Конъюгаты антитело-лекарственное средство (adc) с дуокармицином, применяемые для лечения рака эндометрия

Настоящее изобретение относится к применению конъюгата антитело-лекарственное средство (ADC) формулы II для лечения солидных опухолей человека, экспрессирующих HER2, где солидная опухоль человека, экспрессирующая HER2, представляет собой рак эндометрия, в частности серозную карциному эндометрия (USC). В частности, настоящее изобретение относится к ADC, содержащим дуокармицин, применяемым для лечения рака эндометрия, а именно, где рак эндометрия является HER2 IHC 2+ или 1+, а также HER2 FISH-негативным. 3 з.п. ф-лы, 3 ил., 1 пр.

 

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Настоящее изобретение относится к конъюгатам антитело-лекарственное средство (ADC) с дуокармицином, которые демонстрируют улучшенную противоопухолевую активность in vivo, в частности к ADC с дуокармицином, применяемым для лечения рака эндометрия. Более конкретно настоящее изобретение относится к содержащим дуокармицин ADC для применения в лечении солидных опухолей человека, экспрессирующих рецептор 2 эпидермального фактора роста человека (HER2), где солидная опухоль человека, экспрессирующая HER2, представляет собой рак эндометрия, в частности, где солидная опухоль человека, экспрессирующая HER2, представляет собой серозную карциному матки (USC).

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Рак эндометрия (матки) представляет собой самое распространенное гинекологическое злокачественное новообразование в Европе и Северной Америке. Оно является седьмой самой частой причиной смерти от рака среди женщин в Западной Европе, составляя 1%-2% от всех смертей от рака. В соответствии с последними рекомендациями Национальной всеобщей онкологической сети (NCCN) патологоанатомы подразделяют рак матки на три отдельных типа: i) истинная эндометриоидная аденокарцинома, ii) серозная или светлоклеточная аденокарцинома и iii) саркокарцинома, т.е. смешанный тип карциномы и саркомы (NCCN Guidelines®, Version 2.2015). Различие между эндометриоидной аденокарциномой и серозной аденокарциномой эндометрия является важным с точки зрения прогнозирования и лечения. Обычно эндометриоидная аденокарцинома наблюдается в матке и имеет лучший прогноз по сравнению с эндометриоидной серозной карциномой, которая часто имеет перитонеальную диссеминацию и более плохой прогноз. (K. Garg и R.A. Soslow в Arch. Pathol. Lab. Med., Vol. 138, март 2014, 335-342).

Серозная карцинома матки (USC) или папиллярная серозная карцинома матки составляет приблизительно 10% случаев от всех случаев рака эндометрия. Данный подтип рака эндометрия является биологически более агрессивным и является наиболее частой причиной смерти при раке эндометрия. Исследования молекулярного профилирования говорят о том, что HER2 представляет собой один из наиболее сверхэкспрессированных генов при USC. HER2 является рецептором тирозинкиназ, членом семейства рецепторов эпидермального фактора роста (EGFR). Сверхэкспрессия HER2 при USC наблюдается в диапазоне от 18% до 80% и зависит от нескольких факторов, таких как тип опухоли и стадия забранного образца ткани, а также от применяемой техники иммуногистохимического исследования (IHC) (A.D. Santin с соавт. в Clin. Cancer Res., 8, 2002, 1271-1279; B.M. Slomovitz с соавт. в J. Clin. Oncol. 22, 2004, 3126-3132). Вплоть до 35% USC могут сверхэкспрессировать онкоген HER2 на высоком уровне по данным иммуногистохимического исследования (т.е., являются HER IHC 3+) или содержать амплификацию гена HER2, выявляемой при флуоресцентной гибридизации in situ (т.е., являются FISH-позитивными). Еще у 45% USC наблюдается умеренный (т.е., HER IHC 2+) или низкий (HER2 IHC 1+) уровень экспрессирования HER2.

Трастузумаб (Herceptin™, Genentech/Roche) представляет собой рекомбинантное гуманизированное IgG1 моноклональное антитело, направленное против внеклеточного домена HER2, которое в настоящее время утверждено для лечения как метастатического рака груди, так и рака груди ранних стадий, а также местнораспространенного или метастатического рака желудка со сверхэкспрессированием HER2. Отчеты по анализу клинических случаев описывают применение трастузумаба для лечения рака эндометрия. В Int. Gynecol. Cancer 16: 1370-1373, 2006, E. Jewell с соавт. описывает положительный результат введения трастузумаба одной пациентке с метастатическим раком эндометрия. В Int. J. Gynecol. Obstet. 102: 128-131, 2008, A.D. Santon с соавт. сообщает о результатах лечения трастузумабом двух пациенток с поздними стадиями или рецидивирующей карциномой эндометрия со сверхэкспрессированием HER2. В Gynecol. Oncol. 116: 15-20, 2010, Fleming с соавт. сообщает о результатах исследования II фазы с участием 34 пациентов, у которых имеются HER2-позитивные карциномы эндометрия и которые получают лечение трастузумабом. Трастузумаб в настоящее время не утвержден для лечения какого-либо вида рака эндометрия.

D.P. English с соавт. в Cancer Medicine, опубликованном John Wiley & Sons Ltd., стр. 1-10, 2014, сообщают, что T-DM1 является высоко эффективным против первичной серозной карциномы матки (USC) со сверхэкспрессированием HER2 in vitro и in vivo. T-DM1 (Kadcyla™, адо-трастузумаб эмтанзин, Genentech/Roche) представляет собой конъюгат антитело-лекарственное средство, который включает трастузумаб, который ковалентно связан с агентом, оказывающим воздействие на микротубулы, DM1. DM1 принадлежит к химиотерапевтическим средствам класса майтансинов. В среднем, 3-4 молекулы DM1 конъюгированы с каждой молекулой трастузумаба. T-DM1 представляет собой агент, целью которого является доставка высоко эффективного DM1 в клетки со сверхэкспрессированным HER2 при помощи опосредованного рецепторами эндоцитоза. T-DM1 утвержден для лечения пациентов с HER2-позитивным метастатическим раком груди, которые ранее получали лечение трастузумабом и таксаном. Авторы делают вывод, что T-DM1 демонстрирует обнадеживающее противоопухолевое влияние на HER2-позитивные линии клеток USC и ксенотрансплантаты USC (т.е., HER2 IHC 3+) у мышей с ТКИД (тяжелым комбинированным иммунодефицитом) (15 мг/кг, интраперитонеальные инъекции один раз в неделю), и его активность значительно выше при сравнении с трастузумабом, а также T-DM1 может представлять новый вариант лечения пациентов с HER2-позитивной USC при наличии у них устойчивого к стандартной химиотерапии заболевания. Никакие клинические исследования по лечению рака эндометрия при помощи T-DM1 в настоящее время не проводятся.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ НАСТОЯЩЕГО ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к ADC, содержащим дуокармицин, для применения в лечении солидных опухолей человека, экспрессирующих HER2, где солидная опухоль человека, экспрессирующая HER2, представляет собой рак эндометрия, в частности, где солидная опухоль человека, экспрессирующая HER2, представляет собой USC.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

Фигура 1. Цитотоксичность линии клеток USC in vitro: SYD985 по сравнению с T-DM1.

Фигура 2. Эффективность в отношении ксенотрансплантата линии клеток USC in vivo у мышей: SYD985 по сравнению с T-DM1 после нескольких инъекций.

Фигура 3. Эффективность в отношении ксенотрансплантата линии клеток USC in vivo у мышей: SYD985 по сравнению с T-DM1 после однократной инъекции в День 0.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ НАСТОЯЩЕГО ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к ADC, содержащим дуокармицин, для применения в лечении солидных опухолей человека, экспрессирующих HER2 (т.е., HER2 IHC 3+, 2+ или 1+), где солидная опухоль человека, экспрессирующая HER2, представляет собой рак эндометрия, в частности, где солидная опухоль человека, экспрессирующая HER2, представляет собой USC.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение предоставляет соединение формулы (I)

где

анти-HER2 Ab представляет собой анти-HER2 антитело или фрагмент антитела,

n составляет от 0 до 3, предпочтительно от 0 до 1,

m представляет собой среднее число молекул лекарственного препарата, конъюгированных с антителом (DAR) от 1 до 4,

R¹ выбирают из

y составляет от 1 до 16, и

R² выбирают из

,

для применения в лечении солидных опухолей человека, экспрессирующих HER2, где солидная опухоль человека, экспрессирующая HER2, представляет собой рак эндометрия, в частности, где солидная опухоль человека, экспрессирующая HER2, представляет собой USC.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы (I), где анти-HER2 Ab представляет собой анти-HER2 антитело или фрагмент антитела, n составляет от 0 до 1, m представляет среднее DAR от 1 до 4, предпочтительно от 2 до 3, R¹ выбирают из

y составляет от 1 до 16, предпочтительно от 1 до 4, а R² выбирают из

.

В дополнительном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы (I), где анти-HER2 Ab представляет собой анти-HER2 моноклональное антитело, n составляет от 0 до 1, m представляет среднее DAR от 2 до 3, предпочтительно от 2,5 до 2,9, R¹ выбирают из

,

y составляет от 1 до 4, а R² выбирают из

.

В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы (I), где анти-HER2 Ab представляет собой трастузумаб или его биоподобное лекарственное средство, n составляет от 0 до 1, m представляет среднее DAR от 2 до 3, предпочтительно от 2,5 до 2,9, R¹ выбирают из

,

y составляет от 1 до 4, а R² выбирают из

.

В предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы (II), включающему трастузумаб или его биоподобное лекарственное средство

Соединение формулы (II), также в настоящем описании называемое SYD985, имеет среднее значение DAR от 2,6 до 2,9.

В структурных формулах, представленных в настоящем описании, n представляет целое число от 0 до 3, в то время как m представляет среднее число молекул лекарственного препарата, конъюгированных с антителом (DAR) от 1 до 4. Как хорошо известно в области техники, DAR и распределение содержания лекарственного средства можно определить, например, при помощи хроматографии с гидрофобным взаимодействием (HIC) или обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (RP-HPLC). HIC является в частности подходящей для определения среднего DAR.

Дуокармицины, впервые выделенные из культуральной жидкости представителей рода Streptomyces, являются членами семейства противоопухолевых антибиотиков, которые включают дуокармицин А, дуокармицин SA и CC-1065. Эти чрезвычайно активные средства по неподтвержденным данным получают свою биологическую активность из способности последовательно селективно алкилировать ДНК в N3-положении аденина в малой бороздке, что инициирует каскад событий, приводящих к гибели опухолевой клетки.

WO2011/133039A раскрывает серию аналогов ДНК-алкилирующего средства СС-1065 и его конъюгатов антитело-лекарственное средство (ADC) направленного на HER2 действия. В Примере 15 определенное количество конъюгатов трастузумаб-дуокармицин тестируют в отношении ксенотрансплантатов N87 (т.е., HER2 IHC 3+ опухоль желудка) у бестимусных мышей.

Типичные примеры рака эндометрия (матки), который можно лечить в соответствии с настоящим изобретением, включают карциному эндометрия, серозную или светлоклеточную аденокарциному и саркокарциному. Предпочтительно рак эндометрия представляет собой USC.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение предоставляет соединение формулы (I) или (II) для применения в лечении рака эндометрия, который демонстрирует умеренную или низкую экспрессию HER2 (т.е., HER2 IHC 2+ или 1+), в частности в лечении USC.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение предоставляет соединение формулы (I) или (II) для применения в лечении рака эндометрия без амплификации гена HER2 (т.е., HER2 FISH-негативного), в частности USC.

Неожиданным образом настоящие изобретатели обнаружили, что соединения настоящего изобретения в частности можно применять для лечения рака эндометрия, особенно USC, с умеренной или низкой экспрессией HER2 (т.е., HER2 IHC 2+ или 1+) и/или без амплификации гена HER2 (т.е., HER2 FISH-негативный). Ни трастузумаб, ни T-DM1 не демонстрируют эффективности в отношении данных опухолей. WO2011/133039A также не обучает и не предлагает применение ADC, содержащих дуокармицин, для лечения рака эндометрия.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения рак эндометрия представляет собой USC, демонстрирующую умеренную или низкую экспрессию HER2 (т.е., HER2 IHC 2+ или 1+) без амплификации гена HER2 (т.е., HER2 FISH-негативная).

Обычно противоопухолевую активность оценивают сначала в линиях опухолевых клеток (человека) in vitro, после чего производят оценку in vivo. Противоопухолевая активность ADC, находящихся в объеме настоящего изобретения, преимущественно оценивают на животных моделях, обычно на бестимусных мышах, имеющих подкожный ксенотрансплантат. Ксенотрансплантат может быть, как линией опухолевых клеток (человека), так и (первичной) опухолью, полученной от пациента.

В соответствии с настоящим изобретением анти-HER2 антитело или фрагмент антитела может представлять собой антитело или фрагмент антитела, способные связывать HER2, например, IgG1 антитело, имеющее гипервариабельные участки (CDR) трастузумаба, или антитело, которое демонстрирует конкурентное связывание с трастузумабом. Предпочтительным антителом является моноклональное анти-HER2 антитело. В частности, предпочтительное моноклональное антитело представляет собой трастузумаб или его биоподобное лекарственное средство.

Соединения формулы (I) и (II) конъюгата антитело-лекарственное средство (ADC) в соответствии с настоящим изобретением имеют линкер, связывающий в конъюгате лекарственное средство с антителом при помощи атома серы остатка цистеина, т.е., они представляют собой связанные цистеином конъюгаты антитело-лекарственное средство. Остаток цистеина может быть, как природным остатком цистеина, который присутствует в тяжелой и/или легкой цепи антитела (Ab) и образует внутрицепочечные дисульфидные связи, или созданным при помощи генной инженерии остатком цистеина, которые введен в Ab в одном или более подходящих положениях в тяжелую и/или легкую цепь. Настоящее изобретение в частности касается соединений ADC, где лекарственное средство-линкер конъюгируется при помощи внутрицепочечных дисульфидных связей антител, более конкретно моноклональных антител (mAb). Антитела различных классов антител содержат различное число внутрицепочечных дисульфидных связей. Например, IgG1 антитела обычно имеют четыре внутрицепочечные дисульфидные связи, из них все четыре локализуются в шарнирной области, и после (частичного) восстановления дисульфидных связей лекарственное средство-линкер случайным образом присоединяется к свободным тиольным группам.

Соединения формулы (I) и (II) для применения в соответствии с настоящим изобретением, можно получить в соответствии со способами и процедурами, которые хорошо известны специалисту в данной области техники. Конъюгация при помощи внутрицепочечных дисульфидных связей может иметь место после полного или частичного восстановления данных дисульфидных связей. Подходящие способы приготовления данных соединений можно обнаружить в описании примеров Заявителя WO2011/133039A. В частности, пример 15 WO2011/133039A описывает частичное восстановление трастузумаба для образования 2 свободных тиольных групп в каждом mAb и для конъюгирования с определенным числом лекарственных средств-линкеров с ADC, имеющих среднее значение DAR, приблизительно равный 2. Специалисты в данной области техники понимают, как получить ADC, имеющие среднее значение DAR от 1 до 4. Примеры 7 и 8 WO2005/084390A описывают стратегии частичного восстановления, частичного восстановления/частичного повторного окисления, а также полного восстановления для (частичной) загрузки антител (лекарственным средством-линкером vcMMAE).

IHC и FISH статус опухолевой ткани определяют при помощи известных тестов, процедур и оборудования. В соответствии с настоящим изобретением, амплификацию гена HER2 можно измерить при помощи флуоресцентных (FISH), хромогенных (CISH) или любых других способов гибридизации in situ. В продаже имеются подходящие тесты для определения статуса экспрессии HER2 на мембранах клеток опухолевой ткани, такие, как HercepTest™ (Dako Denmark). Дополнительные HER2 IHC тесты производит Ventana Medical Systems (PATHWAY anti-HER2/neu), Biogenex Laboratories (InSite™ HER2/neu) и Leica Biosystems (Bond Oracle™ HER2 IHC). HER2 FISH/CISH тесты можно приобрести у Abbott Molecular (PathVysion HER2 DNA Probe Kit), Life Technologies (SPOT-Light® HER2 CISH Kit), Dako Denmark (HER2 CISH PharmDx™ Kit), Dako Denmark (HER2 FISH PharmDx™ Kit), и Ventana Medical Systems (INFORM HER2 Dual ISH DNA Probe Cocktail).

Настоящее изобретение также относится к применению соединения формулы (I) или (II) для лечения пациентов (т.е., женщин) с раком эндометрия, в частности USC, который является HER2 IHC2+ или 1+ и/или HER2 FISH-негативным, как описано ранее в данной заявке.

Настоящее изобретение дополнительно касается применения комбинации соединения формулы (I) или (II) с лекарственным препаратом на основе моноклональных антител и/или химиотерапевтическим средством для лечения рака эндометрия, в частности для лечения USC.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения лекарственный препарат на основе моноклональных антител для применения в комбинации с соединением формулы (I) или (II) в соответствии с настоящим изобретением представляет собой пертузумаб, бевацизумаб или трастузумаб, а химиотерапевтическое средство представляет собой i) таксан, в частности доцетаксел или паклитаксел, ii) средство, повреждающее ДНК, в частности цисплатин, карбоплатин или оксалиплатин, iii) ингибитор топоизомераз, в частности топотекан или иринотекан, iv) антрациклин, в частности доксорубицин, липосомальный доксорубицин, эпирубицин, даунорубицин или валрубицин, более конкретно доксорубицин, v) ингибитор mTOR (мишени рапамицина в клетках), в частности темсиролимус или vi) ингибитор тирозинкиназ, в частности лапатиниб или афатиниб.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения лекарственный препарат на основе моноклональных антител для применения в комбинации с соединением формулы (I) или (II) в соответствии с настоящим изобретением представляет собой пертузумаб, а химиотерапевтическое средство представляет собой таксан, в частности доцетаксел или паклитаксел, антрациклин, в частности доксорубицин, эпирубицин, даунорубицин или валрубицин, более конкретно доксорубицин, или ингибитор тирозинкиназ, в частности афатиниб.

Настоящее изобретение дополнительно относится к применению комбинации соединения формулы (I) или (II) с другим ADC, таким как, например, T-DM1, для лечения солидных опухолей человека и гемобластозов, экспрессирующих HER2, в частности солидных опухолей человека, экспрессирующих HER2.

Настоящее изобретение дополнительно относится к фармацевтической композиции, включающей соединение формулы (I) или (II) или его комбинацию с лекарственным препаратом на основе моноклональных антител и/или его химиотерапевтическим средством, как описано ранее в данной заявке, а также с одним или более фармацевтически приемлемыми эксципиентами.

Типичные фармацевтические составы лекарственных белков, таких как моноклональные антитела и (моноклональные) конъюгаты антитело-лекарственное средство, имеют форму лиофилизированных порошков или таблеток, которые требуют (водного) растворения (т.е., разведения) перед внутривенным введением, или форму замороженных (водных) растворов, которые требуют размораживания перед применением. В частности, в соответствии с настоящим изобретением фармацевтическая композиция предоставляется в форме лиофилизированной таблетки.

Подходящие для включения в фармацевтическую композицию (до лиофилизации) фармацевтически приемлемые эксципиенты в соответствии с настоящим изобретением включают буферные растворы (например, цитрат, гистидин или сукцинат-содержащие соли в воде), лиопротекторы (например, сахарозу, трегалозу), регуляторы тоничности (например, хлорид натрия), сурфактанты (например, полисорбат) и объемообразующие препараты (например, маннитол, глицин). Эксципиенты, применяемые для лиофилизированных белковых составов, выбирают по их способности предотвращать денатурацию белка во время процесса лиофилизации, а также в процессе хранения.

Состав многодозового стерильного лиофилизированного порошка Herceptin™ содержит 440 мг трастузумаба, 400 мг α,α-трегалозы дигидрата, 9,9 мг L-гистидина гидрохлорида, 6,4 мг L-гистидина и 1,8 мг полисорбата 20, USP. Разведение 20 мл Бактериостатической или Стерильной воды для инъекций (BWFI или SWFI) обеспечивает многодозовый раствор, содержащий 21 мг/мл трастузумаба при pH, приблизительно равной 6. Состав стерильного лиофилизированного порошка однократного применения Kadcyla™ содержит после разведения 20 мг/мл адо-трастузумаба эмтанзина, 0,02% масс./об. полисорбата 20, 10 ммоль сукцината натрия и 6% масс./об. сахарозы при pH 5,0.

Терапевтически эффективное количество соединения формулы (I) или (II) для применения в соответствии с настоящим изобретением, находится в диапазоне от приблизительно 0,01 до приблизительно 15 мг/кг веса тела, в частности в диапазоне от приблизительно 0,1 до приблизительно 10 мг/кг, более конкретно в диапазоне от приблизительно 0,3 до приблизительно 10 мг/кг веса тела. Последний диапазон соответствует приблизительно базовой дозе в диапазоне от 20 до 800 мг соединения ADC. Соединение для применения в соответствии с настоящим изобретением вводят еженедельно, дважды в неделю, три раза в неделю или ежемесячно, например, еженедельно в течение первых 12 недель и далее каждые три недели в период прогрессирования заболевания. Альтернативные режимы лечения можно применять в зависимости от тяжести заболевания, возраста пациента, вводимого соединения и других факторов, которые будут учитываться лечащим врачом.

ПРИМЕРЫ

Цитотоксичность линии клеток USC in vitro

Девять первичных линий клеток USC оценивают на предмет экспрессии HER2 на их поверхности при помощи IHC и проточной цитометрии (FACS), а также на амплификацию гена HER2 при помощи FISH, как описывает D.P. English с соавт. в Cancer Medicine, опубликованном John Wiley & Sons Ltd., стр. 1-10, 2014.

SYD985 является в 50-160 раз более активным по сравнению с T-DM1 в отношении первичных линий клеток USC с экспрессией HER2 IHC 1+ и IHC 2+. В наборе трех линий клеток USC HER2 IHC 1+ средние значения IC₅₀ (ИК₅₀) для SYD985 и T-DM1 составляют 0,07 мкг/мл и 3,58 мкг/мл, соответственно (р=0,004); в наборе трех линий клеток USC HER2 IHC 2+ средние значения ИК₅₀ составляют 0,02 мкг/мл и 1,82 мкг/мл, соответственно (р=0,005); и в наборе трех линий клеток USC HER2 IHC 3+ средние значения ИК₅₀ составляют 0,01 мкг/мл и 0,04 мкг/мл, соответственно (р=0,06).

Фигура 1 демонстрирует репрезентативные кривые зависимости доза-ответ SYD985 по сравнению с T-DM1 для линий клеток USC HER IHC 3+, 2+ и 1+.

Эффективность в отношении ксенотрансплантата линии клеток USC у мышей in vivo

Мышам женского пола с ТКИД в возрасте от пяти до восьми недель (Harlan, Netherlands) производят однократно интраперитонеальную инъекцию (i.p.) 7,5×10⁶ USC ARK-2 клеток (т.е., HER2 IHC 3+, FISH-позитивных клеток) в 400 мкл раствора фосфатно-солевого буфера. Через период времени, равный 7 дням для развития опухоли, две группы по 5 мышей в каждой получают либо SYD985 (5 мг/кг/нед в/в), либо T-DM1 (5 мг/кг/нед в/в). Признаки общей токсичности не наблюдаются ни в одной из данных групп лечения. Мыши во всех группах лечения получают серии из пяти инъекций, после которых их помещают в группу последующего наблюдения и наблюдают на предмет общей выживаемости в качестве основного результата.

Фигура 2 демонстрирует эффективность в отношении ксенотрансплантата линии клеток USC in vivo у мышей, получающих SYD985, по сравнению с получающими T-DM1 после нескольких инъекций.

Исследование эффективности в отношении ксенотрансплантатов линии клеток USC у мышей in vivo

Клетки USC ARK-2 (т.е., HER2 IHC 3+, FISH-позитивные) выращиваются в культуре, промываются и вводятся подкожно (с Matrigel™) в концентрации 7 миллионов клеток мышами с ТКИД в возрасте 5-8 недель. После достижения опухолью объема, равного приблизительно 200 мм³, мышей случайным образом делят на 5 групп с приблизительно сходным средним объемом опухоли между группами. В каждой группе находится всего 8-10 животных.

Животные получают однократную внутривенную инъекцию носителя, T-DM1 в количестве 10 мг/кг или SYD985 в количестве 10 мг/кг. Размер опухоли и вес животного записывают в течение 21 дня. Данные по выживаемости регистрируют в течение 30 дней.

Фигура 3 демонстрирует эффективность в отношении ксенотрансплантатов линии клеток USC у мышей in vivo, получающих SYD985, по сравнению с T-DM1 после однократной инъекции в День 0.

1. Применение соединения формулы (II)

для лечения солидных опухолей человека, экспрессирующих HER2, где солидная опухоль человека, экспрессирующая HER2, представляет собой рак эндометрия, и

где соединение формулы (II) имеет среднее значение соотношения лекарственного средства к антителу от 2,6 до 2,9.

2. Применение по п.1, где рак эндометрия представляет собой серозную карциному матки.

3. Применение по п.1 или 2, где рак эндометрия является HER2 IHC 2+ или 1+.

4. Применение по любому из пп.1-3, где рак эндометрия является HER2 FISH-негативным.