2-амино-1-бензамидо-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1н-пиррол-3-карбоксамид, вызывающий нарушения фаз клеточного цикла и проявляющий цитотоксическую активность в отношении сарком мягких тканей и гастроинтестинальных стромальных опухолей (гисо)



2-амино-1-бензамидо-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1н-пиррол-3-карбоксамид, вызывающий нарушения фаз клеточного цикла и проявляющий цитотоксическую активность в отношении сарком мягких тканей и гастроинтестинальных стромальных опухолей (гисо)
2-амино-1-бензамидо-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1н-пиррол-3-карбоксамид, вызывающий нарушения фаз клеточного цикла и проявляющий цитотоксическую активность в отношении сарком мягких тканей и гастроинтестинальных стромальных опухолей (гисо)
2-амино-1-бензамидо-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1н-пиррол-3-карбоксамид, вызывающий нарушения фаз клеточного цикла и проявляющий цитотоксическую активность в отношении сарком мягких тканей и гастроинтестинальных стромальных опухолей (гисо)
2-амино-1-бензамидо-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1н-пиррол-3-карбоксамид, вызывающий нарушения фаз клеточного цикла и проявляющий цитотоксическую активность в отношении сарком мягких тканей и гастроинтестинальных стромальных опухолей (гисо)
2-амино-1-бензамидо-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1н-пиррол-3-карбоксамид, вызывающий нарушения фаз клеточного цикла и проявляющий цитотоксическую активность в отношении сарком мягких тканей и гастроинтестинальных стромальных опухолей (гисо)
2-амино-1-бензамидо-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1н-пиррол-3-карбоксамид, вызывающий нарушения фаз клеточного цикла и проявляющий цитотоксическую активность в отношении сарком мягких тканей и гастроинтестинальных стромальных опухолей (гисо)
2-амино-1-бензамидо-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1н-пиррол-3-карбоксамид, вызывающий нарушения фаз клеточного цикла и проявляющий цитотоксическую активность в отношении сарком мягких тканей и гастроинтестинальных стромальных опухолей (гисо)
2-амино-1-бензамидо-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1н-пиррол-3-карбоксамид, вызывающий нарушения фаз клеточного цикла и проявляющий цитотоксическую активность в отношении сарком мягких тканей и гастроинтестинальных стромальных опухолей (гисо)
2-амино-1-бензамидо-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1н-пиррол-3-карбоксамид, вызывающий нарушения фаз клеточного цикла и проявляющий цитотоксическую активность в отношении сарком мягких тканей и гастроинтестинальных стромальных опухолей (гисо)
2-амино-1-бензамидо-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1н-пиррол-3-карбоксамид, вызывающий нарушения фаз клеточного цикла и проявляющий цитотоксическую активность в отношении сарком мягких тканей и гастроинтестинальных стромальных опухолей (гисо)
2-амино-1-бензамидо-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1н-пиррол-3-карбоксамид, вызывающий нарушения фаз клеточного цикла и проявляющий цитотоксическую активность в отношении сарком мягких тканей и гастроинтестинальных стромальных опухолей (гисо)

Владельцы патента RU 2765545:

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Казанский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Пермская государственная фармацевтическая академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к применению 2-амино-1-бензамидо-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1Н-пиррол-3-карбоксамида I указанной ниже формулы для получения лекарственного противоопухолевого препарата. Соединение проявляет цитотоксическую активность в отношении сарком мягких тканей и гастроинтестинальных стромальных опухолей. 3 ил., 2 табл.

 

Изобретение относится к области медицины, производным пиррола, а именно новому биологически активному 2-амино-1-бензамидо-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1Н-пиррол-3-карбоксамиду (2-АБПК) I формулы:

который может найти применение в медицине в качестве лекарственного противоопухолевого препарата.

Ближайшим структурным аналогом к заявленному соединению являются соединения общей формулы II, проявляющие противоопухолевую активность этиловые эфиры 2-амино-1-бензоиламино-4-оксо-5-(2-оксо-2-арил-этилиден)-4,5-дигидро-1Н-пирролидин-3-карбоновых кислот [Патент №2607920 Российская Федерация, МПК C07D 417/00, А61К 31/195. Этиловые эфиры 2-амино-1-бензоиламино-4-оксо-5-(2-оксо-2-арил-этилиден)-4,5-дигидро-1Н-пирролидин-3-карбоновых кислот, проявляющие противоопухолевую активность, и способ их получения: №2015120527: заявл. 29.05.2015: опубл. 11.01.2017 / С.С. Зыкова, Н.М. Игидов, М.В. Киселев, С.В. Бойчук, А.Р. Галембикова]:

В качестве эталона сравнения нами взят противоопухолевый препарат - паклитаксел [Патент №2059631, МПК C07D 305/14, А61K 31/195. Производные таксола и фармацевтическая композиция, обладающая противоопухолевой активностью: №91 5010248: заявл. 29.11.1991: опубл. 10.05.1996 / Валентине Дж. Стелла, Абрахам Е. Мэтью].

Заявляемое соединение 2-АБПК в тесте острой токсичности на мышах при внутрибрюшинном введении в виде суспензии в 2% крахмальной слизи имеет токсичность более 1000 мг/кг [Колла В.Э., Сыропятов Б.Я. Дозы лекарственных средств и химических соединений для лабораторных животных, М.: Медицина. - 1998. - 263 с.].

Целью предлагаемого изобретения является синтез нового, ранее не описанного 2-амино-1-бензамидо-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1Н-пиррол-3-карбоксамида (2-АБПК) (I) проявляющего цитотоксическую активность в отношении сарком мягких тканей и гастроинтестинальных стромальных опухолей (ГИСО).

Поставленная цель достигается получением 2-амино-1-бензамидо-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1Н-пиррол-3-карбоксамида (I) взаимодействием N-(5-(трет-бутил)-2-оксофуран-3(2Н)-илиден)бензогидразида (II) с цианоацетамидом в присутствии триэтиламина в среде толуола по схеме:

Методика получения 2-амино-1-бензамидо-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1Н-пиррол-3-карбоксамида (I). Смесь 1.36 г (0.005 моль) N-(5-(трет-бутил)-2-оксофуран-3(2Н)-илиден)бензогидразида (II), 0.42 г (0.005 моль) цианоацетамида и 0.5 г (0.005 моль) триэтиламина кипятили в 60 мл бензола в течение 25 минут. Выпавший при охлаждении осадок отфильтровывали и перекристаллизовывали из этанола. Получали 0.99 г (выход 56%) кристаллического вещества (I) с Тпл 230-231°С. C18H20N4O4. ИК-спектр, v/см-1, вазелиновое масло: 3408 (NH), 3318 (NH), 3204 (NH), 1679 (С=O), 1648 (С=O), 1591 (С=С). Спектр ЯМР 1Н (ДМСО-d6), δ, м.д.: 1.02 с (9Н, С(СН3)3), 6.42 с (1Н, СН), 7.01 уш. с (1H, NH), 7.34 уш. с (1Н, NH), 7.65 м (5Н, аром.), 8.70 уш. с (1Н, NH), 9.15 с (1H, NH), 10.86 с (1Н, NH).

Спектр ЯМР 13С, δ, м.д., ДМСО-d6: 25.98, 87.47, 101.80, 128.02, 128.05, 131.16, 132.08, 141.20, 164.90, 165.52, 167.01, 179.99, 204.57.

Масс-спектр, m/z (Iотн., %): 356 (74.7) [М]+., 300 (19.2) [М-2СО)]+, 299 (38.9) [М- t-BuCO]+, 282 (23.7) [М-2СО-Н2O]+, 271 (12.0) [M-t-BuCO]+, 105 (100.0) [PhCO]+, 77 (20.9) [Ph]+, 271 (14.3) [t-Bu]+.

Заявляемое соединение представляет собой светло-желтое кристаллическое вещество, растворимое в ДМСО, ДМФА, уксусной кислоте, при нагревании - в этиловом спирте, устойчивое при хранении.

Изобретение подтверждается следующими графическими материалами, на которых представлено:

На фиг. 1 - микрофотографии клеток ГИСО (GIST T1-R), проинкубированных с 2-АБПК (10 μМ) и паклитакселом (1 μМ) в течение 24 часов.

На фиг. 2 - расщепленные формы каспазы-3 и ПАРП, фосфорилированные формы гистонов 2АХ и 3 в клеточных линиях GIST Т1-IM-R (левая панель) и SK-LMS-1 (правая панель), инкубированных в течение 48 часов с 2-АБПК (5 и 10 μМ), паклитакселом (1 μМ) и винбластином (0,01 μМ). В качестве контроля загрузки использовался β-актин.

На фиг. 3 - гистограммы проточной цитометрии клеточного цикла линии GIST T1-IM-R, инкубированных с 2-АБПК (10 μМ) и паклитакселом (1 μМ) в течение 48 часов.

По результатам микроскопии клеточных линий сарком мягких тканей, в том числе лейомиосаркомы, рабдомиосаркомы, фибросаркомы (SK-LMS-1, RD, НТ1080, соответственно), и ГИСО (GIST T1-R) было выявлено следующее морфологическое изменение - переход формы клеток на округлую. Это может свидетельствовать о задержке клеток в фазе митоза. Соответствующие изменения были обнаружены при инкубации клеток с паклитакселом (препарат сравнения), который инициирует гибель клеток по механизму апоптоза (Фиг. 1).

Половинные ингибирующие концентрации (IC50) для 2-АБПК, определенные с помощью MTS-теста в отношении клеточных линий сарком мягких тканей (SK-LMS-1, RD, НТ1080), а также наивных, иматиниб- и паклитаксел-резистентных клеточных линий ГИСО (GIST T1, GIST T1-R, GIST 430 и GIST Tx-R) и нетрансформированных фибробластов человека (ВJ tert) представлены в табл.1. Большая цитотоксическая активность исследуемого соединения в отношении ряда опухолевых клеточных линий, в том числе паклитаксел-резистентных ГИСО, по сравнению с нетрансформированными фибробластами человека свидетельствует о широком терапевтическом окне 2-АБПК, что делает его потенциальным кандидатом для терапии опухолей с приобретенной резистентностью к паклитакселу.

Гибель клеток по механизму апоптоза была подтверждена методом иммуноблоттинга, о чем свидетельствовали повышенные уровни расщепленных форм каспазы-3 и поли-АДФ-рибоза-полимеразы (ПАРП) в клеточных линиях GIST T1-IM-R и SK-LMS-1, обработанных 2-АБПК, паклитакселом и винбластином (положительный контроль). Важно отметить, что выраженность апоптоза, вызванного 2-АБПК, была существенно выше по сравнению с паклитакселом и винбластином. Апоптоз клеток, инкубированных с 2-АБПК, может быть вызван либо индукцией двухцепочечных разрывов ДНК, что доказывает повышенный уровень фосфорилированной формы гистона 2АХ (Фиг. 2, левая панель), либо явлением «митотической катастрофы», маркером которой является повышение уровня фосфорилированной формы гистона 3. (Фиг. 2, правая панель).

С помощью проточной цитометрии (Flow Cytometer BD FACSCanto II) был произведен анализ клеточного цикла клеток GIST T1-IM-R. Таким образом, в образцах, инкубированных 48 часов с 2-АБПК и паклитакселом (положительный контроль) было обнаружено повышенное количество гиподиплоидных клеток (subG1), что свидетельствуют о проапоптотической активности 2-АБПК.

Репрезентативные гистограммы проточной цитометрии (Фиг. 3) иллюстрируют распределение клеточного цикла GIST T1-IM-R, инкубированных с 2-АБПК (10 μМ) и паклитакселом (1 μМ) в течение 48 часов. Эксперимент был выполнен трехкратно, в каждом случае было подсчитано не менее 150000 клеток. Об апоптозе клеток, инкубированных в присутствии 2-АБПК и паклитакселом, свидетельствует пик subG1 (отмечен стрелкой). Результаты количественной оценки приведены в таблице 2.

Таким образом, результаты проведенных исследований указывают на то, что 2-АБПК проявляет цитотоксическую и проапоптотическую активность в отношении сарком мягких тканей и гастроинтестинальных стромальных опухолей (ГИСО).

Применение 2-амино-1-бензамидо-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1Н-пиррол-3-карбоксамида I формулы

для получения лекарственного противоопухолевого препарата.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к новому 2-амино-1-бензамидо-5-[2-(нафталин-1-ил)-2-оксоэтилиден]-4-оксо-4,5-дигидро-1Н-пиррол-3-карбоксамиду формулы I, обладающему цитотоксическими и проапоптогенными свойствами в отношении клеток солидных опухолей человека, в том числе резистентных к химиопрепаратам. Технический результат: получено новое соединение, проявляющее противоопухолевую активность и низкую токсичность.

Изобретение относится к новым соединениям общей формулы Iа-г, где R=СН3O (Iа), С2Н5O (Iб), Br (Iв), Cl (Iг), которые обладают противоопухолевой активностью. Также предложен способ получения соединений формулы Iа-г и их применение для получения лекарственных препаратов для лечения онкологических заболеваний.

Изобретение относится к соединениям для лечения клеточно-пролиферативных нарушений, имеющих формулу (II): где значения R1, R2 , X, А, В, R6, R7, R9 указаны в пункте 1 формулы, за исключением соединения формулы: 4 н. .

Изобретение относится к новым замещенным циклоалкеновым производным формулы (I) в которой X и Y представляют собой группу, в которой Х и Y вместе с атомом углерода кольца В, к которому они присоединены, образуют кольцо А, Х и Y вместе представляют заместитель кольца В или Х и Y каждый представляет собой атом водорода.

Изобретение относится к применению дигидробромида 2-(3,4-дигидроксифенил)-9-диэтиламиноэтилимидазо[1,2-a]бензимидазола в качестве средства, обладающего противоопухолевым действием в отношении эпидермоидной карциномы легких Льюиса (LLC). 1 табл.

Группа изобретений относится к способу ингибирования роста TIGIT-экспрессирующей опухоли у субъекта, включающему введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества антитела, которое специфично связывает внеклеточный домен TIGIT человека, при этом TIGIT-экспрессирующая опухоль представляет собой колоректальный рак с высокой микросателлитной нестабильностью, микросателлитно-стабильный колоректальный рак, трижды негативный рак молочной железы, карциному из клеток Меркеля, рак эндометрия или рак пищевода; и при этом антитело, которое связывает TIGIT человека, содержит CDR1 тяжелой цепи, содержащий последовательность TSDYAWN (SEQ ID NO: 4), CDR2 тяжелой цепи, содержащий YISYSGSTSYNPSLRS (SEQ ID NO: 5), CDR3 тяжелой цепи, содержащий ARRQVGLGFAY (SEQ ID NO: 6), CDR1 легкой цепи, содержащий KASQDVSTAVA (SEQ ID NO: 7), CDR2 легкой цепи, содержащий SASYRYT (SEQ ID NO: 8), и CDR3 легкой цепи, содержащий QQHYSTP (SEQ ID NO: 9), также относится к способу ингибирования роста TIGIT-экспрессирующей опухоли у субъекта, включающему введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества антитела, которое специфично связывает внеклеточный домен TIGIT человека, в комбинации с антагонистом PD-1 или антагонистом PD-L1, также относится к способу ингибирования роста TIGIT-экспрессирующей опухоли у субъекта, включающему введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества антитела, которое специфично связывает внеклеточный домен TIGIT человека, в комбинации с антагонистом PD-1 или антагонистом PD-L1, при этом указанная TIGIT-экспрессирующая опухоль устойчива или рефрактерна к лечению антагонистом PD-1 или антагонистом PD-L1 в виде отдельного агента или где указанный субъект ранее получал лечение антагонистом PD-1 или антагонистом PD-L1 в виде отдельного агента, также относится к способу ингибирования роста TIGIT-экспрессирующей опухоли у субъекта, включающему введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества антитела, которое специфично связывает внеклеточный домен TIGIT человека, при этом указанная TIGIT-экспрессирующая опухоль экспрессирует рецептор полиовируса (PVR) и/или подобный рецептору полиовируса белок 2 (PVRL2), а также относится к способу ингибирования роста TIGIT-экспрессирующей опухоли у субъекта, включающему введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества антитела, которое специфично связывает внеклеточный домен TIGIT человека, в комбинации с антагонистом PD-1 или антагонистом PD-L1, при этом указанная TIGIT-экспрессирующая опухоль экспрессирует рецептор полиовируса (PVR) и/или подобный рецептору полиовируса белок 2 (PVRL2), или указанная TIGIT-экспрессирующая опухоль содержит инфильтрирующие опухоль лимфоциты (ИОЛ), или указанная TIGIT-экспрессирующая опухоль содержит регуляторные T-клетки.

Изобретение относится к области фармацевтической химии, а именно к соединению формулы (Ib) или его фармацевтически приемлемой соли. Где в формуле (Ib) m представляет собой 1 или 2; R выбран из группы, состоящей из: (a) -(C=O)-(NH)q-Rc, где q представляет собой 0 или 1; и Rc выбран из группы, состоящей из: (i) водорода, (ii) -C1-4алкила, необязательно замещенного одним-двумя -OH, (iii) -C3-6циклоалкила, необязательно замещенного -OH; (b) -S(O)2-NH2; и (c) -S(O)2-C1-4алкила; R1 независимо выбран из (a) водорода и (b) галогена; и R2 независимо выбран из (a) водорода и (b) –OH.

Изобретение относится к области биотехнологии. Описана группа изобретений, включающая антитело против B7-H3 или его антигенсвязывающий фрагмент, фармацевтическую композицию для лечения заболеваний, ассоциированных с B7-H3 позитивными клетками, молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую вышеуказанное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, рекомбинантный вектор для экспрессии антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, клетку-хозяин, трансформированную рекомбинантным вектором, для экспрессии антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, способ получения антитела или его антигенсвязывающего фрагмента и способ лечения заболеваний, связанных с B7-H3 позитивными клетками.
© Патентный поиск, поиск патентов на изобретения - FindPatent.RU 2012-2024
Политика конфиденциальности 2020-10-12 2022-02-23T14:59:55
Наверх