Производные 2-(пирано[3,2-c]хромен-5-ил)уксусной кислоты и способ их получения

Авторы патента:

Яковлев Игорь Павлович (RU)

Чернов Никита Максимович (RU)

Шутов Роман Вадимович (RU)

G01N33/52 - использование соединений или составов для колориметрического, спектрофотометрического или флуорометрического анализа, например реактивной бумаги

C09B57/00 - Прочие синтетические красители известного строения

C07D493/04 - орто-конденсированные системы

Владельцы патента RU 2775546:

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Санкт-Петербургский государственный химико-фармацевтический университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО СПХФУ Минздрава России) (RU)

Изобретение относится к ряду новых полифункциональных гетероциклических соединений - производным 2-(пирано[3,2-с]хромен-5-ил)уксусной кислоты Ia-ф и способу их получения, заключающемуся во взаимодействии 3-винилхромонов и цианацетамида в этаноле при температуре 20°С при катализе третичными аминами - триэтиламином (TEA) или основанием Хюнига (диизопропилэтиламин, DIPEA). Технический результат: получены новые производные 2-(пирано[3,2-с]хромен-5-ил)уксусной кислоты Ia-ф, обладающие флуоресцентными свойствами, которые могут быть использованы в качестве флуоресцентных красителей и зондов. 2 н. и 1 з.п. ф-лы, 1 табл., 21 пр.

, где

Группа изобретений относится к области органической химии и химии красителей, а именно к ряду новых полифункциональных гетероциклических соединений - производным 2-(пирано[3,2-с]хромен-5-ил)уксусной кислоты Iа-ф, которые могут быть использованы в органическом синтезе как полупродукты и в биохимических исследованиях в качестве флуоресцентных красителей и зондов, и к способу их получения.

где:

В научно-технической литературе представлено сравнительно немного способов синтеза пирано[3,2-с]хроменов, не имеющих оксогруппы в положении 5. В основном они построены на (4+2)-циклоконденсации 3-формилхромонов II с СН-кислотными соединениями. Так, реакция 3-формилхромонов II с фенилуксусными кислотами III в присутствии ацетата калия и уксусного ангидрида приводит к образованию пирано[3,2-с]хроменов IV с выходами 73-83% [, М. A facile route to phenyl, phenylsylfanyl and phenylselanyl substituted pyrano[3,2-c]chromenes / M. , R. , P. , A. , H.M. El-Shaaer // Tetrahedron. - 2010. - Vol.66. - P. 1410-1419].

Также известно взаимодействие 3-формилхромонов II с тиазинами V при катализе пиридином (Ру) в среде тетрагидрофурана (THF) [Shutov, R.V. А study of the reactions of 2-aryl-4-hydroxy-6H-1,3-thiazin-6-ones with chromone-3-carboxaldehydes / R.V. Shutov, E.V. Kuklina, B.A. Ivin // Tetahedron Letters. - 2011. - Vol. 52. - P. 266-269]. Одним из продуктов в этой реации являются пирано[3,2-с]хромены VI, выделяемые с выходом 33-65%. Данный синтез осложняется образованием двух побочных продуктов - пирано[2,3-d][1,3]тиазинов и хромонилакриловых кислот.

Нами же предлагается использовать для рециклизации хромонов в пирано[3,2-с]хромены цианацетамид VII, который хорошо зарекомендовал себя как структурный блок для построения кумаринов за счет гладко протекающего присоединения O-нуклеофилов по нитрильной группе [Gyuris, М. Synthesis of 2-amino-3-cyano-4H-chromene-4-carboxamide derivatives by an isocyandide-based domino conjugate addition/O-trapping rearrangement sequence / M. Gyuris, R. , L.G. , G.K. , J. , I. Kanizsai // European Journal of Organic Chemistry. - 2010. - Vol. 2010. - P. 848-851].

Таким образом, задачей предлагаемой группы изобретений является создание ряда неописанных в литературе производных 2-(пирано[3,2-с]хромен-5-ил)уксусной кислоты Iа-ф.

Техническими результатами, на решение которых направлена группа изобретений, являются получение ряда новых полифункциональных гетероциклических соединений (Ia-ф), обладающих флуоресцентными свойствами; простой и эффективный способ их получения из электронодефицитных 3-винилхромонов VIIIa-ф и цианацетамида VII.

Согласно разработанному способу получения взаимодействие 3-винилхромонов VIIIa-ф и цианацетамида VII протекает в этаноле при мольном соотношении 1:1,5 соответственно при температуре 20°С и при катализе третичными аминами - триэтиламином (TEA) или основанием Хюнига (диизопропилэтиламин, DIPEA), применяемыми в количестве 1,5-7,5 эквивалентов.

По завершении реакции проводится очистка реакционной массы от побочно образующихся хромено[4,3-b]пиридинов подкислением уксусной кислотой [Chernov, N.M. A flexible synthetic approach to fluorescent chromeno[4,3-b]pyridines and pyrano[3,2-c]chromenes from electron-deficient 3-vinylchromones / N.M. Chernov, R.V. Shutov, N.Yu. Sipkina, M.N. Krivchun, I.P. Yakovlev // ChemPlusChem. - 2021. - Vol. 86. - P. 1256-1266]. Выделение индивидуальных продуктов Ia-ф затем выполняется путем закисления реакционной массы соляной кислотой с последующим кипячением реакционной массы для гидролиза промежуточно образующихся иминов пирано[3,2-с]хроменов. Выход соединений Ia-ф составляет 23-66%.

Разработанный способ получения производных 2-(пирано[3,2-с]хромен-5-ил)уксусной кислоты Ia-ф изучен и проверен в лабораторных условиях. Структура и чистота полученных продуктов установлены методами спектроскопии ЯМР ¹Н, ¹³С и масс-спектрометрии высокого разрешения (HRMS-ESI). Изучение фотофизических свойств соединений Ia-ф показало их способность к флуоресценции в желто-зеленой области спектра (485-570 нм).

Предлагаемая группа изобретений проиллюстрирована примерами практического осуществления.

Пример 1. Получение этил-2-(3-карбамоил-2-оксо-9-хлор-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-5-ил)ацетата (Iа).

Смесь этил-3-(6-хлор-4-оксо-4H-хромен-3-ил)акрилата VIIIa (556 мг, 2 ммоль), цианацетамида VII (252 мг, 3 ммоль) и TEA (303 мг, 3 ммоль) в 10 мл этанола перемешивают при 20°С в течение суток. Затем реакционную массу подкисляют ледяной уксусной кислотой (0,5 мл), отфильтровывают выпавший осадок побочного продукта. К фильтрату добавляют соляную кислоту (0,5 мл), кипятят реакционную массу полчаса и охлаждают. Далее отфильтровывают выпавший осадок продукта, промывают этанолом и сушат. Получают 415 мг (выход 57%) соединения Iа в виде желто-зеленого порошка с Т_пл. 203-204°С. Спектр ЯМР ¹Н (400 МГц, ДМСО-d₆): δ_H (м.д.) 1.16 (t, J=7.0 Hz, 3Н, СН₃СН₂), 2.92 (dd, J=8.0, 15.8 Hz, 1Н, H-2'a), 2.98 (dd, J=5.0, 15.8 Hz, 1H, H-2'b), 4.04-4.12 (m, 2H, CH₃CH₂), 5.88 (dd, J=5.0, 8.0 Hz, 1H, H-5), 7.00 (d, J=8.8 Hz, 1H, H-7), 7.50 (dd, J=2.5, 8.8 Hz, 1H, H-8), 7.57 (d, J=2.5 Hz, 1H, H-10), 7.88 (br. s, 1H, NH), 7.94 (br. s, 1H, NH), 8.39 (s, 1H, H-4). Спектр ЯМР ¹³C (100 МГц, ДМСО-d₆): δ_C (м.д.) 14.45 (CH₂CH₃), 39.36 (С-2'), 60.81 (СН₂СН₃), 73.13 (С-5), 110.85 (С-4а), 116.78 (С-10а), 117.37 (С-3), 119.92 (С-7), 122.92 (С-10), 126.77 (С-9), 134.04 (С-8), 146.77 (С-4), 152.99 (С-10b), 153.48 (С-6а), 160.64 (CONH₂), 162.82 (С-2), 169.49 (С-1'). Масс-спектр HRMS-ESI: m/z [M+Na]⁺ вычислено для C₁₇H₁₄ClNO₆: 386.0402; найдено: 386.0408.

Пример 2. Получение этил-2-(3-карбамоил-2-оксо-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-5-ил)ацетата (Iб).

Смесь этил-3-(4-оксо-4H-хромен-3-ил)акрилата VIIIб (488 мг, 2 ммоль), цианацетамида VII (252 мг, 3 ммоль) и TEA (303 мг, 3 ммоль) в 10 мл этанола перемешивают при 20°С в течение суток. Затем реакционную массу подкисляют ледяной уксусной кислотой (0,5 мл), отфильтровывают выпавший осадок побочного продукта. К фильтрату добавляют соляную кислоту (0,5 мл), кипятят реакционную массу полчаса и охлаждают. Далее отфильтровывают выпавший осадок продукта, промывают этанолом и сушат. Получают 315 мг (выход 48%) соединения 16 в виде желто-зеленого порошка с Т_пл. 195-197°С. Спектр ЯМР ¹Н (400 МГц, ДМСО-d₆): δ_H (м.д.) 1.16 (t, J=7.1 Hz, 3Н, СН₃СН₂), 2.90 (dd, J=8.2, 15.6 Hz, 1H, H-2'a), 2.96 (dd, J=4.9, 15.6 Hz, 1H, H-2'b), 4.03-4.12 (m, 2H, CH₃CH₂), 5.85 (dd, J=4.9, 8.2 Hz, 1H, H-5), 6.97 (d, J=8.3 Hz, 1H, H-7), 7.14 (pseudo t, J=7.6 Hz, 1H, H-9), 7.48 (pseudo t, J=8.0 Hz, 1H, H-8), 7.65 (d, J=7.7 Hz, 1H, H-10), 7.84 (br. s, 1H, NH), 7.96 (br. s, 1H, NH), 8.39 (s, 1H, H-4). Спектр ЯМР ¹³C (100 МГц, ДМСО-d₆): δ_C (м.д.) 14.46, 39.37, 60.77, 72.80, 110.27, 115.36, 116.36, 117.96, 123.04, 123.88, 134.80, 147.04, 154.60, 154.88, 161.04, 163.03, 169.58. Масс-спектр HRMS-ESI: m/z [M+Na]⁺ вычислено для C₁₇H₁₅NO₆: 352.0792; найдено: 352.0801.

Пример 3. Получение этил-2-(3-карбамоил-9-метил-2-оксо-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-5-ил)ацетата (Iв).

Смесь этил-3-(6-метил-4-оксо-4H-хромен-3-ил)акрилата VIIIв (516 мг, 2 ммоль), цианацетамида VII (252 мг, 3 ммоль) и TEA (1.52 г, 15 ммоль) в 10 мл этанола перемешивают при 20°С в течение суток. Затем реакционную массу подкисляют ледяной уксусной кислотой (1 мл), отфильтровывают выпавший осадок побочного продукта. К фильтрату добавляют соляную кислоту (1,5 мл), кипятят реакционную массу полчаса и охлаждают. Далее отфильтровывают выпавший осадок продукта, промывают этанолом и сушат. Получают 365 мг (выход 53%) соединения Iв виде желто-зеленого порошка с Т_пл. 210-211°С. Спектр ЯМР ¹Н (400 МГц, ДМСО-d₆): δ_Н (м.д.) 1.17 (t, J=7.1 Hz, 3Н, СН₃СН₂), 2.31 (s, 3Н, СН₃), 2.88 (dd, J=8.1, 15.6 Hz, 1Н, H-2'a), 2.94 (dd, J=5.0, 15.6 Hz, 1Н, H-2'b), 4.03-4.12 (m, 2H, CH₃CH₂), 5.80 (dd, J=5.0, 8.1 Hz, 1H, H-5), 6.87 (d, J=8.3 Hz, 1H, H-7), 7.29 (dd, J=2.2, 8.3 Hz, 1H, H-8), 7.46 (d, J=2.2 Hz, 1H, H-10), 7.88 (br. d, J=2.5 Hz, 1H, NH), 7.94 (br. d, J=2.5 Hz, 1H, NH), 8.38 (s, 1H, H-4). Спектр ЯМР ¹³C (100 МГц, ДМСО-d₆): δ_C (м.д.) 14.48, 20.53, 39.35, 60.75, 72.67, 110.34, 115.10, 116.11, 117.84, 123.68, 132.23, 135.50, 147.07, 152.82, 154.84, 161.08, 163.05, 169.61. Масс-спектр HRMS-ESI: m/z [M+Na]⁺ вычислено для C₁₈H₁₇NO₆: 366.0948; найдено: 366.0947.

Пример 4. Получение этил-2-(9-бром-3-карбамоил-2-оксо-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-5-ил)ацетата (Iг).

Смесь этил-3-(6-бром-4-оксо-4//-хромен-3-ил)акрилата VIIIг (646 мг, 2 ммоль), цианацетамида VII (252 мг, 3 ммоль) и TEA (303 мг, 3 ммоль) в 10 мл этанола перемешивают при 20°С в течение суток. Затем реакционную массу подкисляют ледяной уксусной кислотой (0,5 мл), отфильтровывают выпавший осадок побочного продукта. К фильтрату добавляют соляную кислоту (0,5 мл), кипятят реакционную массу полчаса и охлаждают. Далее отфильтровывают выпавший осадок продукта, промывают этанолом и сушат. Получают 495 мг (выход 61%) соединения Iг в виде желто-зеленого порошка с Т_пл. 226-228°С. Спектр ЯМР ¹Н (400 МГц, ДМСО-d₆): δ_H (м.д.) 1.16 (t, J=7.1 Hz, 3Н, СН₃СН₂), 2.92 (dd, J=8.0, 15.8 Hz, 1H, H-2'a), 2.97 (dd, J=5.0, 15.8 Hz, 1H, H-2'b), 4.03-4.12 (m, 2H, СН3СН2), 5.89 (dd, J=5.0, 8.0 Hz, 1H, H-5), 6.95 (d, J=8.8 Hz, 1H, H-7), 7.63 (dd, J=2.5, 8.8 Hz, 1H, H-8), 7.70 (d, J=2.5 Hz, 1H, H-10), 7.88 (br. s, 1H, NH), 7.94 (br. s, 1H, NH), 8.40 (s, 1H, H-4). Спектр ЯМР ¹³C (100 МГц, ДМСО-d₆): δ_C (м.д.) 14.46, 39.35, 60.81, 73.11, 110.83, 114.26, 117.28, 117.37, 120.29, 125.79, 136.89, 146.81, 152.89, 153.92, 160.65, 162.83, 169.50. Масс-спектр HRMS-ESI: m/z [M+Na]⁺ вычислено для C₁₇H₁₄BrNO₆: 429.9897; найдено: 429.9894.

Пример 5. Получение этил-2-(3-карбамоил-2-оксо-9-фтор-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-5-ил)ацетата (Iд).

Смесь этил-3-(6-фтор-4-оксо-4H-хромен-3-ил)акрилата VIIIд (524 мг, 2 ммоль), цианацетамида VII (252 мг, 3 ммоль) и DIPEA (388 мг, 3 ммоль) в 10 мл этанола перемешивают при 20°С в течение суток. Затем реакционную массу подкисляют ледяной уксусной кислотой (0,5 мл), отфильтровывают выпавший осадок побочного продукта. К фильтрату добавляют соляную кислоту (0,5 мл), кипятят реакционную массу полчаса и охлаждают. Далее отфильтровывают выпавший осадок продукта, промывают этанолом и сушат. Получают 410 мг (выход 59%) соединения Iд в виде желто-зеленого порошка с Т_пл. 208-210°С. Спектр ЯМР ¹Н (400 МГц, ДМСО-d₆): δ_H (м.д.) 1.16 (t, J=7.1 Hz, 3Н, СН₃СН₂), 2.90 (dd, J=8.0, 15.6 Hz, 1H, H-2'a), 2.96 (dd, J=5.0, 15.6 Hz, 1H, H-2'b), 4.04-4.12 (m, 2H, CH₃CH₂), 5.84 (dd, J=5.0, 8.0 Hz, 1H, H-5), 7.00 (dd, J=9.0 Hz, J_HF=4.4 Hz, 1H, H-7), 7.34 (pseudotd, J=3.1, 8.8 Hz, J_HF=8.8 Hz, 1H, H-8), 7.40 (dd, J=3.1 Hz, J_HF=8.3 Hz, 1H, H-10), 7.87 (br. s, 1H, NH), 7.94 (br. s, 1H, NH), 8.40 (s, 1H, H-4). Спектр ЯМР ¹³C (100 МГц, ДМСО-d₆): δ_C (м.д.) 14.46, 39.48, 60.79, 72.94, 109.81 (d, ²J_CF=25.7 Hz), 111.00, 116.29 (d, ³J_CF=8.8 Hz), 117.25, 119.75 (d, ³J_CF=8.1 Hz), 121.35 (d, ²J_CF=24.2 Hz), 146.79, 150.94 (d, ⁴J_CF=2.2 Hz), 153.45 (d, ⁴J_CF=2.2 Hz), 157.55 (d, ¹J_CF=239.2 Hz), 160.73, 162.86, 169.55. Масс-спектр HRMS-ESI: m/z [M+Na]⁺ вычислено для C₁₇H₁₄FNO₆: 370.0697; найдено: 370.0699.

Пример 6. Получение этил-2-(3-карбамоил-9-нитро-2-оксо-2,5-дигидропирано [3,2-с]хромен-5-ил)ацетата (Iе).

Смесь этил-3-(6-нитро-4-оксо-4H-хромен-3-ил)акрилата VIIIe (578 мг, 2 ммоль), цианацетамида VII (252 мг, 3 ммоль) и TEA (303 мг, 3 ммоль) в 10 мл этанола перемешивают при 20°С в течение суток. Затем реакционную массу подкисляют ледяной уксусной кислотой (0,5 мл), отфильтровывают выпавший осадок побочного продукта. К фильтрату добавляют соляную кислоту (0,5 мл), кипятят реакционную массу полчаса и охлаждают. Далее отфильтровывают выпавший осадок продукта, промывают этанолом и сушат. Получают 195 мг (выход 26%) соединения Iе в виде желто-зеленого порошка с Т_пл. 216-217°С. Спектр ЯМР ¹Н (400 МГц, ДМСО-d₆): δ_H (м.д.) 1.15 (t, J=7.1 Hz, 3Н, СН₃СН₂), 2.99 (dd, J=8.0, 16.0 Hz, 1Н, H-2'a), 3.06 (dd, J=4.5, 16.0 Hz, 1H, H-2'b), 4.04-4.11 (m, 2H, CH₃CH₂), 6.05 (dd, J=4.5, 8.0 Hz, 1H, H-5), 7.17 (d, J=8.8 Hz, 1H, H-7), 7.92 (br. s, 1H, NH), 7.94 (br. s, 1H, NH), 8.29 (m, 2H, H-8, H-10), 8.42 (s, 1H, H-4). Спектр ЯМР ¹³C (100 МГц, ДМСО-d₆): δ_C (м.д.) 14.43, 40.30, 60.90, 74.33, 110.98, 115.33, 118.30, 118.94, 119.16, 129.43, 142.39, 146.49, 151.87, 159.60, 160.33, 162.63, 169.35. Масс-спектр HRMS-ESI: m/z [M+Na]⁺ вычислено для C₁₇H₁₄N₂O₈: 397.0642; найдено: 397.0628.

Пример 7. Получение этил-2-(3-карбамоил-9-метокси-2-оксо-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-5-ил)ацетата (Iж).

Смесь этил-3-(6-метокси-4-оксо-4H-хромен-3-ил)акрилата VIIIж (548 мг, 2 ммоль), цианацетамида VII (252 мг, 3 ммоль) и TEA (1,52 г, 15 ммоль) в 10 мл этанола перемешивают при 20°С в течение суток. Затем реакционную массу подкисляют ледяной уксусной кислотой (1 мл), отфильтровывают выпавший осадок побочного продукта. К фильтрату добавляют соляную кислоту (1,5 мл), кипятят реакционную массу полчаса и охлаждают. Далее отфильтровывают выпавший осадок продукта, промывают этанолом и сушат. Получают 345 мг (выход 48%) соединения Iж в виде желтого порошка с Т_пл. 194-196°С. Спектр ЯМР ¹Н (400 МГц, ДМСО-d₆): δ_H (м.д.) 1.17 (t, J=7.1 Hz, 3Н, СН₃СН₂), 2.88 (dd, J=8.2, 15.6 Hz, 1H, H-2'a), 2.93 (dd, J=5.3, 15.6 Hz, 1H, H-2'b), 3.81 (s, 3Н, CH₃O), 4.05-4.13 (m, 2H, CH₃CH₂), 5.79 (dd, J=5.3, 8.2 Hz, 1H, H-5), 6.93 (d, J=9.0 Hz, 1H, H-7), 7.09 (m, 2H, H-8, H-10), 7.85 (br. s, 1H, NH), 7.95 (br. s, 1H, NH), 8.39 (s, 1H, H-4). Спектр ЯМР ¹³C (100 МГц, ДМСО-d₆): δ_C (м.д.) 14.49, 40.07, 56.19, 60.76, 72.62, 106.70, 110.77, 115.74, 116.36, 119.28, 121.71, 147.00, 148.80, 154.62, 154.87, 161.03, 163.02, 169.62. Масс-спектр HRMS-ESI: m/z [M+Na]⁺ вычислено для C₁₈H₁₇NO₇: 382.0897; найдено: 382.0904.

Пример 8. Получение этил-2-(3-карбамоил-8-метил-2-оксо-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-5-ил)ацетата (Iз).

Смесь этил-3-(7-метил-4-оксо-4H-хромен-3-ил)акрилата VIIIз (516 мг, 2 ммоль), цианацетамида VII (252 мг, 3 ммоль) и TEA (303 мг, 3 ммоль) в 10 мл этанола перемешивают при 20°С в течение суток. Затем реакционную массу подкисляют ледяной уксусной кислотой (0,5 мл), отфильтровывают выпавший осадок побочного продукта. К фильтрату добавляют соляную кислоту (0,5 мл), кипятят реакционную массу полчаса и охлаждают. Далее отфильтровывают выпавший осадок продукта, промывают этанолом и сушат. Получают 370 мг (выход 54%) соединения Iз в виде желто-зеленого порошка с Т_пл. 223-225°С. Спектр ЯМР ¹Н (400 МГц, ДМСО-d₆): δ_H (м.д.) 1.17 (t, J=7.1 Hz, 3Н, СН₃СН₂), 2.33 (s, 3Н, СН₃), 2.88 (dd, J=8.2, 15.6 Hz, 1Н, H-2'a), 2.95 (dd, J=5.0, 15.6 Hz, 1Н, H-2'b), 4.04-4.12 (m, 2Н, CH₃CH₂), 5.82 (dd, J=5.0, 8.2 Hz, 1Н, Н-5), 6.82 (s, 1Н, Н-7), 6.97 (d, J=8.0 Hz, 1Н, Н-8), 7.55 (d, J=8.0 Hz, 1Н, Н-10), 7.81 (br. s, 1H, NH), 7.95 (br. s, 1Н, NH), 8.37 (s, 1Н, Н-4). Спектр ЯМР ¹³С (100 МГц, ДМСО-d₆): δ_C (м.д.) 14.47, 21.83, 40.62, 60.77, 72.84, 109.55, 112.79, 115.55, 118.23, 123.76, 124.04, 145.94, 147.10, 155.00, 155.13, 161.12, 163.12, 169.59. Масс-спектр HRMS-ESI: m/z [M+Na]⁺ вычислено для C₁₈H₁₇NO₆: 366.0948; найдено: 366.0959.

Пример 9. Получение этил-2-(3-карбамоил-8-метокси-2-оксо-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-5-ил)ацетата (Iи).

Смесь этил-3-(7-метокси-4-оксо-4H-хромен-3-ил)акрилата VIIIи (548 мг, 2 ммоль), цианацетамида VII (252 мг, 3 ммоль) и TEA (303 мг, 3 ммоль) в 10 мл этанола перемешивают при 20°С в течение суток. Затем реакционную массу подкисляют ледяной уксусной кислотой (0,5 мл), отфильтровывают выпавший осадок побочного продукта. К фильтрату добавляют соляную кислоту (0,5 мл), кипятят реакционную массу полчаса и охлаждают. Далее отфильтровывают выпавший осадок продукта, промывают этанолом и сушат. Получают 400 мг (выход 56%) соединения Iи в виде желтого порошка с Т_пл. 199-200°С. Спектр ЯМР ¹Н (400 МГц, ДМСО-d₆): δ_H (м.д.) 1.17 (t, J=7.1 Hz, 3Н, СН₃СН₂), 2.90 (dd, J=8.0, 15.6 Hz, 1H, H-2'a), 2.95 (dd, J=5.0, 15.6 Hz, 1H, H-2'b), 3.82 (s, 3Н, CH₃O), 4.05-4.13 (m, 2H, CH₃CH₂), 5.83 (dd, J=5.0, 8.0 Hz, 1H, H-5), 6.55 (d, J=2.1 Hz, 1H, H-7), 6.73 (dd, J=2.1, 8.8 Hz, 1H, H-8), 7.59 (d, J=8.8 Hz, 1H, H-10), 7.77 (br. d, J=2.5 Hz, 1H, NH), 7.93 (br. d, J=2.5 Hz, 1H, NH), 8.35 (s, 1H, H-4). Спектр ЯМР ¹³C (100 МГц, ДМСО-d₆): δ_C (м.д.) 14.48, 40.61, 56.33, 60.77, 73.24, 102.80, 108.12, 108.29, 110.25, 114.17, 125.49, 147.12, 155.66, 157.15, 161.24, 163.27, 165.04, 169.58. Масс-спектр HRMS-ESI: m/z [M+Na]⁺ вычислено для C₁₈H₁₇NO₇: 382.0897; найдено: 382.0887.

Пример 10. Получение этил-2-(8-гидрокси-3-карбамоил-2-оксо-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-5-ил)ацетата (Iк).

Смесь этил-3-(7-гидрокси-4-оксо-4H-хромен-3-ил)акрилата VIIIк (520 мг, 2 ммоль), цианацетамида VII (252 мг, 3 ммоль) и TEA (303 мг, 3 ммоль) в 10 мл этанола перемешивают при 20°С в течение суток. Затем реакционную массу подкисляют ледяной уксусной кислотой (0,5 мл), отфильтровывают выпавший осадок побочного продукта. К фильтрату добавляют соляную кислоту (0,5 мл), кипятят реакционную массу полчаса и охлаждают. Далее отфильтровывают выпавший осадок продукта, промывают этанолом и сушат. Получают 360 мг (выход 52%) соединения Iк в виде желтого порошка с Т_пл. 221-223°С. Спектр ЯМР ¹Н (400 МГц, ДМСО-d₆): δ_H (м.д.) 1.17 (t, J=7.0 Hz, 3Н, СН₃СН₂), 2.84-2.95 (m, 2Н, Н-2), 4.06-4.10 (m, 2Н, СН₃СН₂), 5.77 (pseudot, J=5.3 Hz, 1Н, H-5), 6.32 (s, 1H, H-7), 6.57 (d, J=8.5 Hz, 1H, H-8), 7.51 (d, J=8.5 Hz, 1H, H-10), 7.72 (br. s, 1H, NH), 7.93 (br. s, 1H, NH), 8.33 (s, 1H, H-4), 10.65 (br. s, 1H, ОН). Спектр ЯМР ¹³C (100 МГц, ДМСО-d₆): δ_C (м.д.) 14.47, 40.58, 60.76, 73.09, 104.15, 107.03, 107.62, 111.45, 113.34, 125.85, 147.15, 156.25, 157.23, 161.35, 163.41, 164.15, 169.62. Масс-спектр HRMS-ESI: m/z [M+Na]⁺ вычислено для C₁₇H₁₅NO₇: 368.0741; найдено: 368.0744.

Пример 11. Получение этил-2-(3-карбамоил-2,9-диметил-2-оксо-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-5-ил)ацетата (Iл).

Смесь этил-3-(6,7-диметил-4-оксо-4H-хромен-3-ил)акрилата VIIIл (544 мг, 2 ммоль), цианацетамида VII (252 мг, 3 ммоль) и TEA (1,52 г, 15 ммоль) в 10 мл этанола перемешивают при 20°С в течение суток. Затем реакционную массу подкисляют ледяной уксусной кислотой (1 мл), отфильтровывают выпавший осадок побочного продукта. К фильтрату добавляют соляную кислоту (1,5 мл), кипятят реакционную массу полчаса и охлаждают. Далее отфильтровывают выпавший осадок продукта, промывают этанолом и сушат. Получают 385 мг (выход 54%) соединения Iл в виде желто-зеленого порошка с Т_пл. 234-236°С. Спектр ЯМР ¹Н (400 МГц, ДМСО-d₆;): δ_H (м.д.) 1.17 (t, J=7.1 Hz, 3Н, СН₃СН₂), 2.22 (s, 3Н, СН₃), 2.24 (s, 3Н, СН₃), 2.86 (dd, J=8.3, 15.6 Hz, 1Н, H-2'a), 2.92 (dd, J=5.0, 15.6 Hz, 1H, H-2'b), 4.04-4.12 (m, 2H, CH₃CH₂, 5.78 (dd, J=5.0, 8.3 Hz, 1H, H-5), 6.80 (s, 1H, H-7), 7.41 (s, 1H, H-10), 7.80 (br. s, 1H, NH), 7.94 (br. s, 1H, NH), 8.36 (s, 1H, H-4). Спектр ЯМР ¹³C (100 МГц, ДМСО-d₆): δ_C (м.д.) 14.49, 18.91, 20.37, 39.64, 60.74, 72.69, 109.59, 112.79, 115.24, 118.75, 123.95, 131.37, 144.88, 147.12, 153.17, 155.37, 161.19, 163.15, 169.61. Масс-спектр HRMS-ESI: m/z [M+Na]⁺ вычислено для C₁₉H₁₉NO₆: 380.1105; найдено: 380.1102.

Пример 12. Получение этил-2-(3-карбамоил-2-оксо-8,9-дифтор-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-5-ил)ацетата (Iм).

Смесь этил-3-(6,7-дифтор-4-оксо-4Я-хромен-3-ил)акрилата VIIIм (560 мг, 2 ммоль), цианацетамида VII (252 мг, 3 ммоль) и DIPEA (388 мг, 3 ммоль) в 10 мл этанола перемешивают при 20°С в течение суток. Затем реакционную массу подкисляют ледяной уксусной кислотой (0,5 мл), отфильтровывают выпавший осадок побочного продукта. К фильтрату добавляют соляную кислоту (0,5 мл), кипятят реакционную массу полчаса и охлаждают. Далее отфильтровывают выпавший осадок продукта, промывают этанолом и сушат. Получают 380 мг (выход 52%) соединения Iм в виде желто-зеленого порошка с Т_пл. 198-199°С. Спектр ЯМР ¹Н (400 МГц, ДМСО-d₆): δ_H (м.д.) 1.17 (t, J=7.1 Hz, 3Н, СН₃СН₂), 2.96 (m, 2Н, Н-2), 4.05-4.12 (т, 2Н, СН₃СН₂), 5.90 (dd, J=5.4, 7.5 Hz, 1Н, Н-5), 7.22 (dd, J_HF=6.6, 11.3 Hz, 1H, H-7), 7.70 (pseudot, J_HF=9.2 Hz, 1H, H-10), 7.86 (br. s, 1H, NH), 7.93 (br. s, 1H, NH), 8.39 (s, 1H, H-4). Спектр ЯМР ¹³C (100 МГц, ДМСО-d₆): δ_C (м.д.) 14.45, 40.60, 60.85, 73.45, 107.92 (d, J_CF=21.3 Hz), 110.22, 112.12 (dd, J_CF=2.9, 6.8 Hz), 112.30 (d, J_CF=21.3 Hz), 116.99, 145.80 (dd, J_CF=13.9, 241.4 Hz), 146.84, 151.85 (dd, J_CF=2.2, 11.7 Hz), 152.96, 153.09 (dd, J_CF=13.9, 253.8 Hz), 160.66, 162.85, 169.46. Масс-спектр HRMS-ESI: m/z [M+Na]⁺ вычислено для C₁₇H₁₃F₂NO₆: 388.0603; найдено: 388.0597.

Пример 13. Получение этил-2-(7-бром-3-карбамоил-9-метил-2-оксо-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-5-ил)ацетата (Iн).

Смесь этил-3-(8-бром-6-метил-4-оксо-4H-хромен-3-ил)акрилата VIIIн (674 мг, 2 ммоль), цианацетамида VII (252 мг, 3 ммоль) и TEA (303 мг, 3 ммоль) в 10 мл этанола перемешивают при 20°С в течение суток. Затем реакционную массу подкисляют ледяной уксусной кислотой (0,5 мл), отфильтровывают выпавший осадок побочного продукта. К фильтрату добавляют соляную кислоту (0,5 мл), кипятят реакционную массу полчаса и охлаждают. Далее отфильтровывают выпавший осадок продукта, промывают этанолом и сушат. Получают 480 мг (выход 57%) соединения Iн в виде желто-зеленого порошка с Т_пл. 235-237°С. Спектр ЯМР ¹Н (400 МГц, ДМСО-d₆): δ_H (м.д.) 1.18 (t, J=7.1 Hz, 3Н, СН₃СН₂), 2.31 (s, 3Н, СН₃), 2.84 (dd, J=9.3, 15.5 Hz, 1Н, H-2'a), 2.96 (dd, J=3.8, 15.5 Hz, 1H, H-2'b), 4.07-4.11 (m, 2H, CH₃CH₂), 5.94 (dd, J=3.8, 9.3 Hz, 1H, H-5), 7.45 (s, 1H, H-8), 7.58 (s, 1H, H-10), 7.86 (br. s, 1H, NH), 7.94 (br. s, 1H, NH), 8.40 (s, 1H, H-4). Спектр ЯМР ¹³C (100 МГц, ДМСО-d₆): δ_C (м.д.) 14.53, 20.18, 39.36, 60.93, 73.62, 110.74, 110.93, 116.57, 117.06, 123.30, 133.77, 137.70, 146.80, 148.95, 153.68, 160.84, 162.86, 169.33. Масс-спектр HRMS-ESI: m/z [M+Na]⁺ вычислено для C₁₈H₁₆BrNO₆: 444.0053; найдено: 444.0068.

Пример 14. Получение этил-2-(3-карбамоил-9-метил-7-нитро-2-оксо-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-5-ил)ацетата (Iо).

Смесь этил-3-(6-метил-8-нитро-4-оксо-4H-хромен-3-ил)акрилата VIIIo (606 мг, 2 ммоль), цианацетамида VII (252 мг, 3 ммоль) и TEA (303 мг, 3 ммоль) в 10 мл этанола перемешивают при 20°С в течение суток. Затем реакционную массу подкисляют ледяной уксусной кислотой (0,5 мл), отфильтровывают выпавший осадок побочного продукта. К фильтрату добавляют соляную кислоту (0,5 мл), кипятят реакционную массу полчаса и охлаждают. Далее отфильтровывают выпавший осадок продукта, промывают этанолом и сушат. Получают 180 мг (выход 23%) соединения Iо в виде желто-зеленого порошка с Т_пл. 242-244°С. Спектр ЯМР ¹Н (400 МГц, ДМСО-δ₆): δ_H (м.д.) 1.15 (t, J=7.1 Hz, 3Н, СН₃СН₂), 2.39 (s, 3Н, СН₃), 2.90 (dd, J=9.3, 15.6 Hz, 1Н, H-2'a), 3.00 (dd, J=4.2, 15.6 Hz, 1H, H-2'b), 4.05 (q, J=7.1 Hz, 2H, CH₃CH₂), 6.03 (dd, J=4.2, 9.3 Hz, 1H, H-5), 7.79 (s, 1H, H-8), 7.90 (br. s, 1H, NH), 7.94 (br. s, 1H, NH), 8.22 (s, 1H, H-10), 8.43 (s, 1H, H-4). Спектр ЯМР ¹³C (100 МГц, ДМСО-d₆): δ_C (м.д.) 14.34, 20.16, 40.61,60.90, 74.17, 111.15, 117.65, 117.99, 128.74, 129.12, 132.72, 139.26, 145.50, 146.60, 152.37, 160,54, 162.73, 169.18. Масс-спектр HRMS-ESI: m/z [M+Na]⁺ вычислено для C₁₈H₁₆N₂O₈: 411.0799; найдено: 411.0805.

Пример 15. Получение этил-2-(9-бром-3-карбамоил-8-метокси-2-оксо-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-5-ил)ацетата (Iп).

Смесь этил-3-(6-бром-6-метокси-4-оксо-4H-хромен-3-ил)акрилата VIIIп (674 мг, 2 ммоль), цианацетамида VII (252 мг, 3 ммоль) и TEA (303 мг, 3 ммоль) в 10 мл этанола перемешивают при 20°С в течение суток. Затем реакционную массу подкисляют ледяной уксусной кислотой (0,5 мл), отфильтровывают выпавший осадок побочного продукта. К фильтрату добавляют соляную кислоту (0,5 мл), кипятят реакционную массу полчаса и охлаждают. Далее отфильтровывают выпавший осадок продукта, промывают этанолом и сушат. Получают 505 мг (выход 58%) соединения Iп в виде желтого порошка с Т_пл. 252-253°С. Спектр ЯМР ¹Н (400 МГц, ДМСО-d₆): δ_H (м.д.) 1.17 (t, J=7.1 Hz, 3Н, СН₃СН₂), 2.94 (dd, J=7.6, 15.8 Hz, 1Н, H-2'a), 2.98 (dd, J=5.3, 15.8 Hz, 1H, H-2'b), 3.91 (s, 3H, CH₃O), 4.06-4.14 (m, 2H, CH₃CH₂), 5.88 (dd, J=5.3, 7.6 Hz, 1H, H-5), 6.77 (s, 1H, H-7), 7.73 (s, 1H, H-10), 7.80 (br. d, J=2.2 Hz, 1H, NH), 7.92 (br. d, J=2.2 Hz, 1H, NH), 8.37 (s, 1H, H-4). Спектр ЯМР ¹³C (100 МГц, ДМСО-d₆): δ_C (м.д.) 14.49, 39.70, 57.60, 60.82, 73.55, 102.58, 104.49, 108.48, 109.29, 115.09, 127.28, 147.02, 154.19, 156.55, 160.49, 160.92, 163.10, 169.53. Масс-спектр HRMS-ESI: m/z [M+Na]⁺ вычислено для C₁₈H₁₆BrNO₇: 460.0002; найдено: 460.0013.

Пример 16. Получение этил-2-(3-карбамоил-2-оксо-3,12-дигидробензо[h]пирано[3,2-с]хромен-12-ил)ацетата (Iр).

Смесь этил-3-(4-оксо-4H-бензо[h]хромен-3-ил)акрилата VIIIp (589 мг, 2 ммоль), цианацетамида VII (252 мг, 3 ммоль) и TEA (303 мг, 3 ммоль) в 10 мл этанола перемешивают при 20°С в течение суток. Затем реакционную массу подкисляют ледяной уксусной кислотой (0,5 мл), отфильтровывают выпавший осадок побочного продукта. К фильтрату добавляют соляную кислоту (0,5 мл), кипятят реакционную массу полчаса и охлаждают. Далее отфильтровывают выпавший осадок продукта, промывают этанолом и сушат. Получают 500 мг (выход 66%) соединения Iр в виде желтого порошка с Т_пл. 257-259°С. Спектр ЯМР ¹Н (400 МГц, ДМСО-d₆): δ_H (м.д.) 1.10 (t, J=7.0 Hz, 3Н, СН₃СН₂), 2.98 (dd, J=8.3, 15.6 Hz, 1H, H-2'a), 3.03 (dd, J=5.1, 15.6 Hz, 1H, H-2'b), 4.04-4.12 (m, 2H, CH₃CH₂), 6.15 (dd, J=5.1, 8.3 Hz, 1H, H-12), 7.60-7.73 (m, 4H, H-6-9), 7.94 (br. s, 1H, NH), 7.98 (m, 2H, H-10, NH), 8.05 (d, J=8.2 Hz, 1H, H-5), 8.47 (s, 1H, H-1). Спектр ЯМР ¹³C (100 МГц, ДМСО-d₆): δ_C (м.д.) 14.46, 40.46, 60.82, 73.81, 109.07. 109.97, 115.36, 119.32, 122.67, 122.68, 124.40, 127.43, 128.65, 129.75, 136.42, 147.05, 152.15, 155.69, 161.26, 163.20, 169.55. Масс-спектр HRMS-ESI: m/z [M+Na]⁺ вычислено для C₂₁H₁₇NO₆: 402.0948; найдено: 402.0949.

Пример 17. Получение 2-(3-карбамоил-2-оксо-9-хлор-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-5-ил)уксусной кислоты (Iс).

Смесь 3-(6-хлор-4-оксо-4H-хромен-3-ил)акриловой кислоты VIIIc (501 мг, 2 ммоль), цианацетамида VII (252 мг, 3 ммоль) и TEA (303 мг, 3 ммоль) в 10 мл этанола перемешивают при 20°С в течение суток. Затем реакционную массу подкисляют ледяной уксусной кислотой (0,5 мл), отфильтровывают выпавший осадок побочного продукта. К фильтрату добавляют соляную кислоту (0,5 мл), кипятят реакционную массу полчаса и охлаждают. Далее отфильтровывают выпавший осадок продукта, промывают этанолом и сушат. Получают 230 мг (выход 34%) соединения Iс в виде желто-зеленого порошка с Т_пл. 275-277°С. Спектр ЯМР ¹Н (400 МГц, ДМСО-d₆): δ_H (м.д.) 2.84 (dd, J=8.0, 16.0 Hz, 1Н, H-2'a), 2.90 (dd, J=5.1, 16.0 Hz, 1H, H-2'b), 5.85 (dd, J=5.1, 8.0 Hz, 1H, H-5), 7.03 (d, J=8.8 Hz, 1H, H-7), 7.52 (dd, J=2.5, 8.8 Hz, 1H, H-8), 7.60 (d, J=2.5 Hz, 1H, H-10), 7.89 (br. s, 1H, NH), 7.95 (br. s, 1H, NH), 8.38 (s, 1H, H-4). Спектр ЯМР ¹³C (100 МГц, ДМСО-d₆): δ_C (м.д.) 40.59, 73.28, 111.11, 116.90, 117.34, 119.98, 122.98, 126.71, 134.04, 146.83, 153.01, 153.62, 160.70, 162.88, 171.02. Масс-спектр HRMS-ESI: m/z [M+Na]⁺ вычислено для C₁₅H₁₀ClNO₆: 358.0089; найдено: 358.0102.

Пример 18. Получение 5-(2-амино-2-оксоэтил)-2-оксо-9-хлор-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-3-карбоксамида (Iт).

Смесь 3-(6-хлор-4-оксо-4H-хромен-3-ил)акриламида VIIIт (500 мг, 2 ммоль), цианацетамида VII (252 мг, 3 ммоль) и TEA (303 мг, 3 ммоль) в 10 мл этанола перемешивают при 20°С в течение суток. Затем реакционную массу подкисляют ледяной уксусной кислотой (0,5 мл), отфильтровывают выпавший осадок побочного продукта. К фильтрату добавляют соляную кислоту (0,5 мл), кипятят реакционную массу полчаса и охлаждают. Далее отфильтровывают выпавший осадок продукта, промывают этанолом и сушат. Получают 420 мг (выход 63%) соединения Iт в виде желто-зеленого порошка с Т_пл. 314-316°С. Спектр ЯМР ¹Н (400 МГц, ДМСО-d₆): δ_H (м.д.) 2.64 (dd, J=5.8, 14.7 Hz, 1Н, H-2'a), 2.70 (dd, J=7.8, 14.7 Hz, 1H, H-2'b), 5.80 (dd, J=5.8, 7.8 Hz, 1H, H-5), 7.03 (m, 2H, H-7, NH), 7.41 (br. s, 1H, NH), 7.52 (dd, J=2.5, 8.8 Hz, 1H, H-8), 7.60 (d, J=2.5 Hz, 1H, H-10), 7.87 (br. s, 1H, NH), 7.95 (br. s, 1H, NH), 8.31 (s, 1H, H-4). Спектр ЯМР ¹³C (100 МГц, ДМСО-d₆): δ_C (м.д.) 40.86, 73.83, 111.55, 116.91, 117.27, 120.13, 122.88, 126.64, 134.01, 146.83, 152.84, 153.79, 160.76, 162.87, 170.17. Масс-спектр HRMS-ESI: m/z [M+Na]⁺ вычислено для C₁₅H₁₁ClN₂O₅: 357.0249; найдено: 357.0248.

Пример 19. Получение 5-(2-диэтиламиноамино-2-оксоэтил)-2-оксо-9-хлор-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-3-карбоксамида (Iу).

Смесь N,N-диэтил-3 -(6-хлор-4-оксо-4H-хромен-3-ил)акриламида VIIIy (612 мг, 2 ммоль), цианацетамида VII (252 мг, 3 ммоль) и TEA (303 мг, 3 ммоль) в 10 мл этанола перемешивают при 20°С в течение суток. Затем реакционную массу подкисляют ледяной уксусной кислотой (0,5 мл), отфильтровывают выпавший осадок побочного продукта. К фильтрату добавляют соляную кислоту (0,5 мл), кипятят реакционную массу полчаса и охлаждают. Далее отфильтровывают выпавший осадок продукта, промывают этанолом и сушат. Получают 345 мг (выход 44%) соединения Iу в виде желто-зеленого порошка с Т_пл. 231-233°С. Спектр ЯМР ¹Н (400 МГц, ДМСО-d₆): δ_H (м.д.) 0.98 (t, J=7.0 Hz, 6Н, СН₃СН₂), 2.90 (dd, J=5.9, 15.9 Hz, 1H, H-2'a), 3.00 (dd, J=6.9, 15.9 Hz, 1H, H-2'b), 3.13-3.31 (m, 4H, CH₃CH₂), 5.91 (pseudot, J=6.5 Hz, 1H, H-5), 7.01 (d, J=8.8 Hz, 1H, H-7), 7.51 (dd, J=2.5, 8.8 Hz, 1H, H-8), 7.60 (d, J=2.5 Hz, 1H, H-10), 7.85 (br. d, J=2.1 Hz, 1H, NH), 7.95 (br. d, J=2.1 Hz, 1H, NH), 8.36 (s, 1H, H-4). Спектр ЯМР ¹³C (100 МГц, ДМСО-d₆): δ_C (м.д.) 13.39, 14.69, 37.98, 41.86, 73.86, 111.67, 116.92, 117.09, 119.88, 122.94, 126.55, 133.95, 147.31, 152.93, 153.93, 160.75, 162.88, 167.40. Масс-спектр HRMS-ESI: m/z [M+Na]⁺ вычислено для C₁₉H₁₉ClN₂O₅: 413.0875; найдено: 413.0882.

Пример 20. Получение 2-оксо-9-хлор-5-(цианметил)-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-3-карбоксамида (Iф).

Смесь 3-(6-хлор-4-оксо-4H-хромен-3-ил)акрилонитрила VIIIф (463 мг, 2 ммоль), цианацетамида VII (252 мг, 3 ммоль) и TEA (303 мг, 3 ммоль) в 10 мл этанола перемешивают при 20°С в течение суток. Затем реакционную массу подкисляют ледяной уксусной кислотой (0,5 мл), отфильтровывают выпавший осадок побочного продукта. К фильтрату добавляют соляную кислоту (0,5 мл), кипятят реакционную массу полчаса и охлаждают. Далее отфильтровывают выпавший осадок продукта, промывают этанолом и сушат. Получают 290 мг (выход 46%) соединения Iф в виде желто-зеленого порошка с Т_пл. 279-281°С. Спектр ЯМР ¹Н (400 МГц, ДМСО-d₆): δ_H (м.д.) 3.22 (dd, J=4.4, 17.3 Hz, 1Н, H-2'a), 3.32 (dd, J=7.3, 17.3 Hz, 1H, H-2'b), 5.90 (dd, J=4.4, 7.3 Hz, 1H, H-5), 7.13 (d, J=8.8 Hz, 1H, H-7), 7.56 (dd, J=2.5, 8.8 Hz, 1H, H-8), 7.62 (d, J=2.5 Hz, 1H, H-10), 7.91 (br. s, 1H, NH), 7.94 (br. s, 1H, NH), 8.43 (s, 1H, H-4). Спектр ЯМР ¹³C (100 МГц, ДМСО-d₆): δ_C (м.д.) 23.77, 72.02, 109.61, 116.66, 117.71, 117.74, 119.95, 123.04, 127.19, 134.31, 146.40, 153.07, 153.30, 160.47, 162.74. Масс-спектр HRMS-ESI: m/z [M+Na]⁺ вычислено для C₁₅H₉ClN₂O₄: 339.0143; найдено: 339.0139.

Пример 21. Флуоресцентные свойства производных 2-(пирано[3,2-с]хромен-5-ил)уксусной кислоты (Iа-ф).

Спектры флуоресценции растворов исследуемых соединений Iа-ф зарегистрированы на спектрофлуориметре BMG Labtech CLARIOstar. Растворы веществ Ia-ф были приготовлены в этаноле в концентрации 10^-4 моль/л. Длины волн максимумов поглощения (λ_abs) и эмиссии (λ_em) представлены в таблице 1. Сдвиг Стокса (Δλ) рассчитан по формуле (1):

Из полученных данных следует, что синтезированные пирано[3,2-с]хромены Ia-ф флуоресцируют в желто-зеленой области спектра (485-570 нм) со стоксовым сдвигом 78-148 нм, что делает данные соединения пригодными для применения в качестве флуоресцентных красителей и/или зондов в биохимических исследованиях.

1. Производные 2-(пирано[3,2-с]хромен-5-ил)уксусной кислоты формулы I:

где R¹=Cl, R²=H, R³=H, EWG=COOC₂H₅; Ia - этил-2-(3-карбамоил-2-оксо-9-хлор-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-5-ил)ацетат;

R¹=H, R²=H, R³=H, EWG=COOC₂H₅; Iб - этил-2-(3-карбамоил-2-оксо-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-5-ил)ацетат;

R¹=CH₃, R²=H, R³=H, EWG=COOC₂H₅; Iв- этил-2-(3-карбамоил-9-метил-2-оксо-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-5-ил)ацетат;

R¹=Br, R²=H, R³=H, EWG=COOC₂H₅; Iг - этил-2-(9-бром-3-карбамоил-2-оксо-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-5-ил)ацетат;

R¹=F, R²=H, R³=H, EWG=COOC₂H₅; Iд - этил-2-(3-карбамоил-2-оксо-9-фтор-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-5-ил)ацетат;

R¹=NO₂, R²=H, R³=H, EWG=COOC₂H₅; Ie - этил-2-(3-карбамоил-9-нитро-2-оксо-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-5-ил)ацетат;

R¹=CH₃O, R²=H, R³=H, EWG=COOC₂H₅; Iж - этил-2-(3-карбамоил-9-метокси-2-оксо-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-5-ил)ацетат;

R¹=H, R²=CH₃, R³=H, EWG=COOC₂H₅; Iз - этил-2-(3-карбамоил-8-метил-2-оксо-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-5-ил)ацетат;

R¹=H, R²=CH₃O, R³=H, EWG=COOC₂H₅; Iи - этил-2-(3-карбамоил-8-метокси-2-оксо-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-5-ил)ацетат;

R¹=H, R²=OH, R³=H, EWG=COOC₂H₅; Iк - этил-2-(8-гидрокси-3-карбамоил-2-оксо-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-5-ил)ацетат;

R¹=CH₃, R²=CH₃, R³=H, EWG=COOC₂H₅; Iл - этил-2-(3-карбамоил-2,9-диметил-2-оксо-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-5-ил)ацетат;

R¹=F, R²=F, R³=H, EWG=COOC₂H₅; Iм - этил-2-(3-карбамоил-2-оксо-8,9-дифтор-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-5-ил)ацетат;

R¹=CH₃, R²=H, R³=Br, EWG=COOC₂H₅; Iн - этил-2-(7-бром-3-карбамоил-9-метил-2-оксо-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-5-ил)ацетат;

R¹=CH₃, R²=H, R³=NO₂, EWG=COOC₂H₅; Io - этил-2-(3-карбамоил-9-метил-7-нитро-2-оксо-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-5-ил)ацетат;

R¹=Br, R²=CH₃O, R³=H, EWG=COOC₂H₅; Iп - этил-2-(9-бром-3-карбамоил-8-метокси-2-оксо-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-5-ил)ацетат;

R¹=H, R²=R³=бензо, EWG=COOC₂H₅; Iр - 2-(3-карбамоил-2-оксо-9-хлор-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-5-ил)уксусной кислоты;

R¹=Cl, R²=H, R³=H, EWG-COOH; Iс - 2-(3-карбамоил-2-оксо-9-хлор-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-5-ил)уксусной кислоты;

R¹=Cl, R²=H, R³=H, EWG=CONH₂; Iт - 5-(2-амино-2-оксоэтил)-2-оксо-9-хлор-2,5-дигидропирано[3,2-c] хромен-3 -карбоксамид;

R¹=Cl, R²=H, R³=H, EWG=CON(C₂H₅)₂; Iу - 5-(2-диэтиламиноамино-2-оксоэтил)-2-оксо-9-хлор-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-3-карбоксамид;

R¹=Cl, R²=H, R³=H, EWG=CN; Iф - 2-оксо-9-хлор-5-(цианметил)-2,5-дигидропирано[3,2-с]хромен-3-карбоксамид.

2. Способ получения производных 2-(пирано[3,2-с]хромен-5-ил)уксусной кислоты формулы 1 по п. 1 путем взаимодействия выбранных из группы: этил-3-(6-хлор-4-оксо-4H-хромен-3-ил)акрилата, этил-3-(4-оксо-4H-хромен-3-ил)акрилата, этил-3-(6-метил-4-оксо-4H-хромен-3-ил)акрилата, этил-3-(6-бром-4-оксо-4H-хромен-3-ил)акрилата, этил-3-(6-фтор-4-оксо-4H-хромен-3-ил)акрилата, этил-3-(6-нитро-4-оксо-4H-хромен-3-ил)акрилата, этил-3-(6-метокси-4-оксо-4H-хромен-3-ил)акрилата, этил-3-(7-метил-4-оксо-4H-хромен-3-ил)акрилата, этил-3-(7-метокси-4-оксо-4H-хромен-3-ил)акрилата, этил-3-(7-гидрокси-4-оксо-4H-хромен-3-ил)акрилата, этил-3-(6,7-диметил-4-оксо-4H-хромен-3-ил)акрилата, этил-3-(6,7-дифтор-4-оксо-4H-хромен-3-ил)акрилата, этил-3-(8-бром-6-метил-4-оксо-4H-хромен-3-ил)акрилата, этил-3-(6-метил-8-нитро-4-оксо-4H-хромен-3-ил)акрилата, этил-3-(6-бром-6-метокси-4-оксо-4H-хромен-3-ил)акрилата, этил-3-(4-оксо-4H-бензо[h]хромен-3-ил)акрилата, 3-(6-хлор-4-оксо-4H-хромен-3-ил)акриловой кислоты, 3-(6-хлор-4-оксо-4H-хромен-3-ил)акриламида, N,N-диэтил-3-(6-хлор-4-оксо-4H-хромен-3-ил)акриламида, 3-(6-хлор-4-оксо-4H-хромен-3-ил)акрилонитрила, 3-винилхромонов и цианацетамида, при мольном соотношении 1:1,5 соответственно в среде этанола, для чего реакционную массу перемешивают сутки при температуре 20°С в присутствии катализаторов третичных аминов - триэтиламина (TEA) или основания Хюнига (диизопропилэтиламин, DIPEA), применяемых в количестве 1,5-7,5 эквивалентов, реакционную массу подкисляют ледяной уксусной кислотой, отфильтровывают выпавший осадок побочно образующихся хромено[4,3-b]пиридинов, к фильтрату добавляют соляную кислоту, кипятят полчаса, охлаждают и отфильтровывают выпавший осадок целевого продукта.

3. Способ получения производных 2-(пирано[3,2-с]хромен-5-ил)уксусной кислоты формулы I по п. 2, отличающийся тем, что осадок целевого продукта дополнительно промывают этанолом и сушат.

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии и токсикологии, и может быть использовано для определения персонифицированной эффективной дозы ингибиторов холинэстераз для организма на доклиническом уровне. Проводят предварительное разделение экспериментальных животных на функциональные группы по значению дибукаинового числа по бутирилхолинэстеразе: более 75%, от 35 до 75%, менее 35%.

Способ оценки репродуктивных качеств быков-производителей по содержанию фосфора и селена в семенной плазме // 2773861

Изобретение относится к области животноводства, в частности к скотоводству, и может быть использовано для оценки репродуктивных качеств быков-производителей. Способ оценки репродуктивных качеств быков-производителей включает отбор свежей спермы объёмом не менее 2 мл.

Способ определения функциональной активности антитромбина iii в плазме крови // 2772195

Изобретение относится к области медицины. Предложен способ определения функциональной активности антитромбина III (AT III) в плазме крови, включающий взаимодействие AT III с гепарином.

Способ количественного определения антиконвульсантов в плазме крови больных эпилепсией // 2771430

Изобретение относится к медицине и касается способа количественного определения антиконвульсантов в плазме крови больных эпилепсией, включающего их выделение из плазмы крови с последующей хромато-масс-спектрометрией продуктов экстракции и регистрацию масс-спектров анализируемых средств, где выделение антиконвульсантов из плазмы крови и очистку экстракта осуществляют путем депротеинизации, добавляя к образцу плазмы крови внутренний стандарт N-адамантил-гексаметиленимина в ацетонитриле, образовавшуюся смесь встряхивают, а затем центрифугируют, после чего надосадочную жидкость переносят в хроматографическую виалу, которую помещают в автосамплер хроматографа для дальнейшего масс-спектрометрического детектирования, а содержание антиконвульсантов определяют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием на жидкостном хромато-масс-спектрометре, анализируемые вещества разделяют на колонке, а количественное определение концентрации для каждого из соединений антиконвульсантов в плазме крови осуществляют по формуле как отношение площадей пиков анализируемого антиконвульсанта и внутреннего стандарта, выраженных в условных единицах интегрирования, умноженное на значение коэффициента пересчета наклона калибровочной кривой к оси абсцисс и суммированное с коэффициентом пересчета точки пересечения кривой с осью ординат.

Способ оценки качества спермы жеребцов по активности креатинфосфокиназы в сыворотке крови // 2770741

Изобретение относится к области животноводства, в частности к коневодству, и может быть использовано для отбора жеребцов с высоким качеством спермы. Способ оценки качества спермы жеребцов по активности креатинфосфокиназы в сыворотке крови включает отбор образцов крови.

Способ комплексной оценки количества окислительно модифицированных белков в биологических жидкостях // 2770562

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической биохимии, и может быть использовано для комплексной оценки количества окислительно-модифицированных белков в биологических жидкостях. Осуществляют измерение оптической плотности предварительно подготовленного образца в диапазоне длин волн 230-535 нм, построение графика зависимости оптической плотности исследуемого образца от длины волны.

Способ оценки бактериальной биоплёнки // 2770413

Изобретение относится к медицине, а именно к микробиологии, инфекционным болезням, дезинфектологии, и касается способа оценки состава биопленки. Формируют биопленки исследуемой культуры внесением бактериальной взвеси в лунки полистиролового планшета с последующей инкубацией в оптимальных для роста бактерий температурных условиях, внесение в половину лунок 0,1%-водного раствора генцианвиолета с его экстракцией 96%-ным этанолом и фотометрированием при длине волны 560 нм.

Способ оценки влияния средств, используемых для профилактики катетер-ассоциированных инфекций, на бактериальную колонизацию поверхности катетеров // 2770112

Изобретение относится к области медицины, а именно клинической микробиологии, хирургии, урологии, и предназначено для оценки влияния средств, используемых для профилактики катетер-ассоциированных инфекций на бактериальную колонизацию поверхности катетера. Биопленки люминесцентных бактерий формируют на фрагменте катетера 0,5 см в 4-луночных полистироловых культуральных планшетах in vitro в течение 6 и 24 часов в присутствии и отсутствие средства, промывают в 0,89% растворе NaCl, после чего оценивают биолюминесценцию (I, усл.

Способ прогнозирования прогрессии цервикального плоскоклеточного интраэпителиального поражения низкой степени на фоне папилломавирусной инфекции // 2766719

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии. В венозной крови пациентки с выявленным цервикальным интраэпителиальным поражением низкой степени, ассоциированным с вирусом папилломы человека высокого канцерогенного риска, однократно определяют концентрацию фолиевой кислоты методом хемилюминесцентного иммуноанализа на микрочастицах.

Способ оценки имплантационной состоятельности эндометрия на основании эндометриальной экспрессии vdr, hoxa 11 в программах врт у женщин старшего репродуктивного возраста с трубно-перитонеальным фактором бесплодия // 2765639

Изобретение относится к области медицины, в частности к патологической анатомии и гинекологии, и может быть использовано в репродуктивной медицине при подготовке к программам вспомогательных репродуктивных технологий у женщин старшего репродуктивного возраста с трубно-перитонеальным фактором бесплодия.

7,9,12,14-тетрамино-21,29-имино-23,27-нитрило-30н,32н-диаценафтен[c,d,n,o](1,18)-диазо-(7,12)-дигидразоциклотрикозен, обладающий свойством кислотного красителя для шелка, шерсти и капрона // 2747973

Изобретение относится к 7,9,12,14-тетрамино-21,29-имино-23,27-нитрило-30Н,32Н-диаценафтен[c,d,n,o](1,18)-диазо-(7,12)-дигидразоциклотрикозену формулы (1), обладающему свойством кислотного красителя для шелка, шерсти и капрона. Технический результат: получено новое соединение, которое может быть использовано в качестве кислотного красителя, окрашивающего шелк, шерсть и капрон в различные оттенки желтого цвета.