соль); ионная пара бенгальского розового и ди-цетил-пиридинийхлорида; триэтиламмониевая соль сложного этилового эфира бенгальского розового; триэтиламмониевая соль сложного этилового эфира бенгальского розового; сложный этиловый эфир бенгальского розового; сложный метиловый эфир бенгальского розового; три-н-бутил-аммониевая соль сложного октилового эфира бенгальского розового (RB); сложный 6'-O-ацетиловый и этиловый эфир бенгальского розового.

Особенно предпочтительными фотосенсибилизаторами являются зеленые порфирины, такие как BPD-DA, -DB, -MA и -MB, и, в частности, BPD-MA, EA6 и B3. Данные соединения представляют собой производные порфирина, полученные реакцией ядра порфирина с алкином в реакции типа Дильса-Альдера с получением моногидробензопорфирина, и они подробно описаны в выданном патенте США № 5171749, который полностью включен сюда в качестве ссылки. Конечно, можно также применять комбинации фотосенсибилизаторов (т.е. более одного фотосенсибилизатора). Предпочтительно, чтобы спектр поглощения фотосенсибилизатора находился в видимом диапазоне, обычно от 350 до 1200 нм, более предпочтительно от 400 до 900 нм, а еще более предпочтительно от 600 до 900 нм.

BPD-MA описан, например, в патенте США № 5171749; ЕА6 и В3 описаны в заявках на патенты США соответственно №09/088524 и 08/918840, которые все включены сюда в качестве ссылки. Предпочтительные зеленые порфирины имеют основную структуру:

или

или

где R⁴ представляет винил или 1-гидроксиэтил, а R¹, R² и R³ представляют Н, или алкил, или замещенный алкил.

BPD-MA имеет структуру, показанную в формуле 1, в которой R¹ и R² представляют метил, R⁴ представляет винил, а один из R³ представляет Н, а другой представляет метил. ЕА6 имеет формулу 2, в которой R¹ и R² представляют метил, а оба R³ представляют 2-гидроксиэтил (т.е. сложные эфиры этиленгликоля). В3 имеет формулу 2, в которой R¹ представляет метил, R² представляет Н, а оба R³ представляют метил. В обоих ЕА6 и В3 R⁴ также представляет винил. В предпочтительных вариантах реализации изобретения комбинации одного или более фотосенсибилизаторов, выбранных из А-ЕА6, В-ЕА6, или их комбинации используют в практике настоящего изобретения.

Визудин™, который также известен как вертепорфин для инъекций, включает приблизительно равные количества двух региоизомеров BPD-MA (обозначенные как BPD-MA_C и BPD-MA_D). Региоизомеры получают в результате процесса, используемого для их синтеза, при котором происходят модификации колец С и D без значимой химической специфичности. Химическими названиями двух региоизомеров являются 9-метил(BPD-MA_C) и 13-метил(BPD-MA_D)транс-(±)-18-этенил-4,4а-дигидро-3,4-бис(метоксикарбонил)-4а,8,14,19-тетраметил-23Н,25Н-бензо[b]порфин-9,13-дипропаноат. Молекулярная формула представляет собой C₄₁H₄₂N₄O₈ c молекулярной массой приблизительно 718,8. В одном из предпочтительных вариантов реализации фотосенсибилизаторы, применяемые в практике изобретения, не представляют собой комбинацию приблизительно равных количеств двух региоизомеров.

Представления двух региоизомеров, а также иллюстрации кольцевых форм А и В для ЕА6 и В3 следующие:

Родственные соединения формул 3 и 4 также можно использовать; в целом, R⁴ представляет винил или 1-гидроксиэтил, а R¹, R² и R³ представляют Н, или алкил, или замещенный алкил.

Микроагрегаты

МА изобретения приводят к созданию содержащих фосфолипиды мицелл, липосом и их смесей. Фосфолипиды, пригодные для использования в изобретении, могут представлять собой любые естественно встречающиеся или синтетические фосфолипиды, насыщенные или ненасыщенные. Они включают, но не ограничиваются, следующие: фосфатидилхолин, фосфатидилэтаноламин, фосфатидилсерин, фосфатидилинозитол, фосфатидилглицерин, фосфатидовую кислоту, липофосфолипиды, фосфолипид яиц или соевых бобов или их комбинации. Используемый здесь термин "фосфолипид яиц или соевых бобов" относится к фосфолипидам, выделенными из источников в виде яиц и соевых бобов (например, куриных яиц и культивированных соевых бобов).

Фосфолипиды должны быть в любой форме, включая подвергнутые высаливанию или обессоливанию, гидрированные, или частично гидрированные, или естественные, полусинтетические (модифицированные), или синтетические. В предпочтительных вариантах реализации изобретения используемые фосфолипиды представляют собой те, которые способны образовывать липосомы, но также способны привести к созданию мицелл, если высокоэнергетический этап обработки используется для уменьшения размера мультиламеллярных липосом. В одном наборе предпочтительных вариантов реализации изобретения фосфолипиды из яиц, включая яичный фосфатидилглицерин (EPG), не используются.

Еще более предпочтительными являются ненасыщенные фосфатидилглицерины и фосфатидилхолины с заряженными головными группами. Такие предпочтительные варианты реализации включают использование отрицательно заряженных моно- или полиненасыщенных фосфатидилглицеринов и фосфатидилхолинов, таких как пальмитоилолеоилфосфатидилглицерин (POPG), диолеоилфосфатидилглицерин (DOPG), дипальмитоилфосфатидилхолин (DPPC) или их комбинации. Цепь ненасыщенной жирной кислоты предпочтительно находится на той же фосфолипидной молекуле, что и заряженная головная группа, но, альтернативно, желательная комбинация ненасыщенности и заряда может быть достигнута использованием заряженной насыщенной молекулы, такой как DMPG, вместе с ненасыщенной молекулой фосфолипида. В целом предпочтительно ограничить количество ненасыщенного фосфолипида (другими словами, не составлять всю композицию из ненасыщенных фосфолипидов) ввиду большей устойчивости насыщенных фосфолипидов. Предпочтительно соотношение между ненасыщенным заряженным фосфолипидом и насыщенным фосфолипидом составляет, по меньшей мере, приблизительно 1:99, а предпочтительнее соотношение составляет, по меньшей мере, приблизительно 3:97, а еще предпочтительнее в диапазоне приблизительно 10:90 или более. Наиболее предпочтительно соотношение находится в диапазоне от около 40:60 до около 50:50, но может превышать 50:50.

Число ненасыщенностей (двойных связей) в цепи жирной кислоты может находиться в диапазоне около 1-6, но более предпочтительно приблизительно от 1 до 3, а наиболее предпочтительно около 1 или около 2.

Не привязываясь к теории и имея в виду предпочтительное использование ненасыщенных липидов в МА изобретения, считается, что насыщенные ацильные цепи могут не быть достаточно гибкими во время лиофилизации (удаления воды из) МА. Таким образом, в случае липосом, где воду удаляют из объема, заключенного в сердцевине (для которого применима аналогия изготовления изюма из винограда), ненасыщенные ацильные цепи обеспечивают возможность обеспечения большей кривизны в липидной мембране и могут внести необходимую гибкость для обеспечения возможности сжатия во время сушки. Итак, мицеллы, содержащие МА изобретения, менее восприимчивы к указанным эффектам, поскольку у них нет внутренней водной сердцевины (или, альтернативно, они имеют значимо меньшую водную сердцевину). Это может объяснить устойчивость мицеллы, содержащей МА, во время лиофилизации. Гибкость ненасыщенных липидов может быть вероятной причиной образования структуры маленькой устойчивой мицеллы во время микрофлюидизации. Присутствие ненасыщенных липидов также снижает температуру фазового перехода (переход жидкости в гель) композиции до температуры ниже комнатной и вызывает менее выраженный переход. Количество ненасыщенного липида определяет степень, до которой уменьшается температура фазового перехода. Считается также, что присутствие заряженной головной группы на фосфолипиде (например, на фосфатидилглицерине) стабилизирует мелкие липосомы и мицеллы, потому что репульсивный заряд предотвращает слияние в более крупные липосомные структуры.

Все МА изобретения могут включать, состоять из или состоять по существу из любого одного или нескольких фосфолипидов в комбинации с гидрофобным агентом. Предпочтительно фосфолипиды, используемые в МА изобретения, являются ненасыщенными, синтетическими и/или полученными из не животных источников. Предпочтительнее фосфолипиды, используемые в МА изобретения, включают DOPG (1,2-диолеоилфосфатидилглицерин), который представляет собой липид растительного происхождения с двойной ненасыщенностью.

Фосфатидилглицерины (PG) могут также присутствовать в МА изобретения. Примеры таких PG включают димиристоилфосфатидилглицерин (DMPG), DLPG и им подобные. Включение таких PG можно использовать для содействия стабилизации мицелл. Другие типы подходящих липидов, которые можно включить, представляют собой фосфатидилэтаноламины (РЕ), фосфатидовые кислоты (РА), фосфатидилсерины и фосфатидилинозитолы.

Диапазон соотношений между общими липидами и гидрофобным агентом можно использовать в практике изобретения. Соотношение зависит от используемого гидрофобного агента, но должно обеспечить присутствие достаточного числа липидных молекул для образования стабильного МА. Соответствующие соотношения общих липидов: гидрофобного агента могут составлять от около 7:1 и выше, хотя более низкие соотношения также не проявляют побочных эффектов. Предпочтительный диапазон составляет приблизительно от 7:1 до 10:1. Конечно, все промежуточные соотношения в пределах данного диапазона, такие как приблизительно 8:1 и приблизительно 9:1 находятся в пределах диапазона притязаний изобретения. Кроме того, в пределах диапазона притязаний изобретения находятся субпромежуточные соотношения в пределах диапазона, такие как приблизительно от 7,1:1 до 7,9:1, приблизительно от 8,1:1 до 8,9:1 и приблизительно от 9,1:1 до 9,9:1, находятся в пределах диапазона притязаний изобретения. Когда количество липидных молекул недостаточно для образования устойчивого комплекса, липофильная фаза МА может стать насыщенной молекулами гидрофобного агента. Затем любое незначительное изменение условий способа может заставить некоторое количество ранее инкапсулированного гидрофобного агента вытечь на поверхность МА или даже наружу в водную фазу.

Если концентрация гидрофобного агента достаточно высока, он может в действительности осаждаться наружу из водного слоя и способствовать агрегации МА. Чем больше неинкапсулированного гидрофобного агента присутствует, тем выше степень агрегации. Чем больше агрегация, тем больше будет средний размер агрегатов, и МА больше не будет достаточно маленького размера для эффективного применения на этапах, таких как стерилизация фильтрацией. Таким образом, незначительные увеличения содержания липидов могут значимо увеличить способность к фильтрации липосомной композиции увеличением способности образовывать и сохранять мелкие агрегаты. Это особенно предпочтительно при работе со значительными объемами 500 мл, 1 л, 5 л, 40 л или более, в отличие от меньших партий, составляющих приблизительно 100-500 мл или менее.

Когда изготавливаются большие объемы МА, более высокое молярное соотношение фосфолипида обеспечивает большую гарантию возможности надежной асептической фильтрации предоставлением более мелких агрегатов. Кроме того, таким образом, можно избежать существенных потерь активности, которые обычно происходят в больших партиях, связанных, по меньшей мере, частично, с проблемами фильтрации. Другое средство увеличения способности к фильтрации представляет собой получение МА, содержащей мицеллы, поскольку мицеллы меньше, чем липосомы в целом. Такие МА, содержащие мицеллы, легче стерилизуются фильтрацией через фильтр с размером пор 0,22 мкм и являются предпочтительным вариантом реализации изобретения. Дополнительные преимущества МА, содержащих более мелкие мицеллы, представляет собой сниженная потеря активного гидрофобного агента посредством крупных агрегатов, утрачиваемых во время фильтрации или других процессов, и устойчивость более мелких агрегатов после растворения. Таким образом, предпочтительным вариантом реализации изобретения является тот, при котором гидрофобный агент присутствует в количествах или соотношениях, которые благоприятствуют образованию мицелл.

При использовании в МА изобретения комбинации фосфолипидов можно использовать диапазон относительных соотношений липидов в комбинации при описанных выше общих соотношениях липида : гидрофобного агента. Целесообразные соотношения липидов для комбинаций из двух фосфолипидов находятся в диапазоне от около 50:50 до около 97:1. Конечно, все промежуточные соотношения в пределах данного диапазона, такие как приблизительно 70:30, приблизительно 80:20 и приблизительно 90:10, находятся в пределах диапазона притязаний изобретения. Как указано использованием соотношения 99:1, субпромежуточные соотношения в пределах диапазона, такие как приблизительно от 71:29 до 29:21, приблизительно от 81:19 до 89:11 и приблизительно от 91:9 до 97:3, находятся в пределах диапазона притязаний изобретения. Примеры комбинаций двух фосфолипидов, где можно использовать такие соотношения, включают DMPC:DMPG, DMPC:EPG, DMPC:POPG и DMPC:DOPG. Дополнительным примером является DMPC:EPG, предпочтительно в соотношении соответственно около 5:3. При данной комбинации можно использовать даже более высокие соотношения гидрофобного агента:липида, такие как соответственно 1:10, 1:15 или 1:20.

Особенно предпочтительный вариант реализации МА изобретения включает гидрофобные агенты в общем соотношении фосфолипида:гидрофобного агента 8:1 при соотношении липидов DMPC:DOPC 60:40 в комбинации, содержащей антиоксиданты ВНТ и АР. В частности, в таких МА можно использовать такие гидрофобные агенты, как ЕА6 и/или BPD-MA. Предпочтительны также МА композиции, включающие ЕА6 в мелких липосомах, включающих липиды и другие компоненты, как описано в данном описании.

Антиоксиданты

В предпочтительных вариантах реализации, включающих использование ненасыщенных фосфолипидов, изобретение охватывает применение антиоксидантов для предотвращения окисления фосфолипидов. Было известно, что самоокисление ненасыщенных ациловых цепей является проблемой для длительного хранения липосомных композиций. Невозможность предотвратить окислительный распад ненасыщенных фосфолипидов приводит к появлению подкомпонентов, таких как лизолипиды и жирные кислоты, которые могут быть нежелательны в некоторых МА композициях. По существу, антиоксиданты, пригодные для включения в микроагрегаты, содержащие фосфолипид, для улучшения длительного хранения, известны в данной области. Примеры таких антиоксидантов включают бутилированный гидрокситолуол (ВНТ), альфа-токоферол и аскорбилпальмитат (АР), а также буферные агенты для регуляции рН, такие как фосфаты и глицин. Предпочтительно ВНТ присутствует в количестве около 0,01-0,02% (мас), а АР - около 0,1-0,2% (мас).

ВНТ гидрофобен, и следовало бы ожидать, что он останется в липофильных средах для МА изобретения. ВНТ обладает способностью предотвращать цепное распространение во время самоокисления, акцептируя радикалы, образованные во время окислительного распада липидов. Аскорбиновая кислота обладает способностью действовать в качестве антиоксиданта и действовать с другими антиоксидантами, такими как альфа-токоферол. Было показано, что система ВНТ/аскорбиновая кислота обеспечивает возможность регенерации ВНТ после его превращения в феноксильный радикал после очистки окисленных липидов от свободных радикалов, приводя посредством этого к появлению аскорбиловых радикалов. Указанный последний фактор оправдывает описанные выше относительные массовые соотношения между АР и ВНТ. АР использовали вместо аскорбиновой кислоты, потому следовало бы ожидать, что гидрофобная природа первого будет концентрировать антиоксидант внутри липофильных сред.

Другое соображение в плане борьбы против окисления состоит в заполнении головных пространств контейнеров газообразным азотом и герметичной укупорке таких контейнеров. Кроме того, и ввиду того, что ионы металлов могут катализировать процессы окисления, предпочтительно использование лекарственных препаратов, наполнителей и контейнеров высокого качества, тщательной очистки производственного оборудования и целесообразно использовать соединения, образующие хелаты с ионами металлов.

Криопротективные агенты и изотонические агенты

В предпочтительном варианте реализации изобретения МА стабилизируются лиофилизацией. Преимуществом МА изобретения, содержащих мицеллы, является то, что мицеллы могут легче лиофилизироваться, по сравнению с липосомами, ввиду отсутствия водной сердцевины. Лиофилизация липосом требует прохождения воды, по меньшей мере, через одну двухслойную липидную мембрану, что приводит к увеличению времени обработки и расходам. Отсутствие водной сердцевины также позволяет мицеллам иметь более высокую концентрацию фосфолипида на единицу объема. Таким образом, большее количество гидрофобного агента может быть солюбилизировано фосфолипидом на единицу объема мицеллы. Это позволяет конечному мицеллярному МА носителю доставки иметь более высокую плотность лекарственного препарата на единицу объема, чем у других носителей доставки, таких как отдельно липосомы.

МА данного изобретения могут содержать криопротектор для стабилизации МА во время лиофилизации. Альтернативно, физические структуры МА можно сохранить присутствием достаточного количества воды после лиофилизации. Это можно осуществить соответствующей регуляцией степени лиофилизации. Поскольку в мицеллах нет заключенного объема, МА изобретения, содержащие мицеллы, способствуют большему контролю за растворимыми в воде компонентами, подобными растворителю или соли, который предстоит удалить при получении носителей доставки, требующих такого удаления.

В заявляемом изобретении можно использовать любой криопротективный агент, используемый в области лиофилизированных композиций, такой как ди- или полисахариды или другие увеличивающие объем агенты, такие как лизин. Далее можно использовать изотонические агенты, обычно добавляемые для поддержания изомолярности с биологическими жидкостями. В предпочтительных вариантах реализации используют дисахарид или полисахарид, и он действует и в качестве криопротективного агента, и в качестве изотонического агента. В особенно предпочтительном варианте реализации дисахарид или полисахарид выбирают из группы, состоящей из лактозы, трегалозы, мальтозы, мальтотриозы, палатинозы, лактулозы или сахарозы, причем предпочтительна лактоза или трегалоза. Эффективные сахара, такие как трегалоза и лактоза, способны связывать водород с фосфолипидной головной группой вместо воды. Высказывалась также гипотеза, что эффективные сахара также действуют в качестве пространственной матрицы для уменьшения противодействия фосфолипидов на внешнюю поверхность прилегающих МА, таких как липосомы.

Когда процесс гидратации липидной пленки продолжителен, наблюдается тенденция к образованию более крупных липосом, и гидрофобные агенты могут даже осаждаться. Добавление дисахарида или полисахарида обеспечивает самую большую площадь поверхности для отложения тонкой пленки МА и, фактически, немедленной последующей гидратации. Данная тонкая пленка обеспечивает более быструю гидратацию, так что, когда МА первоначально образуются добавлением водной фазы (гидратированные), МА состоят из частиц меньшего и более однородного размера. Это обеспечивает значительные преимущества с точки зрения легкости изготовления.

Однако возможно также, что, когда сахарид присутствует в композиции изобретения, его добавляют после образования сухой липидной пленки как часть водного раствора, используемого для гидратации. В особенно предпочтительном варианте реализации сахарид добавляют к сухой липидной пленке изобретения во время гидратации.

Дисахариды или полисахариды предпочтительнее моносахаридов для данной цели. Для поддержания осмотического давления МА композиций изобретения, аналогичного таковому крови, следует добавить не более чем 4-5% моносахаридов. В отличие от этого, можно использовать около 9-10% дисахарида без генерирования неприемлемого осмотического давления. Большее количество дисахарида обеспечивает большую площадь поверхности, что приводит к меньшим размерам частиц, образующихся во время гидратации липидной пленки.

Также дисахарид или полисахарид при их присутствии составляют в композицию при предпочтительном соотношении соответственно около 10-20 сахарида к 0,5-0,6 общего количества фосфолипидов, еще более предпочтительно при соотношении приблизительно 10 к 1,5-4,0. В одном варианте реализации предпочтительная, но не ограничивающая композиция представляет собой лактозу или трегалозу и общее количество фосфолипидов в соотношении соответственно приблизительно от 10 к 0,94-1,88 до приблизительно 10 к 0,65-1,30. Присутствие дисахарида или полисахарида в композиции не только имеет тенденцию давать выход МА, имеющих крайне маленькие и узкие диапазоны размеров агрегатов, но также предоставляет МА композиции, в которых гидрофобные агенты, такие как гидромонобензопорфириновый фотосенсибилизатор, могут быть устойчиво включены эффективным образом, т.е. с эффективностью инкапсуляции, приближающейся к 80-100%. Более того, МА, изготовленные с сахаридом, обычно проявляют улучшенную физическую и химическую устойчивость, так что они могут удерживать включенный гидрофобный агент, такой гидро-монобензопорфириновый фотосенсибилизатор, без утечки при продолжительном хранении или в виде растворенной водной суспензии, или в виде криогенно высушенного порошка.

Лиофилизация

После изготовления МА изобретения при желании могут быть лиофилизированы для длительного хранения. Например, BPD-MA, предпочтительный гидро-монобензопорфириновый фотосенсибилизатор, сохранял свою активность в подвергнутой криогенной сушке МА композиции, в течение периода, по меньшей мере, 9 мес при комнатной температуре, и планировался срок хранения, по меньшей мере, 2 года. Если композиция лиофилизирована, ее можно упаковать во флакончики для последующего растворения (восстановления) подходящим водным раствором, таким как стерильная вода или стерильная вода, содержащая сахарид и/или другие подходящие наполнители, непосредственно перед применением. Например, растворение может представлять собой просто добавление воды для инъекций непосредственно перед введением.

В данной области известны различные методики лиофилизации. Например, флакончики, содержащие МА изобретения, можно сначала заморозить до -45°С, а затем держать там в течение периода до около 90 мин. За этим может следовать цикл первичной сушки в высоком вакууме, при котором температуру медленно повышают приблизительно до 10°С в течение периода обычно порядка около 50 ч. За этим может следовать цикл вторичной сушки при 20°С в течение до 24 ч. Как только давление лиофилизатора стабилизируется на уровне около 55-65 мТорр (73-87 микробар), цикл заканчивается. Затем флакончики можно герметично укупорить после продувки газообразным азотом. Общее правило лиофилизации состоит в том, что для успешной регидратации предпочтительна твердая, хрупкая, не слипшаяся и однородная лепешка.

Кроме того, применение лиофилизации может предотвратить гидролиз гидрофобных агентов, восприимчивых к таким реакциям. Например, фотосенсибилизатор BPD-MA может гидролизироваться в BPD-DA.

Размер

В одном аспекте изобретения МА имеют достаточно маленький и узкий размер, так что можно эффективно осуществить асептическую фильтрацию композиции через гидрофильный фильтр 0,22 мкм и большими объемами от 500 мл до 1 л или более без значимого засорения фильтра. По существу, МА, содержащие мицеллы и мелкие липосомы, являются предпочтительным вариантом реализации изобретения. Кроме того, и благодаря их меньшему размеру МА изобретения могут главным образом или преимущественно содержать мицеллы, несущие гидрофобный агент. МА изобретения могут содержать более чем приблизительно 50%, более чем приблизительно 60%, более чем приблизительно 75%, более чем приблизительно 80%, более чем приблизительно 90% и более чем приблизительно 95% мицелл. Еще более предпочтительно, МА изобретения могут содержать более чем приблизительно 97%, приблизительно 98% или приблизительно 99% мицелл. Наиболее предпочтительно, в желаемых обстоятельствах МА изобретения состоят только из мицелл. Альтернативно, МА изобретения могут в некоторых обстоятельствах (когда используют способ экструзии для уменьшения размера мультиламеллярных липосом, а не высокоэнергетический процесс, такой как микрофлюидизация) содержать до 100% липосом.

Мицеллы относятся к микроагрегатам с гидрофобной (липофильной) "хвостовой" частью фосфолипидов, в целом ориентированной в направлении внутренности мицеллы. Предпочтительно, мицеллы имеют "хвостовую" часть, в целом ориентированную в направлении центра мицеллы. Мицеллы не имеют двухслойной мембраны и поэтому не считаются везикулами или липосомами. Мицеллы изобретения имеют средние диаметры менее чем около 30 нм (нанометров). Предпочтительно, они имеют средние диаметры менее чем около 20 нм.

Липосомы относятся к микроагрегатам, включающим, по меньшей мере, один фосфолипидный слой, составленный из двух липидных однослойных мембран, имеющих гидрофобную "хвостовую" область и гидрофильную "головную" область. Структура мембранного двойного слоя такова, что гидрофобные (неполярные) "хвосты" липидных однослойных мембран ориентируются в направлении центра двухслойной мембраны, в то время как гидрофильные "головки" ориентируются в направлении водной фазы. Они в целом включают полностью закрытые, липидные двухслойные мембраны, которые содержат захваченный водный объем. Благодаря двухслойной мембране значительная часть (приблизительно до половины) фосфолипидов будут иметь свои гидрофобные (липофильные) части, в целом ориентированные в сторону от центра липосомы. Липосомы включают уноламеллярные везикулы, имеющие одну двухслойную структуру мембраны или мультиламеллярные везикулы, имеющие множественные двухслойные структуры мембраны, причем каждая двухслойная структура отделена от следующей водным слоем. Средние диаметры липосом больше, чем диаметры мицелл.

В липосомах гидрофобный агент может быть захвачен в водную фазу липосомы или может быть ассоциирован с "хвостовой" частью фосфолипидов в липидной двухслойной мембране. В мицеллах гидрофобный агент оставлен для ассоциации только с "хвостовой" частью фосфолипидов в сердцевине мицеллы. Кроме того, и мицеллы, и липосомы можно использовать для содействия "нацеливанию" гидрофобного лекарственного препарата в активный участок или для солюбилизации гидрофобных лекарственных препаратов для парентерального введения.

В одном аспекте настоящего изобретения используется способность образовывать мицеллы и липосомы одной и той же смесью гидрофобного агента и фосфолипидов. Это привело бы к образованию МА, которые имеют два вида распределения их диаметров, указывая на присутствие и мицелл, и липосом. В другом аспекте изобретения мицеллы и липосомы образуются в условиях, которые благоприятствуют одному типу микроагрегатов перед другими в той же смеси. Условия, которые благоприятствуют образованию мицелл, включают присутствие низкого содержания соли в смеси, а также использование водного раствора с низким содержанием соли для гидратирования высушенной смеси. "Низкое содержание соли" относится к условиям, содержащим менее чем около 0,1 N свободных катионов или анионов. Предпочтительно, оно относится к менее чем около 0,01 N свободных ионов. Более предпочтительно, оно относится к менее чем около 0,001 N свободных ионов.

Предпочтительные МА изобретения имеют средний размер диаметра агрегатов гораздо ниже приблизительно 300 нм, предпочтительнее ниже приблизительно 200 нм. Наиболее предпочтительно, МА изобретения имеют средний размер диаметра агрегатов ниже приблизительно 100 нм, а иногда, в зависимости от выбранных условий, в диапазоне 10-50 нм. Размер микроагрегатов, изготовленных содержащими QLT 0074, DOPG и DMPC (см. пример 1 ниже) были измерены с использованием трех различных способов (с использованием измерителя субмикронных частиц NICOMP 370, анализом излома при замораживании и ВЭЖХ с исключением размера). Анализ излома при замораживании показал смесь мицелл (диаметром 7-15 нм) и относительно малочисленные липосомы (диаметром от 6 до 270 нм). ВЭЖХ с исключением размера указала средний размер частиц 28 нм при тестировании в четырех различных средах (раствор с фосфатным буфером (PBS), 0,9% хлорид натрия, 9,2% лактозы и 5% декстрозы) при диапазоне 25-35 нм.

Как обсуждено в данном описании, изобретение регулирует 4 основных параметра, которые в неожиданной степени могут воздействовать на легкость уменьшения размера агрегатов. В результате значительно улучшается возможность фильтрации МА изобретения, особенно стандартной асептической фильтрацией. Указанные параметры представляют собой (1) продукцию мицелл и мелких липосом за счет использования условий низкого содержания солей; (2) подходящее молярное соотношение между гидро-монобензопорфириновым фотосенсибилизатором и общим количеством фосфолипидов; (3) температуру во время этапа гидратации и (4) температуру во время этапа гомогенизации или уменьшения размера. Последние два параметра обсуждаются ниже.

Способность к фильтрации можно тестировать пропусканием МА композиции через Microfluidizer^TM 3 раза и удаления образца шприцем. Шприц соединяют с гидрофильным фильтром с размером пор 0,22 мкм, а затем помещают в шприцевой насос. Постоянную скорость движения поршня устанавливают на 10 мл/мин и фильтрат собирают до тех пор, пока фильтр не заблокируется крупными агрегатами. Затем измеряют объем фильтрата и регистрируют в мл/см² или г/см², причем квадратный см представляет собой эффективную площадь фильтрации. Таким образом, способность к фильтрации в целях изобретения определяют как максимальный объем или массу МА композиции, которую можно профильтровать через фильтр с порами 0,22 мкм.

МА изобретения можно использовать в качестве носителя доставки для составляющего гидрофобного агента для нацеливания на любую клетку или ткань, для которой желателен контакт с агентом. В предпочтительных вариантах реализации изобретения агент представляет собой фотосенсибилизатор, который должен быть доставлен перед световым облучением, как часть фотодинамической терапии (PDT). Особенно предпочтительные МА изобретения включают гидро-монобензопорфириновый фотосенсибилизатор, включая BPD-MA и EA6, для применения при фотодинамической терапии (PDT) или диагностике.

МА изобретения также предпочтительно включает мицеллы, которые легко и значительно дестабилизируются в присутствии белков, солей, заряженных элементов и/или полимеров. Такие МА хорошо подходят в качестве фармацевтической композиции для доставки гидрофобных лекарственных препаратов в жидкости, такие как кровь, которая содержит белки, соли, заряженные элементы и полимеры. Благодаря способности дестабилизироваться после доставки к целевым состояниям МА изобретения могут быстро доставить гидрофобные агенты к мишеням, таким как поток крови, где лекарственные препараты могут быть захвачены или перенесены в компоненты крови для дальнейшего транспорта и/или нецеливания на основании особенностей компонентов. МА, по существу, можно считать "быстро распадающимися" в том смысле, что МА устойчив in vitro, но при введении in vivo гидрофобный лекарственный препарат (такой как фотосенсибилизатор) быстро высвобождается в поток крови, где он ассоциируется с компонентами крови, такими как сывороточные липопротеиды. Другой благоприятный эффект данного переноса снижается отложением гидрофобных агентов в различных органах, особенно в печени. По существу, фармакокинетика доставки гидрофобного агента такими мицеллами изменена, по сравнению с применением других носителей или устройств доставки, таких как те, которые быстро не высвобождают агент, или те, которые не переносят агент к компонентам крови.

Получение

Способы производства МА изобретения включают, состоят и/или по существу состоят из комбинации гидрофобных агентов и фосфолипидов и воздействия на них условий, способных сформировать мицеллы, мелкие липосомы или их комбинации, как обсуждено выше. Предпочтительно, способы включают использование фосфолипидов, способных формировать липидные двухслойные мембраны и приводить к продукции устойчивых мицелл и/или мелких липосом. Полученные в результате МА, особенно те, которые включают или состоят из мицелл изобретения, не содержат диспергирующих средств, обычно используемых для производства мицелл. Отсутствие диспергирующих средств может заметно снизить токсичность, которая, как известно, приводит к гемолизу и повреждению почек. Для содействия формированию мицелл МА изобретения изготавливают в условиях низкого содержания солей, потому что, как отмечено выше, мицеллы изобретения дестабилизируются солью.

В целом, МА изобретения продуцируют растворением молекул желательного составляющего компонента МА (такого как желательные фосфолипиды, гидрофобный агент и, необязательно, антиоксиданты и криопротекторы) в растворителе для образования "промежуточного комплекса". Предпочтительными растворителями являются органические или иным образом не водные. Подходящие органические растворители включают любой летучий органический растворитель, такой как простой диэтиловый эфир, ацетон, метиленхлорид, хлороформ, пиперидин, пиперидино-водные смеси, метанол, трет-бутанол, диметилсульфоксид, N-метил-2-пирролидон и их смеси.

Предпочтительно, органический растворитель является не смешиваемым с водой, таким как метиленхлорид, но не смешиваемость с водой не требуется. В любом случае, выбранный растворитель должен не только быть способен растворить все компоненты липидной пленки, но должен также не вступать в реакцию с данными компонентами ни в какой значимой степени или другим образом оказывать вредное воздействие на них.

Затем органический растворитель удаляют из полученного раствора для образования сухой липидной пленки любой известной лабораторной методикой, которая не оказывает значимого вредного воздействия на сухую липидную пленку и гидрофобный агент. Такие методики включают любые методики, которые удаляют растворитель через его газообразную фазу, включая испарение или вакуум. В одном варианте реализации растворитель удаляют помещением раствора в вакуум до испарения органического растворителя. Твердый остаток представляет собой сухую липидную пленку изобретения, которая содержит агрегаты компонентов МА, считающиеся "предшественником". Толщина липидной пленки не имеет принципиального значения, но обычно варьирует от около 30 до около 45 мг/см², в зависимости от количества твердого остатка и площади поверхности сосуда, который его содержит. В другом варианте реализации изобретения растворитель удаляют как часть способа получения "предшественника" Nanba et al. (патент США №5096629, который включен сюда в качестве ссылки, как если бы он был полностью изложен), при котором нагревают "промежуточный комплекс" и подвергают его сушке посредством устройства немедленной вакуумной сушки, такого как CRUX 8B™ (Orient Chemical Ind., Ltd., Japan), для получения липидного порошка, содержащего агрегаты компонентов МА.

После образования пленку или порошок можно хранить в течение продолжительного периода времени, предпочтительно не более чем 4-21 д, перед гидратацией. Хранение может осуществляться в соответствующем газе, таком как аргон. Хотя температура во время периода хранения липидной пленки или порошка также не является важным фактором, она предпочтительно ниже комнатной температуры, наиболее предпочтительно, в диапазоне от около -20 до около 4°С. Одно преимущество способа по сравнению с получением "предшественника" Nanba et al. состоит в уменьшении вариабельности от партии к партии, наблюдавшейся у тонкой пленки, которая возникает вследствие использования множественных партий в испарительном сосуде.

Сухую липидную пленку или порошок можно гидратировать водным раствором, предпочтительно содержащим дисахарид или полисахарид, если он ранее не присутствовал. Это приведет к образованию больших мультиламеллярных липосом, которые можно далее обработать экструзией или высокоэнергетическим способом, таким как микрофлюидизация, для образования частиц желаемого размера. Примеры водных растворов, которые можно использовать в течение этапа гидратации, включают стерильную воду или разведенный раствор лактозы. В одном варианте реализации изобретения раствор представляет собой физиологически изотонический раствор, такой как 9,2% лактоза, который обеспечивает возможность болюсных инъекций. Предпочтительно, водный раствор стерилен. Предпочтительнее, для производства мицелл и стабилизации мелких липосом раствор является низко солевым. Считают, что присутствие солей нейтрализует отрицательные отталкивающие заряды, которые предотвращают агрегацию или слияние данных мелких частиц в более крупные липосомы.

Объем водного раствора, используемого во время гидратации, может в значительной степени варьировать, но не должен быть настолько велик как около 98%, ни настолько мал как около 30-40%. Обычный диапазон используемых объемов должен быть от около 50 или 60% до около 95%, предпочтительно от около 75% до около 95%, предпочтительнее от около 80% до около 90%, а наиболее предпочтительно приблизительно от 85 до 90%. Конечно, все субдиапазоны от около 30% до около 98% включены в качестве части изобретения.

Физическую манипуляцию с материалом во время гидратации можно проводить различными средствами, включая смешивание и вращение на роторном испарителе, ручное взбалтывание сосудов и использование стандартных лабораторных средств перемешивания и встряхивания (включая решетчатые мешалки с пластинами, миксеры с высоким сдвигом, пластинчатые мешалки и их комбинации). Предпочтительными в практике изобретения являются способы высокоскоростного перемешивания, такие как использование смешивания с высоким сдвигом или овальных решетчатых смесителей.

После гидратации образуются крупные агрегаты, которые включают терапевтически эффективное количество гидрофобного агента. "Терапевтически эффективное количество" может широко варьировать, в зависимости от ткани, подлежащей лечению, и того, связан ли гидрофобный агент со смецифичным для мишени лигандом, таким как антитело или иммунологически активный фрагмент. Обычно терапевтически эффективное количество такого, чтобы создать дозу гидрофобного агента в пределах диапазона от около 0,1 до около 20 мг/кг, предпочтительно приблизительно от 0,15 до 2,0 мг/кг, а еще предпочтительнее от около 0,25 до около 0,75 мг/кг. Предпочтительно, концентрация гидрофобного агента мас./об. в "промежуточном комплексе" находится в диапазоне от около 0,1 до около 8,0-10,0 г/л, когда смесь становится такой, как густой гель, так что невозможно с ней обращаться или ввести ее субъекту обычными средствами. Наиболее предпочтительно концентрация составляет приблизительно от 2,0 до 2,5 г/л.

Следует отметить, что если агент представляет собой фотосенсибилизатор, то различные параметры, используемые для избирательной фотодинамической терапии, являются взаимно связанными. Поэтому терапевтически эффективное количество следует также корригировать с учетом других параметров, например, текучести, интенсивности падающего излучения, длительности света, используемого при фотодинамической терапии, и интервала времени между введением фотосенсибилизирующего агента и терапевтическим облучением. В целом, все указанные параметры регулируют для того, чтобы вызвать значительное повреждение ткани, считающейся нежелательной, такой как неоваскулярная или опухолевая ткань, без значительного повреждения окружающей ткани, или для обеспечения возможности наблюдения такой нежелательной ткани без значительного повреждения окружающей ткани.

Этап гидратации должен иметь место при температуре, которая не превышает температуру стеклования образованных агрегатов фосфолипида и гидрофобного агента. Для фотоссенибилизаторов изобретения указанная температура составляет около 30°С. Предпочтительно, температура находится на уровне комнатной температуры или ниже, таком как от 10 до 25°С, или даже предпочтительнее от 15 до 20°С или от 17 до 22°С, особенно предпочтительная температура составляет около 21°С. Температуру стеклования агрегатов фосфолипида и гидрофобного агента можно измерить с использованием дифференциального сканирующего микрокалориметра. Madden et al. ("Spontaneous vesiculation of large multilamellar vesicles composed of saturated phosphatidylcholine and phosphatidylglycerol mixtures." Biochemistry, Vol.27, pp.8724-8730 (1988)) описывают воздействия температуры и ионной силы на образование пузырьков.

Использование ненасыщенных заряженных липидов, как предусмотрено изобретением, может эффективно снизить температуру фазового перехода Тс (переход жидкости в гель) композиции до уровня ниже комнатной температуры и вызвать менее выраженный переход. Количество ненасыщенного липида определяет степень снижения Тс.

Размеры частиц крупнозернистых агрегатов, образованных сначала во время гидратации, затем гомогенизируются в более равномерный размер и/или уменьшаются до меньшего диапазона размера, составляющего менее чем от около 50 до около 300 нм, в зависимости от используемого способа уменьшения размера. Предпочтительно, данная гомогенизация и/или уменьшение размера также проводится при температуре ниже температуры стеклования комплекса гидрофобного агента-фосфолипида, образовавшегося на этапе гидратации. Для фотосенсибилизаторов изобретения такая температура не превышает приблизительно 30°С и предпочтительно составляет температуру ниже комнатной, приблизительно 25°С. Было обнаружено, что температура гомогенизации с фотосенсибилизаторами предпочтительно находится на уровне комнатной температуры или ниже, например, 15-20°С. При более высоких температурах гомогенизации, таких как приблизительно 32-42°С, как ожидается, относительная способность к фильтрации МА композиции может первоначально улучшиться вследствие увеличенной текучести, но затем неожиданно имеет тенденцию уменьшаться при продолжении перемешивания вследствие увеличивающегося размера частиц.

Во время этапа гомогенизации можно использовать различные способы высокоскоростного перемешивания или высокоэнергетического воздействия на систему. Примеры таких способов включают микрофлюидизацию (измельчение струей жидкости), смешивание с высоким сдвигом и обработку ультразвуком. Хотя обработка ультразвуком эффективна, она не идеальна для применения при крупномасштабном производстве МА. Обработка посредством указанного выше высокоэнергетического устройства приводит к продукции мелких частиц, обычно смеси мелких липосом и мицелл. Экструзия представляет собой другой способ уменьшения размера. Экструзия приводит к продукции мелких липосом (достигающих размер от 50 до 100 нм), но авторы изобретения не наблюдали образования мицелл при данной процедуре. Экструзия включает воздействие на гидратированный материал под давлением и при температурах, которые, как известно, делают липосомные композиции жидкими, для прохождения через мембранные фильтры с определенным размером пор. Экструзия, хотя и соответствующая партиям материала лабораторного масштаба, может быть не идеальной для крупномасштабных способов, поскольку 1) поры засоряются даже при высоких значениях давления, превышающих 1000 фунтов/дюйм² (6895 кПа), 2) площадь поверхности мембраны фильтра и объем экструдера являются ограничениями и 3) множественные дискретные прохождения через экструдер повышают вероятность различий между партиями.

Устройства для описанных выше способов включают Microfluidizer™ (такой как Microfluidics™ модель 110F); устройство для обработки ультразвуком; миксер с высоким сдвигом; гомогенизатор; стандартный лабораторный аппарат для встряхивания или мешалку или любое другое устройство для перемешивания. Конечно, модификации в таких способах для соответствия конкретному представляющему интерес гидрофобному агенту и образования желательных МА находятся в пределах диапазона притязаний изобретения. В одном предпочтительном варианте реализации изобретения указанные способы используют для производства МА, содержащих главным образом мицеллы.

Такие способы можно использовать для производства МА с различными соотношениями мицелл, липосом и их комбинаций. В вариантах реализации, при которых продуцируют и мицелли и липосомы, их можно разделить распределением размера двух типов, наблюдающимся в комбинациях мицелл и липосом. Это связано со значимо меньшим размером мицелл по сравнению с липосомами. Анализ размера МА можно выполнить способами, включающими электронную микроскопию, для исключения крупных агрегатов, таких как липосомы, и использованием устройства для измерения размера частиц, которое можно использовать в комбинации с обычными способами подбора для распределений одного и двух видов. Другой способ представляет собой использование опосредованного хлоридом марганца (Mn²⁺) ядерного магнитного резонанса (³¹P-ЯМР), при котором меченные фосфором³¹ головные группы липидов на внутреннем слое двухслойной липидной структуры липосом не гасятся Mn²⁺, потому что Mn²⁺ не может легко пройти через двухслойную мембрану для вхождения в заключенный объем. Таким образом, липосомы будут продуцировать остаточный ЯМР сигнал, составляющий приблизительно 30-40% для крупных и мелких липосом после добавления Mn²⁺. Однако все меченые ³¹Р головные группы липидов мицеллы находятся на поверхности и, следовательно, полностью подвержены воздействию гашению Mn²⁺. Таким образом, мицеллы не продуцируют остающийся ЯМР сигнал вследствие гашения после добавления Mn²⁺ (см. фиг.1).

В предпочтительном варианте реализации для перемешивания используют устройство высокого давления, такое как Microfluidizer™. Некоторые модели микрофлюидизации представляют собой устройства непрерывной обработки, позволяющие производить продукт в масштабе партий. При микрофлюидизации используются потоки гидратированного материала под высоким давлением, которые сталкиваются на сверхвысоких скоростях в точно определенных микроканалах. В камере взаимодействия два потока жидкости на высокой скорости сталкиваются друг с другом под углом 90°. Комбинированные силы сдвига, соударения и кавитации приводят к продукции липосом и мицелл. При микрофлюидизации большое количество тепла генерируется во время короткого периода времени, в течение которого жидкость проходит через камеру взаимодействия с высоким давлением. По мере увеличения температуры микрофлюидизации текучесть мембран также увеличивается, что исходно облегчает уменьшение размера частиц. Например, способность к фильтрации может увеличиться до четырех раз исходными несколькими прохождениями через устройство Microfluidizer™. Увеличение текучести двухслойной мембраны способствует уменьшению размера частиц, что облегчает фильтрацию конечной композиции. При первоначальных нескольких прохождениях данный механизм увеличенной текучести преимущественно преобладает в способе.

Однако по мере увеличения и количества прохождений, и температуры большинство молекул гидрофобного агента, очевидно, выдавливаются в случаях, связанных с липосомами, увеличивая тенденцию липосом к агрегации в более крупные частицы. В точке, в которой агрегация пузырьков начинает преобладать в процессе, размеры больше нельзя уменьшить.

По указанной причине в способах изобретения температуру гомогенизации охлаждают и поддерживают на уровне температуры, не превышающем комнатную температуру, после того как композиция проходит через зону максимального перемешивания, т.е. камеру взаимодействия устройства Microfluidizer™. Соответствущее охлаждающее устройство может быть легко предоставлено для любого стандартного перемешивающего устройства, в котором должна происходить гомогенизация, например, Microfluidizer™, таким образом, как циркуляцией холодной воды в соответствующий охлаждающий кожух вокруг смесительной камеры или другой зоны максимальной турбулентности. Хотя давление, используемое в таких устройствах высокого давления, не имеет решающего значения, нередко применяют давление от около 10000 до около 16000 фунтов/дюйм² (68950-110300 кПа).

Не следовало бы ожидать, что поддержание температуры гидратации и этапа гомогенизации/уменьшения на уровне ниже 30°С даст меньшие размеры частиц. В действительности, изобретение противоречит обычному представлению о том, что маленькие размеры частиц достигаются скорее увеличением, а не снижением данных температур. См., например, M.Lee et al., "Size Distribution of Liposomes by Flow Field-Flow Fractionation", J.Pharm. & Biomed.Analysis, 11:10,911-20 (1993), уравнение (6), показывающее диаметр частиц "d", как обратно пропорционально связанный с температурой "Т", и фиг.6b в указанной публикации, показывающую препарат липосом I (полученной приблизительно при 70°С), имеющей размер частиц, меньший, чем препарат липосом II (полученный приблизительно при 23°С).

В качестве последнего этапа МА композиции изобретения предпочтительно асептически фильтруют через фильтр, имеющий крайне маленький размер пор, т.е. 0,22 мкм. Хотя в данной области известны другие способы стерилизации, такие как нагревание и рентгеновское облечение, использование таких способов может привести к необратимым структурным изменениям липидов и гидрофобных агентов, таких как многие фотосенсибилизаторы. В данной области известно широкое разнообразие фильтрационных устройств, включающих картриджи Durapore TP, Millipak 100, Millidisk 40S и Millidisk MCGL. Величины фильтрового давления, используемого во время стерилизационной фильтрации, могут широко варьировать в зависимости от объема композиции, плотности, температуры, типа фильтра, размера пор фильтра и размера МА. Однако в качестве руководства обычный набор условий фильтрации должен быть следующим: давление фильтрации 15-25 фунтов/дюйм² (103,4-172,4 кПа); нагрузка фильтрации от 0,8 до 1,5 мл/см² и температура фильтрации около 25°С. Предпочтительно используют гидрофильный Millidisk 40S при нагрузке приблизительно 1 мл/см².

Обычная общая процедура получения гидромонобензопорфиринового фотосенсибилизатора, содержащего МА изобретения, описана ниже с дополнительными иллюстративными деталями:

(1) Стерильная фильтрация метиленхлорида в качестве органического растворителя через гидрофобный фильтр с размером пор 0,22 мкм.

(2) Добавление DMPC:EPG:BPD:MA в соотношении 4,7:3,25:1 и наполнителей в профильтрованный органический растворитель, растворяя и наполнители, и фотосенсибилизатор для образования "промежуточного комплекса".

(3) Фильтрация полученного раствора через гидрофобный фильтр с размером пор 0,22 мкм.

(4) Перенос фильтрата в роторное испарительное устройство, такое, как имеется в продаже под названием Rotoevaporator.

(5) Удаление органического растворителя для образования сухой липидной пленки.

(6) Анализ липидной пленки для определения уровня концентрации органического растворителя; необязательно продолжающееся удаление до тех пор, пока уровень органического растворителя не будет ниже 0,01%.

(7) Приготовление 10% раствора лактозы. Если МА композицию предстоит инъецировать, данный раствор должен быть пригоден для инъекций.

(8) Фильтрация раствора лактозы через гидрофобный фильтр с размером пор 0,22 мкм.

(9) Гидратация липидной пленки профильтрованным 10% раствором лактозы для образования крупных агрегатов.

(10) Уменьшение размеров частиц крупных агрегатов пропусканием их через Microfluidizer™, необязательно при 9000 фунтов на квадратный дюйм (62055 кПа) в течение приблизительно 5 дискретных прохождений для получения мицелл.

(11) Определение распределения уменьшенного размера агрегатов МА.

(12) Асептическая фильтрация МА композиции через гидрофобный фильтр с размером пор 0,22 мкм. (Необязательно раствор можно сначала предварительно профильтровать через предварительный фильтр с размером пор 5,0 мкм или меньше.)

(13) Анализ активности фотосенсибилизатора.

(14) Заполнение флакончиков МА композицией.

(15) Лиофилизация.

Указанную выше процедуру можно приспособить для избирательной продукции мицелл проведением всех соответствующих этапов в условиях низкого содержания солей для содействия последующей продукции мицелл после гидратации. В сущности, увеличивающие объем агенты не нужно использовать. При таких видах применения полученные мицеллы имеют диаметр порядка 15 нм, который находится на нижнем пределе для возможных размеров липосом. Структуру мицелл подтвердили использованием ³¹Р-ЯМР.

Альтернативная общая процедура продукции с использованием способа получения "предшественника" Nanba et al. (см. патент США № 5096629) описана ниже с дополнительными иллюстративными деталями:

(1) Стерильная фильтрация метиленхлорида в качестве органического растворителя через гидрофобный фильтр с размером пор 0,22 мкм.

(2) Добавление DMPC:DOPG в соотношении 60:40 с общими липидами: ЕА: при соотношении 8:1 и антиоксидантов ВНТ и АР в профильтрованный органический растворитель, растворяя и наполнители, и фотосенсибилизатор для образования "промежуточного комплекса".

(3) Фильтрация полученного раствора через гидрофобный фильтр с размером пор 0,22 мкм.

(4) Перенос фильтрата в резервуар для жидкости с последующей подачей в трубчатый нагреватель, нагреваемый снаружи.

(5) Удаление органического растворителя направлением нагретой смеси в вакуумную камеру при давлении не более 300 мм рт.ст. со скоростью, в 0,1 раза превышающей скорость звука, для немедленной сушки смеси для образования липидного порошка.

(6) Анализ липидного порошка для определения уровня концентрации органического растворителя; необязательно продолжающееся удаление до тех пор, пока уровень органического растворителя не будет ниже 0,01%.

(7) Приготовление 10% раствора лактозы. Если МА композицию предстоит инъецировать, данный раствор должен быть пригоден для инъекций.

(8) Фильтрация раствора лактозы через гидрофобный фильтр с размером пор 0,22 мкм.

(9) Гидратация липидного порошка профильтрованным 10% раствором лактозы для образования крупных агрегатов.

(10) Диспергирование крупных агрегатов перемешиванием их при высоких значениях об/мин при температуре ниже температуры стеклования фотосенсибилизатора и агрегатов, содержащих фосфолипид.

(11) Определение распределения уменьшенного размера агрегатов МА.

(12) Асептическая фильтрация МА композиции через гидрофобный фильтр с размером пор 0,22 мкм. (Необязательно раствор можно сначала предварительно профильтровать через предварительный фильтр с размером пор 5,0 мкм или меньше.)

(13) Анализ активности фотосенсибилизатора.

(14) Заполнение флакончиков МА композицией.

(15) Лиофилизация.

Одним средством проведения указанной выше немедленной сушки является использование вакуумного сушильного устройства, такого как изделие CRUX 8B™ Orient Chemical Ind., Ltd., Japan. Кроме того, указанный выше этап дисперсии можно проводить при скоростях около 10000 об/мин или в диапазоне от 8000 до 15000 об/мин. Такой способ получения "предшественника" можно также приспособить для избирательной продукции мицелл проведением всех соответствующих этапов в условиях низкого содержания солей для содействия последующей продукции мицелл после гидратации. В сущности, увеличивающие объем агенты не нужно использовать.

Как описано выше, осуществление способов изобретения для продукции МА можно проводить с использованием разнообразных фосфолипидов и способов. Помимо использования условий низкого содержания солей, изобретение включает наблюдение, что использование заряженных, ненасыщенных фосфолипидов, таких как EPG и DOPG, а также высокоэнергетической обработки (такой как микрофлюидизация и обработка ультразвуком), как оказывается, содействует образованию мицелл в образующих иначе липосомы комбинациях фосфолипидов и гидрофобных агентов. Использование ненасыщенных фосфолипидов обеспечивает ряд желательных характеристик. Они включают способность проведения этапов продукции МА при комнатной температуре и продукции меньших МА при использовании в комбинации с насыщенными липидами.

Введение и применение

Гидрофобные агенты, включенные в МА изобретения, можно применять для любого целесообразного фармацевтического, сельскохозяйственного или промышленного вида применения. МА с включенными фотосенсибилизаторами можно использовать по поводу любого состояния или в любом способе, для которых целесообразны фотосенсибилизаторы, в комбинации с воздействием света или другого электромагнитного излучения. Они включают, но не ограничиваются, диагностику или лечение рака, уменьшение активированных лейкоцитов, лечение глазных расстройств, лечение и профилактику образования новой сосудистой сети и ангиогенеза, разрушение вирусов и клеток, инфицированных ими, лечение атеросклеротических бляшек, лечение рестеноза и другие. Кроме того, многие фотосенсибилизаторы можно активировать светом при соответствующих возбуждающих длинах волн для видимого флюоресцирования. Данную флюоресценцию далее можно использовать для определения локализации опухоли или другой ткани-мишени. Включением гидрофильных агентов в МА изобретения можно получить более эффективную упаковку, доставку и, следовательно, введение средств.

Вообще говоря, МА изобретения можно применять любым образом, идентичным или аналогичным введению мицелл и липосом. Концентрация гидрофобного агента в МА изобретения зависит от природы агента, а также от природы желательного введения. Данная зависимость также существует при применении гидромонобензопорфириновых фотосенсибилизаторов посредством МА.

МА композиции и составы изобретения можно вводить парентерально или инъекцией. Инъекция может быть внутривенной, подкожной, внутримышечной, интратекальной или даже внутрибрюшинной. Однако МА можно также вводить как аэрозоль интраназально, или внутрилегочно, или местно. Композиции, предназначенные для дозированного по времени высвобождения, также находятся в пределах диапазона притязаний изобретения.

Количество МА композиций с гидрофобным агентом, которое предстоит ввести, зависит от выбора активного агента, состояний, подлежащих лечению, способа введения, индивидуального субъекта, а также от навыков, опыта и суждения практикующего врача. Вообще говоря, однако, дозировки в диапазоне 0,05-10 мг/кг могут быть целесообразны. Указанный выше диапазон является, конечно, просто предлагаемым, поскольку количество переменных величин в отношении индивидуального режима лечения велико. Поэтому ожидаются значительные отклонения от указанных рекомендуемых величин.

Например, и с использованием фотосенсибилизаторов в качестве диагностических средств при определении локализации опухолевой ткани или при определении локализации атеросклеротических бляшек МА композиции изобретения вводят системно таким же в целом известным образом, который известен в отношении фотодинамической терапии. Период ожидания для обеспечения возможности лекарственным препаратам покинуть ткани, в которых они не накапливаются, приблизительно такой же, например, от около 30 мин до около 10 ч. После того как композициям изобретения была предоставлена возможность локализоваться, локализацию ткани-мишени определяют выявлением присутствия фотосенсибилизатора.

При диагностике фотосенсибилизаторы, включенные в МА, можно использовать наряду с изотопом или другими выявляющими средствами, или их можно метить ими. В таком случае средство выявления зависит от природы метки. Сцинтиграфические метки, такие как технеций или индий, можно выявить с использованием сканнеров ex vivo. Специфические флюоресцентные метки также можно использовать, но, как и выявление, основанное на флюоресценции самих фотосенсибилизаторов, данные метки могут потребовать предварительного облучения.

Для активации фотосенсибилизатора, применяемого МА изобретения, используют любую подходящую длину волн поглощения. Это можно доставить с использованием различных способов, известных в данной области, для опосредования цитотоксичности или испускания флюоресценции, таких как видимое излучение, включая световые источники накаливания или флюоресценции или фотодиоды, такие как диоды, испускающие свет. Лазерный свет также можно использовать для доставки света in situ к локализовавшемуся фотосенсибилизатору. При обычной последовательности операций, например, за несколько часов до облучения, внутривенно инъецируют приблизительно 0,5-1,5 мг/кг зеленого порфиринового фотосенсибилизатора, а затем возбуждают соответствующей длиной волн.

Следующий пример представлен для описания предпочтительных вариантов реализации, сфер применения и атрибутов настоящего изобретения, но он не предназначен для ограничения изобретения. Изобретение не должно ограничиваться определенным фотосенсибилизатором, используемым в примере.

Пример 1

Приготовление QLT0074 для инъекций

500 мл метиленхлорида добавляют к 0,001 г бутилированного гидрокситолуола, 0,01 г аскорбилпальмитата, 3,2 г диолеилфосфатидилглицерина и 4,8 г димиристоилфосфатидилхолина в нагнетающее устройство и смешивают с использованием верхней мешалки до получения прозрачного раствора. После получения прозрачного раствора 1 г кристаллов QLT0074 медленно добавляют при пониженном освещении и смешивают с использованием верхней мешалки до полного растворения кристаллов. Затем раствор фильтруют через фильтр с порами 0,22 мкм и переносят в колбу с круглым дном. Колбу помещают на роторный испаритель и удаляют метиленхлорид под пониженным давлением при продолжающейся сушке после прекращении дистилляции. Вакуумное воздействие прерывают и колбу прикрепляют к вакуумному трубопроводу для дальнейшей сушки. 500 мл стерильного профильтрованного 9,2% мас./об. моногидрата лактозы в воде для инъекций добавляют в QLT0074/тонкую липидную пленку и перемешивают при комнатной температуре в течение, по меньшей мере, 1 ч для растворения и образования мультиламеллярных везикул. Микрофлюидизатор модели М-1105 промывают водой, а затем некоторым количеством раствора лактозы, а затем раствором QLT0074/липида до появления в оттоке зеленого раствора. Используют следующие параметры: воздушное давление 120 фунтов/дюйм² (827400 кПа); рабочее давление 10030 фунтов/дюйм² (6,9^.10⁷ кПа); показание датчика давления воздуха на впуске 62 фунта/дюйм² (427500 кПа). Резервуар охлаждающего змеевика заполняют раздавленным льдом и водой для поддержания температуры продукта в диапазоне 16-20°С. Материал QLT0074/липида пропускают 5 раз через микрофлюидизатор. Затем полученный материал пропускают через фильтр с порами 0,22 мкм и аликвотные количества помещают в маркированные флакончики для лиофилизации, по 1 мл на аликвотную порцию. Материал лиофилизируют с использованием лиофилизатора ВССА, Labcocno, серия #215369. Лиофилизированные образцы хранят в темноте при 2-8°С.

Все приведенные здесь ссылки, включая патенты, патентные заявки и публикации, включены полностью сюда в качестве ссылки независимо от того, были ли они ранее специально включены, или нет. Используемые здесь термины "некий", "один" и "любой" предназначены для включения и форм единственного и множественного числа.

Теперь после полного описания изобретения специалистам в данной области будет понятно, что то же можно выполнить в пределах широкого диапазона эквивалентных параметров, концентраций и условий без отхода от сущности и объема притязаний изобретения и без излишнего экспериментирования.

Хотя изобретение было описано в связи с конкретными вариантами его реализации, следует понимать, что оно может подвергаться дальнейшим модификациям. Данная заявка предназначена охватить любые изменения, виды применения или адаптации изобретения, в целом следующие принципам изобретения, и такие включенные отклонения от настоящего описания считаются находящимися в пределах известной и привычной практики в рамках данной области, к которой относится изобретение, и что может быть отнесено к существенным признакам, изложенным здесь выше, как следует в диапазоне притязаний прилагаемой формулы изобретения.

1. Композиция для доставки гидрофобных препаратов, включающая микроагрегаты, причем указанные микроагрегаты включают насыщенные и ненасыщенные фосфолипиды и один или более фотосенсибилизаторов, в которой указанный ненасыщенный фосфолипид не является яичным фосфатидилглицерином.

2. Композиция по п.1, в которой указанные микроагрегаты включают мицеллы.

3. Композиция по п.1 или 2, в которой указанные один или более фотосенсибилизаторов представляют собой А-ЕА6, В-ЕА6, представленные формулами

или их комбинацию.

4. Композиция по п.1, 2 или 3, в которой один или более указанных насыщенных и ненасыщенных фосфолипидов включают отрицательно заряженную головную группу.

5. Композиция по п.4, в которой указанные фосфолипиды включают диолеоилфосфатидилглицерин (DOPG) и димиристоилфосфатидилхолин (DMPC).

6. Композиция по п.5, в которой соотношение DOPG:DMPC составляет 40:60.

7. Композиция по п.6, в которой указанные микроагрегаты дополнительно включают, по меньшей мере, один антиоксидант.

8. Композиция по п.7, в которой указанный, по меньшей мере, один антиоксидант представляет собой бутилированный гидрокситолуол (ВНТ) и/или аскорбилпальмитат (АР).

9. Композиция по любому из предшествующих пунктов, в которой соотношение фосфолипидов:фотосенсибилизатора составляет 8:1.

10. Композиция по п.1 или 2, в которой указанные один или более фотосенсибилизаторов представляют собой один или более гидромонобензо-порфириновый фотосенсибилизатор, но не являются комбинацией приблизительно равных частей 9-метил-транс-(±)-18-этенил-4,4а-дигидро-3,4-бис(метоксикарбонил)-4а,8,14,19-тетраметил-23Н,25Н-бензо[b]порфин-9,13-дипропаноат (BPD-MA_C) и 13-метил-транс-(±)-18-этенил-4,4а-дигидро-3,4-бис(метоксикарбонил)-4а,8,14,19-тетраметил-23Н,25Н-бензо[b]порфин-9,13-дипропаноат (BPD-MA_D).

11. Композиция по п.10, в которой указанный фотосенсибилизатор представляет собой А-ЕА6 или В-ЕА6.

12. Композиция для доставки гидрофобных препаратов, включающая микроагрегаты, причем указанные микроагрегаты включают насыщенные и ненасыщенные фосфолипиды, по меньшей мере, один из которых включает отрицательно заряженную головную группу и один или более фотосенсибилизаторов, в которой указанный ненасыщенный фосфолипид не является яичным фосфатидилглицерином.

13. Композиция микроагрегатов для доставки гидрофобных препаратов, включающая мицеллы, причем указанные мицеллы включают фосфолипиды и один или более фотосенсибилизатор, в которой или

a) указанные фосфолипиды способны образовывать липидную двухслойную мембрану и не включают яичный фосфолипид или яичный фосфатидилглицерин или

b) указанные фосфолипиды способны образовывать липидную двухслойную мембрану и указанный один или более фотосенсибилизатор не является комбинацией приблизительно равных частей BPD-MA_C и BPD-MA_D.

14. Способ изготовления композиции микроагрегатов, включающей мицеллы, где указанные мицеллы включают один или более гидрофобный агент и смесь фосфолипидов, причем указанный способ включает стадии:

продуцирования смеси органического растворителя, гидрофобного агента и фосфолипидов, способных образовывать липидную двуслойную мембрану для образования "промежуточного комплекса";

удаления указанного растворителя для продукции материала "предшественника";

гидратации указанного материала "предшественника" водным растворителем;

обработки указанного гидратированного материала для продукции мицелл, включающих микроагрегаты, в которых или

a) указанные фосфолипиды способны образовывать липидную двухслойную мембрану и не включают яичный фосфолипид или яичный фосфатидилглицерин; или

b) указанные фосфолипиды способны образовывать липидную двухслойную мембрану и указанный один или более гидрофобный агент не является комбинацией приблизительно равных частей BPD-MA_C и BPD-MA_D.

15. Способ по п.14, в котором указанный один или более гидрофобный агент представляет собой фотосенсибилизатор, но не является комбинацией приблизительно равных частей BPD-MA_C и BPD-МА_Dn

16. Способ по п.15, в котором один или более фотосенсибилизаторов представляют собой А-ЕА6, В-ЕА6 или их комбинацию.

17. Способ по п.14, 15 или 16, в котором указанный "промежуточный комплекс" и указанный водный растворитель являются низкосолевыми.

18. Способ по п.17, в котором указанные этапы гидратации и обработки происходят при температуре менее чем приблизительно 30°С.

19. Способ по п.14, 15 или 16, в котором указанные стадии включают:

a) подачу с постоянной скоростью раствора органического растворителя смеси фосфолипидов, способных образовывать липидную двухслойную мембрану, в трубчатый нагреватель, нагреваемый снаружи;

b) выпаривание органического растворителя в нагревателе для получения смеси, по существу, твердых веществ и пара перегретого органического растворителя;

c) введение данной смеси с высокой скоростью, составляющей более 0,1 раза скорости звука в вакуумную камеру при давлении не более 300 мм рт.ст., для немедленного испарения органического растворителя и сушки твердых веществ, посредством чего получают липидный порошок; и

d) диспергирование полученного липидного порошка в низкосолевой водный растворитель при температуре менее чем приблизительно 30°С.

20. Способ по п.18 или 19, в котором стадия обработки указанного гидратированного материала для продукции мицелл, включающих микроагрегаты, осуществляют способом с подводом высокой энергии.

21. Способ по п.20, при котором указанный способ с подводом высокой энергии выбирают из группы, состоящей из микрофлюидизации, высокоскоростного сдвига, экструзии, обработки ультразвуком и гомогенизации.

22. Композиция для доставки гидрофобных препаратов, включающая мицеллы, причем указанные мицеллы включают насыщенные и ненасыщенные фосфолипиды и один или более гидромонобензопорфириновый фотосенсибилизатор, где мицеллы в композиции имеют средний диаметр менее чем около 100 нм.

23. Композиция по п.22, в которой один или более фотосенсибилизаторов представляет собой BPD-MA, A-EA6, В-ЕА6 или их комбинацию.

24. Композиция по п.22, в которой один или более насыщенных и ненасыщенных фосфолипидов включает отрицательно заряженную головную группу.

25. Композиция по п.24, в которой фосфолипиды включают DOPG и DMPC.

26. Композиция по п.25, в которой соотношение DOPG:DMPC составляет 40:60.

27. Композиция по п.22, в которой указанные мицеллы дополнительно включают, по меньшей мере, один антиоксидант.

28. Композиция по п.27, в которой указанный, по меньшей мере, один антиоксидант представляет собой ВНТ и/или АР.

29. Композиция по п.22, в которой соотношение фосфолипидов: фотосенсибилизатора составляет 8:1.

30. Композиция по п.23, в которой указанный фотосенсибилизатор представляет собой А-ЕА6 или В-ЕА6.

31. Композиция по п.22, в которой указанные мицеллы имеют средний диаметр менее чем около 50 нм.

32. Композиция по п.31, в которой указанные мицеллы имеют средний диаметр менее чем около 30 нм.

33. Композиция по п.32, в которой указанные мицеллы имеют средний диаметр менее чем около 20 нм.

34. Композиция по п.22, в которой указанный ненасыщенный фосфолипид представляет собой является яичный фосфолипид.

35. Композиция по п.22, в которой указанный ненасыщенный фосфолипид получен из не относящегося к животным источника.

36. Композиция по п.35, в которой один или более фотосенсибилизаторов представляет собой BPD-MA, A-EA6 или их комбинацию.