Способ высушивания жидких культур bacillusthuringiensis
328tItt2l
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Союз Советских
Социалистических
Республик
Зависимое от авт. свидетельства ¹
Заявлено 16.VL1970 (№ 1455721/30-15) с присоединением заявки ¹
Приоритет
Опубликовано 02.11.1972. Бюллетень № 7
Дата опубликования описания 30.111.1972
М. Кл. В Old 1/16
С 12d 7/00
Комитет по делам изобретений и открытий при Совете Министров
СССР
УДК 66.047:576.8.06 (088.8) Авторы изобретения
Н. В. Кандыбин, С. Г. Гребельский, Н. М. Барбашова, М. Г. Чеверда, Л. А. Симонова, А. Я. Лескова, Л. М. Рыбина и С. Д. Штейнбок
Всесоюзный научно-исследовательский институт сельскохозяйственной микробиологии
Заявитель
СПОСОБ ВЬ1СУШИВАНИЯ ЖИДКИХ КУЛЬТУР BACILLU8
TH U RIN GI EN S l S
Бациллы группы тюрннгензпс служат основой ряда микробных, препаратов, предназначенных для защиты растений OT вредных насекомых.
Длительное сохранение культур бацилл необходимо для:
1) коллекционного хранения отобранны штаммов;
2) обеспечения возможности проведения длительных разносторонних биологических исследований с одной культурой;
3) создания моделей препаратов, предназначенных для борьбы с вредными насекомыми.
Для указанных целей производят высушивание культур бацилл лиофильным или воздушно-тепловым способом. В обоих случаях культуру подвергают предварительной сепарации до получения пасты, которую высушиватот. В результате теряются все энтомоцидные метаболиты, выделяемые бациллами в питательную среду.
Таким образом, для высушивання культур известными способами требуется, с одной стороны,,предварителыгая трудоемкая операция— сепарировапие, а с другой стороны, становится невозможной полная характеристика энтомоцидных свойств изучаемой или используемой культуры (штамма или,вариетета), поскольку отбраковываются весьма важные энтомотоксп шые компоненты, например термостабильный экзотоксин (токсин) н ряд других.
В целях устранения указанных недостатков разработан и испытан способ получения сухой
5 культуры. Вас. t/turittgiettsts, содержащей живые клетки, кристаллический экзотоксин и термостабпльт ый 3ti3oToxct»t. Cttoco6 зак. ночается в том, что высушиванию подвергают всю культуру с культуральной жидкостью (без прсдва10 рительной сепарации и бсз получения нромежуто шого продукта в виде пасты).
Жидкая культура в виде мелкоднсперсного аэрозоля подастся в поток горячего воздуха, где It происходит высушивание. В течение до15 лей секунды жидкость испаряется, превратцаясь в мелки и порошок, кото1тый Выводится в приемник. Кратковременность пребывания культуры в потоке горячего воздуха предохраняет споры, кристаллы и другие мнкробные
20 энтомотокснчные метаболпты от деструкции.
Для повышения числа жизнеспособных спор и сохранности токсинов высушнванне культуры пРонзводят в присутствии кристаллнзирующегося нанолннтеля. В качестве такового ис25 пользуют МаС1 в количестве 0,8 /о к объему исходного высушпвасмого материала. NaC1 вводят непосредственно перед высушнваннем.
В момент высушивання iNtaCl кристаллизуется, причем споры и параспоральные тела служат
328921
Составитель С. Гребельский
Техред Т. Ускова
Корректор T. Бабакина
Редактор H. Спиридонов
Заказ 717/1 Изд. № 249 Тираж 448 Подписное
ЦНИИПИ 1(омнтета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР
Москва, К-35, Раушская наб., д. 4/5
Типография, пр. Сапунова, 2 центРамн I(PHcTaJIJikfaaLIHH. HPH Bbl+LLIEIBaHEI;f культуры без введения каких-либо наполнителей выживаемость спор не превышает 30—
40%, а при добавлении 0,8% Na(,1 выживаемость спор возрастает до 76%.
Испытание энтомоцидности высушенных таким способом образцог1 культур Вас. tlkuriiugiensis показало их высокую эффективность.
Введение этой культуры в корм подопытных насекомых (в дозах, обычно применяющихся в практике защиты растений) вызывает значительно большую их п1бель, чем введение в корм жидкой (исходной) или лиофилизированной культуры.
1(ультура, высушенная предлагаемым способом, полностью сохраняет термостабильный экзотоксин,,в то время как культура, высушенная лиофильным способом, не содержит его.
Таким образом, высушиванне методом распыления не только не снижает, но даже увеличивает энтомопатогенные и энтомотоксичные свойства культуры по сравиеншо с культурой, высушенной лиофильным способом.
Установлено так >«е, что высушенная предлагаемым способом культура в значительной степени сохраняет свои первоначальные свойства при хранении в условиях комнатной температуры и в холодильнике в течение одного года.
Таким образом, разработанный способ высушиван1гя культур Bac. thuri>lginsis обеспечиваетвозможностьдлительного хранения их без потери титра жизнеспособных спор H с сохранением всех энтомоцидных компонентов.
Изобретение может найти, широкое применеННе при микробиологических и энтомопатоло10 гических исследованиях, а также в практике разработки технологии производства микробных препаратов на основе бацилл группы тюрннгензис.
Предмет изобретения
1. Способ высушивания жидких культур
Bacillus thuringiensis путем распыления в потоке горячего воздуха, отличающийся тем, что, с целью полного сохранения жизнеспособных
20 спор и энтомотоксичных метаболитов, .высушивание производят.в присутствии кристаллизующего с я н а и олн и тел я.
2. Способ по п. 1, отлисающийся тем, что в качестве кристаллизующегося Hanoлнителя бе25 рут хлористый натрий.
3. Способ по и, 2, отличаюи1ийс» тем, что
xr1oðHñòûé натрий берут в количестве 0,8% и весу культуры.
