Эфир янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она, препятствующий развитию сердечных аритмий

Изобретение относится к применению эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она в качестве средства, препятствующего развитию нарушений сердечного ритма и стабилизирующего функциональную организацию кардиомиоцитов синусного узла. Эфир янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она оказывает выраженное стабилизирующее воздействие на синусный узел, не влияет на проведение электрического возбуждения между кардиомиоцитами периферической части узла и рабочими атриальными кардиомиоцитами, что сохраняет эти клетки под протектирующим влиянием синусного узла и предохраняет их от возможного аритмического влияния патологических очагов эктопической электрической активности и может быть полезным как при лечении пациентов с нарушениями сердечного ритма, которые сочетаются или осложняются цереброваскулярными заболеваниями, так и у пациентов с расстройствами мозгового кровообращения, которые сопровождаются нарушенным ритмом сердечных сокращений. 5 табл., 7 ил., 2 пр.

 

Изобретение относится к области медицины, в частности к фармакологии, и касается нового применения известного вещества - эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она при нарушениях сердечного ритма. Рассматриваемое вещество - эфир янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она (100 мг/кг, в/в) обладает выраженной цереброваскулярной противоишемической активностью и не оказывает гипотензивного эффекта. Последнее его выгодно отличает от используемых в неврологии препаратов (пикамилона, мексидола, нимодипина, циннаризина и кавинтона) [Середенин С.Б., Авдюнина Н.И., Курза Е.В., Мирзоян Р.С, Ганьшина Т.С., Курдюмов И.Н., Масленников Д.В., Турилова А.И., Ковалев Г.И., Васильева Е.В, Пятин Б.М., Грушевская Л.Н., Блынская Е.В., Зайцева Н.М., Дурнев А.Д., Жердев В.П. Патент на изобретение №2658833. Эфиры янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она, улучшающие кровоснабжение ишемизированного мозга; Курза Е.В., Авдюнина Н.И., Ганьшина Т.С., Масленников Д.В., Турилова А.И., Пятин Б.М., Грушевская Л.Н., Зайцева Н.М., Большакова Р.Ф., Ковалев Г.И., Васильева Е.В., Мирзоян Р.С. Синтез и цереброваскулярная активность новых производных 5-гидроксиадамантан-2-она. Хим-фарм. журнал, 2018, т.52, №2, с. 3-7. DOI: 10.30906/0023-1134-2018-52-2-3-7].

Поиск и изучение механизма действия эффективных антиаритмических средств является одной из наиболее актуальных проблем современной фармакологии, так как нарушения сердечного ритма нередко служат причиной внезапной смерти и вызывают опасные осложнения со стороны различных систем организма. Фармакологическая коррекция остается основным подходом в лечении и профилактике аритмий, так как предложенные хирургические методы - имплантация пейсмекеров, применение дефибрилляторов - не лишены существенных недостатков.

При наиболее часто встречающихся типах аритмий, таких как фибрилляция предсердий, эффективными являются препараты III класса по классификации E.Vaughan-Williams. К ним относятся кардиоциклид, нибентан, рефралон (ниферидил), соталол и вернакалант [Каверина Н.В., Лысковцев В.В., Соколов С.Ф., Кищук Е.П. Новый антиаритмический препарат III класса. Фармакологические свойства и электрофизиологический механизм. Вестник аритмологии, 1998, №9, с. 39-42.; Турилова А.И., Каверина Н.В., Кацитадзе Н.Ш. Действие новых антиаритмических препаратов III класса кардиоциклидаинибентана на фоне активации бета-адренореценторовсердца. Эксперим. и клин. фармакол., 2002. Т 65, №5. с. 29-30; Каверина Н.В., Лысковцев В.В., Попова Е.П. Сравнительное изучение электрофизиологических свойств противоаритмических препаратов III класса (кардиоциклид, нибентан, соталол) и их эффективности при фибрилляции предсердий, вызванной стимуляцией блуждающего нерва. Эксперим. и клин. фармакол., 2007, т. 70, №1. c. 11-16.; Глушков Р.Г., Южаков С.Д., Львов А.И. и др. Новая группа антиаритмических средств III класса- производных пиперидил-4-этана. Химико-фармацевтический журнал, 2011, т. 45, №2, с. 3-12; Camm A.J., Capucci A., Hohnloser S. et al. Arandomized active controlled study comparing the efficacy and safety of vernakalant to amiodarone in recenton set atrial fibrillation.J.Am.Coll.Cardiol, 2011; v.57, №3, p. 313-321; Майков Е.Б. Юричева Ю.А., Миронов Н.Ю., Соколов С.Ф., Голицын С.П., Розенштраух Л.В., Чазов Е.И. Рефралон (ниферидил) - новый антиаритмический препарат III класса для медикаментозной кардиоверсии персистирующей фибрилляции и трепетания предсердий. Терапевтический архив, 2015, №1, с. 38-48].

Известно также, что антиаритмические препараты III класса в той или иной степени обладают свойствами антиаритмиков I, II и IV классов [Резник А.В., Федоров В.В., Розенштраух Л.В., Кокоз Ю.М. и др. Ионные механизмы кардиотропного действия препарата III класса РГ-2. Кардиология, 2003, №10, с. 76-81; Миронов Н.Ю., Голицын С.П., Соколов С.Ф. и др. Электрофизиологические эффекты и противоаритмическая активность нового отечественного антиаритмического препарата III класса ниферидила у больных пароксизмальными наджелудочковыми тахикардиями. Эксперим. и клин. фармакол., 2012, т. 75, №10, с. 16-21].

В клинической практике при терапии нарушений ритма сердца чаще всего используют комбинированную терапию, включающую антиаритмические препараты различных классов [Недоступ А.В., Благова О.В. Принципы комбинированной антиаритмической терапии. Русский мед. журнал, 2005, №11, с. 767-774; Недоступ А.В. Вопросы стратегии терапии аритмий сердца. Русский мед. журнал, Кардиология, 2008, т. 16, №6, с. 431-435; Майков Е.Б., Юричева Ю.А., Миронов Н.Ю., Соколов С.Ф., Голицын С.П., Розенштраух Л.В., Чазов Е.И. Рефралон (ниферидил)-новый антиаритмический препарат III класса для медикаментозной кардиоверсииперсистирующей фибрилляции и трепетания предсердий. Терапевтический архив, 2015, №1, с. 38-48, doi: 10.17116/terarkh2015 8713 8-48].

Нормализующее влияние на нарушенный ритм сердечных сокращений оказывают вещества, относящиеся к различным классам химических соединений и различным фармакологическим группам. Вместе с тем, применяемые антиаритмические препараты часто недостаточно эффективны и обладают серьезными побочными эффектами, включая проаритмогенное действие [Машковский М.Д. Лекарственные средства, Москва, Изд-во «Новая волна», 2000; Pollard C.E., AbiGergesN., Bridgland-Taylor M.H., Easter A., Hammond T.G., Valentin J.P. An introduction to QT interval prolongation and non-clinical approaches to assessing and reducing risk.Br.J.Pharmacol., 2010, v. 159, N1, p. 12-21]. Этим и определяется необходимость изыскания и изучения новых лекарственных средств для лечения нарушений сердечного ритма.

Ранее нами среди производных адамантана было выявлено новое средство для лечения аритмий - N-[2-(адамант-2-ил)аминокарбонилметил]-N'-[3-(диэтиламино)пропил]-4-нитробензамид, которое обладает преимуществом перед рядом известных антиаритмических препаратов и рассматривается нами в дальнейшем как прототип [Авдюнина Н.И., Турилова А.И., Пятин Б.М., Мирзоян Р.С., Ганьшина Т.С., Большакова Р.Ф., Грушевская Л.Н., Алексеев К.В., Жердев В.П. N-[2-(адамант-2-ил)аминокарбонилметил]-N¹-(диалкиламино)алкилнитробензамиды, обладающие антиаритмической активностью. Патент РФ на изобретение №2547096]. Установлено, что прототип обладает выраженной антиаритмической (антифибрилляторной) активностью на моделях хлоридкальциевой и аконитиновой аритмий. Он обладает и малой токсичностью, а по широте терапевтического действия превосходит известные антиаритмические препараты I класса (лидокаин, этмозин, новокаинамид), IV класса (верапамил) и III класса(кардиоциклид) [Турилова А.И., Авдюнина Н.И., Пятин Б.М., Ганьшина Т.С., Грушевская Л.Н., Мирзоян Р.С. Поиск антиаритмических средств среди производных адамант-2-иламидовалкиламинокарбоновыхкислот.Эксперим. и клин. фармакол., 2013, т.76, №8, с. 20-23.; Авдюнина Н.И., Турилова А.И., Ганьшина Т.С., Мирзоян Р.С., Грушевская Л.Н., Зайцева Н.М., Пятин Б.М. Синтез и антиаритмическая активность N-[2-(адамант-2-ил)-аминокар-бонилметил]-N-(диалкиламино)-алкилнитробензамидов. Хим-фарм. журнал., 2019, т. 53, №1, с. 24-29. DOI: 10.30906/0023-1134-2019-53-1-24-29].

Задачей изобретения является изучение антиаритмической активности эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она. В результате поиска по источникам патентной и научной информации не выявлено сведений о его применении в качестве средства для лечения нарушений сердечного ритма. Применение этого соединения в качестве средства, обладающего антиаритмической активностью, предложенное авторами, установлено впервые.

Сущность настоящего изобретения заключается в выявлении возможности применения эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она для лечения нарушений сердечного ритма. Технический результат изобретения - расширение арсенала средств, проявляющий выраженную антиаритмическую активность и поясняется следующими примерами.

Пример 1

Влияние соединения эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она на нарушения сердечного ритма у крыс, вызванные хлоридом кальция и аконитином

Для оценки эффектов заявляемого соединения были использованы базисные сертифицированные методики, рекомендуемые Фармакологическим комитетом МЗ РФ для исследования лекарственных веществ, обладающих антиаритмическими свойствами [Галенко-Ярошевский П.А., Каверина Н.В., Камкин А.Г., Турилова А.И., Богус С.К., Шейх-заде Ю.Р. Методические рекомендации по доклиническому изучению антиаритмических лекарственных средств. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая. - М., Гриф и К, 2012б, с. 385-387].

Опыты выполнены на 80 белых нелинейных бодрствующих крысах-самцах массой 200 г, содержащихся в стандартных условиях вивария. Животных получали из питомника: филиал «Столбовая» ФГБНУ «НЦБМТ». Эксперименты выполнены с соблюдением этических правил гуманного обращения с животными, утвержденными Этической комиссией ФГБНУ «НИИ фармакологии имени В.В. Закусова».

В работе были использованы две модели аритмий: хлоридкальциевая и аконитиновая.

При изучении антиаритмической активности перед началом эксперимента у всех животных регистрировали ЭКГ во II стандартном отведении.

Хлоридкальциевую аритмию вызывали высокими дозами 10% раствора хлорида кальция (250-390 мг/кг). Через 1-2 минуты после введения хлорида кальция возникает фибрилляция желудочков сердца. Вначале эксперимента подбирали дозу 10% раствора хлорида кальция, вызывающую летальную фибрилляцию желудочков. Исследуемые соединения вводили за 1-2 минуты до введения хлорида кальция. ЭКГ регистрировали во П стандартном отведении каждые 5 минут с помощью Полиспектра -8/В и компьютерной программы. Антиаритмический эффект оценивали по уменьшению количества случаев летальной фибрилляции желудочков сердца. Значимость данных оценивали с помощью критерия Фишера.

Аконитиновую аритмию вызывали с помощью внутривенного введения аконитина-гидрохлорида в дозах 30-40 мкг/кг. Через 1-3 минуты после введения аконитина развивались нарушения сердечного ритма смешанного предсердно-желудочкового типа, которые носили разнообразный харакаер. В экспериментах использовали дозу аконитина, которая вызывала нарушения сердечного ритма средней тяжести (политопная экстрасистолия). ЭКГ регистрировали во П стандартном отведении с помощью Полиспектра -8/В и компьютерной программы через 3, 5, 10, 15 и 20 минут после введения аконитина. Критерием положительного эффекта соединения служило отсутствие аритмии, вызванной аконитином. Эффективную дозу ЭД₅₀ и доверительные границы вычисляли по методу Миллера и Тейнтера при уровне вероятности р=0,05. О терапевтической широте препарата судили по величине антиаритмического индекса (АИ), представляющего собой отношение летальной дозы ЛД₅₀ к эффективной ЭД₅₀.

Острую токсичность вещества изучалина нелинейных бодрствующих крысах-самцах массой 200 г при внутривенном введении. В качестве растворителя использовали апирогенную воду для инъекций. Изучение острой токсичности проводили на 6-8 животных с использованием трех и более доз. Результаты оценивали через 2 недели после введения соединений. Эффективную дозу- ЭД₅₀ и летальную дозу - LD₅₀ с доверительными границами вычисляли по методу Миллера и Тейнтера при уровне вероятности р=0,05.

Животные были разделены на следующие экспериментальные группы: 1 - изучение острой токсичности эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она (n=21); 2 - изучение влияния эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она на нарушения сердечного ритма, вызванные хлоридом кальция (n=32); 3 - изучение влияния эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она на нарушения сердечного ритма, вызванные аконитином (n=27).

Изучение острой токсичности эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она и прототипа

Изучение острой токсичности веществ выполнено на 21 нелинейных бодрствующих крысах-самцах массой 200 г при внутривенном введении. Результаты экспериментов представлены в таблице 1. В качестве препаратов сравнения использовали прототип и антиаритмическое средство III класса кардиоциклид. Проведенные исследования показали, что наименее токсичным оказалось соединение эфир янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она, которое существенно превосходит прототип и кардиоциклид (табл. 1).

Влияние эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-онана нарушения сердечного ритма, вызванные высокими дозами хлорида кальция

Проведенные опыты показали, что в контроле при внутривенном введении 10% раствора хлорида кальция (250-390 мг/кг) погибло 10 животных из 10. Защитный эффект исследуемого соединения проявлялся в дозах 0,5-1,0-2,0 мг/кг при их внутривенном введении до введения хлорида кальция. В зависимости от дозы исследуемого соединения выживаемость животных составила от 37 до 86%. (табл. 2). У выживших животных не были выявлены нарушения ЭКГ (фиг. 1).

Таким образом, эфир янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она в условиях хлоридкальциевой модели аритмии проявляет антиаритмическую активность. При определении антиаритмического индекса соединения было установлено, что по величине антиаритмического индекса оно превосходит прототип и препараты сравнения - кардиоциклид, лидокаин и верапамил, что свидетельствует о наибольшей широте терапевтического действия эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она (табл. 3).

Влияние эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-онана нарушения сердечного ритма, вызванные аконитином

Опыты проведены на 27 нелинейных бодрствующих крысах. В результате проведенного исследования было показано, что в условиях аконитиновой модели аритмии эфир янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она обладает антиаритмической активностью, а по величине антиаритмического индекса не уступает прототипу и превосходит препараты сравнения - кардиоциклид, лидокаин, этмозин, новокаинамид (табл. 4, фиг. 2).

Таким образом, результаты проведенного исследования позволили установить, что эфир янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она проявляет антиаритмическую активность в условиях хлоридкальциевой и аконитиновой моделей аритмии. На хлоридкальциевой модели аритмий соединение по широте терапевтического действия имеет преимущество перед прототипом и известными антиаритмическими препаратами I класса (лидокаином), IV класса (верапамилом) и III класса (кардиоциклидом), а в условиях аконитиновой модели аритмий по широте терапевтического действия оно превосходит этмозин, лидокаин, новокаинамид и кардициклид и не уступает прототипу.

В соответствии с полученными данными дальнейшее исследование посвящено электрофизиологическому изучению механизма действия эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она.

Пример 2

Влияние соединения эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она на характеристики электрической активности пейсмекеров синусного узла сердца крыс in vitro

Эксперименты проводились на аутбредных крысах стока Вистар обоих полов с массой тела от 160 до 200 г. Животных получали из питомника: филиал «Столбовая» ФГБНУ «НЦБМТ». Всего было использовано 26 животных. Уход за крысами осуществлялся согласно текущему российскому законодательству и данным «Руководства по содержанию и использованию лабораторных животных» («Guide for the Care and Use of Laboratory Animals», National Academy Press, USA. 2011). В процессе содержания они регулярно получали стандартное питание и питье без ограничений. Животных наркотизировали внутрибрюшинным введением раствора золетила (Золетил 100, Virbac) в дозе 40 мг/кг массы тела и умерщвляли вскрытием грудной клетки. Затем вырезали правое предсердие с ушком, краниальной и каудальной полыми венами, помещали в ванночку, заполненную раствором Хенкса при комнатной температуре. Полученный препарат стальными нержавеющими иглами прикрепляли к подложке эндокардиальной поверхностью вверх и переносили в проточную термостатируемую кювету (t_o=38°С), заполненную раствором Кребса-Рингера, уравновешенного смесью 5% СО2 и 95% O2 до рН 7.40. Скорость протекания среды через кювету составляла около 3 мл/мин. Перед исследованием препарат фотографировали через окуляр микроскопа электрофизиологической установки, в который был вставлен окуляр-микрометр (цена деления - 0.012 мм). Положение кончика микроэлектрода наносилось на фотографию препарата. Регистрация электрической активности кардиомиоцитов проводилась конвенциональными плавающими стеклянными микроэлектродами, заполненными 3М KCl, с сопротивлением 40-60 мΩ. После пятиминутной записи потенциалов действия клетки раствор Кребса-Рингера в кювете заменяли на раствор Кребса-Рингера, содержащий эфир янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она. После чего проводили максимально возможную по длительности регистрацию электрической активности при следующиих концентрациях эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она:

A) 5 мг/л;

Б) 50 мг/л;

B) последовательное введение растворов эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она в концентрации 5 мг/л, а затем 50 мг/л.

В случае остановки электрической активности синусного узла проводили отмывку препарата интактным раствором Кребса-Рингера.

В качестве усилителя постоянного тока использовался Intracellular Electrometer IE-210 (Warner Instruments Co). Сигнал с выхода усилителя постоянного тока через аналого-цифровой преобразователь L-card Е-14-140-М регистрировался с частотой дискретизации 20 kHz в программе PowerGraph 3.3 Professional. Для последующего анализа использовались усредненные потенциала действия, получаемые путем наложения друг на друга (averaging) серии из двадцати последовательных потенциалов действия с последующими наложением на усредненный потенциал соответствующего фильтра (noise filter). Обработка электрофизиологических данных проводилась в программе LabChart 7.2 Pro с использованием расширения PeakAnalysis (v1.2.1), а также в программе AutoCAD 2012.

Количественному анализу подвергались следующие характеристики потенциалов действия (фиг. 3): амплитуда потенциала действия (APA,actionpotentialamplitude, mV), максимальный диастолический потенциал (MDP, maximal diastolic potential, mV), овершут (OS,overshoot, mV), степень диастолического наклона в фазе 4 (dV/dt4, mV/s), максимальное значение первой производной в фазе 0 (dV/dt0, V/s), радиус кривизны перехода из фазы 4 в фазу 0 (R, условные единицы (у.е.) программы AutoCAD 2012, полученные при анализе кривых потенциалов действия при стандартизированной развертке со значениями 0.05sec/дел Ось абсцисс и 10 mV/дел - Ось ординат), частота следования потенциалов действия (F, Hz) и длительность потенциала действия (APD,action potential duration, ms) на разных уровнях амплитуды (в процентах) потенциала действия (APD90, APD80, APD70, APD60, APD50, APD40, APD30, APD20, и APD10).

Статистическая обработка и построение графиков проводилась в программе GraphPad Prism 6. В таблице 5 представлены значения М (среднее)±SEM (стандартная ошибка среднего).

Выделение групп пейсмекеров синусного узла для анализа влияния эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она.

Электрофизиологическое картирование синусного узла сердца крыс показало отличие его строения от синусного узла сердца кролика [Bleeker W.K., Mackaay A.J.C., Masson-Pevet M., Bouman L.N., Becker A.E. Functional and morphological organization of the rabbit sinus node. Circ. Res., 1980, V. 46, N 1, P. 11-22.]: как с эпикардиальной, так и с эндокардиальной поверхностей был выявлен мультикластерный (или мультицентричный) характер локализации истинных пейсмекеров в пределах синусного узла. Промежутки между скоплениями истинных пейсмекеров заполнены латентными пейсмекерами с разнообразными характеристиками электрической активности [Родина А.С., Шагалеева О.Ю., Золотарев В.И., Мещанинова А.Д., Тихонова Т.А., Сутягин П.В. Распределение клеток-водителей ритма и рабочих кардиомиоцитов в области синусного узла сердца крыс. // Московский морфологический журнал, 2019, Т. 4, №3. С. 113-119, URL: http://mosmj.ru/4/3/113-119.pdf; Шагалеева О.Ю., Родина А.С., Золотарев В.И., Мещанинова А.Д., Тихонова Т.А., Сутягин П.В. Сравнение распределений клеток-водителей ритма и рабочих кардиомиоцитов эпикардиальной и эндокардиальной поверхностей области синусного узла сердца крыс. // Московский морфологический журнал, 2019, Т. 4, №3. С. 139-144, URL: http://mosmj.ru/4/3/139-144.pdf].

Анализ электрофизиологических характеристик пейсмекерных кардиомиоцитов синусного узла сердца интактных крыс (табл. 5, фиг. 4) и в условиях воздействия эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она позволил выделить в пределах синусного узла как минимум 4 типа пейсмекеров.

1. Истинные пейсмекеры (ИП)-ТР(True Pacemaker), в первую очередь, обладают максимальными значениями радиуса кривизны перехода из фазы 4 в фазу 0, что свидетельствует о спонтанном возбуждении этих клеток (фиг. 4А, таблица 5). Кроме того, клетки этого типа характеризуются максимальными среди пейсмекеров синусного узла значениями ширины пика потенциала действия (APD₇₀ (action potential duration)), диастолического наклона (dV/dt₄) и наименьшими значениями dV/dt₀ и амплитуды потенциала действия (АРА (actionpotentialamplitude)).

2. Потенциальные истинные пейсмекеры (ПИП) - РТР (фиг. 4Б, таблица 5) - (разновидность латентных пейсмекеров, Potential True Pacemaker(PTP)) отличаются от истинных (TP) значительно меньшим радиусом кривизны перехода из фазы 4 в фазу 0 (5,1±3,0 у.е. у РТР против 15,9±5,1 у.е. у TP) и более высокими значениями dV/dt₀ (18,1±10,9V/sy РТР против 10,0±4,8V/sy TP). Эксперименты показали, что все прочие показатели электрической активности практически одинаковы у обоих типов пейсмекеров.

3. Третий тип латентных пейсмекеров - TLP (фиг. 4 В, таблица 5) - (переходный тип латентных пейсмекеров (ПТЛП),Transitional Latent Pacemaker (TLP)), в основном, располагается на периферии синусного узла. От первых двух типов отличается большей амплитудой потенциала действия (АРА) и значения dV/dt₀. В свою очередь, значения радиуса кривизны перехода из фазы 4 в фазу 0 и ширины пика потенциала действия (APD₇₀) у TLP были значительно меньше, чем у РТР (2,4±1,1 у.е. против 5,1±3,0 у.е. и 46,7±5,7 мсек против 63,6±17,6 мсек, соответственно). Интересно, что амплитуда потенциала действия (АРА) и диастолический наклон (dV/dt₄) у TLP имеют практически такие же значения как уТР и РТР.

4. Атриальный тип пейсмекеров (АТП) - (Atrial Type Pacemaker (ATP)) располагается на границе синусного узла и окружающего рабочего миокарда правого предсердия, обладая электрофизиологическими характеристиками свойственными как пейсмекерам (наличие медленной диастолической деполяризации), так и рабочим атриальным кардиомиоцитам (РАК) (Atrial Working Cardiomyocyte (AWC)). Следует отметить, что степень диастолической деполяризации (dV/dt₄) у этих клеток минимальна средй всех пейсмекерных клеток (4,5±0,7 mV/s), тогда как значения амплитуды потенциала действия (АРА), dV/dt₀ и APD₇₀ были практически неотличимы от таковых у рабочих атриальных кардиомиоцитов (фиг. 4Г и 4Д, таблица 5).

Результаты анализа характеристик потенциалов действия кардиомиоцитов.

A. Амплитуда потенциала действия (АРА) в субпопуляциях истинных (TP), потенциальных истинных (РТР) и переходных латентных (TLP) клеток-водителей ритма схожи. У атриального типа пейсмекеров (АТР) и атриальных рабочих кардиомиоцитов (AWC) амплитуда потенциалов действия значительно выше (таблица 5).

Б. Скорость нарастания потенциала в фазе 4 (диастолический наклон, dV/dt₄) в субпопуляциях истинных (TP), потенциальных истинных (РТР) и переходных латентных (TLP) пейсмекеров также как и в предыдущем случае примерно равнозначны. У атриального типа пейсмекеров (АТР) этот показатель достоверно ниже.

B. Радиус кривизны перехода из фазы 4 в фазу 0 и ширина пика потенциала действия (APD₇₀) падают в ряду TP → РТР → TLP → АТР, причем эти показатели у АТР существенно отличаются от показателей первых трех типов.

Г. Показатель dV/dt₀ в ряду TP → РТР → TLP → АТР → AWC закономерно растет, что свидетельствует об увеличении доли быстрых натриевых каналов (каналы Navl.5) в сарколемме указанных типов кардиомиоцитов. Однако известно, что при исследовании истинных пейсмекеров методом patch clamp быстрый натриевый ток не выявляется, что свидетельствует об отсутствии или инактивации быстрых натриевых каналов у этих клеток [Dobrzynski Н., Boyett M.R., Anderson R.H. New insights in to pacemaker activity: promoting understanding of sick sinus syndrome. // Circulation, 2007, V. 115, N 14, P. 1921-1932.; Satoh H. Sino-atrial nodal cell sofmammalian hearts: ionic currentsandgeneexpressionofpacemakerionic channels. // J. SmoothMuscleRes., 2003, V. 39, N 5, P. 175-193.].

Таким образом, истинные (TP), потенциальные истинные (РТР) и переходные латентные (TLP) пейсмекеры представляют собой единую функциональную группу, в основном, со сходными электрофизиологическими характеристиками, кроме электрофизиологических характеристик атриального типа пейсмекеров (АТР), лежащих на границе синусного узла и рабочего атриального миокарда (AWC), которые, согласно данным литературы, сдерживают гиперполяризующее воздействие на центральную часть синусного узла со стороны рабочей атриальной мускулатуры [Boyett M.R., Honjo Н., Kodama I. The sinoatrial node, a heterogeneous pacemaker structure. // Cardiovasc. Res., 2000, V. 47, P. 658-687.].

Анализ влияния эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она на пейсмекерные клетки синусного узла сердца крыс

Размер клеток-пейсмекеров в самой широкой их части (а они имеют веретеновидную форму), составляющий всего 3-7 микрометра в диаметре [Сутягин П.В. Морфологический анализ взаимоотношений миоцитов в синусно-предсердном узле сердца крыс. // Бюл. эксперим. биологии и медицины, 2009, Т. 148, №11, С. 589-592.], и «мягкий» скелет синусного узла сердца крыс, представленный коллагеновой сеткой, в котором количественное содержание соединительной ткани достигает 70% [Павлович Е.Р. Количественный ультраструктурный анализ проводящей системы сердца крысы. // В книге: «Ультраструктура сердца» под редакцией Шарова В.Г. и Иргашева Ш.Б., Ташкент, 1988, С. 13-25.], обусловили необходимость усовершенствования используемого стеклянного микроэлектрода. Параметры его кончика были изменены до такого состояния последнего, когда кончик мог прокалывать плотную соединительную ткань межклеточного матрикса, одновременно длительно оставаясь внутри клетки без ее видимого повреждения.

За время экспериментальных исследований было сделано 32 записи длительностью от 3-х до 116 минут. В среднем длительность записи составила 43±28 минут.

Влияние эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она в концентрации 5 мг/л в растворе Кребса-Рингера:

Истинные пейсмекеры (TP). Всего с истинными пейсмекерами получено 4 записи. Анализ характеристик электрической активности в трех случаях показал снижение амплитуды потенциалов действия (АРА) и dV/dt₀. Все остальные параметры или имели разнонаправленный характер изменений, или не изменялись вовсе. В одном случае изменений характеристик электрической активности не наблюдалось.

Потенциальные истинные пейсмекеры (РТР). Сделано 3 записи. В двух случаях произошло снижение dV/dt₀ и увеличение dV/dt₄, и радиуса кривизны перехода из фазы 4 в фазу 0 (R), т.е. произошло превращение (конвертация) потенциальных истинных пейсмекеров в истинные (фиг. 5А и 5Б). В одном случае, напротив, воздействие препарата привело к увеличению dV/dt₀ и снижению dV/dt4 и радиуса (R), т.е. конвертации РТР в переходный тип латентных пейсмекеров (TLP) (фиг. 6А и 6Б).

Переходный тип латентных пейсмекеров (TLP). Сделано 5 записей. Из них на основании изменений dV/dt₀, dV/dt₄ и R в 2-х случаях потенциалы действия переходных латентных пейсмекеров (TLP) трансформировались в потенциалы действия потенциальных истинных пейсмекеров (РТР), в одном случае - в потенциалы действия атриального типа пейсмекеров (АТР), и в двух случаях - потенциалы действия остались в пределах показателей TLP.

Атриальный тип пейсмекеров (АТР). Во всех четырех записях электрофизиологические характеристики клеток этого типа менялись в разных направлениях, но при этом все четыре пейсмекера остались в пределах указанного типа.

Атриальные рабочие кардиомиоциты (AWC). Была сделана одна запись, из которой следует, что эфир янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она в концентрации 5 мг/л в растворе Кребса-Рингера снижает амплитуду потенциала действия (АРА) и dV/dt₀.

Влияние эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она в концентрации 50 мг/л в растворе Кребса-Рингера:

Истинные пейсмекеры (TP). Всего с истинными пейсмекерами получено две записи. При этом изменений электрофизиологических характеристик этих клеток не наблюдалось.

Переходный тип латентных пейсмекеров (TLP). Сделано 5 записей. Из них на основании изменений dV/dt₀, dV/dt₄ и R в одном случае потенциалы действия переходного латентного пейсмекера (TLP) трансформировались в потенциалы действия потенциального истинного пейсмекера (РТР), в одном случае - в потенциалы действия атриального типа пейсмекеров (АТР) (фиг. 7А и 7Б), и в трех случаях - потенциалы действия остались в пределах показателей TLP.

Атриальные рабочие кардиомиоциты (AWC). Была сделана одна запись, из которой следует, что эфир янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она в концентрации 50 мг/л в растворе Кребса-Рингера также как и в концентрации 5 мг/л снижает амплитуду потенциала действия (АРА) и dV/dt₀.

Влияние эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она на клетки синусного узла в концентрации 50 мг/л непосредственно после воздействия этого же вещества в концентрации 5 мг/л (также в растворе Кребса-Рингера):

Истинные пейсмекеры (TP). Всего было сделано две записи истинных пейсмекеров. При этом в обоих случаях значимых изменений характеристик потенциалов действия этих пейсмекеров не наблюдалось.

Потенциальные истинные пейсмекеры (РТР). Была сделана одна запись потенциального истинного пейсмекера. Воздействие эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она в концентрации 5 мг/л привело к трансформации потенциала действия в таковой, присущий истинным пейсмекерам (фиг. 5А и 5Б). Увеличение концентрации исследуемого вещества до 50 мг/л не вызвала дальнейшей трансформации потенциала действия РТР (фиг. 5Б и 5В).

Переходный тип латентных пейсмекеров (TLP). Было сделано две записи переходного типа латентных пейсмекеров. В обоих случаях электрофизиологические характеристики пейсмекеров остались в пределах указанного типа.

Атриальный тип пейсмекеров (АТР). Было сделано две записи атриального типа пейсмекеров. В обоих случаях наблюдалось увеличение амплитуды потенциалов действия (АРА) и снижение dV/dt₄ и изменение потенциалов действия этих клеток в сторону рабочих атриальных кардиомиоцитов (AWC).

Таким образом, эфир янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она в концентрации 5 мг/л в растворе Кребса-Рингера приводит к следующим результатам:

1. Эфир янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она существенно не влияет на электрофизиологические характеристики истинных клеток-водителей ритма (TP), т.е. это воздействие не ведет к эффекту передвижения доминантного пейсмекерного региона, который наблюдается в результате влияния значительного числа факторов: низкая концентрация хлорид ионов в культуральной среде, блокада I_Kr-быстро активирующегося компонента K⁺ тока задержанного выпрямления с помощью Е-4031, блокада - I_to - преходящего тока выходящего направления с помощью 4-АР, низкая концентрация Na⁺ в культуральной среде, низкая концентрация Са²⁺ в культуральной среде, низкая температура культуральной среды, высокая концентрация K⁺ в культуральной среде, парасимпатическая и симпатическая стимуляция, введение в культуральную среду ацетилхолина и норадреналинаили адреналина, электрическая стимуляция, введение в культуральную среду нифедипина - блокатора долго-длящегося высокопорогового медленно инактивирующегося типа кальциевого тока I_Ca,L, введение в культуральную среду сердечных гликозидов [Boyett M.R., Honjo Н., Kodama I. The sinoatrial node, a heterogeneous pacemaker structure. // Cardiovasc. Res., 2000, V. 47, P. 658-687.; Калинина E.E., Сутягин П.В., Пылаев А.С. Миграция доминантного пейсмекерного региона в синусно-предсердном узле крысы. // Бюл. эксперим. биологии и медицины, 1998, Т. 95, №3, С. 337-339.; Сутягин П.В., Калинина Е.Е., Пылаев А.С. Влияние ацетилхолина на параметры функционирования синусно-предсердного узла сердца крыс in vitro. // Бюл. эксперим. биологии и медицины, 2004, Т. 138, №8, С. 218-220.].

2. Формы потенциалов действия потенциальных истинных пейсмекеров (РТР) трансформируются в таковые, присущие истинным клеткам-водителям ритма (TP). Таким образом, идет расширение площади синусного узла, занятой истинными пейсмекерами (TP).

3. Функцию потенциальных истинных пейсмекеров (РТР) частично берут на себя клетки переходного типа латентных пейсмекеров (TLP), некоторое количество которых функционально трансформируются в потенциальные истинные пейсмекеры (РТР).

4. Потенциалы действия клеток переходного типа латентных пейсмекеров (TLP) могут функционально трансформироваться как в потенциалы действия потенциальных истинных пейсмекеров (РТР), так и в потенциалы действия атриального типа пейсмекеров (АТР).

5. Однонаправленное воздействие на атриальный тип пейсмекеров (АТР) отсутствует.

6. У рабочего атриального кардиомиоцита (AWC) отмечается снижение амплитуды потенциала (АРА) действия и dV/dt₀.

Увеличение концентрации эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она до 50 мг/л в растворе Кребса-Рингера приводит к следующим результатам:

1. В популяции истинных пейсмекеров (TP) не происходит значимых изменений электрофизиологических характеристик.

2. Эфир янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она в концентрации 50 мг/л также как и 5 мг/л способен трансформировать в ту или иную сторону потенциалы действия пейсмекеров, рангом ниже истинных.

В качестве препарата сравнения был рассмотрен известный антиаритмический препарат этмозин. Далее представлены результаты сравнительного изучения влияния эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она и этмозина на клетки синусного узла и рабочие атриальные кардиомиоциты.

1. Влияние на истинные пейсмекеры. Эфир янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-онакак в концентрации 5 мг/л, так и 50 мг/л не вызывал выраженных модификаций потенциалов действия истинных пейсмекеров (TP), что также отражалось и в неизменности частоты следования потенциалов действия клеток синусного узла (незначительные флуктуации в разные стороны от 100%) после введения препарата. Этмозин же в концентрации 10 дМ приводил к неуклонному падению частоты следования потенциалов действия атриальных рабочих кардиомиоцитов, что свидетельствует о снижении собственной частоты генерации потенциалов действия истинными пейсмекерами [Золотарев В.И., Мещанинова А.Д., Родина А.С., Липатова В.А., Сутягин П.В. Действие морицизина (этмозина) на тип 1 латентных пейсмекеров синусного узла сердца крысы. // Московский морфологический журнал, 2018, Т. 1, №1, С. 50-55, URL: http://mosmi.ru/1/1/50_55.pdf].

2. Влияние на потенциальные истинные пейсмекеры. Действие эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она в концентрациях 5 мг/л и 50 мг/л приводило как к увеличению радиуса (R) кривизны перехода из фазы 4 в фазу 0 (трансформация потенциалов действия из РТРв TP, фиг. 5А, 5Б и 5В), так и его (R) снижению (из РТР в TLP, фиг. 6А и 6Б), не вызывая, однако, выраженных модификаций формы потенциалов действия этих клеток. Напротив, этмозин в концентрации 10 μМ вызывал не только увеличение радиуса кривизны перехода из фазы 4 в фазу 0 (R), но и отчетливую и нарастающую со временем деформацию потенциалов действия потенциальных истинных пейсмекеров [Золотарев В.И., Мещанинова А.Д., Родина А.С., Липатова В.А., Сутягин П.В. Действие морицизина (этмозина) на тип 1 латентных пейсмекеров синусного узла сердца крысы. // Московский морфологический журнал, 2018, Т. 1, №1, С. 50-55, URL: http://mosmj.ru/1/1/50 55.pdf].

3. Влияние на переходный и атриальный типы латентных пейсмекеров.

Эфир янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она как в концентрации 5 мг/л, так и в концентрации 50 мг/л у части латентных пейсмекеров переходного типа вызывал трансформацию потенциалов действия из TLP в РТР, у части, напротив, из TLP в АТР(фиг. 7А и 7b) и у части TLP - не вызывал значимых изменений в форме потенциалов действия. Этмозин же, в свою очередь, в концентрации 10 μМ вызывал у этих пейсмекеров одновременное снижение амплитуды потенциалов действия (АРА) и dV/dt₀, не вызывая достоверных изменений радиуса кривизны перехода из фазы 4 в фазу 0(R)[Мещанинова А.Д., Золотарев В.И., Родина А.С., Липатова В.А., Сутягин П.В. Действие морицизина (этмозина) на тип 2 латентных пейсмекеров синусного узла сердца крысы. // Московский морфологический журнал, 2018, Т. 1, №1, С. 73-78, URL: http://mosmj.ru/1/1/73_78.pdf]. Следует, однако, отметить, что в значительном числе экспериментов (но не во всех) с эфиром янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она как в концентрации 5 мг/л, так и в концентрации 50 мг/л у истинных, потенциально истинных, промежуточного типа латентных, атриального типа латентных пейсмекеров и рабочих атриальных кардиомиоцитов также отмечалось снижение dV/dt₀.

4. Влияние на атриальные рабочие кардиомиоциты.

Эфир янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она как в концентрации 5 мг/л, так и в концентрации 50 мг/л снижает амплитуду потенциала действия (АРА) и dV/dt₀ атриальных рабочих кардиомиоцитов, совпадая в этом по действию с этмозином в концентрации 10 μМ [Абалаков Г.А., Сутягин П.В. Этмозин способен нарушать электрическую связь между рабочими кардиомиоцитами правого предсердия крыс in vitro. // Бюл. эксперим. биологии и медицины, 2018, Т. 165, №3, С. 325-330.].

5. Остановка ритмической электрической активности кардиомиоцитов синусного узла.

Эфир янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она как в концентрации 5 мг/л, так и 50 мг/л в растворе Кребса-Рингера в двух записях из 32-х вызвал остановку деятельности синусного узла (sinus arrest). Этот эффект развивался в растворе эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она быстро (3 минуты для концентрации 5 мг/л и 12 минут для концентрации 50 мг/л) и также быстро снимался отмывкой препарата интактным раствором Кребса-Рингера (в течение 4 минут для концентрации 5 мг/л и 3 минут для концентрации 50 мг/л). Важно, что после остановки в центральной области синусного узла визуально не наблюдалось сократительной активности миокарда.

Этмозин, в свою очередь, не приводил к потере ритмической электрической активности клеток центральной части синусного узла [Золотарев В.И., Мещанинова А.Д., Родина А.С., Липатова В.А., Сутягин П.В. Действие морицизина (этмозина) на тип 1 латентных пейсмекеров синусного узла сердца крысы. // Московский морфологический журнал, 2018, Т. 1, №1, С. 50-55, URL: http://mosmj.ru/1/1/50_55.pdf], в центральной части синусного узла в ходе экспериментов наблюдались ритмические сокращения. При этом ритмическая активность клеток периферической части узла [Мещанинова А.Д., Золотарев В.И., Родина А.С., Липатова В.А., Сутягин П.В. Действие морицизина (этмозина) на тип 2 латентных пейсмекеров синусного узла сердца крысы. // Московский морфологический журнал, 2018, Т. 1, №1, С. 73-78, URL:http://mosmj.ru/1/1/73_78,pdf] и перинодальных (вокругузловых) рабочих кардиомиоцитов утрачивается [Абалаков Г.А., Сутягин П.В. Этмозин способен нарушать электрическую связь между рабочими кардиомиоцитами правого предсердия крыс in vitro. // Бюл. эксперим. биологии и медицины, 2018, Т. 165, №3, С. 325-330.].

Таким образом, сравнение эффектов эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она и этмозина показало, что в отличие от этмозина, антиаритмическое действие которого, в частности, заключается в ограничении проводимости электрического возбуждения между рабочими атриальными кардиомиоцитами, эфир янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она стабилизирует функциональную активность центральной части синусного узла, не ограничивая проводимость электрического возбуждения по рабочему атриальному миокарду.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Соединение - эфир янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она, зарегистрированное ранее в качестве улучшающего кровоснабжение ишемизированного мозга, обладает выраженной антиаритмической активностью. Это выражается в том, что соединение проявляет антиаритмическое действие у бодрствующих крыс на хлоридкальциевой и аконитиновой моделях аритмий. Эфир янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она, наряду с выраженной антиаритмической активностью, обладает наименьшей токсичностью и превосходит прототип по антиаритмическому индексу на хлоридкальциевой модели в 3,4 раза, анааконитиновой модели аритмий ему не уступает.

Электрофизиологический анализ характеристик пейсмекерных кардиомиоцитов синусного узла сердца крыс in vitro под влиянием эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она позволил установить, что соединение в концентрациях 5 мг/л и 50 мг/л в растворе Кребса-Рингера, расширяя зону, занятую истинными пейсмекерами (TP) за счет потенциальных истинных пейсмекеров (РТР) и сохраняя зону окружающих их потенциальных истинных пейсмекеров (РТР) за счет трансформации потенциалов действия переходного типа латентных пейсмекеров (TLP), стабилизирует функциональную активность центральной части синусного узла, защищая ее от действия эктопических (реентрантных) аритмий всевозможного происхождения. Эфир янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она не оказывает влияния на проведение электрического возбуждения между центральной частью синусного узла, пейсмекерами периферической части узла и рабочими атриальными кардиомиоцитами, сохраняя эти клетки под влиянием центральной части синусного узла и предохраняя их от возможного аритмического влияния патологических очагов эктопической электрической активности. Соединение в отличие от этмозина в большей степени расширяет центральную область синусного узла и, соответственно, оказывает более стабилизирующее воздействие на синусный узел.

Следует также подчеркнуть, что эфир янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она сочетает в себе два положительных свойства - антиаритмическое и цереброваскулярное. Эти свойства соединения могут быть полезными и необходимыми как при лечении пациентов с нарушениями сердечного ритма, которые сочетаются или осложняются цереброваскулярными расстройствами, так и у пациентов с нарушениями мозгового кровообращения, которые сопровождаются аритмиями сердечных сокращений.

Краткое описание чертежей

Фиг. 1. Влияние эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она в дозе 1,0 мг/кг внутривенно на фибрилляцию желудочков сердца, вызванную высокими дозами хлорида кальция.

1А - фибрилляция, вызванная хлоридом кальция (300 мг/кг, внутривенно).

1Б - влияние хлорида кальция на фоне действия соединения.

Сверху вниз: фон, через 30 с, 1, 5, 10, 15 и 20 минут после введения хлорида кальция.

Фиг. 2. Влияние эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она в дозе 5 мг/кг внутривенно на нарушения сердечного ритма, вызванные аконитином.

2А - аритмии, вызванные аконитином (40 мкг/кг).

2Б - влияние аконитина на фоне действия соединения.

Сверху вниз: фон, через 3, 5, 10, 15 и 20 минут после введения аконитина.

Фиг. 3. Основные электрофизиологические характеристики клеток синусного узла сердца крыс.

Ось абсцисс - время, секунда, с; Ось ординат - потенциал мембраны, миллиВольт, мВ.

Фаза 4 - фаза медленной диастолической деполяризации (dV/dt₀);

Фаза 0 - фаза начального быстрого подъема потенциала (dV/dt₄);

АРА (action potential amplitude) - амплитуда потенциала действия (АРА=MDP+OS);

MDP (maximal diastolic potential) - максимальный диастолический потенциал;

OS (overshoot) - реверсия потенциала;

APD₇₀ (action potential duration) - длительность (ширина) потенциала действия на уровне 70% амплитуды потенциала действия;

R - радиус кривизны перехода из фазы 4 в фазу 0.

Фиг. 4. Формы потенциалов действия пейсмекеров (клеток-водителей ритма) и рабочих атриальных кардиомиоцитов синусного узла сердца крыс. Ось абсцисс - время, секунда, с; Ось ординат - потенциал мембраны, миллиВольт, мВ.

4А - истинные пейсмекеры (клетки-водители ритма) (ИП) - TP (True Pacemaker);

4Б - потенциальные истинные пейсмекеры (ПИП) - РТР (Potential True Pacemaker);

4В - переходный тип латентных пейсмекеров (ПТЛП) - TLP (Transitional Latent Pacemaker);

4Г - атриальный тип пейсмекеров (АТП) - АТР (Atrial Type Pacemaker);

4Д - рабочий атриальный кардиомиоцит (РАК) - AWC (Atrial Working Cardiomyocyte).

Фиг. 5. Трансформация потенциала действия потенциального истинного пейсмекера (ПИП, РТР (Potential True Pacemaker)) под воздействием эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она в растворе Кребса-Рингера.

Ось абсцисс - время, секунда, с; Ось ординат - потенциал мембраны, миллиВольт, мВ.

5А. Форма потенциала действия интактного потенциального истинного пейсмекера.

5Б. Форма потенциала действия потенциального истинного пейсмекера в результате воздействия раствора эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она в концентрации 5 мг/л.

5В. Форма потенциала действия потенциального истинного пейсмекера в результате последовательного воздействия раствора эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она в концентрации 50 мг/л.

Фиг. 6. Трансформация потенциала действия потенциального истинного пейсмекера (ПИП, PTP(Potential True Pacemaker)) под воздействием эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она в растворе Кребса-Рингера.

Ось абсцисс - время, секунда, с; Ось ординат - потенциал мембраны, миллиВольт, мВ.

6А. Форма потенциала действия интактного потенциального истинного пейсмекера;

6Б. Форма потенциала действия потенциального истинного пейсмекера в результате воздействия раствора эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она в концентрации 5 мг/л.

Фиг. 7. Трансформация потенциала действия латентного пейсмекера переходного типа (ПТЛП, TLP (Transitional Latent Pacemaker)) под воздействием эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она в растворе Кребса-Рингера.

Ось абсцисс - время, секунда, с; Ось ординат - потенциал мембраны, миллиВольт, мВ.

7А. Форма потенциала действия интактного латентного пейсмекера переходного типа;

7Б. Форма потенциала действия латентного пейсмекера переходного типа в растворе эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она в концентрации 50 мг/л.

Литература

1. Патент РФ на изобретение №2658833.

2. Патент РФ на изобретение, №2547096.

3. Курза Е.В., Авдюнина Н.И., Ганыпина Т.С., Масленников Д.В., Турилова А.И., Пятин Б.М., Грушевская Л.Н., Зайцева Н.М., Большакова Р.Ф., Ковалев Г.И., Васильева Е.В., Мирзоян Р.С. Синтез и цереброваскулярная активность новых производных 5-гидроксиадамантан-2-она. Хим-фарм. журнал, 2018, т. 52, №2, с. 3-7. DOI: 10.30906/0023-1134-2018-52-2-3-7.

4. Каверина Н.В., Лысковцев В.В., Соколов С.Ф., Кищук Е.П. Новый антиаритмический препарат III класса. Фармакологические свойства и электрофизиологический механизм. Вестник аритмологии, 1998, №9, с. 39-42.

5. Турилова А.И., Каверина Н.В., Кацитадзе Н.Ш. Действие новых антиаритмических препаратовШ класса кардиоциклида и нибентана на фоне активации бета-адренореценторов сердца.Эксперим. и клин, фармакол., 2002. Т 65, №5. с. 29-30.

6. Каверина Н.В., Лысковцев В.В., Попова Е.П. Сравнительное изучение электрофизиологических свойств противоаритмических препаратов III класса (кардиоциклид, нибентан, соталол) и их эффективности при фибрилляции предсердий, вызванной стимуляцией блуждающего нерва. Эксперим. и клин, фармакол., 2007, т.70, №1, с. 11-16.

7. Глушков Р.Г., Южаков С.Д., Львов А.И. и др. Новая группа антиаритмических средств III класса- производных пиперидил-4-этана. Химико-фармацевтический журнал, 2011, т.45, №2, с. 3-12.

8. Camm A.J., Capucci A., Hohnloser S. et al. A randomized activecontrolled study comparing the efficacy and safety of vernakalant to amiodarone in recent onset atrial fibrillation. J. Am.Coll. Cardiol, 2011, v.57, №3, p. 313-321.

9. Майков Е.Б., Юричева Ю.А., Миронов Н.Ю., Соколов С.Ф., Голицын С.П., Розенштраух Л.В., Чазов Е.И. Рефралон (ниферидил) - новый антиаритмический препарат Шкласса для медикаментозной кардиоверсии персистирующей фибрилляции и трепетания предсердий. Терапевтический архив, 2015, №1, с. 38-48.

10. Резник А.В., Федоров В.В., Розенштраух Л.В., Кокоз Ю.М. и др. Ионные механизмы кардиотропного действия препарата III класса РГ-2. Кардиология, 2003, №10, с. 76-81.

11. Миронов Н.Ю., Голицын С.П., Соколов С.Ф. и др. Электрофизиологические эффекты и противоаритмическая активность нового отечественного антиаритмического препарата III класса ниферидила у больных пароксизмальными наджелудочковыми тахикардиями. Эксперим. и клин. фармакол., 2012, т.75, №10, с. 16-21.

12. Недоступ А.В., Благова О.В. Принципы комбинированной антиаритмической терапии. Русский мед. журнал, 2005, №11, с. 767-774.

13. Недоступ А.В. Вопросы стратегии терапии аритмий сердца. Русский мед. журнал, Кардиология, 2008, т.16, №6, с. 431-435.

14. Майков Е.Б., Юричева Ю.А., Миронов Н.Ю., Соколов С.Ф., Голицын С.П., Розенштраух Л.В., Чазов Е.И. Рефралон (ниферидил)-новый антиаритмический препарат III класса для медикаментозной кардиоверсии персистирующей фибрилляции и трепетания предсердий. Терапевтический архив, 2015, №1, с. 38-48, doi: 10.17116/terarkh201587138-48.

15. Машковский М.Д. Лекарственные средства, Москва, Изд-во «Новая волна», 2000.

16. Pollard С.Е., AbiGerges N., Bridgland-Taylor M.H., Easter A., Hammond T.G., Valentin J.P. An introduction to QT interval prolongation and nonclinical approaches to assessing and reducing risk. Br. J. Pharmacol., 2010, v. 159, N1, p. 12-21.

17. Турилова А.И., Авдюнина Н.И., Пятин Б.М., Ганьшина Т.С., Грушевская Л.Н., Мирзоян Р.С. Поиск антиаритмических средств среди производных адамант-2-ил-амидов алкиламинокарбоновых кислот. Эксперим. и клин, фармакол., 2013, т. 76, №8, с. 20-23.

18. Авдюнина Н.И., Турилова А.И., Ганьшина Т.С., Мирзоян Р.С., Грушевская Л.Н., Зайцева Н.М., Пятин Б.М. Синтез и антиаритмическая активность N-[2-(адамант-2-ил)-аминокар-бонилметил]-N'(диалкиламино)алкилнитробензамидов. Хим-фарм. журнал, 2019, т. 53, №1, с. 24-29. DOI: 10.30906/0023-1134-2019-53-1-24-29.

19. Галенко-Ярошевский П.А., Каверина Н.В., Камкин А.Г., Турилова А.И., Богус С.К., Шейх-заде Ю.Р. Методические рекомендации по доклиническому изучению антиаритмических лекарственных средств. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая, - М., Гриф и К, 20126, с. 385-387.

20. Нинидзе И.Г., Турилова А.И., Бердяев С.Ю. Новый антиаритмический препарат боннекор(фармакология и клиническое применение): Сб. тр. / НИИ фармакологии РАМН; Под ред. Н.В. Кавериной, Г.Г. Чичканова. - М.: ВИНИТИ, 1993, 124-127.

21. Каверина Н.В., Лысковцев В.В., Соколов С.Ф., Кищук Е.П. Новый антиаритмический препарат III класса. Фармакологические свойства и электрофизиологический механизм. Вестник аритмологии, 1998, №9, с. 39-42.

22. Турилова А.И., Бердяев С.Ю., Гриценко А.Н., Сенова З.П. Связь между химической структурой и антиаритмическим действием этацизина и его аналогов. Фармакол. и токсикол., 1990, т. 53, №6, с. 20-21.

23. Bleeker W.K., Mackaay A.J.C., Masson-Pevet M., Bouman L.N., Becker A.E. Functional and morphological organization of the rabbit sinus node. Circ. Res., 1980, V. 46, N 1, P. 11-22.

24. Родина A.C., Шагалеева О.Ю., Золотарев В.И., Мещанинова А.Д., Тихонова Т.А., Сутягин П.В. Распределение клеток-водителей ритма и рабочих кардиомиоцитов в области синусного узла сердца крыс. // Московский морфологический журнал, 2019, Т. 4, №3. С. 113-119, URL: http://mosmi.ru/4/3/113-119.pdf

25. Шагалеева О.Ю., Родина А.С., Золотарев В.И., Мещанинова А.Д., Тихонова Т.А., Сутягин П.В. Сравнение распределений клеток-водителей ритма и рабочих кардиомиоцитов эпикардиальной и эндокардиальной поверхностей области синусного узла сердца крыс. // Московский морфологический журнал, 2019, Т. 4, №3. С.139-144, URL:http://mosmj.ru/4/3/139-144.pdf

26. Dobrzynski Н., Boyett M.R., Anderson R.H. New insights into pacemaker activity: promoting understanding of sick sinus syndrome. // Circulation, 2007, V. 115, N 14, P. 1921-1932.

27. Satoh H. Sino-atrial nodal cells of mammalian hearts: ionic currents and gene expression of pacemaker ionic channels. // J. Smooth Muscle Res., 2003, V. 39, N5, P. 175-193.

28. Boyett M.R., Honjo H., Kodama I. The sinoatrial node, a heterogeneous pacemaker structure. // Cardiovasc. Res., 2000, V. 47, P. 658-687.

29. Сутягин П.В. Морфологический анализ взаимоотношений миоцитов в синусно-предсердном узле сердца крыс. // Бюл. эксперим. биологии и медицины, 2009, Т. 148, №11, С. 589-592.

30. Павлович Е.Р. Количественный ультраструктурный анализ проводящей системы сердца крысы. // В книге: «Ультраструктура сердца» под редакцией Шарова В.Г. и Иргашева Ш.Б., Ташкент, 1988, С.13-25.

31. Boyett M.R., Honjo H., Kodama I. The sinoatrial node, a heterogeneous pacemaker structure. // Cardiovasc. Res., 2000, V. 47, P. 658-687.

32. Калинина E.E., Сутягин П.В., Пылаев A.C. Миграция доминантного пейсмекерного региона в синусно-предсердном узле крысы. // Бюл. эксперим. биологии и медицины, 1998, Т. 95, №3, С. 337-339.

33. Сутягин П.В., Калинина Е.Е., Пылаев А.С. Влияние ацетилхолина на параметры функционирования синусно-предсердного узла сердца крыс in vitro. // Бюл. эксперим. биологии и медицины, 2004, Т. 138, №8, С. 218-220.

34. Абалаков Г.А., Сутягин П.В. Этмозин способен нарушать электрическую связь между рабочими кардиомиоцитами правого предсердия крыс in vitro. // Бюл. эксперим. биологии и медицины, 2018, Т. 165, №3, С. 325-330.

35. Золотарев В.И., Мещанинова А.Д., Родина А.С., Липатова В.А., Сутягин П.В. Действие морицизина (этмозина) на тип 1 латентных пейсмекеров синусного узла сердца крысы. // Московский морфологический журнал, 2018, Т. 1, №1, С. 50-55, URL: http://mosmj.ru/1/1/50_55.pdf.

36. Мещанинова А.Д., Золотарев В.И., Родина А.С., Липатова В.А., Сутягин П.В. Действие морицизина (этмозина) на тип 2 латентных пейсмекеров синусного узла сердца крысы. // Московский морфологический журнал, 2018, Т. 1, №1, С. 73-78, URL: http://mosmj.ru/1/1/73_78.pdf.

Применение эфира янтарной кислоты 5-гидроксиадамантан-2-она в качестве средства, препятствующего развитию нарушений сердечного ритма и стабилизирующего функциональную организацию кардиомиоцитов синусного узла.