Аллергоид из яда пчел для аллерген-специфической иммунотерапии больных с аллергическими реакциями на ужаление пчелами и способ его получения

Авторы патента:

A61P37/08 - противоаллергические средства (антиастматические средства A61P 11/06; офтальмологические противоаллергические средства A61P 27/14)

A61K35/64 - насекомые, например маточное молочко (пчел)

Владельцы патента RU 2279888:

Мартынов Александр Игоревич (RU)
Федосеева Вера Николаевна (RU)
Федоскова Татьяна Германовна (RU)
Орлова Ирина Азгаровна (RU)

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и медицине. Аллергоид для аллерген-специфической иммунотерапии больных с аллергическими реакциями на ужаления пчелами содержит аллергенные фракции с молекулярной массой 3-12; 16-31; 38-46, а также 20 и 60 kD и получен путем полимеризации суммарно аллергенной фракции формальдегидом и стабилизации NaBH₄. Предложен способ получения аллергоида и способ аллерген-специфической иммунотерапии больных с аллергической реакцией на ужаления пчелами с использованием данного аллергена. Изобретение обеспечивает получение аллергоида с высокой специфической активностью и безопасностью при применении. 3 н. и 2 з.п.ф-лы, 2 табл.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и касается создания безопасного высокоэффективного гипосенсибилизирующего аллергоида с иммуностимулирующим эффектом для аллерген-специфической иммунотерапии больных, страдающих аллергией к яду пчел.

Аллергия, формирующаяся при ужалениях пчел, ос, признана наиболее опасным видом инсектной аллергии.

Яд пчел содержит ряд фармакологически и биохимически активных веществ: биогенные амины (норадреналин, гистамин, серотонин и др.), пептиды (мелиттин, Мс-пептид, МСП-пептид, секапин, минимин, терциатин и др.), ферменты (фосфолипазы А, В, гиалуронидазу, кислую и щелочную фосфатазы, и др.). В настоящее время описаны и представлены в соответствии с требованиями современной Международной Номенклатуры следующие аллергены пчелы медоносной (табл.1).

Отмечено также, что яд пчелы, осы и шмеля имеет общие антигенные детерминанты, с которыми может быть связан эффект перекрестно-аллергических реакции при укусах указанных насекомых. На укусы пчел формируются токсические реакции как локальные, так и системные. В основе аллергических реакций лежат иммунологические механизмы, в том числе обширные локальные (местные) реакции, анафилактические, по типу сывороточной болезни. Природа аллергического ответа на яд перепончатокрылых (Hymenoptera) характеризуется продукцией специфических IgE- и IgG-антител. Последние могут быть выявлены у пациентов в течение недель и месяцев с момента укуса. Большинство авторов полагает, что увеличение IgG-антител связывается с ростом "блокирующих" (защитных) антител в организме больного. Клинически защитный эффект этих антител не во всех случаях имел место. Наличие IgE-антител связывают с наличием позитивных кожных тестов у больных. Специфические к яду пчелы IgE-антитела выявлены в сыворотках больных с общей и сильно выраженной местной реакцией на ужаление перепончатокрылым. Значительные уровни специфических IgG-антител выявлены у пчеловодов, которые неоднократно подвергались ужалению, что, по-видимому, свидетельствует о возможных защитных функциях IgG-антител, титры которых резко возрастают и у больных после специфической иммунотерапии.

Из известной разработки аллергоидной формы аллергена из яда пчел следует, что при ужалении пчелами лиц, имеющих сенсибилизацию к яду перепончатокрылых, могут возникать острые аллергические реакции вплоть до анафилактического шока. Единственным надежным методом профилактики и терапии этих состояний является специфическая иммунотерапия (СИТ) аллергеном из яда пчел (ЯП). Однако в процессе СИТ при введении малых доз аллергенов сохраняется риск получения у больных реакций анафилактического типа.

Разработан препарат аллергоид (АЛД) из яда пчел Apis mellifera на основе модификации формальдегидом нативного аллергена с использованием иммунохимического (гель-хроматография, иммуноблоттинг) и клинико-лабораторного анализа (ИФА, хемилюминисценция). На основе главных аллергенов (фракции с ММ=3-12 kD, 16-31 kD, 38-46 kD) сформирована основная аллергенная фракция (ОАФ). В экспериментах на животных изучена динамика IgG-"блок"-антител по А.Д.Адо и соавт., 1991 (В.Н.Федосеева, А.И.Мартынов, И.А.Орлова, Т.Г.Федоскова. Разработка лечебной формы аллергоида из яда пчел. -"Аллергология и иммунология, том 4, №2, 2003, стр.84. Материалы V Съезда иммунологов и аллергологов СНГ, Санкт-Петербург, Россия, 8-11 июля 2003).

Задачей настоящего изобретения является создание препарата для аллерген-специфической иммунотерапии больных с аллергическими реакциями на ужаления пчелами, обладающего специфической активностью и безопасного.

Для решения поставленной задачи предлагается группа изобретений, объединенных единым изобретательским замыслом:

Аллергоид для аллерген-специфической иммунотерапии больных с аллергическими реакциями на ужаления пчелами, содержащий аллергенные фракции с молекулярной массой 3-12, 16-31, 38-46, а также 20 и 60 kD и полученный путем полимеризации суммарной аллергенной фракции формальдегидом и стабилизации NaBH₄.

Предложен способ получения аллергоида, заключающийся в экстрагировании яда пчел, растворении яда в физрастворе, стабилизации сывороточным альбумином человека, осветлении, очищении диализом не более 3-х часов и выделении суммарной аллергенной фракции с последующей обработкой формальдегидом для полимеризации белков при смене температуры от +4°С до +22°С, по окончании полимеризации проводят диализ, центрифугируют при 6000 об/мин в течение 30 мин, стабилизируют NaBH₄, лиофильно высушивают.

Осветление пчелиного яда проводят центрифугированием.

Полимеризацию осуществляют в течение 30 дней.

Предложен также способ аллерген-специфической иммунотерапии больных с аллергическими реакциями на ужаления пчелами, в котором используется вышеназванный аллергоид.

Для получения аллергоида проводят:

1) Растворение пчелиного яда в физиологическом растворе,

2) Стабилизацию пчелиного яда сухим ЧСА (сывороточный альбумин человека),

3) Осветление стабилизированного пчелиного яда центрифугированием,

4) Коррекцию рН (до 7,0),

5) Очистку диализом,

6) Хроматографию и выделение главных и минорных аллергенов,

7) Получение суммарной аллергенной фракции для перевода в аллергоидную форму (фракции с ММ=3-12, 16-31, 38-46 kD - главные; 20 и 60 kD - малые),

8) Изучение иммунохимических свойств,

9) Изучение биологических свойств,

10) Обработку суммарной аллергенной фракции формальдегидом, при которой происходит полимеризация белков, в течение 30 дней со сменой температурных режимов от 4 до 22°С,

11) Диализ,

12) Центрифугирование (6000 об/мин в течение 30 мин),

13) Стабилизацию NaBH₄,

14) Лиофильное высушивание.

Проводили изучение иммунохимических свойств аллергоида, разработана схема АСИТ (аллерген-специфическая иммунотерапия), изучены биологические свойства аллергоида, специфическая активность, доказана безопасность препарата.

Для лечения больных с аллергическими реакциями на ужаление пчелами проводили симптоматическую терапию острой реакции на ужаление пчелы и аллерген-специфическую иммунотерапию аллергенами из яда пчел.

Разработана схема гипосенсибилизации животных, которая может быть использована в клинике. Принцип введения возрастающих доз по определенной схеме приведен в таблице 2.

Приведенные экспериментальные исследования и испытания на добровольцах показали, что заявленный аллергоид безвреден.

Таблица 1 Аллергены яда пчелы медоносной (Apis mellifera)
Название	Аллерген	Mm
Apis mellifera (Honey bee)	Api m 1 (Phosfolipase A2)	16,000
Apis mellifera (Honey bee)	Api m 2 (Hyaluronidase)	44,000
Api m 4 (Melittin)	3,000

1. Аллергоид для аллерген-специфической иммунотерапии больных с аллергическими реакциями на ужаления пчелами, характеризующийся тем, что он содержит аллергенные фракции с молекулярной массой 3-12; 16-31; 38-46, а также 20 и 60 kD и полученный путем полимеризации суммарно аллергенной фракции формальдегидом и стабилизации NaBH₄.

2. Способ получения аллергоида, характеризующийся тем, что яд пчел экстрагируют, при этом яд растворяют в физрастворе, далее стабилизируют сывороточным альбумином человека, осветляют, затем очищают диализом не более 3 ч и выделяют суммарную аллергенную фракцию с молекулярной массой 3-12; 16-31; 38-46, а также 20 и 60 kD, которую затем обрабатывают формальдегидом для полимеризации белков при смене температуры от 4 до 22°С, по окончании полимеризации проводят диализ, центрифугируют при 6000 об/мин в течение 30 мин, полученный аллергоид стабилизируют NaBH₄ и лиофильно высушивают.

3. Способ по п.2, осветление пчелиного яда проводят центрифугированием.

4. Способ по п.2, полимеризацию осуществляют в течение 30 дней.

5. Способ аллерген-специфической иммунотерапии больных с аллергической реакцией на ужаления пчелами, характеризующийся тем, что используют аллергоид по п.1.

Изобретение относится к производным пиперидина общей формулы (I) в свободной форме или в форме соли, где Ar1 обозначает фенил, замещенный одним или несколькими атомами галогена,Ar2 обозначает фенил или нафтил, который является незамещенным или замещен одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, включающей галоген, циано, гидрокси, нитро, С1-С8алкил, С1 -С8галоалкил, С1-С8алкокси или С1-С8алкоксикарбонил,R1 обозначает водород или С1-С8алкил, необязательно замещенный гидрокси-, С1-С8алкокси-, ацилоксигруппой, -N(R2)R3, галогеном, карбоксигруппой, С 1-С8алкоксикарбонилом, -CON(R4)R 5 или одновалентной циклической органической группой, R2 и R3 каждый независимо друг от друга обозначает водород или С1-С8алкил, или R2 обозначает водород и R3 обозначает ацил или -SO2R6, или R2 и R3 вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членную гетероциклическую группу,R4 и R5 каждый независимо друг от друга обозначает водород или С1-С8алкил, или R4 и R 5 вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5- или 6-членную гетероциклическую группу,R6 обозначает С1-С8алкил, С1-С 8галоалкил или фенил, необязательно замещенный С1 -С8алкилом, иn обозначает 1, 2, 3 или 4, при условии, что когда Ar1 обозначает пара-хлорфенил и R1 обозначает водород, то Ar2 не обозначает фенил или пара-нитрофенил.

Способ лечения аллергии с использованием замещенных пиразолов // 2277909

Изобретение относится к области медицины и касается способа лечения аллергии путем введения субъекту терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, включающей соединение формулы I.

Производные триазаспиро [5.5] ундекана и фармацевтическая композиция, включающая его в качестве активного ингредиента // 2269528

Оптически активные изомеры кетотифена и их терапевтически активные метаболиты // 2266115

Изобретение относится к области химико-фармацевтической промышленности и касается фармацевтической композиции, содержащей S-изомер соединения формулы I, или его фармацевтически приемлемые соли и сольваты вместе с фармацевтически приемлемым носителем; способа синтеза соединения S-изомера формулы I, а также способа лечения заболевания, выбранного из группы, включающей респираторные заболевания, аллергические заболевания, кожные заболевания, желудочно-кишечные заболевания и глазные болезни.

Производные триазаспиро[5,5]ундекана (варианты), фармацевтическая композиция и способ регулирования хемокина/рецептора хемокина // 2265021

Изобретение относится к новым производным триазаспиро[5.5]ундекана формулы (I): где значения радикалов R1-R5 указаны в формуле изобретения, или их четвертичным аммониевым солям, N-оксидам или нетоксичным солям.

Антигистаминная фармацевтическая композиция // 2264814

Изобретение относится к области медицины, конкретно к антигистаминному препарату мебгидролин. .

Аллерген осиного яда с пониженной реакционной способностью ige и способ его получения (варианты) // 2264462

Изобретение относится к рекомбинантным аллергенам яда насекомых и специфическим способам их получения, в частности антигена 5 аллергена осиного яда. .

Бензимидазольное производное, ингибитор человеческой химазы, терапевтический агент и фармацевтическая композиция на его основе // 2263674

Изобретение относится к бензимидазольным производным или их применимым в медицине солям, общей формулы (1) где R1 и R2 могут иметь одинаковые или различные значения и, независимо друг от друга, представляют собой атом водорода, атом галогена, циано группу, гидроксильную группу, алкильную группу, содержащую 1-4 углеродных атома, алкокси группу, содержащую 1-4 углеродных атома, трифторметильную группу; А представляет собой незамещенную, линейную алкиленовую группу, содержащую 1-7 углеродных атомов; Е представляет собой группу -COOR3, где R3 представляет собой атом водорода или линейную алкильную группу, содержащую 1-6 углеродных атома; G представляет собой незамещенную, линейную алкиленовую группу, содержащую 1-6 углеродных атомов; М представляет собой простую связь или -S(O)m-, где m представляет собой целое число в интервале 0, 1 или 2; J представляет собой замещенную или незамещенную гетероциклическую группу, содержащую 4-10 углеродных атомов и один гетероатом в кольце, выбранный из группы, состоящей из атома азота или атома серы, исключая незамещенное пиридиновое кольцо; заместитель в указанной ароматической гетероциклической группе выбирают из атома галогена, циано группы, линейной алкильной группы, содержащей 1-6 углеродных атомов, линейной алкокси группы, содержащей 1-6 углеродных атомов, трифторметильной группы и трифторметокси группы; причем один или более из указанных заместителей могут быть замещены по произвольным положениям кольца; и Х представляет собой метиновую группу (-СН=).

Производные индола, способ их получения и их применение // 2259998

Способ лечения аллергии с использованием замещенных пиразолов // 2259202

Изобретение относится к области химико-фармацевтической промышленности и касается способа лечения субъекта с аллергическим заболеванием, который включает введение субъекту терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, включающей соединение формулы (I), соединения обладают высокой эффективностью при лечении аллергии, а также являются низкотоксичными веществами.

Способ лечения хеликобактерассоциированной язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки // 2278685

Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии, и может быть применено для лечения хеликобактерассоциированной язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки.

Антивирусное вещество // 2276988

Изобретение относится к биофармакологии, медицине. .

Средство для лечения простатита // 2275929

Изобретение относится к созданию лекарственного средств растительного происхождения и может быть применено для лечения простатита, а также аденомы предстательной железы.

Фармацевтическая композиция для внутреннего применения, обладающая иммунотропной и адаптогенной активностями // 2275928

Изобретение относится к фармации, а именно к созданию лекарственного средств на основе природного происхождения с широким спектром лечебного действия. .

Способ лечения заболеваний зрительного нерва // 2269352

Изобретение относится к медицине, в частности к офтальмологии, и касается лечения заболеваний зрительного нерва. .

Препарат для лечения дерматитов плотоядных // 2267317

Изобретение относится к ветеринарии. .

Средство для лечения невралгических заболеваний // 2266746

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а точнее к лекарственным средствам для наружного употребления, и может быть использовано для лечения и профилактики невралгических заболеваний.

Способ получения препарата для повышения резистентности организма животных // 2264222

Изобретение относится к ветеринарии. .

Лекарственный препарат и способ лечения заболеваний опорно-двигательного аппарата, периферической нервной системы и кожных покровов // 2261720

Изобретение относится к области фармацевтики и касается лекарственного препарата. .

Средство и способ специфической иммунотерапии больных аллергическими заболеваниями, имеющих сенсибилизацию к укусам комаров // 2259846

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и медицине. .

Способ получения препарата для повышения резистентности организма // 2280463

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и используется для повышения общей и специфической резистентности организма животных