Способ получения противогрибкового антибиотика
о и
Союз Советских
Социалистических
Республик
<»> 517198
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61} Дополнительное к авт. свид-sy (22} Заявлено 17.1274 (2l} 2099213/13 (61} N. Кл.
А 61 К 31/71
С 12 Q 9/00 с присоединением заявки ¹Государственный комитет
СССР во делам наобретеннй н открытий (23} ЙриоритетОпубликовано 250179 Бюллетень ¹ 3 (63} УДК 615.779.9 (088. 8) Дата опубликования описания 250179 (72} Авторы T.N.Bîðîíêèíà, В.И.Коренева, Г.B,Êèðcàíoâà, изобретения E.т 14учак r В.В.Оноприенко и и.н.колосов
Всесоюзный научно-исследовательский институт фитопатологии (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОТИВОГРИБКОВОГО
АНТИБИОТИКА
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к производству антибиотиков, Известен способ получения противогрибкового антибиотика, заключающийся в том, что культуральную жидкость
3idgmoc(adytum te natum басс . экстрагируют хлороформом с последующим вы-. делением целевого продукта путем многостадийной системы очистки, .
Этот способ трудоемкий и не обеспечивает достаточный выход и степень чистоты антибиотика.
Отличительной особенностью предлагаемого способа является то, что штамм243увос1айцтп 1ема1ипт бсксс. выращивают на питательной среде, содержащей глюкозу и пептон (2,6:1т5).
Культуральную жидкость ври рН 7. экстрагируют смесью растворителей, состоящей из насыщенных и хлорированных углеводородов (хлористый метилен, хлороформ, четыреххлористый углерод), например петролейный эфир (т.кип.4070 C) и четыреххлористый углерод (9г1 по объему). Растворители из объединенного экстракта частично от-: гоняют в вакууме, а осыпавшие кристаллы отделяют фильтрованием, Получен,ный препарат повторно крнсталлизуют из смеси бензола с гексаном или гептаном.
П р и и е р 1, Антибиотик получают путем глубинного культивирования O dgmocEadjum 1еопд ппт при 28 С на среде, содержащей глюкозу (3,9Ъ) и пептон (1,5%) в колбах на встряхиваемой качалке со скоростью вращения
220 об/мин, рН 6. Продолжительность ферментации 120 ч. Культуральную жидкость фильтруют, Фильтрат в объеме
10 л с содержанием антибиотика не ниже 100 мг/л (т.е. 1 г антибиотика по весу) экстрагируют при рН 7 четыре раза смесью петролейного эфира и четыреххлористого углерода (9:1) при соотношении культуральной жидкости и растворителя 2:1. После разделения сепарированием или центрифугированием объединенный экстракт упаривают в вакууме на роторном испарителе при температуре не выше 30 С до объема 150200 мл. Выпадающие при этом кристаллы белого или бледно-розового цвета отделяют фильтрованием. Получают 0,8 г кристаллического продукта с содержанием 905 по весу антибиотика.
П р и .м е р 2, Кристаллизацию очищенного препарата, полученного по примеру 1, осуществляют из смеси бен517198
Антибиотик имеет формулу
Н Н
СО
Н Ме ц
Ne 3f 0 со нв со
МИе
0H Ме К Ме Н
Снже К СО
2%Ие
Формула изобретения — М е Або — Ме).еп — ОН .
Составитель Г.Смирнова
Техред С.Мигай Корректор М.Демчик
Редактор Л.Письман
Заказ 7858/1 Тираж 67(Подписное
ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.4/5
Филиал ППП Патент, r.Óæãoðîä, ул.Проектная, 4 зол.-гексан (2:1) . Для этого навеску препарата растворяют в 15-кратном объеме растворителя (15 мл на 1 r ае,щества) при температуре кипения, Затем раствор выдерживают при О С до полного выпадения кристаллического:.продукта. После фильтрования и высушивания получают мелкокристаллический порошок антибиотика белого цвета.
Полученный антибиотик характеризуется следующими свойствами:
T.пл. 214"214,5 ÑÙ 39,9 (c 0,4 10 в этиловом спирте); УФ-спектр в этиJIoBDM спирте и оцс 21 1 (Е 9500); мол.вес 737; ИК-спектр имеет полосы поглощения в области 3426, 3360, 3325е 1640, 1520 cM . I5
Эмпирическая формула С > Н6 Н 0>.
На основании ИК-спектра, результатов титрования кислотами и щелочами и исследовании продуктов кислотного гидролиза установлено, что антибиотик-gp нейтральный полипептид, При жестком гидролизе антибиотика 5н. НС0 в 20%ной уксусной кислоте (20 ч 105 С) образуются, моль: Ь -лейцнн 1у 0 - алло -изолейцин 1 1, - N -метиллейцин 1;
Э-эритро-р --оксилейцин 1;1.- М -метилаланин 3 °
При легком гидролизе (Зн. НС0 s
50%-ной уксусной кислоте) получают пептиды
Н- Nel.en Ken — MeARa — OH, H-MeMa- НцЬепЯе — MeAFa-OH, И-Len- MeARa — hheAEa-йц(.еп — Ие—
-Н Ме
Ме еНСН С жн
Способ получения противогрибкового антибиотика путем глубинного культивирования З дуеосВад ит 1еоnoturn(5сюсс. на питательной среде, содержащей источники углерода, азота, минеральные соли, с последующим выделением целевого продукта иэ культуральной жидкости экстракцией органическими раст-. ворителями и очисткой кристаллизацией, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода и чистоты антибиотика, продуцент выращивают на среде с пептоном и глюкозой, экстракцию осуществляют смесью углеводорода и хлорированного углеводорода при рН 6-7 и кристаллизуют из смеси бензол-гексан (2:1), 
