Системы доставки пропофола

Настоящее изобретение относится к микроэмульсии пропофола для парентерального введения. Микроэмульсия пропофола содержит масляную фазу в форме масляных капель, диспергированных в непрерывной фазе водного разбавителя. Масляная фаза содержит пропофол, по меньшей мере одно поверхностно-активное вещество, содержащее 15-гидроксистеарат полиэтиленгликоля (солютол HS 15), по меньшей мере один растворитель, содержащий среднецепочечные триглицериды (МСТ), по меньшей мере одно дополнительное поверхностно-активное вещество и по меньшей мере один сорастворитель. Масляные капли имеют размер не более 20 нм в непрерывной фазе. Весовое соотношение между указанным по меньшей мере одним растворителем и поверхностно-активным веществом составляет от 1:8 до 1:12. Микроэмульсия имеет монодисперсное распределение размера масляных капель. Также описан допускающий разбавление концентрат пропофола и способ получения микроэмульсии, предусматривающий разбавление допускающего разбавление концентрата пропофола в заранее заданном количестве фармацевтически приемлемого водного разбавителя. Микроэмульсия пропофола по изобретению обеспечивает относительно безболезненное введение состава. 4 н. и 21 з.п. ф-лы, 7 ил., 15 табл., 10 пр.

 

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к новым допускающим разбавление системам доставки, пригодным для внутривенной доставки пропофола.

ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Пропофол (2,6-диизопропилфенол, C12H18O) является широко используемым лекарственным средством для внутривенной индукции анестезии, а также средством для поддержания анестезии путем инфузионного введения. Популярность пропофола вызвана различными его преимуществами. Среди положительных свойств, которые ним предлагаются, - быстрое начало и кратковременность его действия из-за низкой тенденции к накоплению в организме (высокая скорость выведения и относительно быстрое устранение из-за его короткого периода полувыведения) в сочетании со спокойным и превосходным пробуждением от анестезии с низкой частотой послеоперационной тошноты и рвоты. Тот факт, что восстановление после анестезии пропофолом характеризуется минимальными побочными эффектами, расширило его применение от только лишь анестезирующего лекарственного средства до седативно-гипнотического средства, используемого в отделениях интенсивной терапии, в амбулаторных процедурах и в системах жизнеобеспечения у взрослых.

Пропофол представляет собой липофильное масло с практически нулевой растворимостью в воде (150 мкг/литр) и поэтому вводится внутривенно (IV) в эмульсионном составе. Разработка инъекционного состава на основе пропофола представила большую проблему. Первые клинические испытания были проведены в Европе в 1977 г. с использованием препаратов с 1 и 2 вес. % пропофола, составленных с использованием Cremophor EL и этанола. Этот состав продемонстрировал высокую частоту случаев анафилаксии, что вызвало отказ от дальнейшей разработки пропофола. После этого было предпринято множество попыток разработать состав с минимальными побочными эффектами и подходящим анестезирующим профилем с сохранением в то же время физической и химической стабильности состава. Наконец, была разработана и оценена эмульсия пропофола типа "масло-в-воде" (на основе липидов) для применения у человека в клинических испытаниях в Европе в 1983 г. и в Соединенных Штатах в 1984 г. Этот состав выпустили в Соединенном Королевстве и Новой Зеландии в 1986 г. и в США в 1989 г. В 1999 г. на рынок США также вывели генерическую форму эмульсии на основе липидов. Несмотря на одобрение этих эмульсий FDA и в Европе, сообщалось о нескольких основных недостатках: физическая нестабильность эмульсии, боль при инъекции, гиперлипидемия (из-за относительно высокого содержания липидов) и повышение вероятности заражения микроорганизмами, приводящего к септическим осложнениям и даже смерти. Кроме того, чувствительность пропофола к окислению и композиция на основе эмульсии, которая является субстратом для пролиферации бактерий, часто диктуют сложные производственные процедуры и налагают ограничения на условия хранения и ограничения на применение после вскрытия флакона с эмульсией. Кроме того, нестабильность эмульсии может вызывать с течением времени образование крупных капель (более 500 нм), подвергая пациентов риску, поскольку слитые капли слишком велики, чтобы проходить через кровеносные капилляры, не вызывая эмболии; образование крупных жировых глобул также чрезвычайно опасно, так как они могут оставаться относительно долго в органах пациента, таких как легкие, селезенка и печень, приводя к токсичности в органах.

В отличие от большинства внутривенно вводимых соединений, которые обычно являются электрически заряженными молекулами, пропофол не заряжен и поэтому не может вводиться в виде водно-солевого раствора. Высокая липофильность и ограниченная смешиваемость пропофола (150 мкг/литр) вынуждают составлять его в виде эмульсии на основе липидов, содержащей соевое масло, лецитин яичного желтка и глицерин. При решении проблем растворимости пропофола значительное количество нежелательных свойств было связано с этой крупнокапельной эмульсионной системой. Состав характеризовался тяжелыми аллергическими реакциями, физической нестабильностью и значительной болью во время IV инъекции. В отделениях интенсивной терапии, где пропофол используется для длительного введения, вероятность развития гиперлипидемии является значительной. Это осложнение было названо "синдром инфузии пропофола" и может часто приводить к летальным метаболическим нарушениям. Кроме того, липидный состав характеризовался высоким риском возникновения бактериемии из-за его ассоциации с микробиологическим загрязнением во время производства или во время его приготовления перед применением. Невозможность преодолеть вероятность микробного роста привела к риску развития у пациентов высокой температуры, инфекций, сепсиса и даже смерти. Высокая стоимость производства эмульсии пропофола по сравнению с альтернативными средствами индукции анестезии, а также требования к применению пропофола в течение 6 часов после открытия заставили многих производителей составов пропофола остановить производство.

Из-за своих свойств состав пропофола представляет собой серьезную проблему для ученых из области физической и коллоидной химии. Некоторые из нежелательных свойств пропофола зависят от состава. Следовательно, существует значительный интерес к разработке новых составов, которые будут иметь минимальные побочные эффекты и нежелательные свойства, однако сохранят полезный кинетический профиль пропофола и его требуемое анестезирующее действие.

Микроэмульсии (ME) можно рассматривать как носителей для доставки лекарственных средств из-за их спонтанного образования, высокой способности к солюбилизации и физической стабильности [1]. Попытки составить пропофол в классических микроэмульсиях типа "масло в воде" еще не признаны фармацевтической промышленностью или FDA. На сегодняшний день не разработано приемлемых составов микроэмульсий пропофола, допускающих полное разбавление, которые обладают всеми необходимыми условиями для IV препаратов на основе пропофола, например, допускающие разбавление в водной фазе, с подходящей осмолярностью, распределением размеров капель, стабильностью, микробиологической очисткой, безболезненностью и т.д., которые необходимы для правильного диспергирования в крови без возникновения побочных эффектов или разрушения физическим или химическим путями.

Наноразмерные самоорганизующиеся жидкости (NSSL) - это усовершенствованная категория средств доставки. NSSL представляют собой самоорганизующиеся микроэмульсионные системы из нанокапель, содержащие поверхностно-активные вещества и масло. Такие системы могут иногда содержать дополнительные компоненты, такие как дополнительные поверхностно-активные вещества, растворители, сорастворители и другие добавки. Эти самоорганизующиеся микроэмульсии могут находиться в форме концентратов, которые можно полностью и постепенно разбавлять водной фазой с образованием микроэмульсий. После образования, эти системы самоорганизуются в обратные мицеллы; при разбавлении водой или водными растворами образуются набухающие в воде мицеллы или нанокапли типа "вода в масле", способные превращаться во взаимно непрерывные мезофазы в присутствии водной фазы, например воды. При дальнейшем разбавлении они подвергаются инверсии (инверсия зонтичного типа) в капли типа "масло в воде". Ранее такие системы были изучены и продемонстрирована их способность к солюбилизации нерастворимых лекарственных средств и нутрицевтиков [2-7]. Однако пропофол имеет уникальную химическую структуру, будучи очень липофильным, и таким образом слабо взаимодействует с концевыми группами поверхностно-активного вещества и требует применения дополнительных гидрофильных соединений, чтобы дегидратировать концевые группы поверхностно-активных веществ для получения эластичности, кривизны и нулевого межфазного натяжения системы. Вследствие его уникальных свойств не всякая допускающая разбавление система обеспечивает стабильную микроэмульсию пропофола, которая подходит для парентерального введения.

В настоящем изобретении наноразмерные структуры, т.е. усовершенствованные самоорганизующиеся системы, специально разработаны для загрузки пропофола в масляном концентрате, которые затем можно легко разбавить "по требованию" и в соответствии с применением с любым типом водного раствора (буфер, вода для инъекций, физиологический раствор, изотонические смеси и другие). Уникальная адаптация подходящих самоорганизующихся составов для пропофола в соответствии с настоящим изобретением обеспечивает возможность дополнительно разбавлять концентрированный состав, несущий лекарственное средство, жидкостью, такой как кровоток, образуя тем самым бесцветные (прозрачные) стабильные смеси без разделения фаз и/или осаждения лекарственного средства. Эти системы изотропны, термодинамически устойчивы, демонстрируют высокую способность к солюбилизации и обладают повышенной способностью улучшать биодоступность пропофола. Другие преимущества этого уникального состава станут очевидными из раскрытия ниже.

ССЫЛКИ

[1] WO 2008/058366

[2] A. Spernath, A. Aserin, Advances in Colloid and Interface Science 2006, 128

[3] A. Spernath, A. Aserin, N. Garti, Journal of Colloid and Interface Science 2006, 299, 900-909

[4] A. Spernath, A. Aserin, N. Garti, Journal of Thermal Analysis and Calorimetry 2006, 83

[5] N. Garti, A. Spernath, A. Aserin, R. Lutz, Soft Matter 2005, 1

[6] A. Spernath, A. Aserin, L. Ziserman, D. Danino, N. Garti, Journal of Controlled Release 2007, 119

[7] WO 03/105607

[8] S. Davis, Advance Clinical Nutrition 1983, pp. 213-39

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к усовершенствованной микроэмульсии пропофола, пригодной для внутривенной доставки пропофола. Пропофол можно загрузить в практически безводный концентрат, который допускает разбавление водой или любой другой физиологической жидкостью непосредственно перед применением, с получением микроэмульсии пропофола, пригодной для парентерального введения. Как альтернатива, микроэмульсию пропофола по настоящему изобретению можно представить в разбавленной форме, готовой для непосредственного применения. Уникальная комбинация компонентов в концентрате пропофола, а также разбавленной микроэмульсии пропофола по настоящему изобретению, значительно увеличивает химическую, биологическую и физическую стабильность состава с течением времени, снижает риск загрязнения, расширяет его сферу применения в различных концентрациях (различных дозах) и разбавленных формах, давая возможность медицинским работникам решать, как и когда состав готовят до применения в соответствии с конкретной потребностью.

Понятно, что концентраты пропофола и дополнительные продукты по настоящему изобретению впервые обеспечивают раствор для давно испытываемой необходимости в создании стабильных, высокочистых, безводных, а также пропофол-содержащих продуктов, допускающих растворение в воде.

В настоящем изобретении адаптированная наноразмерная система дает возможность получать однородный размер и форму капель, усовершенствованные реологические свойства, стабильность пропофола (т.е. в отношении окисления), контролируемое поверхностное натяжение между каплями и воздухом (растекаемость) и т.д. Кроме того, допускающие разбавление и разбавленные системы поддерживают пропофол в связанном состоянии, а именно, исключая свободный пропофол; при этом пропофол высвобождается из системы (либо концентрата, либо разбавленной системы) только при дополнительном разбавлении, т.е. после введения в кровоток. Это, в свою очередь, значительно уменьшает боль при введении.

Таким образом, настоящее изобретение предусматривает микроэмульсии, содержащие пропофол, а также концентраты пропофола, пригодные для разбавления, которые образуют самоорганизующиеся системы (микроэмульсии). Эти самоорганизующиеся структуры являются слабоконцентрированными в масляной фазе (пропофол является основной масляной фазой), образованы масло-сольватированными кластерами или короткими доменами поверхностно-активных веществ, однако отличаются от классических обратных мицелл. При смешивании с небольшими количествами водных сред образуется бинепрерывная структура из сольватированных (богатых маслом) и гидратированных (богатых водой) доменов; при дальнейшем разбавлении водной фазой бинепрерывная структура постепенно и непрерывно преобразуется в нанокапли типа "масло в воде" (O/W), захватывающие молекулы пропофола в свое масляное ядро (или в хвосты поверхностно-активных веществ). Преобразование в микроэмульсии O/W является спонтанным, т.е. без необходимости использования условий напряжения сдвига или чрезмерного нагрева. Концентраты и микроэмульсии по настоящему изобретению обеспечивают термодинамически стабильные наноструктуры (имеющие наноразмерные капли), которые можно безопасно хранить в течение продолжительных периодов времени без агрегации, коалесценции или разделения фаз по сравнению с нестабильностью и коротким сроком годности коммерческих эмульсий пропофола, используемых в настоящее время. Микроэмульсия пропофола по настоящему изобретению также характеризуется практически однородным и стабильным размером капель, обычно имеющим узкое распределение по размерам. Стабильность размера капель имеет важное значение, так как изменения размера капель могут ухудшить высвобождение лекарственного средства (при хранении) и его анестезирующий профиль. Кроме того, концентрат пропофола по настоящему изобретению лишен воды и, как таковой, не поддерживает (или сводит к минимуму) рост микроорганизмов. Кроме того, в отличие от коммерческих эмульсий пропофола или классических микроэмульсий, составы по настоящему изобретению демонстрируют, благодаря тщательной адаптации композиции на основе поверхностно-активных веществ/сорастворителей/дополнительных поверхностно-активных веществ,- достигаемую высокую химическую, биологическую и физическую стабильность и небольшой размер капель. Кроме того, составы по настоящему изобретению можно стерилизовать различными способами, такими как термическая стерилизация, фильтрация через фильтр 0,22 мкм, УФ-излучение и другие способы, известные из уровня техники, без ущерба для полезной структуры микроэмульсий. При изготовлении коммерческих эмульсий пропофола, из-за присущей им нестабильности и необходимости в многоступенчатой гомогенизации, воздействие заражения больше, а стерилизация посредством фильтрации является неэффективной вследствие большого размера капель.

В одном из его аспектов настоящее изобретение предусматривает микроэмульсию пропофола, содержащую масляную фазу в форме масляных капель, диспергированных в непрерывной фазе водного разбавителя, где масляная фаза содержит пропофол, по меньшей мере одно поверхностно-активное вещество, по меньшей мере один растворитель, по меньшей мере одно дополнительное поверхностно-активное вещество и по меньшей мере один сорастворитель, при этом масляные капли имеют размер не более чем 20 нм в непрерывной фазе, пропофол и поверхностно-активное вещество характеризуются коэффициентами диффузии одного порядка, в случае если находятся в композиции микроэмульсии (как измерено с помощью SD-NMR), и микроэмульсия является пригодной для парентерального введения.

В контексте настоящего раскрытия термин коэффициент диффузии означает относительную скорость диффузии одного материала в другой материал. Характерной особенностью микроэмульсий по настоящему раскрытию является сходство между коэффициентами диффузии пропофола и поверхностно-активного вещества, когда они присутствуют в микроэмульсии, и как измерено с помощью SD-NMR (как будет описано ниже). В случае если коэффициенты диффузии пропофола и поверхностно-активного вещества имеют один и тот же порядок, то пропофол по существу не будет иметь движущей силы для диффузии из масляной капли, сохраняя тем самым пропофол внутри масляной капли (т.е. в пределах ядра и/или поверхности раздела с разбавителем). Поскольку свободный пропофол, как известно, является причиной боли при инъекции, то тот факт, что пропофол находится внутри масляных капель, как ожидается, значительно уменьшит боль и раздражение во время и после введения. Кроме того, расположение пропофола в пределах ядра и/или поверхности раздела масляных капель (с аналогичными значениями SD-NMR для поверхностно-активного вещества - пропофола) дает ему возможность выделяться из нанокапли таким образом, что это приведет к быстрой дисперсии пропофола в кровотоке, обеспечивая требуемую быструю индукцию и поддержание анестезии (как видно из исследования на животных).

В некоторых вариантах осуществления коэффициенты диффузии пропофола и поверхностно-активного вещества (в случае если они находятся в микроэмульсии) по меньшей мере на один порядок меньше, чем у других компонентов микроэмульсии.

В других вариантах осуществления коэффициенты диффузии пропофола и поверхностно-активного вещества (в случае если они находятся в микроэмульсии) составляют порядка 1×10-11 м2/с, в случае если они находятся в микроэмульсии конкретной комбинации, как измерено с помощью SD-NMR. В некоторых других вариантах осуществления коэффициенты диффузии пропофола и поверхностно-активного вещества (в случае если они находятся в микроэмульсии) составляют порядка 1×10-10 м2/с, 1×10-9 м2/с или даже 1×10-8 м2/с, в случае если они находятся в микроэмульсии в конкретной комбинации, как измерено с помощью SD-NMR.

Поверхностно-активное вещество может быть выбрано из подходящего поверхностно-активного вещества любого типа, которое удовлетворяет требованию коэффициента диффузии в композиции на основе микроэмульсии. Они могут включать ионные, катионные или амфотерные, или неионные поверхностно-активные вещества, имеющие гидрофильную природу, т.е. поверхностно-активное вещество, имеющее сродство к воде. Иллюстративными поверхностно-активными веществами являются полиоксиэтиленсорбитанмонолаурат, полиоксиэтиленсорбитанмонопальмитат, полиоксиэтиленсорбитанмоноолеат и полиоксиэтиленовые сложные эфиры насыщенного и ненасыщенного касторовых масел, этоксилированные сложные эфиры моноглицерина, этоксилированные жирные кислоты и этоксилированные жирные кислоты с короткой, средней и длинной цепями жирных кислот и другие. Гидрофильные фосфолипиды, такие как лизофосфатидилхолин и другие подобные фосфолипиды.

Перечень гидрофильных поверхностно-активных веществ включает по меньшей мере одно гидрофильное поверхностно-активное вещество из полиоксиэтиленов, этоксилированного (20ЕО) сорбитанмонолаурата (Т20), этоксилированного (20ЕО) сорбитанмоностеарата/пальмитата (Т60), этоксилированного (20ЕО) сорбитанмоноолеата/линолеата (Т80), этоксилированного (20ЕО) сорбитантриолеата (Т85), этоксилированного (от 20ЕО до 40ЕО) касторового масла; гидрогенизованного этоксилированного (20-40ЕО) касторового масла, этоксилированного (5-40ЕО) моноглицерида стеарата/пальмитата, полиоксила 35 и 40ЕО касторового масла. В соответствии с другими вариантами осуществления гидрофильное поверхностно-активное вещество может быть выбрано из полиоксила 35 касторового масла, полисорбата 40 (Tween 40), полисорбата 60 (Tween 60), полисорбата 80 (Tween 80), Mirj S40, олеоилмакроголглицеридов, полиглицерил-3-диолеата, этоксилированной гидроксилстеариновой кислоты (солютол HS15), сложных эфиров сахаров, таких как моноолеат сахарозы, монолаурат сахарозы, моностеарат сахарозы. Сложные эфиры полиглицерина, такие как моноолеат или монолаурат декаглицерина, монолаурат или моноолеат гексаглицерина.

В некоторых вариантах осуществления гидрофильное поверхностно-активное вещество можно смешивать с определенными количествами липофильных поверхностно-активных веществ, таких как моностеарат сорбитана, моноолеат сорбитана, тристеарат или триолеат сорбитана, сложные эфиры полиглицерина, такие как моно- и триглицериновые сложные эфиры стеариновой кислоты, или пальмитиновой кислоты, или лауриновой, или олеиновой и их смесей. Сложные эфиры сахарозы, такие как ди- и триэфиры сахарозы и жирных кислот, и фосфолипиды любого типа.

В некоторых вариантах осуществления поверхностно-активное вещество может представлять собой 15-гидроксистеарат полиэтиленгликоля (солютол HS 15). В других вариантах осуществления поверхностно-активное вещество может представлять собой полиоксиэтилены, такие как полисорбат (полиоксиэтиленсорбитанмонолаурат, такой как Tween 40, Tween 60, Tween 80 и т.п.).

В одном из его аспектов настоящее изобретение предусматривает микроэмульсию пропофола, содержащую масляную фазу в форме масляных капель, диспергированных в непрерывной фазе водного разбавителя, где масляная фаза содержит пропофол, 15-гидроксистеарат полиэтиленгликоля (солютол HS 15), по меньшей мере один растворитель, по меньшей мере одно дополнительное поверхностно-активное вещество и по меньшей мере один сорастворитель, при этом масляные капли имеют размер не более чем 20 нм в непрерывной фазе, и микроэмульсия пригодна для парентерального введения.

В другом его аспекте настоящее изобретение предусматривает микроэмульсию пропофола, содержащую масляную фазу в форме масляных капель, диспергированных в непрерывной фазе водного разбавителя, где масляная фаза содержит пропофол, полисорбат, по меньшей мере один растворитель, по меньшей мере одно дополнительное поверхностно-активное вещество и по меньшей мере один сорастворитель, при этом масляные капли имеют размер не более чем 20 нм в непрерывной фазе, и микроэмульсия пригодна для парентерального введения.

В некоторых вариантах осуществления микроэмульсии характеризуются монодисперсным распределением размера масляных капель.

В некоторых вариантах осуществления размер капли и однородное распределение достигается при разбавлении водой в диапазоне от приблизительно 70 до приблизительно 93 вес. % воды.

Микроэмульсии пропофола по настоящему изобретению определяются как спонтанно образующиеся микроэмульсии типа "масло в воде" (O/W), в которых разбавитель образует непрерывную фазу, тогда как масляная фаза имеет форму наноразмерных дискретных капель. В контексте настоящего изобретения термин микроэмульсия пропофола относится к термодинамически стабильным самоорганизующимся нанокаплям или другим структурам несмешивающегося масла, которое растворяет пропофол, и воды или водоподобных жидких дисперсий, т.е. к тем, которые имеют средний диаметр капель не более чем 20 нанометров (нм). Микроэмульсии пропофола по настоящему изобретению характеризуются практически нулевым межфазным натяжением между масляными каплями и водным разбавителем, обеспечивая тем самым самоорганизацию и непрерывную разбавляемость.

Следует подчеркнуть, что микроэмульсии пропофола по настоящему изобретению являются спонтанно образуемыми, без необходимости использовать способы с высокой степенью сдвига, кавитации или гомогенизации при высоком давлении, а простым смешиванием компонентов микроэмульсий при низких скоростях смешивания. Таким образом, в некоторых вариантах осуществления микроэмульсии пропофола по настоящему изобретению получают разбавлением концентратов пропофола (составы и свойства которых будут обсуждаться в данном документе) подходящим разбавителем, например водой, без применения условий сдвига, кавитации или гомогенизации.

В некоторых вариантах осуществления размер масляных капель микроэмульсии составляет приблизительно 10-20 нм (нанометров). Термин размер капель относится к среднему арифметическому измеренных диаметров капель, где диаметры составляют ±15% от среднего значения.

В некоторых других вариантах осуществления размер капель может составлять от приблизительно 15 до приблизительно 17 нм.

Кроме того, микроэмульсии пропофола по настоящему изобретению характеризуются монодисперсным распределением размера масляных капель. А именно, распределение по размеру масляных капель в микроэмульсиях пропофола по настоящему изобретению является узким, без существенного отклонения от среднего значения размера. В некоторых вариантах осуществления индекс полидисперсности (PDI) распределения масляных капель находится в пределах от приблизительно 0,03 до приблизительно 0,08.

Как отмечено выше, в микроэмульсиях по настоящему изобретению пропофол стабильно содержится (т.е. солюбилизирован) внутри масляных капель из-за использования поверхностно-активного вещества, которое характеризуется коэффициентом диффузии, аналогичным коэффициенту диффузии пропофола в композиции на основе микроэмульсии. Примерами таких поверхностно-активных веществ являются солютол и полисорбат (например, Tween 60 или Tween 80) и растворитель, который контролируемо высвобождается в кровоток после введения. Без ограничения какой-либо теорией, система пропофол-поверхностно-активное вещество-растворитель образует сильные молекулярные взаимодействия, что дает возможность солюбилизировать пропофол внутри масляных капель микроэмульсии. Комбинация поверхностно-активного вещества и пропофола в присутствии растворителя обеспечивает взаимодействие между поверхностно-активным веществом и пропофолом (т.е. физическое связывание пропофола с молекулами поверхностно-активного вещества), ингибируя тем самым и/или предотвращая миграцию пропофола из ядра на поверхность раздела масло-вода или его высвобождение в водную фазу при хранении. При высоких значениях разбавления, т.е. при введении в кровоток, формируется мицеллярная система, что дает возможность (из-за своей динамичной структуры) высвободить пропофол из масляной капли в кровоток с получением после этого требуемого анестезирующего эффекта при диффузии через гематоэнцефалический барьер (ВВВ). Другими словами, перед введением в кровоток пропофол практически совсем не присутствует в непрерывной фазе разбавителя, предотвращая тем самым нежелательную боль и дискомфорт в области внутривенного введения и во время него.

Боль во время введения также сводится к минимуму из-за небольшого размера капель и их однородности по размеру. Такая однородность также дает возможность осуществлять контролируемое и стабильное высвобождение пропофола в кровоток после введения, а также дает возможность контролировать выведение компонентов из кровотока.

Микроэмульсии пропофола по настоящему изобретению пригодны для парентерального введения пациенту, нуждающемуся в этом. Парентеральные пути введения обеспечивают общую системную доступность и наиболее быстрое начало действия. Наиболее часто используемыми парентеральными путями являются внутривенный (i.v.), внутримышечный (i.m.) и подкожный (s.c). Внутривенная инъекция предполагает быстрое начало анестезии, являясь типичным путем введения пропофола, хотя непрерывное капельное введение пропофола (постоянная инфузия) также используется для поддержания постоянных уровней лекарственного средства у пациентов, нуждающихся в этом (например, продолжительная анестезия или легкое седативное действие).

Разбавитель в микроэмульсиях обычно представляет собой фармацевтически приемлемую водную среду, составляющую непрерывную фазу. В некоторых вариантах осуществления разбавитель выбран из воды, воды для инъекций, физиологического раствора, раствора декстрозы или буфера, характеризующегося рН от 3 до 9, или любого другого изотонического раствора, подходящего для парентерального введения.

В контексте настоящего раскрытия термин растворитель относится к любому органическому растворителю, подходящему для содействия солюбилизации пропофола и одобренному для введения млекопитающему, включая минеральное масло, парафиновые масла, растительные масла, глицериды, жирные кислоты, сложные эфиры жирных кислот, жидкие углеводороды и их спирты и другие.

В соответствии с некоторыми вариантами осуществления растворитель может быть выбран из среднецепочечных триглицеридов (МСТ), оливкового масла, соевого масла, масла канолы, хлопкового масла, пальмолеина, подсолнечного масла, кукурузного масла, изопропилмиристата, олеиллактата, кококаприлокапрата, гексиллаурата, олеиламина, олеиновой кислоты, олеилового спирта, линолевой кислоты, линолеилового спирта, этилолеата, гексана, гептанов, нонана, декана, додекана, D-лимонена, масла нима, лавандового масла, масла перечной мяты, анисового масла, ментола, капсаицина и подобных эфирных масел и их смесей.

В соответствии с другими вариантами осуществления растворитель представляет собой по меньшей мере один среднецепочечный триглицерид (МСТ).

В некоторых вариантах осуществления микроэмульсия содержит пропофол, солютол HS 15, МСТ, по меньшей мере одно дополнительное поверхностно-активное вещество, по меньшей мере один сорастворитель и водный разбавитель.

Микроэмульсии пропофола по настоящему изобретению также содержат по меньшей мере одно дополнительное поверхностно-активное вещество. Под выражением дополнительное поверхностно-активное вещество следует понимать любое средство, отличное от имеющегося поверхностно-активного вещества, которое способно (вместе с поверхностно-активным веществом) снижать межфазное натяжение между масляной фазой и водной фазой почти до нуля (или до нуля), давая возможность образовать гомогенную масляную смесь. В соответствии с некоторыми вариантами осуществления, дополнительное поверхностно-активное вещество выбрано из полиолов, диглицеридов, полиоксиэтиленов, лецитинов, фосфолипидов, таких как DOPC, Epicoron 200, РОРС и других.

В некоторых вариантах осуществления дополнительное поверхностно-активное вещество может представлять собой по меньшей мере один "полиол", т.е. спирт, содержащий по меньшей мере 2 гидроксильные группы. В таких вариантах осуществления по меньшей мере один полиол может быть выбран из этиленгликоля, глицерина, полиэтиленгликоля, полипропиленгликоля, сорбита, маннита, лактита и ксилита.

В других вариантах осуществления полиол выбран из глицерина, полипропиленгликоля, полиэтиленгликоля и их смесей.

Подходящие диглицериды, которые можно использовать в соответствии с настоящим изобретением, включают сложные диэфиры глицерина с короткой, или средней, или длинной, или насыщенной, или моно- или полиненасыщенной цепями жирной кислоты, диненасьпценные С6-20жирные кислоты, полиоксиэтилены, этоксилированный (20ЕО) сорбитанмонолаурат (Т20), этоксилированный (20ЕО) сорбитанмоностеарат/пальмитат (Т60), этоксилированный (20ЕО) сорбитанмоноолеат/линолеат (Т80), этоксилированный (20ЕО) сорбитантриолеат (Т85), этоксилированное (от 20ЕО до 40ЕО) касторовое масло; гидрогенизованное этоксилированное (20-40ЕО) касторовое масло, этоксилированный (5-40ЕО) моноглицерид стеарата/пальмитата.

Иллюстративными полиоксиэтиленовыми поверхностно-активными веществами являются полиоксиэтиленсорбитанмонолаурат, полиоксиэтиленсорбитанмонопальмитат, полиоксиэтиленсорбитанмоноолеат и полиоксиэтиленовые сложные эфиры насыщенного и ненасыщенного касторовых масел, этоксилированные сложные эфиры моноглицерина, этоксилированные жирные кислоты и этоксилированные жирные кислоты с короткой, средней и длинной цепями жирных кислот и другие.

Также можно использовать фосфолипиды, такие как соевый лецитин, лецитин рапса, лецитины кукурузы или подсолнечника, яичный лецитин, диолеилфосфатидилхолин, олеилпальмитоилфосфатидилхолин и соответствующие серины, этаноламины, глицерин и другие.

Сорастворители, используемые в микроэмульсиях по настоящему изобретению, представляют собой средства, которые способствуют солюбилизации пропофола в масляной фазе. В соответствии с некоторыми вариантами осуществления сорастворитель выбран из этанола, пропанола, пропиленгликоля и глицерина.

В некоторых вариантах осуществления дополнительное поверхностно-активное вещество и сорастворитель могут быть одинаковыми, т.е. состоять из одного компонента, имеющего обе функциональные возможности. В других вариантах осуществления сорастворитель и дополнительное поверхностно-активное вещество представляют собой различные химические компоненты.

Уникальная комбинация пропофола, поверхностно-активного вещества и остальных компонентов микроэмульсий обеспечивает превосходную физическую, химическую и термическую стабильность микроэмульсий пропофола, а также превосходный контроль размера масляных капель микроэмульсий. Кроме того, пропофол и поверхностно-активное вещество связаны друг с другом относительно сильными водородными связями или другими физическими взаимодействиями, что сводит к минимуму свободный (несвязанный) пропофол в микроэмульсии, уменьшая тем самым нежелательные побочные эффекты (такие как боль) во время введения. Водородные связи также обеспечивают медленное высвобождение и/или контролируемое высвобождение пропофола из микроэмульсии в кровоток после введения.

В некоторых вариантах осуществления микроэмульсия пропофола содержит по меньшей мере 2 дополнительных поверхностно-активных вещества. В таких вариантах осуществления дополнительные поверхностно-активные вещества могут представлять собой по меньшей мере 2 полиола. Неограничивающий пример такой микроэмульсии включает как пропиленгликоль (PG), так и полиэтиленгликоль (PEG). Дополнительные поверхностно-активные вещества, такие как PG, используют для достижения нулевого межфазного натяжения вдоль всей линии разбавления, обеспечивая тем самым непрерывное и постепенное разбавление микроэмульсии пропофола разбавителем, а также способствуя поддержанию целостности наноструктур. Дополнительные поверхностно-активные вещества, такие как PEG или глицерин, обеспечивают лучшее связывание пропофола в масляной фазе в набухших мицеллах, образованных во время разбавления, дополнительно сохраняя тем самым пропофол в мицеллах перед введением в кровоток.

Таким образом, в некоторых вариантах осуществления микроэмульсия пропофола содержит пропофол, солютол HS 15, МСТ, полиэтил енгликоль, пропиленгликоль, сорастворитель и водный разбавитель.

В других вариантах осуществления микроэмульсия пропофола содержит пропофол, полисорбат, МСТ, полиэтиленгликоль, пропиленгликоль, сорастворитель и водный разбавитель.

В некоторых других вариантах осуществления микроэмульсия пропофола не содержит полиэтиленгликоль.

В некоторых вариантах осуществления микроэмульсия пропофола содержит пропофол в концентрации приблизительно 0,1-2 вес. %. В некоторых других вариантах осуществления эта концентрация составляет приблизительно 0,1-1,75 вес. %, 0,1-1,5 вес. %, 0,1-1,25 вес. %, 0,1-1 вес. %, 0,1-0,75 вес. % или 0,1-0,5 вес. % от микроэмульсии. В дополнительных вариантах осуществления концентрация составляет приблизительно 0,5-2 вес. %, 0,75-2 вес. %, 1-2 вес. % или 1,25-2 вес. % от микроэмульсии.

В соответствии с некоторыми вариантами осуществления микроэмульсия пропофола содержит приблизительно 1 вес. % пропофола.

В соответствии с другими вариантами осуществления микроэмульсия пропофола по настоящему изобретению содержит приблизительно 75-98 вес. % разбавителя. А именно, разбавитель может составлять приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 97 или даже 98 вес. % от композиции на основе микроэмульсии.

Как отмечено выше, размер капель и стабильность пропофола в микроэмульсии преимущественно достигаются с использованием поверхностно-активного вещества и по меньшей мере одного растворителя. Пропофол полностью солюбилизирован в растворителе и взаимодействует с поверхностно-активным веществом посредством обратимых водородных связей. Эти взаимодействия сохраняют пропофол в масляной капле (т.е. в виде мицелл), предотвращая его высвобождение в непрерывную фазу и сводя к минимуму боль и раздражение в месте введения. В кровеносной системе пропофол быстро высвобождается из мицелл, обеспечивая быстрый анестезирующий эффект. Как может оценить специалист в данной области техники, соотношение между этими компонентами можно адаптировать в соответствии с природой растворителя и требуемой загрузкой пропофола, а также может быть выбран для обеспечения определенных характеристик микроэмульсии (таких как требуемый размер частиц и электрический заряд).

Таким образом, в некоторых вариантах осуществления весовое соотношение (т.е. соотношение вес/вес) между пропофолом и поверхностно-активным веществом составляет приблизительно от 1:5 до 1:12. В таких вариантах осуществления соотношение между пропофолом и поверхностно-активным веществом может составлять приблизительно от 1:5,5 до 1:12, от 1:6 до 1:12, от 1:6,5 до 1:12, от 1:7 до 1:12 или даже от 1:7,5 до 1:12. В других таких вариантах осуществления соотношение между пропофолом и поверхностно-активным веществом может составлять приблизительно от 1:5 до 1:11,5, от 1:5 до 1:11, от 1:5 до 1:10,5, от 1:5 до 1:10, от 1:5 до 1:9,5 или даже от 1:5 до 1:9. В некоторых других вариантах осуществления соотношение между пропофолом и поверхностно-активным веществом может составлять 1:5, 1:5,5, 1:6, 1:6,5, 1:7, 1:1,75,1:8,1:8,5, 1:9, 1:9,5,1:10,1:10,5, 1:11, 1:11,5 или 1:12.

В соответствии с некоторыми вариантами осуществления весовое соотношение между указанным по меньшей мере одним растворителем и поверхностно-активным веществом составляет приблизительно от 1:8 до 1:12. В таких вариантах осуществления соотношение между по меньшей мере одним растворителем и поверхностно-активным веществом может составлять приблизительно от 1:8,5 до 1:12, от 1:9 до 1:12 или даже от 1:9,5 до 1:12. В других таких вариантах осуществления соотношение между по меньшей мере одним растворителем и поверхностно-активным веществом может составлять приблизительно от 1:8 до 1:11,5, от 1:8 до 1:11 или даже от 1:8 до 1:10,5. В некоторых других вариантах осуществления соотношение между по меньшей мере одним растворителем и поверхностно-активным веществом может составлять 1:8, 1:8,5, 1:9, 1:9,5, 1:10, 1:10,5, 1:11, 1:11,5 или 1:12.

В некоторых вариантах осуществления весовое соотношение между указанным по меньшей мере одним растворителем и пропофолом составляет приблизительно от 1:2 до 1,25:1. В таких вариантах осуществления соотношение между по меньшей мере одним растворителем и пропофолом может составлять приблизительно от 1:1,8 до 1,25:1, от 1:1,6 до 1,25:1, от 1:1,4 до 1,25:1, от 1:1,2 до 1,25:1 или даже от 1:1 до 1,25:1.

В других таких вариантах осуществления соотношение между по меньшей мере одним растворителем и пропофолом может составлять приблизительно от 1:2 до 1,2:1, от 1:2 до 1,15:1, от 1:2 до 1,1:1 или даже от 1:2 до 1,05:1. В некоторых других вариантах осуществления соотношение между по меньшей мере одним растворителем и пропофолом может составлять 1:2, 1:1,66, 1:1,43, 1:1,2, 1:1, 1,1:1, 1,2:1,1 или 1,25:1.

Микроэмульсии пропофола по настоящему раскрытию могут дополнительно содержать добавки, такие как средства для регулирования уровня рН (например, NaOH).

В противоположность молочно-белым коммерческим эмульсиям, содержащим пропофол, микроэмульсии пропофола по настоящему изобретению в некоторых вариантах осуществления прозрачны из-за монодисперсного наномерного размера их капель и высокой стабильности и сохраняют свою прозрачность в течение длительного периода времени. Из-за небольшого размера капель, который составляет менее одной четвертой средней длины волны видимого света (0,560 мкм), микроэмульсии пропофола по настоящему изобретению кажутся для невооруженного глаза бесцветной и гомогенной жидкостью без какого-либо наблюдаемого помутнения или зон разделения фаз. В некоторых вариантах осуществления микроэмульсия пропофола характеризуется показателем мутности, составляющим приблизительно 20-70 NTU (нефелометрические единицы мутности). В других вариантах осуществления показатель мутности составляет 20-40 NTU. В отличие от коммерческих эмульсий на основе липидов, в которых невооруженным глазом нельзя обнаружить образование крупных масляных глобул из-за непрозрачности эмульсии, прозрачность микроэмульсии пропофола дает возможность легко обнаруживать изменения в ее стабильности (поскольку разделение фаз и/или слияние масляных капель вызовет выявляемое помутнение). Кроме того, рост бактерий также вызовет изменения прозрачности и мутности, обеспечивая тем самым возможность прямого обнаружения загрязнения.

В некоторых вариантах осуществления микроэмульсии пропофола по настоящему изобретению характеризуются показателем осмоляльности, составляющим приблизительно 250-450 мОсм/кг (миллиосмолей на килограмм), сходной с физиологической осмоляльностью кровотока, что ограничивает гемолитический эффект, боль и чувство жжения при введении. Осмоляльность представляет собой концентрацию частиц, растворенных в растворе, выражающую и показывающую осмотическое давление раствора. В некоторых вариантах осуществления осмолярность составляет приблизительно 250-350 мОсм/кг.

В то время как типичные эмульсии пропофола из уровня техники характеризуются абсолютным натяжением капля-воздух (т.е. поверхностным натяжением микрокапель в воздухе), составляющим приблизительно 36-45 мН/м (миллиньютон на метр), микроэмульсии пропофола по настоящему изобретению в некоторых вариантах осуществления характеризуются поверхностным натяжением, составляющим приблизительно 27-35 мН/м. Эти низкие значения межфазного и поверхностного натяжений позволяют лучше распределять микроэмульсию, загруженную пропофолом, в кровотоке и потенциально лучше переносить через гематоэнцефалический барьер, что необходимо для быстрого проявления действия пропофола.

Как дополнительное отличие от эмульсий из уровня техники, в некоторых вариантах осуществления микроэмульсии пропофола по настоящему изобретению демонстрируют поведение ньютоновской жидкости. А именно, давление или усилие сдвига, возникающие в микроэмульсии в потоке, линейно пропорциональны скорости потока. Это дает возможность легко предсказать свойства потока, давая возможность лучше контролировать поток микроэмульсии.

Как уже отмечалось выше, микроэмульсии пропофола по настоящему изобретению можно образовывать путем разбавления концентратов пропофола подходящим разбавителем. Таким образом, в другом аспекте настоящее изобретение предусматривает допускающий разбавление концентрат пропофола, содержащий 2,6-диизопропилфенол (пропофол), поверхностно-активное вещество, по меньшей мере один растворитель, по меньшей мере одно дополнительное поверхностно-активное вещество и по меньшей мере один сорастворитель, при этом концентрат практически не содержит воду.

В другом аспекте настоящее изобретение предусматривает допускающий разбавление концентрат пропофола, содержащий 2,6-диизопропилфенол (пропофол), 15-гидроксистеарат полиэтиленгликоля (солютол HS 15), по меньшей мере один растворитель, по меньшей мере одно дополнительное поверхностно-активное вещество и по меньшей мере один сорастворитель, при этом концентрат практически не содержит воду.

В другом аспекте настоящее изобретение предусматривает допускающий разбавление концентрат пропофола, содержащий 2,6-диизопропилфенол (пропофол), полисорбат, по меньшей мере один растворитель, по меньшей мере одно дополнительное поверхностно-активное вещество и по меньшей мере один сорастворитель, при этом концентрат практически не содержит воду.

Термин концентрат пропофола означает практически (иногда полностью) безводную структурированную систему липид/поверхностно-активное вещество на масляной основе, в которой хвосты поверхностно-активного вещества солюбилизируются пропофолом и растворителем, облегчая полное разбавление водной фазой разбавителя (являются допускающими разбавление) по желанию, с образованием микроэмульсий пропофола по настоящему изобретению. Другими словами, концентраты пропофола по настоящему изобретению предназначены для быстрого и полного разбавления в подходящем разбавителе, обычно в воде для инъекций или физиологическом растворе, образуя микроэмульсии пропофола (в виде самоорганизующейся наноструктурированной системы). Из-за комбинации поверхностно-активного вещества, растворителя, дополнительного поверхностно-активного вещества и сорастворителя система концентрата пропофола по настоящему изобретению способна солюбилизировать пропофол с высоким содержанием, например до 12 вес. %. После разбавления подходящим разбавителем, концентрат пропофола по настоящему изобретению спонтанно образует микроэмульсии, которые вначале являются сольватированными доменами (или кластерами) мезофаз поверхностно-активных веществ, которые при разбавлении (приблизительно 20-30 вес. %) образуют нанокапли типа "вода в масле"; при дальнейшем разбавлении превращаются в бинепрерывные мезофазы и в нанокапли типа "масло в воде" (O/W), в которых разбавитель образует непрерывную фазу, в то время как масляная фаза имеет форму дискретных наноразмерных капель (т.е. микроэмульсии по настоящему изобретению). Как отмечалось выше, микроэмульсии пропофола образуются из концентрата спонтанно, а именно без необходимости применения каких-либо процессов сдвига, кавитации или гомогенизации из-за баланса поверхностных энергий, полученного при выборе компонентов системы.

Чтобы преодолеть высокую степень загрязнения существующих в настоящее время коммерческих составов на основе пропофола, концентраты пропофола по настоящему изобретению являются практически безводными, т.е. не содержат воды. Когда в составе отсутствует вода, концентраты по настоящему изобретению не имеют среды, поддерживающей рост микроорганизмов (например, грибов или бактерий), обеспечивая возможность более длительного хранения без риска заражения (или с минимальным риском). Без ограничения какой-либо теорией, одной из причин, из-за которой почти не наблюдается бактериальное загрязнение для систем по настоящему изобретению, может быть отсутствие несвязанной воды. По сравнению с эмульсиями пропофола, которые содержат высокую концентрацию свободной воды и, таким образом, поддерживают рост микроорганизмов, микроэмульсии пропофола по настоящему изобретению (включая те, которые образуются из концентрата пропофола) не содержат большого количества свободной (т.е. несвязанной) воды, и таким образом ограничивают рост микроорганизмов.

В некоторых вариантах осуществления допускающие разбавление концентраты полностью лишены воды (т.е. являются безводными).

Допускающий разбавление концентрат пропофола по настоящему изобретению обычно содержит приблизительно 3-12 вес. % пропофола, т.е. 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12 вес. % пропофола. В некоторых вариантах осуществления концентрат пропофола содержит приблизительно 4-12 вес. %, 5-12 вес. %, 6-12 вес. %, 7-12 вес. %, 8-12 вес. % или 9-12% пропофола. В других вариантах осуществления концентрат пропофола содержит приблизительно 3-11 вес. %, 3-10 вес. %, 3-9 вес. %, 3-8 вес. % или 3-7 вес. % пропофола.

В соответствии с дополнительными вариантами осуществления концентрат пропофола содержит приблизительно 6-11 вес. % пропофола.

В некоторых вариантах осуществления весовое соотношение между пропофолом и поверхностно-активным веществом в концентрате пропофола составляет приблизительно от 1:5 до 1:12.

В других вариантах осуществления весовое соотношение между указанным по меньшей мере одним растворителем и поверхностно-активным веществом в концентрате пропофола составляет приблизительно от 1:8 до 1:12.

В некоторых других вариантах осуществления весовое соотношение между указанным по меньшей мере одним растворителем и пропофолом в концентрате пропофола составляет приблизительно от 1:2 до 1,25:1.

В некоторых вариантах осуществления растворитель в концентрате пропофола выбран из минерального масла, парафиновых масел, растительных масел, глицеридов, жирных кислот, сложных эфиров жирных кислот, жидких жирных спиртов и жидких жирных кислот, жидких углеводородов и их спиртов и восков. В таких вариантах осуществления растворитель выбран из среднецепочечных триглицеридов (МСТ), оливкового масла, соевого масла, масла канолы, хлопкового масла, пальмолеина, подсолнечного масла, кукурузного масла, изопропилмиристата, олеиллактата, кококаприлокапрата, гексиллаурата, олеиламина, олеиновой кислоты, олеилового спирта, линолевой кислоты, линолеилового спирта, этилолеата, гексана, гептанов, нонана, декана, додекана и их смесей.

В других вариантах осуществления дополнительное поверхностно-активное вещество в концентрате пропофола может быть выбрано из полиолов, диглицеридов, полиоксиэтиленов и лецитинов. В таких вариантах осуществления дополнительное поверхностно-активное вещество может представлять собой по меньшей мере один полиол, выбранный из этиленгликоля, глицерина, полиэтиленгликоля, полипропиленгликоля, сорбита, маннита, лактита и ксилита.

В некоторых других вариантах осуществления сорастворитель в концентрате пропофола выбран из этанола, пропанола или глицерина.

В другом аспекте предусмотрен допускающий разбавление концентрат пропофола, содержащий пропофол, солютол HS 15, МСТ, полиэтиленгликоль, пропиленгликоль и сорастворитель, при этом концентрат практически не содержит воду.

В другом аспекте предусмотрен допускающий разбавление концентрат пропофола, содержащий пропофол, полисорбат, МСТ, полиэтиленгликоль, пропиленгликоль и сорастворитель, при этом концентрат практически не содержит воду.

В некоторых вариантах осуществления сорастворитель представляет собой этанол.

Когда это применимо, если требуется парентеральное введение, то безводный концентрат пропофола по настоящему изобретению образует основу микроэмульсий пропофола.

Дополнительный аспект настоящего изобретения предусматривает фармацевтическую композицию, пригодную для парентерального введения, содержащую допускающий разбавление концентрат по настоящему изобретению, описанный в данном документе, и подходящий фармацевтически приемлемый водный разбавитель.

Микроэмульсионный состав, подходящий для парентерального (например, внутривенного) введения, может дополнительно содержать водные и неводные изотонические стерильные растворы для инъекций, которые могут содержать антиоксиданты, буферы, бактериостатические средства и растворенные вещества, которые делают состав изотоническим с кровью предполагаемого реципиента, а также водные и неводные стерильные суспензии, которые включают суспендирующие средства, солюбилизаторы, загустители, стабилизаторы, консерванты и буферы.

В некоторых вариантах осуществления микроэмульсионный состав на основе пропофола (и/или допускающего разбавление концентрата пропофола) может содержать антиоксиданты, как например, отобранные соединения, которые блокируют цепную реакцию путем взаимодействия со свободными радикалами (такие как токоферол или его производные, т.е. токоферол ацетат), восстановители или антиоксидант, которые способны снижать окислительно-восстановительный потенциал пропофола и продлить стабильность лекарственных средств (например, аскорбиновая кислота или аскорбилпальмитат), синергисты антиоксидантов, которые повышают антиоксидантную активность, и другие.

В других вариантах осуществления микроэмульсионные составы на основе пропофола могут содержать вспомогательные вещества, способные дополнительно ингибировать рост бактерий и грибов, такие как таковые, выбранные из EDTA (этилендиаминтетраацетат натрия), метабисульфита натрия, трометамина, пентетата, бензилового спирта, бензетония хлорида и бензоата натрия и других противомикробных средств, известных в данной области техники.

Другим аспектом настоящего изобретения является применение допускающего разбавление концентрата пропофола для получения композиции (микроэмульсии) для парентерального введения пропофола.

В другом аспекте настоящее изобретение дополнительно предусматривает способ получения композиции, пригодной для парентерального введения пропофола, включающий разбавление концентрата пропофола по настоящему изобретению, описываемого в данном документе, в заранее заданном количестве подходящего разбавителя, такого как вода, физиологический раствор, раствор декстрозы или буфер, характеризующийся рН от 3 до 9. В некоторых вариантах осуществления заранее заданное количество разбавителя составляет приблизительно 75-98 вес. % от микроэмульсии пропофола.

В другом аспекте настоящее изобретение предусматривает набор, содержащий средство для хранения допускающего разбавление концентрата пропофола по настоящему изобретению и по меньшей мере еще одно средство для включения разбавителей, а также инструкции по применению.

Термин "средство для хранения" относится к отсеку, или контейнеру, или обособленной части сосуда, отделенной от других для хранения или содержания различных компонентов набора. В контексте настоящего изобретения данный термин также относится к отдельным контейнерам или сосудам, размещенным в одном корпусе.

Каждый из контейнеров может содержать одну или несколько доз. Контейнеры могут быть в любой форме, известной в данной области техники, такой как шприцы, флакон, ампулы, складные пакеты, бутылки и т.д., обеспечивая немедленное применение или получение микроэмульсии на месте путем добавления разбавителя, например воды для инъекций, непосредственно перед применением.

Поскольку известно, что пропофол относительно легко окисляется, то получение концентратов пропофола, микроэмульсий пропофола или заполнение контейнеров можно в некоторых вариантах осуществления осуществлять в инертной среде (например, аргоне, азоте или других инертных газах).

В некоторых вариантах осуществления набор содержит инструкции по применению и/или по меньшей мере один измерительный инструмент для измерения веса, объема или концентрации каждого компонента.

В соответствии с другим аспектом настоящее изобретение предусматривает способ парентерального введения пропофола субъекту, нуждающемуся в этом, при этом способ включает разбавление допускающего разбавление концентрата пропофола по настоящему изобретению, описываемого в данном документе, до заранее заданного эффективного количества в подходящем разбавителе, получение тем самым композиции, пригодной для парентерального введения (т.е. микроэмульсии пропофола), и введение указанной композиции указанному субъекту внутривенно.

Как известно, термин "эффективное количество" для целей согласно данному документу можно определить такими соображениями, которые известны в данной области техники. Эффективное количество обычно определяется в надлежащим образом разработанных клинических испытаниях (исследования диапазона доз), и специалист в данной области техники будет знать, как правильно проводить такие испытания, чтобы определить эффективное количество. Как общеизвестно, эффективное количество зависит от множества факторов, включая профиль распределения в организме, различные фармакологические параметры, такие как период полувыведения в организме, от нежелательных побочных эффектов, если таковые имеются, от таких факторов, как возраст и пол, и других.

В некоторых вариантах осуществления подходящим разбавителем является вода, вода для инъекций, физиологический раствор или раствор декстрозы, и указанное заранее заданное эффективное количество составляет 0,1-2 вес. % активного соединения в композиции.

Термин "субъект" относится к млекопитающему, человеку или не относящемуся к человеку.

В другом аспекте настоящее изобретение предусматривает способ индуцирования анестезирующего эффекта у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение субъекту микроэмульсии пропофола, как описано в данном документе.

Термин анестезирующий эффект относится к любой форме седации субъекта путем торможения активности центральной нервной системы и/или вызывая локальную блокаду нервных импульсов между органом и центральной нервной системой. Этот термин служит для включения общей анестезии, регионарной анестезии, местной анестезии, периферической блокады, нейроаксиальной блокады (такой как эпидуральная или спинальная анестезия) и седации. Анестезирующий эффект можно получить путем введения микроэмульсии, описанной в данном документе, в любой схеме приема, подходящей для получения требуемого анестезирующего эффекта. В зависимости от требуемого эффекта, микроэмульсию пропофола можно вводить в виде болюсных доз, местной инъекции, непрерывной инфузии и т.д.

Как отмечено выше, уникальное связывание между пропофолом и поверхностно-активными веществами, образующими масляную фазу микроэмульсии, вызывает локализацию пропофола в масляной капле и контролируемое высвобождение только после дополнительного разбавления в кровотоке после введения. Поскольку пропофол известен как раздражающее средство, которое часто вызывает боль и/или чувство жжения в месте введения, такое связывание сводит к минимуму присутствие свободного пропофола во время введения, значительно уменьшая тем самым его раздражающий эффект.

Таким образом, в другом аспекте настоящее раскрытие предусматривает способ предотвращения раздражения или уменьшения боли при введении пропофола в месте введения, при этом способ включает получение микроэмульсии пропофола по настоящему раскрытию и введение микроэмульсии пропофола пациенту, нуждающемуся в этом, в место введения, причем пропофол во время введения содержится в масляных каплях микроэмульсии. Термин раздражение предназначен для обозначения местного воспаления ткани, окружающей место введения (т.е. непосредственного раздражения), а также аллергического ответа из-за взаимодействия иммунной системы с пропофолом (а именно, косвенного раздражения).

Как дополнительно продемонстрировано ниже, микроэмульсии пропофола по настоящему раскрытию продемонстрировали значительно сниженный ответ на боль в модели "лизание лапы" по сравнению с коммерческими эмульсионными составами на основе пропофола, в которых не происходит взаимодействий пропофол-поверхностно-активное вещество.

Фразы "в диапазоне/диапазон между" первым указанным числом и вторым указанным числом и "в диапазоне/диапазон от" первого указанного числа "до" второго указанного числа используются в данном документе взаимозаменяемо и предназначены для включения первого и второго указанных чисел и всех дробных и целых чисел между ними. Следует отметить, что если различные варианты осуществления описываются с использованием заданного диапазона, то диапазон предоставляется как таковой только для удобства и краткости и не должен рассматриваться как негибкое ограничение объема настоящего изобретения. Соответственно, описание диапазона следует рассматривать как конкретно раскрывающее все возможные поддиапазоны, а также отдельные числовые значения в пределах этого диапазона.

Используемый в данном документе термин "приблизительно" предназначен для охвата отклонения ±10% от специально упомянутого значения параметра, такого как температура, давление, концентрация и т.д.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

В целях лучшего понимания объекта изобретения, раскрытого в данном документе, и для иллюстрации того, как он может быть осуществлен на практике, далее будут описаны варианты осуществления, при этом только в качестве неограничивающего примера, со ссылкой на сопутствующие графические материалы, на которых представлено следующее.

На фиг. 1А-1С показана микроэмульсия пропофола по настоящему изобретению (фиг. 1А: состав В9А; фиг. 1В: состав В6А), по сравнению с липидной эмульсией пропофола, полученной путем смешения со значительным сдвигом (или кавитацией) в соответствии с примером 1 из ссылки [1] (фиг. 1С).

На фиг. 2А показано распределение капель по размерам, измеренное с помощью анализа DLS (динамическое светорассеяние), для микроэмульсии, полученной путем разбавления 6 вес. % концентрата пропофола водой для инъекций; при этом концентрация воды в микроэмульсии находится в диапазоне 83,33-95 вес. %.

На фиг. 2В показано распределение капель по размерам, измеренное с помощью DLS, для микроэмульсии, полученной путем разбавления 9 вес. % концентрата пропофола водой для инъекций; при этом концентрация воды в микроэмульсии находится в диапазоне 88,88-95 вес. %.

На фиг. 2С показано распределение капель по размерам, измеренное с помощью DLS, для CLE (коммерческая липидная эмульсия, Propofol-Lipuro®).

На фиг. 3А-3В показаны изменения значения рН в ускоренных исследованиях стабильности разбавленных составов на основе В6 (фиг. 3А) и В9 (фиг. 3В).

На фиг. 4А-4В показаны изменения размера капель в ускоренных исследованиях стабильности разбавленных составов на основе В6 (фиг. 4А) и В9 (фиг. 4В).

На фиг. 5A-5D показаны микроэмульсии, загруженные 1 вес. % пропофола (фиг. 5А), 2,4-изомера пропофола (фиг. 5В), ВНА (фиг. 5С) и TBHQ (фиг. 5D).

На фиг. 6А-6В показаны результаты испытания на гемолиз для разбавленных микроэмульсий пропофола В6А (фиг. 6А) и В9А (фиг. 6В), помещенных на чашки с кровяным агаром, по сравнению с положительным контролем, вызывающим гемолиз Triton X100, и 0,9% солевым раствором, отрицательным контролем, который не вызывает гемолиза.

На фиг. 7А показана средняя концентрация пропофола в плазме в исследовании 1 после однократного внутривенного введения болюса с составами в концентрации 10 мг/мл пропофола трем подвергавшимся воздействию самцам собак породы бигль коммерческой липидной эмульсии-прототипа (Propofol-®Lipuro), микроэмульсий на основе В6А и В9А в дозе, составляющей 6 мг/кг.

На фиг. 7В показана средняя концентрация пропофола в плазме в исследовании 2 после однократного внутривенного введения болюса трех составов с концентрацией 10 мг/мл шести не подвергавшимся воздействию самцам собак породы бигль: коммерческой липидной эмульсии-прототипа (Propofol-®Lipuro), состава на основе В6А и В9А в дозе, составляющей 6 мг/кг.

Подробное описание вариантов осуществления

Пример I. Микроэмульсии пропофола по сравнению с коммерческими эмульсиями Коммерческую липидную эмульсию (CLE) Propofol-Lipuro® 1% с 1 вес. % пропофола использовали в качестве эталона для сравнения с микроэмульсиями пропофола по настоящему изобретению.

Получал два допускающих разбавление концентрата пропофола, содержащих 6 вес. % и 9 вес. % пропофола (соответственно В6 и В9) согласно следующему протоколу получения.

Концентрат В6

Солютол HS-15 (также известный как коллифор HS-15) нагревали до приблизительно 40-60°С. После нагревания солютол вводили в сосуд вместе с пропиленгликолем (PG), МСТ, полиэтиленгликолем 400 (PEG 400) и этанолом и перемешивали в течение 10 минут при 50-400 об/мин. Добавляли яичный лецитин Е80 (фосфолипиды яйца с 80% фосфатидилхолином) и перемешивали в течение 60 минут при 40-50°С и 50-400 об/мин. Затем смесь оставляли для охлаждения до комнатной температуры. После охлаждения смеси добавляли пропофол и перемешивали в течение 5-30 минут при 50-400 об/мин, получая таким образом концентрат, содержащий 6 вес. % пропофола.

Концентрат В9

Солютол HS-15 (также известный как коллифор HS-15) нагревали до приблизительно 40-60°С. После нагревания солютол вводили в сосуд вместе с пропиленгликолем, МСТ, PEG 400 и этанолом и перемешивали в течение 10 минут при 50-400 об/мин. Затем добавляли пропофол и перемешивали в течение 5-30 минут при 50-400 об/мин, получая таким образом концентрат, содержащий 9 вес. % пропофола.

Композиции В10 и В11, содержащие соответственно 10 и 11 вес. % пропофола, получали аналогичным образом. Композиции концентратов подробно описаны в таблице 1.

Чтобы получить микроэмульсии пропофола, концентраты разбавляли соответствующим количеством воды для инъекций в течение 20-60 минут при 200-400 об/мин с получением микроэмульсий с концентрацией пропофола, составляющей 1 вес. %. Следует отметить, что получение больших партий концентрата и/или микроэмульсии может осуществляться в инертной атмосфере (такой как поток азота), чтобы предотвратить окисление пропофола. Композиции микроэмульсий подробно описаны в таблице 2.

* Все количественные величины приведены в вес. %.

* Все количественные величины приведены в вес. %.

Физические свойства микроэмульсий пропофола, полученных из концентратов В6, В9, В10 и В11,по сравнению с CLE представлены в таблицах 3-1 и 3-2.

a. Микроскопический анализ: Nikon Eclipse 80i

b. Оценка мутности: измеритель мутности и содержания свободного/общего хлора HI 83414 Turbidity and free/Total Chlorine Meter от HANNA instruments (с использованием образцов для калибровочной кривой и WFI с 0,13 NTU в качестве эталона)

c. Измерения значений рН: SevenEasy Metller Toledo

d. Оценка размера капель: определитель наноразмеров Zeta sizer, nano sizer (nano-s), MALVERN instruments

e. Микроосмометр Fiske® (модель 210)

Как ясно видно в таблицах 3-1 и 3-2, микроэмульсии В6А, В9А, В10А и В11А характеризуются существенно иными свойствами, чем свойства коммерческих эмульсий (CLE).

Коммерческие эмульсии обычно представляют собой дисперсию двух несмешивающихся жидкостей, образованную в присутствии эмульгаторов/поверхностно-активных веществ, которые уменьшают межфазное натяжение между двумя фазами и покрывают диспергированные капли для замедления агрегации, флокуляции, коалесценции и разделения фаз. Поскольку эмульгаторы не уменьшают межфазное натяжение до нуля, а покрытие не является полным, то для эмульсий требуется применение относительно высоких усилий сдвига многоступенчатого гомогенизатора для уменьшения размера капель при получении эмульсии. Получающиеся неоднородные капли проявляют сильную склонность коалесцировать и/или приводить к разделению фаз, энергетически стабилизируя тем самым систему. Таким образом, коммерческие эмульсии пропофола демонстрируют относительно неоднородный и крупный размер капель, которые нестабильны в течение продолжительных периодов времени (т.е. размер капель увеличивается из-за коалесценции или может даже приводить к разделению фаз). Кроме того, размер капель CLE далеко не гомогенный (как видно из относительно высокого индекса полидисперсности), что также приводит к появлению молочного, белого непрозрачного внешнего вида.

В отличие от CLE, из-за нулевого межфазного натяжения микроэмульсии по настоящему изобретению, такие как микроэмульсии на основе В6А и В9А, спонтанно образуются в виде энергетически сбалансированных систем, которые характеризуются небольшим и однородным размером капель, обеспечивая прозрачные системы.

Аналогичные микроэмульсионные составы, в которых глицерин использовали вместо полиэтиленгликоля в качестве дополнительного поверхностно-активного вещества, приведены в таблице 4-1.

* Все количественные величины приведены в вес. %

** фосфатидилхолин

Дополнительные подходящие микроэмульсии были получены при замене солютола HS15 на Tween 80, как показано в таблице 4-2.

* Все количественные величины приведены в вес. %

** фосфатидилхолин

Пример II. Микроэмульсии пропофола по сравнению с эмульсиями, смешанными со сдвигом

Из-за плохой растворимости пропофола большинство исследуемых в настоящее время эмульсий пропофола получают с использованием значительных усилий сдвига. Важно отметить, что хотя такие эмульсии часто неуместно называются в литературе "микроэмульсиями" или "наноэмульсиями" (см., например [1]), такие эмульсии значительно отличаются от эмульсий по настоящему изобретению.

Для того, чтобы продемонстрировать различия между эмульсиями, смешанными со сдвигом, и микроэмульсиями по настоящему изобретению, осуществляли следующий сравнительный пример.

Эмульсия, смешанная со сдвигом

Пример 1 в [1] выбирали в качестве типичного примера эмульсии, смешанной со сдвигом.

Незагруженная эмульсия, смешанная со сдвигом (без пропофола)

В стеклянный флакон емкостью 20 мл точно отвешивали 785 мг Labrafac™ СС (каприловьш/каприновьш триглицерид) и 527 мг Macrogol 15 гидроксистеарата (также известного как солютол HS15). Смесь нагревали до 40°С в течение 15 минут с перемешиванием при 630 об/мин и затем охлаждали до комнатной температуры в течение 5 минут.

Дисперсионную фазу (0,9% вес/об. NaCl в воде, т.е. физиологический раствор) добавляли к смеси при перемешивании при 630 об/мин до получения конечного объема 15 мл. Состав нагревали и перемешивали при 40°С в течение дополнительных 10 минут при 840 об/мин. На этой стадии, до применения усилий сдвига, определяли диаметр капель и PDI предварительной смеси с использованием метода динамического светорассеяния (Malvern Instruments, MAL500572, модель ZEN1600).

Затем предварительную смесь гомогенизировали с помощью гомогенизатора высокого давления (IKA Labortechnik, тип Т25В) при 10000 фунтов/кв. дюйм в течение 105 секунд. После гомогенизации снова измеряли средний диаметр капель и PDI.

Загруженная пропофолом эмульсия, смешанная со сдвигом (1 вес. %)

В стеклянный флакон емкостью 20 мл точно отвешивали 785 мг Labrafac™ СС и 527 мг Macrogol 15 гидроксистеарата. Смесь нагревали до 40°С в течение 15 минут с перемешиванием при 630 об/мин и затем охлаждали до комнатной температуры в течение 5 минут.

К смеси добавляли 150 мг пропофола и перемешивали при 630 об/мин в течение 5 минут.

Дисперсионную фазу (0,9% вес/об. NaCl в воде, т.е. физиологический раствор) добавляли к смеси при перемешивании при 630 об/мин до получения конечного объема 15 мл. Состав нагревали и перемешивали при 40°С в течение дополнительных 10 минут при 840 об/мин. На этой стадии, до применения усилий сдвига, определяли диаметр капель и PDI смеси с использованием метода динамического светорассеяния (Malvern Instruments, MAL500572, модель ZEN1600).

Затем смесь гомогенизировали с помощью гомогенизатора высокого давления (IKA Labortechnik, тип Т25 В) при 10000 фунтов/кв. дюйм в течение 105 секунд. После гомогенизации снова измеряли средний диаметр капель и PDI.

Незагруженные и загруженные микроэмульсии пропофола

Микроэмульсии пропофола на основе В6А и В9А (полученные из концентратов В6 и В9) получали в соответствии с примером I выше. Также получали аналогичные незагруженные микроэмульсии (т.е. с сохранением того же соотношения компонентов, но без добавления пропофола).

Средний размер капель и значения PDI для всех образцов приведены в таблице 5.

Как можно четко видеть, в отличие от небольшого и однородного размера капель, полученного спонтанно (без гомогенизации) для микроэмульсий пропофола на основе В6А и В9А, эмульсии, смешанные со сдвигом, перед гомогенизацией под высоким давлением демонстрировали значительно больший размер капель (приблизительно на порядок больший). Более того, после сдвига эмульсий с использованием гомогенизации под высоким давлением размер капель эмульсий существенно не уменьшался, и для загруженной пропофолом эмульсии наблюдалось распределение размеров капель на три популяции. А именно, эмульсия 1 вес. % пропофола, смешанная со сдвигом, была далеко не монодисперсной.

Это также подтверждалось внешним видом образцов. Как можно четко увидеть на фиг. 1С, относительно крупный и неоднородный размер капель эмульсии, смешанной со сдвигом, являлся молочным по внешнему виду по сравнению с бесцветной и прозрачной микроэмульсией (фиг. 1А-1В).

Пример III. Разбавляемостъ микроэмульсий пропофола

Одним из преимуществ концентратов пропофола по настоящему изобретению (таких как В9) является возможность разбавлять их при различных соотношениях разбавления без существенного влияния на размер их капель.

Гидродинамический радиус капель микроэмульсии измеряли при комнатной температуре с помощью метода динамического светорассеяния (DLS) с использованием Nano-ZS Zetasizer (Malvern, UK), с водой в качестве диспергирующего средства. Образцы исследовали в одноразовых кюветах из полистирола. Для каждого набора испытаний исходной точкой был 1 вес. % микроэмульсии пропофола, которую дополнительно разбавляли с получением образцов (как указано в таблице ниже). Средний размер капель и значения PDI представлены в таблице 6. Кривые распределения размеров представлены на фиг. 2А-2В по сравнению с кривыми для коммерческих эмульсий пропофола (пропофол Lipuro®) на фиг. 2С.

* 1 вес. % микроэмульсии пропофола

Как ясно видно из таблицы 6, размеры капель пустой системы меньше, чем размеры, измеренные для загруженных систем, что указывает на то, что пропофол находится внутри ядра/поверхности раздела капли, увеличивая ее размер (см. также анализ SD-NMR в примере V ниже).

По сравнению с коммерческими эмульсиями пропофола можно дополнительно наблюдать, что микроэмульсии пропофола по настоящему изобретению допускают полное разбавление без значительного изменения размера капель.

Обратите внимание, что сравнительные результаты для разбавления CLE не могут быть получены, так как разбавление CLE вызывает разделение фаз. В типичном эксперименте при колебаниях температуры от 20 до 40°С показано увеличение размера капель более чем на 20%, а при дополнительном хранении при 40°С показано начало явления коалесценции, что приводило к разделению фаз через 60 дней, как показано в таблице 7.

Это свидетельствует о том, что микроэмульсии пропофола дают возможность лучше контролировать дозирование пропофола, предоставляя персоналу возможность дополнительно разбавлять микроэмульсию до требуемой более низкой концентрации пропофола без изменения физической структуры микроэмульсии и с сохранением ее полезных свойств. Это имеет значение, так как после введения в кровоток микроэмульсии по настоящему изобретению не будут коалесцировать и/или образовывать агрегаты (в отличие от коммерческих эмульсий).

Пример IV. Долгосрочная физическая стабильность

Стабильность микроэмульсий пропофола на основе В6А и В9А, загруженных 10 мг/мл пропофола (1 вес. %), оценивали в течение 12 месяцев при трех различных условиях температуры и относительной влажности (% RH) (5% окружающая среда, 25°С/60% RH и 40°С/25% RH).

Чистота, значение рН и размер капель измеряли в каждый момент времени в трех повторных образцах и сравнивали с исходными измерениями (исходное значение в момент времени 0), взятыми сразу после приготовления составов. Результаты представлены в таблицах 7-9 и на фиг. 3А-4В.

Как можно наблюдать, микроэмульсии сохраняют свою чистоту, значение рН, размер капель и значения PDI в течение продолжительных периодов времени, т.е. по меньшей мере до 12 месяцев при хранении в различных условиях хранения. Таким образом, разбавленные составы по настоящему изобретению могут храниться в течение продолжительных периодов времени без отрицательного воздействия на их свойства.

Из литературы известно, что стабильность эмульсии обусловлена несколькими кинетическими силами: образованием механического барьера между масляной и водной фазами и электростатическими силами отталкивания между каплями. Как правило, эти силы разрушаются, что приводит к деградации эмульсии и ее разделению на масляную и водную фазы. Кроме того, во время тепловой стерилизации эмульсии небольшое количество свободных жирных кислот и гидролиз соевого масла приводят к снижению рН, что в свою очередь ведет к дестабилизации эмульсии. Этот процесс продолжается даже во время хранения, поскольку эмульсии не забуферены. Поэтому коммерческие эмульсии пропофола имеют относительно небольшой срок годности, до двух лет, с особым условием хранения (см. таблицу 7).

Для определения долговременной стабильности составов проводили быстрое измерение с использованием аналитического центрифугирования LUMiFuge™. Анализ LUMiFuge дает возможность прогнозировать срок годности состава в его первоначальной концентрации даже в случаях медленных процессов дестабилизации, таких как седиментация, флокуляция, коалесценция и фракционирование. Во время измерений LUMiFuge параллельный свет освещал всю ячейку с образцом в поле центробежных сил; пропускаемый свет обнаруживался датчиками, расположенными линейно вдоль всей длины ячейки с образцом. С течением временем из-за изменений пропускания света обнаруживались локальные изменения частиц или капель. Результаты представлены на графике, изображающем процент пропускаемого света (% пропускания) в зависимости от локального положения (мм), показывающем соответствующий профиль пропускания с течением времени. Коммерческую эмульсию пропофола, Propofol-Lipuro®, сравнивали с измерениями, проведенными на составах на основе В6 и В9 в течение 24 часов.

При исходной детекции эмульсия на основе липидов Propofol-Lipuro® (имеющая молочно-белый внешний вид) рассеивала и поглощала свет, что приводило к низкому пропусканию (около 0%). Однако со временем стабильность эмульсии нарушилась, что привело к разделению фаз. Эти результаты демонстрируют причину для обеспокоенности по поводу нестабильности эмульсии Propofol-Lipuro®, которая может быть вредной и даже смертельной для пациентов, проходящих анестезирующие процедуры с введением эмульсии на основе липидов.

В то же время в микроэмульсиях по настоящему изобретению (с бесцветным и прозрачным внешним видом) свет пропускается (100%) по всей измеренной длине ячейки. Пропускаемый свет, отражающий прозрачность образца, был получен даже через 24 часа действия центробежных сил при 3000 об/мин, испытываемых во время анализа. Зарегистрированное пропускание LUMiFuge для микроэмульсии было аналогичным измеренному для воды. Эти результаты поддерживают ожидаемый эффект в отношении свойств стабильности для длительного срока годности испытанных микроэмульсий и профиля безопасности таких составов при использовании у пациента даже после длительного хранения. Таким образом, микроэмульсии по настоящему изобретению являются термодинамически стабильными и, как ожидается, будут иметь более широкие условия хранения с меньшими требованиями для надлежащего хранения. Возможность хранить микроэмульсию при более высокой и более низкой температурах, а также более длительный период времени, являются важными преимуществами в фармацевтической промышленности.

Пример V. Самодиффузионный ЯМР (SD-NMR)

Для определения структуры масляных капель (или мицелл) микроэмульсий проводили анализ самодиффузионного ЯМР. Метод SD-NMR способен локализовать каждый компонент в микроэмульсии посредством измерения его коэффициента диффузии. Быстрая диффузия (>100×10-11 m2c-1) характерна для небольших молекул, свободных в растворе, в то время как коэффициенты медленной диффузии (<0,1×10-11 m2c-1) свидетельствуют о низкой подвижности макромолекул или о связанных/агрегированных молекулах.

Измерения ЯМР проводили на спектрометре Bruker AVII 500, оснащенном градиентами GREAT 1/10, зондами 5 мм ВВО и 5 мм BBI, оба с z-градиентной катушкой и с максимальной силой градиента, составляющей соответственно 0,509 и 0,544 Тл м-1. Диффузию измеряли с использованием асимметричного эксперимента с биполярным продольным вихретоковым замедлением (bpLED) или/и асимметричного эксперимента с биполярным индуцированным эхо (известного как однократный), с компенсацией конвекции и фактором асимметрии, составляющим 20%, с увеличением максимального градиента от 2% до 95% от максимальной силы за 32 стадии. Спектр обрабатывали с помощью программного обеспечения Bruker TOPSPIN. Спектры ЯМР регистрировали при 25±0,2°С. Компоненты идентифицировали по их химическому сдвигу в 1 Н ЯМР.

В таблице 10-1 показаны коэффициенты диффузии (Dx, м2/с) различных компонентов для микроэмульсий на основе В6 и В9, незагруженных и загруженных 1 вес. % пропофола.

* Примечание: МСТ показывает аналогичные пропофолу коэффициенты диффузии, однако его низкое содержание препятствует получению точного расчета коэффициента диффузии.

Как видно из таблицы 10, коэффициент диффузии солютола HS15 аналогичен коэффициенту диффузии пропофола. Эти результаты показывают, что пропофол расположен внутри ядра и поверхности раздела набухшей мицеллы. Это свидетельствует о том, что весь пропофол в испытываемых микроэмульсиях содержится в масляной капле, и какой-либо свободный пропофол в непрерывной водной фазе отсутствует. Поскольку свободный пропофол, как известно, является причиной боли при инъекции, то тот факт, что пропофол находится внутри масляных капель, как ожидается, значительно уменьшит боль и раздражение во время и после введения.

Кроме того, следует также подчеркнуть, что когда пропофол вводят в систему, размер капель увеличивается по сравнению с пустой системой от 12,5 нм до 17 нм. Это указывает на то, что пропофол находится в ядре капли, увеличивая тем самым ее диаметр.

Аналогичные результаты были получены при замене солютола HS15 на Tween 60 или Tween 80, как показано в таблице 10-2.

Было также обнаружено, что при замене поверхностно-активного вещества на поверхностно-активное вещество (такое как сложный эфир сахарозы), которое не характеризуется коэффициентом диффузии, аналогичным коэффициенту диффузии пропофола в микроэмульсии, стабильная микроэмульсия не образовывалась. Поскольку пропофол перемещается несколько быстрее, то связывание между пропофолом и непригодным поверхностно-активным веществом является менее сильным, и следовательно больше пропофола находится в свободной форме в водной фазе. Это может указывать на то, что включение пропофола в другую композицию на основе микроэмульсии приводит к отклонению от равновесного состояния и образованию нестабильных микроэмульсий или таких, которые невозможно полностью разбавить.

Связь между поверхностно-активным веществом и пропофолом в отношении связывания в композиции на основе микроэмульсии оценивали при загрузке В9А 1 вес. % видов веществ, сходных по своей структуре с пропофолом. Результаты представлены в таблице 11.

Как видно из таблицы 11, коэффициенты диффузии пропофола и солютола почти идентичны, что свидетельствует о связывании между пропофолом и солютолом в композиции на основе микроэмульсии и о присутствии большей части (если не всего) пропофола в масляном ядре или солюбилизированным в хвостах поверхностно-активного вещества.

Хотя некоторые из испытанных исследуемых видов демонстрировали сходство коэффициента диффузии с коэффициентом диффузии солютола (например, 2,4-изомер, ВНА и ВНТ), как видно из фиг. 5A-5D, такие составы были далеки от достаточной солюбилизации в масляной фазе, в результате чего системы являлись не полностью прозрачными. В некоторых случаях подобные пропофолу структуры, такие как TBHQ, образовывали классическую молочную эмульсию.

Эти результаты свидетельствуют об уникальности композиции на основе микроэмульсионного состава в отношении расположения пропофола в каплях, в которых коэффициенты диффузии характеризуются одинаковым порядком.

Пример VI. Гемолиз in vitro

Помещали 10 мкл разбавленного состава на основе В9 или В6 (т.е. микроэмульсий В6А и В9А) на чашки с триптиказо-соевым агаром с 5% дефибринированной овечьей кровью (TSA 5% DSB) и инкубировали в течение до 24 часов.

В качестве контроля использовали два состава: 10 мкл Triton X100, который, как известно, вызывает гемолиз крови, наносили на треть чашки, и 10 мкл 0,9% NaCl, который не вызывает гемолиза, распределяли на оставшейся трети.

Оба испытываемых состава показали отсутствие гемолиза крови аналогично физиологическому раствору (0,9% NaCl) - см. фиг. 6А-6В.

Пример VII. Загрязнение вследствие роста микроорганизмов

Свежие культуры S. aureus, Е. coli, P. aeruginosa и С. albicans получали за день до анализа (соево-казеиновый агар для бактерий и агар Сабуро с декстрозой для С. albicans) из замороженных штаммов Р2 (после двух пассажей первоначальных культур АТСС). Отдельные колонии собирали и суспендировали в 0,9% стерильном солевом растворе при конечной плотности, составляющей 1,0×108 КОЕ/мл.

Микроэмульсии на основе В6А и В9А (1% пропофола) разделяли на пять частей (по 4 г каждая) в закрываемые пробирки для бактериологических испытаний в асептических условиях, чтобы предотвратить загрязнение образцов. Затем в каждую пробирку для испытаний добавляли аликвоты по 0,04 мл (т.е. 1% объема испытываемого изделия) бактериальных и грибковых суспензий и физиологического раствора (служившего отрицательным контролем для загрязнения первоначальных составов) с получением начальной плотности, составляющей ~1,0×106 КОЕ/мл. Полученные смеси тщательно встряхивали.

Аналогичные аликвоты получали для CLE.

В качестве положительного контроля к 4 мл стерильного физиологического раствора добавляли аликвоты бактериальных и грибковых суспензий объемом 0,04 мл. Все контрольные образцы подвергали тем же испытаниям, что и тестовые изделия.

Аликвоты по 0,5 мл отбирали из каждой пробирки (т.е. образец Т0 - практически во всех образцах отбирали в течение 30 мин. после смешивания, Т0,5 использовали для отображения этого). Для каждого образца три аликвоты по 0,1 мл смеси Т0,5 (без разбавления) распределяли на три подходящих чашки с твердым агаром. Оставшуюся смесь разбавляли в 100, 1000 и 10000 раз, и три аликвоты по 0,1 мл распределяли на три чашки с агаром. Для CLE дубликаты образцов по 0,1 мл распределяли на чашки без разбавления, и с разбавлением в 1000 и 10000 раз (см. таблицу 11-1). Полученные чашки с бактериями выдерживали при 37°С и влажности 85% в течение 24 часов, а чашку с грибком выдерживали при комнатной температуре в течение 48 часов. Затем подсчитывали значение КОЕ и переводили в значение КОЕ/мл исходных материалов.

Смеси выдерживали при 25°С (с бактериальными посевами) или комнатной температуре (с грибковым посевом) без встряхивания. После 24-часового роста (образцы Т24) из каждой пробирки для испытаний отбирали аликвоты по 0,5 мл. Три аликвоты по 0,1 мл (без разбавления) распределяли на три подходящих чашки с агаром. Неразбавленные и разбавленные в 100, 1000 и 10000 раз аликвоты также высевали в три подходящие чашки с агаром. Для CLE дубликаты образцов по 0,1 мл распределяли на чашки с разбавлением в 1000, 10000 и 100000 раз (таблица 12-1), и подсчитывали полученные значения КОЕ. Смеси опять инкубировали в течение дополнительных 24 часов при тех же условиях.

Подсчитывали колониеобразующие единицы, и для каждого разбавления рассчитывали значение КОЕ/мл. Рассчитывали среднее значение КОЕ/мл для всех разбавлений; скорость миграции микроорганизмов (MGR) рассчитывали путем деления логарифмического соотношения значения КОЕ/мл после 24-часовой инкубации и значения, измеренного при То, следующим образом:

MGR=Log[(Т24 КОЕ/мл)/(Т0 КОЕ/мл)].

Результаты приведены в таблицах 12-2 и 12-3.

Посев/объем * ~1,0X108 КОЕ/мл, 0,04 мл; ** 4 грамма; *** 4,0 мл; **** 0,04 мл

Схемы разбавлений:

(a) неразбавленный, разбавления 1/100, 1/1000 и 1/10000 (0,1 мл каждое, в трех повторах);

(b) неразбавленный, разбавления 1/1000 и 1/10000 и 1/100000 (0,1 мл каждое, в двух повторах);

(c) неразбавленный, разбавления 1/100, 1/1000 и 1/10000 (0,1 мл каждое, в двух повторах);

(d) неразбавленный(0,1 мл каждое, в двух повторах)

Бактериальный рост составов на основе В6А и В9А уменьшался или практически не менял темпов роста через 24 часа. Эти результаты показывают, что оба состава не поддерживают рост микроорганизмов. Расчетное значение MGR испытываемых бактериальных штаммов было отрицательным или ниже 0,05. В отличие от микроэмульсий, коммерческая эмульсия на основе липидов продемонстрировала увеличение роста всех испытываемых микроорганизмов со значением MGR, составляющим выше 0,5. Расчетное значение MGR было чрезвычайно высоким (1,19) для эмульсии, испытываемой на рост Е. coli. Результаты показывают, что эмульсия обеспечивает надлежащую и поддерживающую среду для роста бактерий и грибов, в то время как микроэмульсии этого не обеспечивают.

Пример VIII. Фармакологические испытания

Оценивали фармакокинетические параметры после однократной внутривенной болюсной (IV) дозы коммерческого Propofol-Lipuro® (называемого в данном документе прототипом), и пропофол со держащих разбавленных микроэмульсий на основе В6А и В9А, все взятые в концентрации 10 мг/мл, в дозе, составляющей 6 мг/кг, у самцов собак породы бигль. Испытываемое изделие контролировали в плазме до 8 часов.

Система испытаний и план исследования

Исследование 1: В исследование включали 3 подвергавшихся воздействию самцов собак породы бигль (8,06-9,07 кг, поставлены Marshall Bioresources, Пекин, Китай) с 3 самцами на группу. У каждого животного была татуировка с уникальным номером на ухе в качестве идентификации. Собаки в каждой группе получали одну внутривенную дозу состава с пропофолом при номинальной дозе, составляющей 6 мг/кг. Образцы крови собирали в соответствии с каждым моментом времени взятия образцов. План исследования представлен в Таблице 13-1.

Исследование 2: 18 не подвергавшихся воздействию самцов собак породы бигль (весом 7,08-11,16 кг, предоставлены Marshall Bioresources, Пекин, Китай) включали в 3 группы по 6 самцов на группу. У каждого животного была татуировка с уникальным номером на ухе в качестве идентификации. Собаки в каждой группе получали одну внутривенную дозу состава с пропофолом при номинальной дозе, составляющей 6 мг/кг. Образцы крови собирали в соответствии с каждым моментом времени взятия образцов. План исследования представлен в Таблице 13-1.

Получение и введение дозы

Исследование 1: составы на основе В6А и В9А и прототип получали в виде готовых к применению растворов (в их разбавленном состоянии, 10 мг/мл). Перед введением раствор перемешивали, слегка встряхивая флакон, открывали центральный диск и резиновую перегородку очищали спиртовой салфеткой. Затем необходимый объем извлекали с использованием стерильного шприца, проходящего через пробку перегородки. Перед IV инъекцией воздушные пузырьки удаляли.

Исследование 2: составы получали в виде концентрированных растворов (60 или 90 мг/мл, 6 или 9 вес. %) и перед введением разбавляли до требуемой концентрации (10 мг/мл). Процедуру получения дозы проводили следующим образом: воду для инъекций (WFI) добавляли с использованием стерильной пипетки. После добавления WFI колпачок закрывали и испытываемые образцы тщательно перемешивали, встряхивая флакон, пока не образовывался прозрачный, однородный и бесцветный состав. Затем состав оставляли в течение приблизительно 15 мин. при комнатной температуре с целью высвобождения большей части пузырьков и уменьшения образования пены. Требуемый объем извлекали с использованием стерильного шприца, избегая при этом пены или пузырьков. Каждая из шести собак получала требуемую объемную дозу из отдельного недавно приготовленного флакона. Состав прототипа поставляли в виде готового к применению состава и дополнительно не разбавляли перед введением.

Составы полученных доз приведены в таблице 13-2.

Сбор и получение образцов

Серийные образцы крови (приблизительно 0,8 мл в пробирку с антикоагулянтом K2EDTA) собирали через подкожную вену предплечья. Образцы крови собирали в момент перед введением дозы (0 минут, только для исследования 2), 0,0333 (2 минуты), 0,0833 (5 минут), 0,167 (10 минут), 0,333 (20 минут), 0,5 (30 минут), 1, 2, 4, 6 и 8 часов после введения дозы для всех фаз.

После сбора все образцы крови переносили в предварительно маркированные пластиковые микроцентрифужные пробирки, содержащие K2EDTA (10 мкл, 0,5 М), и помещали на водный лед сразу после сбора. После сбора крови образцы обрабатывали для получения плазмы путем центрифугирования при приблизительно 4°С, 3000 g на протяжении 10 минут в течение 60 минут после сбора. Плазму переносили в маркированные полипропиленовые микроцентрифужные пробирки, а затем быстро замораживали на сухом льду и хранили замороженной в морозильной камере с поддержанием температуры -60°С или ниже вплоть до биологического анализа.

Клиническое наблюдение

Наблюдения у клетки на предмет общего состояния здоровья и внешнего вида проводили два раза в день. Животным проводили физический осмотр до начала исследования, чтобы засвидетельствовать состояние здоровья животных. В дни введения дозы животных наблюдали до и после каждого момента времени отбора образца. Регистрировали общее состояние, поведение, активность, экскрецию, дыхание или другие необычные результаты наблюдения, отмеченные на протяжении всего исследования.

Анализ образцов

Образцы плазмы собак анализировали на пропофол с использованием аттестованного биоаналитического способа на основе осаждения белка с последующим анализом LC-MS/MS. Нижний предел количественной оценки (LLOQ) для пропофола составлял 5,00 нг/мл или 10,0 нг/мл, а верхний предел количественной оценки (ULOQ) составлял 2000 нг/мл.

Данные по концентрации пропофола в плазме подвергали некомпартментному фармакокинетическому анализу с использованием программного обеспечения Phoenix WinNonlin (версия 6.2.1, Pharsight, Маунтин Вью, Калифорния).

Период полувыведения в конечной фазе (Т1/2), объем распределения в равновесном состоянии (Vdss), общий клиренс (Cl), среднее время удержания (MRT) от нулевого момента времени до последней измеряемой концентрации (MRT0-last) и от нулевого момента времени до бесконечности (MRT0-inf), площадь под кривой концентрация в плазме-время (AUC) от нулевого момента времени до последней измеряемой концентрации (AUC0-last) и AUC от нулевого момента времени, экстраполированную до бесконечности (AUC0-inf), рассчитывали с использованием линейного/логарифмического методов трапеций.

При проведении фармакокинетического анализа исключали индивидуальные концентрации в плазме ниже нижнего предела количественной оценки (BQL). Для расчета всех фармакокинетических параметров использовали заданное время отбора проб. Для образцов, собранных в течение первого часа после введения дозы, допускалась ±1 минута; для оставшихся временных точек образцы, которые отбирали в пределах 5% от запланированного времени, были приемлемыми и не считались отклонениями от протокола.

Результаты

Индивидуальные и средние (n=3) концентрации пропофола в плазме представлены графически на фиг. 7А-7В. Средние значения С0, Т1/2, Vdss, Cl, AUC0-last, AUC0-inf, MRT0-last и MRT0-inf для пропофола после однократного внутривенного введения дозы представлены в таблице 13-3.

* обозначено на фиг. 7А-7В как 811(В6)

** обозначено на фиг. 7А-7В как 801(В9)

Исследование 1: после введения прототипа 3 подвергавшимся воздействию самцам собак породы бигль, получили значение С0 (начальная концентрация в плазме) (среднее ± S.D.), составляющее 8867±2844 нг/мл, получили значение AUC0-inf (площадь под кривой концентрация в плазме-время от нулевого момента времени до бесконечности) (среднее ± S.D.), составляющее 1600±541 нг/мл ч. и получили значение Cl (общий клиренс) (среднее ± S.D.), составляющее 67,1±20,7 мл/мин./кг.

После введения 811(В6) 3 подвергавшимся воздействию самцам собак породы бигль получили значение С0 (среднее ± S.D.), составляющее 9030±2080 нг/мл, получили значение AUC0-inf (среднее ± S.D.), составляющее 1423±136 нг/мл ч. и получили значение Cl (среднее ± S.D.), составляющее 70,7±7,03 мл/мин./кг. Значения С0, AUC0-inf и Cl были сопоставимы со значениями, полученными при введении дозы коммерческого продукта-прототипа в той же дозировке с соотношениями 1,02, 0,889 и 1,05, соответственно. Что касается фармакодинамики, то все собаки после завершения инъекции вошли в состояние анестезии, которое длилось от 8 до 13 минут без каких-либо побочных эффектов.

После введения 801(В9) 3 подвергавшимся воздействию самцам собак породы бигль, получили значение С0 (среднее ± S.D.), составляющее 9223±5071 нг/мл, получили значение AUC0-inf (среднее ± S.D.), составляющее 1360±190 нг/мл ч. и получили значение Cl (среднее ± S.D.), составляющее 74,6±10,6 мл/мин./кг. Значения С0, AUC0-inf и Cl были сопоставимы со значениями, полученными при введении дозы коммерческого продукта-прототипа в той же дозировке с соотношениями 1,04, 0,850 и 1,11, соответственно. Что касается фармакодинамики, то все собаки после завершения инъекции вошли в состояние анестезии, которое длилось от 8 до 10 минут без каких-либо побочных эффектов.

Исследование 2: после введения прототипа (коммерческая эмульсия пропофола) 6 не подвергавшимся воздействию самцам собак породы бигль, получили значение С0 (среднее ± S.D.), составляющее 12008±5932 нг/мл, получили значение AUC0-inf (среднее ± S.D.), составляющее 1773±324 нг/мл ч. и получили значение Cl (среднее ± S.D.), составляющее 58,0±10,7 мл/мин./кг. Фармакодинамика показала, что все 6 собак плавно входили в состояние анестезии в конце инъекции, и при этом состояние анестезии длилось приблизительно 5-7 минут с легкой степенью неблагоприятных эффектов, таких как "плавающие" подергивания конечностей, наблюдаемые у 1 из 6 собак (D203).

После введения 811(В6) 6 не подвергавшимся воздействию самцам собак породы бигль, получили значение С0 (среднее ± S.D.), составляющее 9400±2572 нг/мл, получили значение AUC0-inf (среднее ± S.D.), составляющее 1607±219 нг/мл ч. и получили значение Cl (среднее ± S.D.), составляющее 63,2±8,17 мл/мин./кг. Значения AUC0-inf и Cl были сопоставимы со значениями, полученными для прототипа с соотношениями 0,906 и 1,09, соответственно. Соотношение С0 у 811(В6) и прототипа составило 0,783, что немного ниже, чем у прототипа. Все собаки плавно входили в состояние анестезии приблизительно через 20 секунд после инъекции, и при этом состояние анестезии длилось 10-11 минут.

После введения 801(В9) 5 не подвергавшимся воздействию самцам собак породы бигль, получили значение Со (среднее ± S.D.), составляющее 7532 ± 749 нг/мл, получили значение AUC0-inf (среднее ± S.D.), составляющее 1446±218 нг/мл ч. и получили значение Cl (среднее ± S.D.), составляющее 70,5±11,8 мл/мин./кг. Значения AUC0-inf и Cl были сопоставимы со значениями, полученными для прототипа с соотношениями 0,816 и 1,22, тогда как С0 была ниже, чем у прототипа с соотношением для прототипа, составляющим 0,627. После завершения инъекции 2 из 6 собак вошли в состояние анестезии.

Пример VIX. Токсикология

Токсикокинетику (ТК) оценивали после введения один раз в два дня внутривенного (IV) болюса разбавленных составов 811 (В6) и 811 (В9) и коммерческой эмульсии Propofol-®Lipuro 1% (10 мг/мл) самцам и самкам собак породы бигль в течение 7 дней.

Введение дозы: 18 (9/пол) самцов и самок собак случайным образом распределяли на 3 группы (3/пол/группа, группы 1, 2 и 3). Один раз в два дня животным вводили IV болюс 811 (В6) и 801 (В9) с 1 вес. % микроэмульсий пропофола и эмульсии Propofol-®Lipuro 1% (10 мг/мл) в дозе, составляющей 6 мг/кг в течение соответственно 7 дней.

Во время исследования оценивали следующие параметры: жизнеспособность, клинические наблюдения, вес тела, потребление пищи, частота дыхания, ЭКГ, частота сердечных сокращений, клиническая патология (гематология и химия сыворотки), макропатология и гистопатология, а также токсикокинетика.

Отбор крови, получение и анализ плазмы

На 1-й и 5-й дни образцы крови (приблизительно 1 мл в пробирку с антикоагулянтом K2EDTA) собирали у всех исследуемых животных в момент 0 (перед введением дозы), 0,0333, 0,0833, 0,167,0,333, 0,5, 1, 4, 8, 12 и 24 часа после введения дозы через подкожную вену предплечья у всех животных. Образцы крови собирали в подходящие маркированные пробирки, переворачивали несколько раз для обеспечения перемешивания и помещали на водный лед. Плазму получали в течение 2 часов после сбора путем центрифугирования при 3200 g и 4°С в течение 15 минут. Плазму переносили в уникально маркированные полипропиленовые пробирки (Eppendorf), покрытые алюминиевой фольгой, и замораживали в вертикальном положении непосредственно над сухим льдом, и хранили в морозильной камере с поддержанием температуры от -60°С до -80°С на сухом льду вплоть до анализа.

Образцы плазмы собак анализировали в отношении пропофола с использованием утвержденного биоаналитического способа на основе осаждения белка с последующим анализом с использованием ультраэффективной жидкостной хроматографии с тройной квадрупольной масс-спектрометрией (UPLC-MS/MS). При использовании аликвот по 30 мкл плазмы собак нижний предел количественной оценки (LLOQ) составлял 10,0 нг/мл, а верхний предел количественной оценки составлял 6000 нг/мл.

Профили пропофола по концентрации в плазме в зависимости от времени анализировали с использованием некомпартментной модели утвержденной программы WinNonlin® (Pharsight, версия 6.2.1). Начальную концентрацию в плазме (С0) и площадь под кривой концентрации в плазме в зависимости от времени (AUC) от нулевого момента времени до 24 часов после введения дозы (AUC0-24 ч.) рассчитывали с использованием линейного повышающего/логарифмического понижающего методов трапеций.

Концентрацию в плазме ниже LLOQ (BLQ) устанавливали равной нулю для токсикокинетического анализа, однако в случае если больше половины (>50%) индивидуальных значений в отдельный момент времени равны BLQ - средние значения будут отображаться как BLQ. Значения AUC0-24 ч. и С0 округлены до 3 значащих цифр. Отношения AUC0-24 ч. и С0 округлены до 2 значащих цифр.

Результаты

Два состава микроэмульсий на основе В6 и на основе В9 и один коммерческий эмульсионный продукт (Propofol-®Lipuro 1% (10 мг/мл)), вводимые посредством внутривенного (IV) болюса собакам породы бигль один раз в два дня (QOD) на уровне дозы, составляющей 6 мг/кг в течение 7-дневного периода исследования, хорошо переносились и все животные выжили до конца исследования. Среднее значение ± SD для С0 и AUC0-24 ч. для пропофола представлены в таблице 14.

Клинические признаки, связанные с испытываемыми изделиями, такие как незначительное покраснение кожи, обесцвечивание и опухание ушей, наблюдали только после третьего дня введения. Эти клинические признаки были обратимыми через несколько часов и фиксировались.

Не было зафиксировано каких-либо аномальных изменений веса тела, потребления пищи, частоты дыхания, ЭКГ, частоты сердечных сокращений и клинической патологии, связанных с испытываемыми продуктами. Общее вскрытие и результаты оценки веса органов рассматривались как не связанные с обработкой изменения в соответствии с гистопатологическими оценками.

Каких-либо заметных половых различий при системном воздействии не наблюдали. Какого-либо заметного накопления лекарственного средства не наблюдали.

При гистопатологической оценке не обнаружили различий между группами 2 испытываемых составов и коммерческих эмульсий. Изменений, связанных с обработкой, не зафиксировано. Зафиксирован ряд гистопатологических результатов в различных органах, все они считаются случайными результатами, характерными для собак породы бигль того же возраста. Наблюдали поражения в месте инъекции у некоторых животных из всех групп, состоящие из фокальной или мультифокальной геморрагии артериальной стенки, субхронического воспаления и гиперплазии эндотелия, а также периартериального субхронического воспаления. Как полагают, все эти изменения связаны с травмой от иглы и не свидетельствуют о потенциальном локальном раздражении из-за спорадического возникновения у животных.

В заключение, не было зафиксировано явной и четкой разницы между двумя испытываемыми составами (микроэмульсиями пропофола на основе В6 и В9) и коммерческими липидными эмульсиями пропофола, что указывает на безопасность (отсутствие побочных эффектов) испытываемых микроэмульсий пропофола.

Пример VIIX. Оценка боли при введении

Боль и местное раздражение являются известными побочными эффектами при введении коммерческих составов пропофола. Как отмечено выше, уникальное взаимодействие между солютолом и пропофолом в составах по настоящему изобретению сохраняет пропофол связанным в масляном ядре микроэмульсии до тех пор, пока она не будет достаточно разбавлена в кровотоке, что обеспечивает относительно безболезненное введение состава.

Чтобы оценить эффективность составления пропофола в микроэмульсиях по настоящему изобретению в отношении боли, связанной с введением, проводили тест на "лизание лапы". Микроэмульсию В9А (1 вес. % пропофола) испытывали в сравнении с Diprivan® (коммерчески доступная инъекционная эмульсия пропофола) в качестве положительного контроля и 0,9% солевым раствором в качестве отрицательного контроля.

Сорок четыре самца крыс линии Спрег-Доули рандомизировали в одну из четырех групп лечения (по 11 животных на группу). Объем вводимой дозы титровали от 0,1 мл до 0,3 мл (что соответствовало приблизительно 20 мг пропофола/кг веса тела) до тех пор, пока не наблюдали ожидаемый эффект в группе положительного контроля (Diprivan®). Первые 4 животных в каждой группе доз получали 0,1 мл или 0,2 мл, и данные в этом исследовании не использовались для анализа.

Общее количество лизаний лапы регистрировали в течение 12 минут после субплантарной инъекции. Общее количество баллов и средние значения сравнивали с использованием двухвыборочного t-теста. Баллы дополнительно оценивали в 2 подмножествах: 1-я категория (одиночный эпизод лизания лапы) и 2-я категория (5 секунд непрерывного лизания).

У контрольных животных с физиологическим раствором каких-либо "лизаний лапы" не наблюдали. Средний комбинированный балл у крыс с инъекцией положительного контроля Diprivan® характеризовался общим баллом "лизания лапы", составляющим 14,7.

У животных, обработанных В9А, наблюдали проявление среднего комбинированного балла, составляющего 1,57, без 2-й категории (5 сек. непрерывного лизания). Статистически значимые отличия (р≤0,05) от группы Diprivan® наблюдали относительно общих средних баллов лизания и ответов подмножества 1-й и 2-й категорий. Результаты суммированы в таблице 15.

У одного животного в группе В9А был сломанный коготь на лапе, в которую вводили дозу, который начинал кровоточить. Вероятно, это способствовало ответу с лизанием. Если это животное исключить из анализа, то количество лизаний в группе В9А составит всего лишь 5. Таким образом, боль при инъекции, наблюдаемая с В9А, была значительно ниже чем у Diprivan®.

1. Микроэмульсия пропофола, содержащая масляную фазу в форме масляных капель, диспергированных в непрерывной фазе водного разбавителя, где масляная фаза содержит пропофол, по меньшей мере одно поверхностно-активное вещество, содержащее 15-гидроксистеарат полиэтиленгликоля (солютол HS 15), по меньшей мере один растворитель, содержащий среднецепочечные триглицериды (МСТ), по меньшей мере одно дополнительное поверхностно-активное вещество и по меньшей мере один сорастворитель, при этом масляные капли имеют размер не более 20 нм в непрерывной фазе, микроэмульсия пригодна для парентерального введения, весовое соотношение между указанным по меньшей мере одним растворителем и поверхностно-активным веществом составляет от 1:8 до 1:12, и микроэмульсия имеет монодисперсное распределение размера масляных капель.

2. Микроэмульсия пропофола по п. 1, где пропофол и поверхностно-активное вещество характеризуются коэффициентами диффузии одного порядка, в случае если находятся в микроэмульсии (как измерено с помощью SD-NMR).

3. Микроэмульсия пропофола по п. 1, где коэффициенты диффузии пропофола и поверхностно-активного вещества (в случае если они находятся в микроэмульсии) по меньшей мере на один порядок меньше, чем у других компонентов микроэмульсии.

4. Микроэмульсия пропофола по п. 1, где коэффициенты диффузии пропофола и поверхностно-активного вещества (в случае если они находятся в микроэмульсии) составляют порядка 1×10-11 м2/с, в случае если они находятся в микроэмульсии, как измерено с помощью SD-NMR.

5. Микроэмульсия пропофола по любому из пп. 1-4, где индекс полидисперсности (PDI) распределения масляных капель составляет от 0,03 до 0,08.

6. Микроэмульсия пропофола по любому из пп. 1-5, где размер масляных капель составляет 10-20 нм.

7. Микроэмульсия пропофола по любому из пп. 1-6, где указанный разбавитель выбран из воды, воды для инъекций, физиологического раствора, раствора декстрозы или буфера, характеризующегося рН от 3 до 9.

8. Микроэмульсия пропофола по любому из пп. 1-7, где растворитель представляет собой по меньшей мере один среднецепочечный триглицерид (МСТ).

9. Микроэмульсия пропофола по любому из пп. 1-8, где дополнительное поверхностно-активное вещество отличается от указанного поверхностно-активного вещества и выбрано из полиолов, диглицеридов, полиоксиэтиленов, лецитинов и фосфолипидов.

10. Микроэмульсия пропофола по п. 9, где дополнительное поверхностно-активное вещество представляет собой по меньшей мере один полиол, выбранный из этиленгликоля, глицерина, полиэтиленгликоля, полипропиленгликоля, сорбита, маннита, лактита и ксилита.

11. Микроэмульсия пропофола по любому из пп. 1-10, где сорастворитель выбран из этанола, пропанола, пропиленгликоля и глицерина.

12. Микроэмульсия пропофола по п. 1, содержащая пропофол, солютол HS 15, МСТ, полиэтиленгликоль, пропиленгликоль, сорастворитель и разбавитель.

13. Микроэмульсия пропофола по п. 12, где разбавитель представляет собой воду для инъекций.

14. Микроэмульсия пропофола по любому из пп. 1-13, содержащая приблизительно 0,1-2 вес. % пропофола.

15. Микроэмульсия пропофола по любому из пп. 1-14, содержащая от 75 до 98 вес. % разбавителя.

16. Микроэмульсия пропофола по любому из пп. 1-15, где весовое соотношение между пропофолом и поверхностно-активным веществом составляет от 1:5 до 1:12.

17. Микроэмульсия пропофола по любому из пп. 1-16, где весовое соотношение между указанным по меньшей мере одним растворителем и пропофолом составляет от 1:2 до 1,25:1.

18. Микроэмульсия пропофола по любому из пп. 1-17, имеющая одну или несколько из следующих характеристик: (i) является прозрачной, (ii) показатель мутности составляет 20-70 NTU, (iii) показатель осмоляльности составляет 250-450 мОсм/кг, (iv) значение поверхностного натяжения составляет 27-35 мН/м и (v) представляет собой ньютоновскую жидкость.

19. Допускающий разбавление концентрат пропофола, содержащий пропофол, по меньшей мере одно поверхностно-активное вещество, содержащее 15-гидроксистеарат полиэтиленгликоля (солютол HS 15), по меньшей мере один растворитель, содержащий среднецепочечные триглицериды (МСТ), по меньшей мере одно дополнительное поверхностно-активное вещество и по меньшей мере один сорастворитель, при этом весовое соотношение между указанным по меньшей мере одним растворителем и поверхностно-активным веществом составляет от 1:8 до 1:12.

20. Допускающий разбавление концентрат пропофола по п. 19, который не содержит воду.

21. Способ получения микроэмульсии, пригодной для парентерального введения пропофола, предусматривающий разбавление допускающего разбавление концентрата пропофола по п. 19 в заранее заданном количестве фармацевтически приемлемого водного разбавителя.

22. Способ по п. 21, где указанное заранее заданное количество разбавителя составляет 75-98 вес. %.

23. Допускающий разбавление концентрат пропофола по п. 19 для применения в способе парентерального введения пропофола субъекту, нуждающемуся в этом, при этом способ предусматривает разбавление указанного допускающего разбавление концентрата пропофола до заранее заданного эффективного количества в фармацевтически приемлемом водном разбавителе, в результате чего получают микроэмульсию, пригодную для парентерального введения, определенную в п. 1, и введение указанной микроэмульсии указанному субъекту парентерально.

24. Микроэмульсия пропофола по любому из пп. 1-18 для применения в индуцировании анестезирующего эффекта у субъекта, нуждающегося в этом.

25. Микроэмульсия пропофола по любому из пп. 1-18 для применения в предотвращении раздражения или уменьшении боли при введении пропофола в месте введения, причем пропофол во время введения содержится в масляных каплях микроэмульсии.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к соединениям формулы I или их фармацевтически приемлемым солям, где R1 представляет собой H, Cl, CH3, CF3 или циклопропил; R2 представляет собой H, F, Cl, CN, CH3, CF3 или CHF2; R3 представляет собой H, F, Cl, CN, CF3, OCF3 или CF2CF3; R4 представляет собой H; R5 представляет собой H, F, Cl, CH3, OCH3, OCH2CH3, OCH2CH2CH3 или OCHF2; R5’ представляет собой H, F, Cl, CH3, OCH3, OCH2CH3, OCH2CH2CH3 или OCHF2; R6 представляет собой H, F или Cl; R6' представляет собой H, F или Cl и R7 представляет собой H, F, Cl, OCH3, OCF3, OCH2CH3, OCH(CH3)2 или OCHF2, при условии что R1, R2, и R3 одновременно не представляют собой водород и что R5, R5’, R6, R6’ и R7 одновременно не представляют собой водород.

Изобретение относится к области органической химии, а именно к производному циклического амина или к его фармакологически приемлемой соли общей формулы (I), где атом углерода, отмеченный значком *, является асимметрическим атомом углерода, и А обозначает группу, представленную общей формулой (IIa), (IIb) или (IIc), где R1 представляет собой метильную группу или этильную группу, необязательно замещенную атомом галогена, R2 представляет собой атом водорода или алкилкарбонильную группу, содержащую от 2 до 5 атомов углерода, каждый R3 независимо представляет собой метильную группу или этильную группу, и n представляет собой 1 или 2.

Настоящее изобретение относится к производным аминоциклобутана общей формулы (1) или его фармацевтически приемлемой соли, где X1 представляет собой атом водорода или атом фтора; Х2 представляет собой атом водорода, или атом фтора, или атом хлора; R1 представляет собой атом водорода, или атом фтора, или атом хлора, или метильную группу, или метоксигруппу, или цианогруппу; R2 представляют собой, независимо или оба, метильную группу или этильную группу.

Группа изобретений относится к лечению артроза. Терапевтическое средство при артрозе содержит в качестве активного ингредиента соединение, представленное формулой (I): где R представляет собой линейную или разветвленную алкенильную группу, имеющую от 2 до 30 атомов углерода; X представляет собой атом кислорода или метиленовую группу, и Y представляет собой атом кислорода; и М представляет собой атом водорода или атом натрия.

Изобретение относится к новым аминоиндановым соединениям, представленным формулами (I) или (II): ,где: А является фенилом или моноциклическим ароматическим 5- или 6-членным кольцом, содержащим 1 или 2 гетероатома, выбранных из N и S; R1 и R4, независимо, являются С1-С6 алкилом или СН2СН2ОН; или R1 и R4 объединены с образованием 4-6-членного карбоциклического или насыщенной 5- или 6-членной моноциклической группы, содержащей один дополнительный кольцевой гетероатом, такой как О; R2 независимо выбран из группы, состоящей из галогена; R3 независимо выбран из группы, состоящей из галогена и С1-С6 алкила; или q равен 2, и две группы R3 связаны с образованием насыщенной 5- или 6-членной моноциклической группы, содержащей 1-2 атома кислорода; m равен от 1 до 3; n равен от 1 до 3; p равен от 0 до 2; q равен от 0 до 2; и X- является ионом галогена, трифторацетатом, сульфатом, и т.д., а также к способам получения и применения этих соединений.

Изобретение относится к соединениям формулы I, приведенной ниже, или к их стереомерам, таутомерам или фармацевтически приемлемым солям. R1, R2, Ra, Rb, Rc, Rd, X, Y, B и кольцо C являются такими, как определено в формуле изобретения.

Изобретение относится к соединениям общей формулы (I) или их фармацевтически приемлемым солям, обладающим действием антагониста мускариновых рецепторов. В формуле (I) R1 выбирают из группы, состоящей из линейного или разветвленного (C1-С10)алкила, (С2-С6)алкенила, арила, (С3-С8)циклоалкила, арил(C1-C6)алкила и гетероарила, необязательно замещенного одним или более заместителями, выбранными из группы, состоящей из атомов галогена, -N(R5)(R6′), -NHCO(R5), -CO2R5, (С1-C10)алкила, (C1-С10)алкокси и арилокси; G выбирают из группы, состоящей из -ОС(О)-, -SO2- и -С(O)-; R2 представляет собой -Н; R3 выбирают из группы, состоящей из (C1-С10)алкила, арила, гетероарила и гетероарил(С1-С6)алкила, необязательно замещенного одним или более заместителями, выбранными из группы, состоящей из атомов галогена, -ОН, (C1-С10)алкила, (C1-С10)алкокси, арилокси и арил(C1-С10)алкиленокси; R6 выбирают из группы, состоящей из фрагментов формулы (i), (ii) и (iii), где m=1, 2 или 3; n=1, 2 или 3; А- представляет собой физиологически приемлемый анион; R4 представляет собой группу формулы (Y), где p представляет собой 0 или целое число от 1 до 4; q представляет собой 0 или целое число от 1 до 4; P отсутствует или его выбирают из группы, состоящей из -О- и -С(О)-; W выбирают из группы, состоящей из Н, линейного или разветвленного (C1-С10)алкила, арила и гетероарила, необязательно замещенного одним или более заместителями, выбранными из группы, состоящей из атомов галогена, -ОН, -NO2, -CO2(R5), (C1-С10)алкила, (C1-С10)алкокси и арила; R5 и R6′ независимо выбирают из группы, состоящей из -Н, (C1-С10)алкила и (С1-С10)алкокси.

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению новых выделенных пептидов, которые вызывают аналгезию и ингибируют ASIC-каналы (протон-чувствительные ионные каналы), к полинуклеотидам, кодирующим указанные пептиды, а также векторам и их применению, и может быть использовано в медицине.

Изобретение относится к области органической химии, а именно к N-гетарилзамещенным 4-гидрокси-1-метил-2,2-диоксо-1H-2λ6,1-бензотиазин-3-карбоксамидам, общей формулы: , где R=5-метил-1,3-тиазол-2-ил, или 4-этоксикарбонилметил-1,3-тиазол-2-ил, или 6-метилпиридин-2-ил, или 5-хлорпиридин-2-ил, или пиримидин-2-ил.

Изобретение относится к медицине и заключается в применении соединений, являющихся антагонистами сигма-1 рецептора, для лечения или предотвращения невропатической боли, возникающей вследствие химиотерапии препаратами группы таксанов, при этом невропатическая боль представляет собой аллодинию или гипералгезию.

Группа изобретений относится к препарату рокурония. Инъекционный препарат рокурония в жидкой форме содержит рокуроний и буферный раствор и имеет pH 3,5 или менее, где буферный раствор содержится в концентрации от 0,015 до 0,5 M и представляет собой буферный раствор на основе глицина и соляной кислоты.
Изобретение относится к медицине, а именно к анестезиологии и реаниматологии в онкологии, и может быть использовано в раннем послеоперационном периоде для купирования острой боли в раннем послеоперационном периоде после радикального хирургического лечения онкологических больных.
Заявленное изобретение относится к области медицины и фармацевтики и представляет собой состав с фиксированной комбинацией доз, содержащий в качестве активных ингредиентов только ибупрофен, дротаверин или их фармацевтически приемлемые соли и один или более фармацевтически приемлемых наполнителей.

Изобретение относится к травматологии и ортопедии и может быть использовано непосредственно после проведения операций на тазобедренном суставе. Описан способ профилактики послеоперационного болевого синдрома, включающий проведение мультимодального обезболивания, отличающийся тем, что непосредственно после операции производят однократные инъекции смеси растворов глюкокортикостероида длительного действия Дипроспана (Бетаметазона) по 0,5 мл и анестетика Лидокаина 2% по 2 мл в оба крестцово-подвздошных сочленения.

Изобретение относится к медицине, а именно к анестезиологии и акушерству, и может быть использовано для обезболивания при самопроизвольных родах. Для этого осуществляют ингаляционное введение севофлурана.

Изобретение относится к соединению формулы (I), в которой A представляет собой 5-членный гетероарил с 2-4 атомами азота, 5,6-бициклический гетероарил с 2-4 атомами азота или 6-членный гетероциклил с 2 гетероатомами, независимо выбранными из азота и кислорода, где A присоединен через азот и необязательно замещен 1-4 заместителями, каждый из которых независимо выбран из циано, галогена, C1-C6-алкила, C1-C6-галогеналкила, C1-C6-алкокси, -OC1-C6-галогеналкила, -C(O)Ra, -C(O)ORa и -S(O)2Ra; каждый Ra представляет собой C1-C6-алкил; L представляет собой –C(R3)(R3)–; R1 представляет собой водород или C1-C6 алкил; R2 представляет собой водород, C1-C6 алкил или C1-C6 галогеналкил; каждый R3 представляет собой водород; R5 представляет собой водород; и представляет собой одинарную связь.
Изобретение относится к области медицины, а именно к хирургии, и предназначено для профилактики ателектаза при робот-ассистированных или лапароскопических операциях.
Изобретение относится к области медицины, в частности к хирургии, а именно к растворам для тумесцентной паравазальной анестезии при радиочастотной облитерации вен.
Изобретение относится к медицине, а именно к анестезиологии, и может быть использовано при проведении анестезиологического пособия при выполнении оперативного вмешательства по поводу удаления глаза.

Группа изобретений относится к препарату рокурония. Препарат рокурония для уменьшения и/или облегчения сосудистой боли, вызываемой применением препарата рокурония, содержит рокуроний и буферный раствор и имеет титруемую кислотность 80 мЭкв или меньше и pH от 2,5 до 4,5, при условии, что титруемая кислотность означает количество гидроксида натрия в мЭкв, израсходованного при титровании 1 л раствора до pH 7,4.
Изобретение относится к препарату, предназначенному для увеличения концентрации в крови по меньшей мере одного соединения, выбранного из группы, состоящей из ω3 полиненасыщенных жирных кислот (PUFA) и их фармацевтически приемлемых солей и сложных эфиров, содержащему композицию, инкапсулированную в мягкую капсулу, где композиция содержит, когда полное количество композиции составляет 100 мас.%: a) от 70 до 90 мас.%, по меньшей мере одного соединения, выбранного из группы, состоящей из ω3 полиненасыщенных жирных кислот и их фармацевтически приемлемых солей и сложных эфиров, b) от 0,5 до 6 мас.% воды, c) от 1 до 29 мас.% эмульгатора, который представляет собой сложный эфир полиоксиэтиленсорбита и жирной кислоты, и d) от 3 до 40 мас.

Настоящее изобретение относится к микроэмульсии пропофола для парентерального введения. Микроэмульсия пропофола содержит масляную фазу в форме масляных капель, диспергированных в непрерывной фазе водного разбавителя. Масляная фаза содержит пропофол, по меньшей мере одно поверхностно-активное вещество, содержащее 15-гидроксистеарат полиэтиленгликоля, по меньшей мере один растворитель, содержащий среднецепочечные триглицериды, по меньшей мере одно дополнительное поверхностно-активное вещество и по меньшей мере один сорастворитель. Масляные капли имеют размер не более 20 нм в непрерывной фазе. Весовое соотношение между указанным по меньшей мере одним растворителем и поверхностно-активным веществом составляет от 1:8 до 1:12. Микроэмульсия имеет монодисперсное распределение размера масляных капель. Также описан допускающий разбавление концентрат пропофола и способ получения микроэмульсии, предусматривающий разбавление допускающего разбавление концентрата пропофола в заранее заданном количестве фармацевтически приемлемого водного разбавителя. Микроэмульсия пропофола по изобретению обеспечивает относительно безболезненное введение состава. 4 н. и 21 з.п. ф-лы, 7 ил., 15 табл., 10 пр.

Наверх