Способ получения гексапептида последовательности 9-14 в- цепи инсулина человека
И АВТОРСКОМУ (:ВИДЬЧУИЛЬС7ВУ (61) Дополнительное к авт. санд-ву (22) Заявлено13.07.72 (21) ). 8i 0219/23 л с присоединением заявки,"е (51) M. К:. (. 0 7(1(13, 5
Гмудейстееннь!Й неммте7
Зовете Инннс рее ЫР
w деми нзеб етенй и OTIIPbIINk (23) Йрноритет
Опублнковачь02, з,). 0„(g 3 юли :=ТЕн . ч"0,39 (53) УДК .;4; съ(4,; .07 (088 8
)л,ата Ои /бликования ОписанияД6.0 . 7( (72) Авторы изобретения
И. Титов -" =". A. Ардемасова
Ленинградский ордена Ленина и Ордена Tоудс,"го Красного
Знамени государственный, унии .:..IcHTBT им, А. A. Жданова
СПОСОЕ- ПОЛУЧЕНКй ГЕКСАПЕПТИДА
ПОСЛЕДОБАТЕHbHG= 7 3="Х4 В-ЦЕПИ .Í(.ÓËÈHÐ; -1 Е ЛОВ Е:"». А
Изобретенче;асае Гся усоВершенство=ванна способа получении гексапептида
Я инсули а чело- ека Ято соединение может быти использовано в синтезе при цодных инсулинов, g такжe их сцнтеч нч @. ких аналОГCB
Известен способ по,ггчениа Гексапепти-э д& Оg-Ig инсулина последОвятельной КОим денсапиеь метилОБОГО зфирз яляниня с (запппденядми амичоч=„- лотами," пос ур, дч-", . юшим Выделением пелеВОГО продукта из весткым способом.
Такой способ хс .рактернзуетси Выделе гнием дслеВОГО BpogJKTH В виде мзтилсво! !
j ГО . Зфиря, поскольку дли дяльнейше -"О ис, пользОВяния пегткда В - B синтезе
1 B-цепи инсулина для превращений метилО е
|вого ефнра в гидразид необходима абра
,бочка гидразином, котораи приводит к частичной деструкции молекулы и сниже нню выхода пелевого Iiponyкта на 30%.
Для усовершенствовании пропесса в, качестве С-конечной =-ашитной групчы
1 предложено использовать трет.-бутилокси карбонилгидразид, который преврашаетса
В ;: дразид прн Обрабоие трифторуксусной кислотой, что не Вызывяет деструк пнк
".. Опек лы, Сушность ОппсываемОГО способа пслу
5 1 чепия защип.енкОГ .: Йептида последовател -. но:-ти В „„ инсулина человека заклю ае . а
В том. ЧтО трет.бъ тилоксикарбони1п и; p& з рт аданаия последовательно конденспру ", с з:2цищенными аминокислотами с после..., л J, (ып(и. < Выделением дел c oI o iipc, KTЯ извест-.
1,,, ,НЫМ СПОСО60М, n p и м е р Х.::tpeT.--ЬутилоксикагI сожын щЦз ид карбОбензОкси&ланина (I .. я 2, Г кярбобвизоксвал пьчня раство я, ют в 3. О мл втилапетатя, дсбавлнют 3., 1 = трет. :.бутилоксикарбонилгрдразида, к Го-. о лученной смбси при 0 С добавлчют 2,1 "::. ЙИБ2клогексилкарбодиимида и Оставляют
О
,на ночь при 0 С. Отфильтровывают вы павшую дипиклогексилмочевину, фильтрат
I промывают последовательно 0,5 н серной кислотой, водой, 5%-ным бикарбонатом
1натрйи, водой, сушат и упаривают досуха щ,После кристаллизации остатка из атила петата пол чают 2,8 г (91 %>-. проду,=."..» с т.пл. 65 C.
Найдено,%: С 57,04„.Н - -,=::«ЗО;-.:
С(y Иду ИэОу
Вычислено,%: С 58,98. ;.: 8 8 .Пример 2. тре - =-«««.)«.-п)л;«"= .=,@;„ )==-. бонилгидразид карбобензок":--==..- -«,. ==.—:,.;=е =.=,, бутиловый эфир ) Глутамил. .—.:а-.=«:,--н =
2,7 г продук . а J —,«а«-твс «у;--,мл метанола и гидрируют р. и:,.-,„ ..-"-,=..=;; . „;
ПалпаДИЯ На Ут : Е ДО ПОРКОац-,=-=. » ««Г,—,«-- . нии СО . Ката: ««затор ОЫИ.П--— промывают метанолом., фильтр:=:.—::. досука, остаток раствориь-.:.-. 1 (3;.;:) л апетата. K полученному -ваствсо=: до«- ::l=„"%.. ют 2,8 r В -нитрожениловог:.= -==-..«".Iî:=:: трет,-бутилового зфно" - э"=:6 ;н.=о .-с.-:- " -"".-таминовой кислоты и re«a=.;-i,":.-к.т н = дня пои комнатной темп -«лт-.: —.,-упарива.от досуха и посл-..: кв««:-:.:-;--:-:= ;;,-=.:.,::---..=,=;=-. Из эфира получают 3,0 Г (98 -", .:,;-,-,à;:,-;-;, c т.пл. 117-120 С.
С gдН„М„О, Вычислено,%: С 57,45: ",-," у;:-;:, И M e P 3 . .TPeY, Б / тНЛQi . Ir) ) ) бонилгидразид карбобеняоксива.1— ил«
ТрЕт.)бу тИЛОВЫЙ Зфнр r . Л «r .«. =. М«нлад ее)); —:::)i (й)
4««.) r ПРОДуКта Р>. Г «r!I)BP) =) т В .)ЛЕ-;=ноле аналОГично примеру = ) «ест "то«: пж:ле упаривания расгвориют и : 5 мл диоксана,к полученноьг, раствоp"-; доб ==:: ляют Л 5 Г В -нитоофенилового зз ::: «--: карбобензогиалича Neve лв=- --. -: - -— комнатной температуре смесь: .=, водоЙ екстпагир) ют етилапет-а -з-.,:, апс 3 атный с) о)) про«):.ыв«» с А ) . :«"- =.." ) «)-«.) карбонатом натрии, водо.-;1) "=-.;-«r:=,".: =.. -=PE Bi) KYI GC> Ó ; ОСЛЕ «,.)ОИС.=,)«>.,-и.:-« ::,.з:-:..« ::.та=. у а и с е«")и з)«и)а ) )» )., Заир пол) 8KYi 4Я Г «72?-. т.г)ч. 181-183 С, НайдBBQ го . «8 ь.
С у К« gggg
Вычислено,%: С 57)"= 5 l ":,:= 2., лп« ,! . C«1 ! «
«1 ц ",; м е р g т".«е«". .,»«)=,: „чо - --; -- -; .« -,-") ем«п идразид эбРбензз " " =й ." = - (« ф) сЦ
2, 3 Г продукта ф гидр«="- у ю)т:= .: —:. ::- «):."«)) после упари«анин м та:.-;ол; вас.--==.: —,. "-;- =.:
1 О мл днметилформамид&„д)обад. к«--::: ., .„- -нитпофенилового ефв-,::=". кар::=,обенз
Р- Йпина « влРю -) -":--"- д:- "=: комнатной температуре. C:;Ie=--;, разб;:-)Б-r вЂ”â€” ;:о-: аЬиоом. выпаьп«(ий Осадок О-..Гнил-=)та. =: — в)веют, j":- Посл«е пеоеосажденип пз гуес-.=. Ли«„.зт;;;., L,«,), r
C",-.r (оставитель
Р.„ЯКторз РЕбЕЛВНЯЯ ГЕХРЕД,ДЕВННКЯИ 1.0ррЕКТОр " - ""<Я
За-каз 1100 тиРаж 529 Г-:ОД11исное
ЦНИИЦИ Государственного коь<итета, авета Министр н < < < "Г
НО делам изобретений н Открыти<<
113035, Москва,. К-35, Раун;скан наб, л. 1/Л
4 11л1<ал III I!1 "11атент, г, Ужгород, ул. агариня, 101
<овека пос<1е<1ОВяте111- н01< конденса1ией Elpo+. е1з110днОГО амннОкислоты с за<цип<енными аминокислотами известным способом„уда лением зя1нитнык групп каталитическим
ГИДРОГЕНОЛИЗОМ И ВЫДЕЛЕНИЕМ НЕЛЕРОГО
I продукта известным способом, О т л н ч а 1О щ и н с и тем, чтО, с це1<ь10 у< »ВЕР111ЕНСТВОВЯНИИ ПРОНЕС..R, П Ка<ЕСТРе г . КОНЕЧНО<1 ЭЯ:1<НТНОН ГP) НПЫ НС1<0111» Ъ" И11
5 трет. -бутилокси1<лрбонилгилг лзнп
