Способ фотодинамической терапии перевивной поверхностной солидной соединительнотканной саркомы м-1 крыс

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной медицине и онкологии, и может быть использовано для фотодинамической терапии перевивной поверхностной солидной соединительнотканной саркомы М-1 крыс. Для этого вводят фотосенсибилизатор «Фоторан Е6» в дозах 5,0 мг/кг, что при экстраполяции на дозу человека составляет 0,85 мг/кг веса тела больного. Через 2,5 часа после введения фотосенсибилизатора проводят облучение лазером с длиной волны 660-670 нм с плотностью мощности 250 мВт/см2 и плотностью энергии 300 Дж/см2 лазерного излучения, время облучения - 20 минут. Способ обеспечивает повышение эффективности фотодинамической терапии, увеличение срока жизни и 100%-ное полное излечение животных за счёт оптимально подобранных параметров и режима лазерного воздействия и дозы вводимого фотосенсибилизатора. 2 табл., 3 ил.

 

Изобретение относится к экспериментальной медицине, в частности к фотодинамической терапии перевивной поверхностной солидной соединительнотканной опухоли саркома М-1 крыс.

Эффективность фотодинамического воздействия зависит от трех составляющих: ФС, света и кислорода. Избирательность разрушения опухоли связана с избирательностью накопления ФС в опухоли по отношению к здоровой ткани и с воздействием света определенной длины волны. Не пораженные опухолью ткани в меньшей степени поглощают ФС, но в результате лазерного облучения имеет место нежелательная частичная деструкция здоровых тканей.

При проведении ФДТ пациенту вводится фотосенсибилизатор (ФС), избирательно накапливающийся в злокачественных новообразованиях. Затем опухоль подвергается дистанционному облучению лазерным светом определенной длины волны, в соответствии со спектром возбуждения ФС. В результате облучения происходит фотохимическая реакция, где ФС фактически играет роль катализатора, и происходит образование активных форм кислорода (основным из которых является синглетный кислород) и различных радикалов, которые являются цитотоксическими агентами и вызывают разрушение клеток опухоли. Второй механизм ФДТ - деструкция эндотелия кровеносных сосудов в зоне лазерного облучения, в результате которой имеет место тромбоз сосудов и нарушение питания в опухоли.

Известен способ ФДТ злокачественных опухолей (RU 2119363), включающий системное введение ФС с последующим дистанционным лазерным облучением опухоли в световой дозе 124 Дж/см2 и 98 Дж/см2 на курс лечения.

Недостаток данного способа состоит в том, что при минимальных побочных реакциях в зоне облучения достичь полной регрессии возможно лишь при воздействии на небольшие поверхностные опухоли.

Известен также способ ФДТ злокачественных опухолей (RU 2146159), включающий системное введение ФС и лазерное дистанционное облучение зоны опухолевого роста световой дозой 300-500 Дж/см2.

Однако данный способ применим, в основном, к поверхностным опухолям. Лазерное облучение с используемыми параметрами приводит к развитию геморрагического некроза в здоровых тканях во время и после ФДТ.

Известен также способ ФДТ злокачественных новообразований (RU 96107054 А), включающий, так же как и заявляемое изобретение, введение в организм пациента фотосенсибилизатора (далее - ФС) и лазерное облучение зоны опухолевого роста световой дозой 300-500 Дж/см2.

Однако, предлагаемый способ направлен в основном на повышение концентрации фотосенсибилизатора в опухоли, в то же время сами параметры лазерного облучения остаются стандартными, что приводит к развитию местных осложнений во время и после ФДТ.

Самым близким (прототипом) является способ ФДТ злокачественных опухолей (RU 2169015 С2), в котором ФДТ осуществляют путем введения ФС "Фотосенс" в дозе 0,3-0,8 мг/кг веса тела больного с последующим воздействием на зону опухолевого роста дистанционным лазерным излучением мощностью 100-500 мВт/см2.

Однако, в этих условиях интенсивное лазерное воздействие, осуществляемое за короткий промежуток времени после введения ФС, приводит к полному терапевтическому эффекту при воздействии на поверхностные опухоли и сопровождается глубоким некрозом опухоли и части окружающих нормальных тканей.

Все известные способы не дают полного терапевтического эффекта без образования длительно незаживающих деструктивных повреждений здоровых тканей. Использование нового отечественного ФС при проведении ФДТ с установленными в наших исследованиях параметрами позволяют достичь полной эрадикации опухолей без серьезных повреждений здоровых тканей в области лазерного воздействия.

Техническим результатом предлагаемого изобретения является разработка оптимального лекарственно-светового интервала (ЛСВИ) - времени от момента введения ФС до облучения лазером, подбор доз введенного ФС и подбор плотности мощности лазерного излучения на опухоль.

Указанный технический результат при осуществлении изобретения достигается за счет того, что так же, как и в известном способе (RU 2169015), вводят фотосенсибилизатор в дозе 0,3-0,8 мг/кг веса тела больного с последующим воздействием на зону опухолевого роста дистанционным лазерным излучением мощностью 100-500 мВт/см2.

Особенностью заявляемого изобретения является то, что вводят фотосенсибилизатор «Фоторан Е6» в дозе 5,0 мг/кг, что при экстраполяции на дозу человека составляет 0,85 мг/кг веса тела больного и через 2,5 часа после введения проводят облучения лазером с длиной волны 660-670 нм с плотностью мощности 250 мВт/см2 и плотностью энергии 300 Дж/см2 лазерного излучения, время облучения - 20 минут.

Изобретение поясняется подробным описанием, сериями опытов, таблицами и иллюстрацией на которой изображена диаграмма динамики накопления Фоторана Е6 в опухолях и здоровых тканях бедра крыс при дозах: А - 1,25 мг/кг, Б - 2,5 мг/кг, В - 5,0 мг/кг; по осям абсцисс - срок после внутрибрюшинного введения фотосенсибилизатора, ч; по осям ординат: слева - интенсивность флуоресценции, справа: - индексы контрастности.

Было проведено изучение противоопухолевой эффективности ФДТ с новым отечественным ФС Фоторан Е6, который содержит трисмеглуминовую соль хлорина Е6 в комплексе с поливинилпирролидоном (ПВП, марка К-17). Активной субстанцией Фоторана является хлорин Е6, который относится к природным порфиринам и выделяется из водоросли Spirullina platensis. Порфирины липофильны и связываются с мембранами клеток, однако они не способны селективно накапливаться в опухолевой ткани. С этой целью их соединяют с молекулами-переносчиками. Для Фоторана Е6 в качестве переносчика используют гидрофильный полимер ПВП. Образующиеся в растворе ПВП молекулярные комплексы «хлорин Е6 - ПВП» обладают более высокой фотосенсибилизирующей активностью и интенсивностью флуоресценции по сравнению с активностью свободного хлорина.

Способ осуществляют следующим образом.

В эксперименте in vivo нами использовались белые беспородные лабораторные крысы, в качестве экспериментальной модели опухоли использовали саркому М-1. Работа выполнена с соблюдением международных рекомендаций по проведению исследований с использованием лабораторных животных, изложенных в «Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых в экспериментальных и других научных целях» (Страсбург, 1987).

На 98 половозрелых самках крыс массой тела 135-190 г с имплантированной подкожно с внешней стороны бедра саркомой М-1. На 7-9 сутки после перевивки при достижении наибольшего диаметра опухолевых узлов 0,8-1,0 см животных методом рандомизации распределяли на 4 опытных и контрольную группы. Опухоли крыс контрольной группы не подвергались воздействиям. Фоторан Е6 вводили животным опытных групп интраперитонеально.

Фотодинамическая активность фотосенсибилизаторов и сохранность окружающих тканей реализуются за счет селективного накопления фотосенсибилизаторов в опухолевой ткани. Поэтому их регистрация с целью определения концентрации и динамики содержания в тканях in vivo необходима для контроля параметров лазерного воздействия. В данной работе уровень содержания Фоторана Е6 оценивали по интенсивности флуоресценции в условных единицах (у. ед.) в опухолевой и здоровой тканях бедра с помощью спектрофлуоресцентного комплекса ЛЭСА-01-«Биоспек». Селективность накопления ФС вычисляли по индексу контрастности. Спектры измеряли до введения препарата (0 часа), а затем через каждые 30 минут в течение 4 часов (см. диаграмму). В течение 3 ч после внутрибрюшинного введения Фоторана Е6 в разных дозах отчетливо регистрировалось постепенное увеличение содержания препарата в опухоли с последующим снижением его концентрации при статистически значимом различии с исходными значениями собственной флуоресценцией биологических тканей при р<0,01-0,001. Относительно высокая интенсивность флуоресценции препарата отмечалась и в здоровых тканях (р<0,05-0,02 относительно исходных значений). При введенных дозах максимальный индекс контрастности был в диапазоне значений 1,7-1,8 через 2-3 часа после введения ФС. С учетом полученных данных опухоли животных из опытных групп облучали лазером через 2,5 ч после введения ФС.

Лазерное облучение проводили в период максимального индекса контрастности опухоль/здоровая ткань после введения ФС (оптимальный лекарственно световой интервал ЛСВИ - 2,5 часа). Для воздействия лазерным излучением на опухоли крыс, находившихся под тиопенталовым наркозом (0,2 мл/100 г массы тела 2,5% раствора, интраперитонеально) использовали полупроводниковый аппарат «Аткус-2» (ЗАО «Полупроводниковые приборы», Санкт-Петербург). Длина волны излучения 662 нм, плотность энергии лазерного излучения (Е) - 300 Дж/см2, плотность мощности - (Ps) - 0.25 Вт/см2, диаметр светового пятна - 1,5 см, время облучения - 20 минут.

Время облучения лазером рассчитывали по формуле:

Т = Е / Ps / 60 секунд

где:

Т - время в минутах;

Е - плотность энергии лазерного излучения Дж/см2;

Ps - плотность мощности лазерного излучения Вт/см2.

Объемы опухолевых узлов определяли в день экспериментального воздействия (V0), на 3, 7, 10, 14 и 21 сутки (Vt) после ФДТ.

Для оценки противоопухолевой эффективности использовали следующие показатели:

- коэффициент абсолютного прироста опухоли (К):

Для этого сначала вычисляли объемы опухолей по формуле:

где: d1; d2, d3, - три взаимно перпендикулярные диаметры опухоли,

V - объем опухоли в см3.

Коэффициент абсолютного прироста опухоли (К) рассчитываем по формуле:

где V0 - объем опухоли до воздействия,

Vt - объем опухоли на определенный срок наблюдения;

- индекс торможения роста опухоли (ТРО, %):

ТРО вычисляли по формуле:

где: Vk - средний объем опухоли в контрольной группе

V0 - средний объем опухоли в опытной группе;

- процент животных в группе с полной регрессией (ПР) опухоли (К = -1), за полную регрессию опухоли мы принимали отсутствие видимой и пальпируемой опухоли.

- увеличение продолжительности жизни (УПЖ, %) животных, подвергнутых ФДТ, относительно контрольных особей:

По средней продолжительности жизни (СПЖ) животных и увеличение продолжительности жизни (УПЖ%) по сравнению с контролем. Значимым считается УПЖ ≥ 50%.

- критерий излечения животных при отсутствии признаков рецидивирования опухоли в течение 90 суток после терапии.

Статистическую обработку результатов исследований проводили в компьютерной программе «Statistica» непараметрическими методами для независимых групп (описательная статистика, значимость различий признаков). Статистическую значимость различий сравниваемых признаков в группах проводилась с помощью непараметрического метод U теста Манна-Уитни (Mann-Whitney U test). Различия считались статистически значимыми при уровне р<0,05, что соответствует 95% вероятности безошибочного прогноза.

Экспериментальные исследования выполнялись:

Вводили ФС в дозах - 1,25; 2,5; 5,0 и 10,0 мг/кг; Е=300 Дж/см2, Ps=0,25 Вт/см2, время облучения 20 минут.

Через 3 суток после ФДТ на облученной коже над опухолями появлялись эрозии, покрытые тонкими струпами. На 7-10 сутки формировались плотные струпы с демаркационной линией между окружающей кожей и некротизированной тканью новообразований.

В опыте с плотностью мощности лазерного излучения 0,25 Вт/см2 и с плотностью энергии 300 Дж/см2, время облучения 20 минут при дозах ФС 1,25 и 2,5 мг/кг полная регрессия саркомы М-1 отмечалась у 100% животных до 21 суток после ФДТ. Полный терапевтический эффект с дозой ФС 2,5 мг/кг на 90 сутки после ФДТ составлял 60%. При дозах 5,0 и 10 мг/кг после полной регрессии опухолевых узлов до 21 суток визуальных признаков рецидивирования неоплазий на протяжении 3 месяцев наблюдений не отмечалось (табл. 1). Примечательно, что при данных параметрах фотодинамического воздействия не отмечалось серьезных длительно незаживающих деструктивных повреждений в области лазерного воздействия, но и сокращалась продолжительность времени заживления поврежденных нормальных тканей.

Результаты количественного анализа исследованных показателей эффективности действия ФДТ с Фотораном Е6 на саркому М-1 приведены в таблице 1.

Показатели увеличения продолжительности жизни и излеченности животных на 90 сутки после ФДТ представлены в таблице 2.

Высокий терапевтический эффект при данных параметрах лазерного воздействия (Е=300 Дж/см2, Ps=0,25 Вт/см2) был обусловлен снижением повреждения нормальных тканей и последующей миграцией клеток воспалительного инфильтрата в зону фотодинамической деструкции для элиминации погибших опухолевых клеток.

Предложенный способ позволяет повысить эффективность проведения ФДТ как за счет фотосенсибилизатора «Фоторан Е6», который обладает свойствами накапливаться в опухоли и при локальном воздействии лазерного излучения с длиной волны в диапазоне 660-670 нм обеспечивает высокий фотосенсибилизирующий эффект, так и за счет подбора параметров проведения ФДТ. После чего удается получить увеличение срока жизни и 100% полного излечения животных.

Способ фотодинамической терапии перевивной поверхностной солидной соединительнотканной саркомы М-1 крыс, включающий введение фотосенсибилизатора в дозе 0,3-0,8 мг/кг веса тела больного с последующим воздействием на зону опухолевого роста дистанционным лазерным излучением мощностью 100-500 мВт/см2, отличающийся тем, что вводят фотосенсибилизатор «Фоторан Е6» в дозах 5,0 мг/кг, что при экстраполяции на дозу человека составляет 0,85 мг/кг веса тела больного, и через 2,5 часа после введения проводят облучение лазером с длиной волны 660-670 нм с плотностью мощности 250 мВт/см2 и плотностью энергии 300 Дж/см2 лазерного излучения, время облучения 20 минут.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для моделирования спинномозговой травмы кролика. Способ включает проведение анестезии и травмирование спинного мозга.
Изобретение относится к области медицины, а именно к офтальмологии. Для трансплантации ретинального пигментного эпителия (РПЭ) в эксперименте на кроликах проводят микроинвазивную трехпортовую 25 G витрэктомию в центральных и задних отделах стекловидного тела, после чего проводят ретинотомию в месте на 3 мм выше центральной зоны сетчатки при помощи острой канюли калибра 39 G.
Изобретение относится к области медицины, а именно к офтальмологии. Для трансплантации ретинального пигментного эпителия (РПЭ) в эксперименте на кроликах проводят микроинвазивную трехпортовую 25 G витрэктомию в центральных и задних отделах стекловидного тела, после чего проводят ретинотомию в месте на 3 мм выше центральной зоны сетчатки при помощи острой канюли калибра 39 G.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, и может быть использовано для моделирования экспериментальной раны мягких тканей у крыс для разработки тактики лечения.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной биологии, и может быть использовано для моделирования отморожения кожных покровов экспериментальных животных в гипоксических условиях.

Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии и офтальмологии, и может быть использовано для прогнозирования развития нейродегенеративных заболеваний у мышей, в основе патогенеза которых лежит γ-синуклеинопатия.

Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к патологической физиологии, общей хирургии, торакальной хирургии, и может быть использовано в качестве показательного симуляционного тренажера, а также в качестве испытания новых адгезивных наклеек для устранения открытого пневмоторакса.

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для отработки практических навыков по диагностике нарушений внутренних органов. Способ заключается в том, что используют модуль имитации аускультации, выполненный с возможностью приема сигнала от блока управления, и моделируют звуковые сигналы функционирования внутренних органов.

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для отработки практических навыков по диагностике нарушений внутренних органов путем выслушивания звуковых феноменов легких, сердца, желудка, кишечника и сосудов.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной медицине, и может быть использовано для моделирования туберкулезной инфекции in vitro. Гранулемоподобные структуры получают из мононуклеарных клеток венозной крови в присутствии микобактерий туберкулеза, культивируемых в трехмерном матриксе.

Изобретение относится к области органической химии, а именно к новым соединениям 2-аминопиримидина формулы I, где R1 выбирается из группы, включающей галоген, циано, замещённый или незамещённый C1-C6 алкил или незамещённый C1-C6 алкокси; R2 выбирается из группы, включающей Н, галоген, незамещённый C1-C6 алкил, незамещённый C1-C6 алкокси; R3 - это H или -(CH2)mNR8R9; R4 и R5 каждая по отдельности является H, незамещённым C1-C6 алкилом, галогеном, -(CH2)mNR8R9; при этом каждая m по отдельности представляет 0 или 1; каждая R8 и каждая R9 по отдельности выбирается из замещённого и незамещённого C1-C6 алкила, или R8, R9 и связанные N вместе формируют незамещённое или замещённое 4-7-членное моноциклическое кольцо, содержащее 1 или 2 гетероатома, выбранных из O, N; W - это NH, N(C1-C3 алкил), O или S; X, Y, Z каждая по отдельности является N или -CR10, где R10 - это H; - это незамещённое 5-6-членное ароматическое кольцо, содержащее 0, 1 гетероатома, выбранных из N; где каждый замещённый элемент по отдельности замещён 1 или 3 группами, выбранными из галогена, C1-C3 алкила, -NH(C1-C3 алкил), -N(C1-C3 алкил)(C1-C3 алкил) и - C(=O)(C1-C3 алкил).

Изобретение относится к новому соединению формулы (I) и его фармацевтически приемлемой соли. Соединения обладают свойствами ингибитора киназной активности и могут быть использованы в производстве лекарства для лечения рака щитовидной железы, немелкоклеточной карциномы, эпидермоидной карциномы, меланомы, рака толстой кишки, карциномы желудка, рака пищевода, рака поджелудочной железы, рака почки, рака печени, рака легких или рака яичников.

Описана фармацевтическая комбинация 3-(1-{3-[5-(1-Метил-пиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидро-пиридазин-3-ил)-бензонитрила или его фармацевтически приемлемой соли и/или сольвата вместе с амидом 4-[(S)-2-азетидин-1-ил-1-(4-хлор-3-трифторметил-фенил)-этиламино]-хиназолин-8-карбоновой кислоты.

Изобретение относится к новому соединению формулы I и к соединению формулы II или их фармацевтически приемлемой соли, которые обладают свойствами ингибитора FGFR-4. Соединения могут найти применение при лечении заболевания или состояния опосредованного FGFR-4, например гепатоклеточной карциномы или гиперлипедимии.

Настоящее изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к комбинации для внутрибрюшинного введения, для лечения и/или предотвращения рецидива рака яичника.

Настоящее изобретение относится к соединению формулы (I) в виде основания, энантиомера, диастереоизомера, включая рацемическую смесь, и аддитивной соли с кислотой, являющемуся прямым безопасным ингибитором комплекса 1 митохондриальной дыхательной цепи и косвенным ингибитором стабилизации фактора, индуцируемого гипоксией (HIF-1), при гипоксическом стрессе, к вариантам способа его получения, к промежуточному соединению для получения соединения формулы (I), а также к лекарственному средству и фармацевтической композиции, содержащим предлагаемое соединение формулы (I). (I)В формуле (I) A представляет собой 5-членную гетероарильную группу, содержащую от 1 до 3 гетероатомов, где по меньшей мере один гетероатом выбран из атома серы и атома азота, где A является незамещенным или замещен одной (C1-C4)алкильной группой, и указанная (C1-C4)алкильная группа является незамещенной или замещена гетероциклильной группой, каждый из R1, R2, R1' и R2', независимо, представляет собой атом водорода или (C1-C4)алкильную группу, и каждый из R3, R4, R5, R3', R4' и R5', независимо, выбран из атома водорода, атома галогена, -O-фторметильной группы и (C1-C4)алкокси группы, где по меньшей мере один из R3, R4 и R5 представляет собой (C1-C4)алкокси группу, и по меньшей мере один из R3', R4' и R5' представляет собой (C1-C4)алкокси группу.

Изобретение относится к новому гетероциклическому соединению формулы (I). Соединение обладает активностью в отношении рецептора хемокина СХС типа 4 (CXCR4) и может быть использовано для лечения заболевания, выбранного из повреждения почки, ишемической болезни, рака и инфаркта миокарда.

Данное изобретение относится к области медицины и фармакологии и касается разработки и получения лекарственных средств, включающих DHMEQ или его аналоги, которые могут быть использованы для лечения и/или профилактики онкологических, аутоиммунных или воспалительных заболеваний.

Изобретение относится к новому химическому соединению, а именно к N,N'-комплексу дибромди-[(4-(бензилсульфанил)метил)-3,5-диметил-1H-пиразол]палладия(II) формулы (1), Данное соединение проявляет противоопухолевую активность и может использоваться в качестве биологически активного вещества, обладающего противораковой активностью.

Группа изобретений относится к медицине и касается средства для лечения аденокарциномы молочной железы, включающего метиловый эфир Nα-трет-бутилоксикарбонил-S-тетрагидропиранилцистеинил-фенилаланил-D-триптофил-Nε-бензил-оксикарбониллизилтреонина (П), где средство представляет собой лиофилизат для приготовления раствора для инъекций, дополнительно содержит фосфатидилхолин (ФХ), холестерин (X) и DSPE-PEG-2000 (ПЭГ-липид) и сахарозу (С) при молярном соотношении компонентов: МП: МФХ: МХ: МПЭГ-липид: МС=1,0 : 71,1 : 13,9 : 0,2 : 346,5.

Аппараты и способы, чтобы управляемым образом генерировать высокочастотные ударные волны. Генерируемые ударные волны можно доставлять к определенным клеточным структурам пациента для использования в медицинских и/или эстетических терапевтических применениях.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной медицине и онкологии, и может быть использовано для фотодинамической терапии перевивной поверхностной солидной соединительнотканной саркомы М-1 крыс. Для этого вводят фотосенсибилизатор «Фоторан Е6» в дозах 5,0 мгкг, что при экстраполяции на дозу человека составляет 0,85 мгкг веса тела больного. Через 2,5 часа после введения фотосенсибилизатора проводят облучение лазером с длиной волны 660-670 нм с плотностью мощности 250 мВтсм2 и плотностью энергии 300 Джсм2 лазерного излучения, время облучения - 20 минут. Способ обеспечивает повышение эффективности фотодинамической терапии, увеличение срока жизни и 100-ное полное излечение животных за счёт оптимально подобранных параметров и режима лазерного воздействия и дозы вводимого фотосенсибилизатора. 2 табл., 3 ил.

Наверх