Способ отделения эпидермиса листа

 

f И ЗО БР ЕТЕ Н И Я

o n и c л - -H - - E 86

< >6836

Союз Советских

Содиалистнческих

Республик

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 29.03.78 (21) 2597217 30-15 с присоединением заявки Ме— (23) Приоритет— (43) Опубликовано 05.09.79. Бюллетень М 33 (45) Дата опубликования описания 06.09.79 (51) М.К:.-" А 01 а 7,00

Государственный комитет ло делам изобретений и открытий (53) УДК 591.169.1 (088.8) (72) Лвтор изобретения (71) Заявитель

Д. Н. Анели

Институт фармакохимии им. И. Г. Кутателадзе (54) СПОСОБ ОТДЕЛЕНИЯ ЭПИДЕРМИСА ЛИСТА

Изобретение относится к области прикладной ботаники и может быть использовано для отделения эпидермиса листа от мезофилла.

Известны способы отделения эпидермиса листа с применением химических веществ, например, для отделения эпидермального слоя с хвои кусочки хвои помещают в 5 — 10 -ный раствор едкого натра при 50 — -60 С. Через неделю эпидермис от lo деляют от остальных тканей листа промыв кой материала, либо под микроскопом с помощью мяпкой кисточки. Полученные пленки эпидермиса тщательно отмывают от ре актива (1). !5

Известно получение отпечатков эпидер. миса при помощи слизистого вещества

cordia ob!iqua и латекса 12).

Известен способ мацерации в растворе, состоящем из 40 мл ледяной уксукной кис- 20 лоты, 40 мл перекиси водорода и 20 мл дистиллированной воды 13).

Известен способ, при котором кусочки листа мацерируют,в 30 -ной перекиси водорода с 10 Д-ным едким кали. Тонкие ли. стья выдерживают в растворе в течение

3 — 5 дней при комнатной температуре, более плотные — мацерируют при 70 С.

Особен|но плотные кожистые листья кипятят,30 — 60 мин 14). 30

Недосгатком указанных способов является то, что для отделения эпидермиса листа от мезофилла применяют химическис вещества и растворители, часто дорогостоящие, которые во многих случаях растворяют мезофилл (полная мацерация) и изменяют сгруктуру эпидермиса. При применении этих способов затруднено отделение эпидермиса листьев нежных травянистых и суккулентных растений.

Известен также способ, .при котором кусочки лчстьев кипятят 1 — 2 вин в 2 мл

5 — 10 о -ного раствора медного купороса

CuSO4 5Н20 (5). Дальнейшее кипячение в течение 1 — 2 л ин с добавлением 4 мл концентрированной соляной кислоты приводит к разрушению ткани между верхним и нижним эпидермисом. Затем кусочки эпидермиса, отделившиеся от остальных тканей, отмывают в воде.

Однако этот способ пригоден только для отделения эпидермиса кожистых листьев, в большинстве случаев древесных растений.

Применяя этот способ для отделения эпидермиса листьев более,нежных травянистых растений, получают отрицательные результаты, так как под действием сильных химических веществ разрушается и эпидермис и изменяется его структура.

i1? 0 p M у Jl а и 3 0 б p e 1 e I! и Я

Сост IBHtc .t!6 Г. Брости>к

Техред В. Рыбакова

Редактор Т. Шарганова

Корректор И. Симкина

Заказ 808/!113 Изд. № 8 Тираж 780 Подписное

11110 «11овск» Государственного комитета СССР по делам изобретений и откры ги >

113035, Моск>>а, Ж-35, Раус>скан наб., д. 4/5

Тип. Харьк. фил. пред. «Патент»

Цель10 изобретения является получен:;0 эпидермиса со всей поверхности листа у различных растений без изменения его структуры.

Поставленная цель достигается тем, что лист замора?кивают, затем оттаивают и под эпидермис ВВОдят Воздух, например Illrll? !4цем, до отделения эпидермиса от мезофилла листа, .затем снимают эпидермис.

Способ осуществляют следующим образом. СВежий лист помеща10т ь ча!Нку с ВОдой (листья суккулентных растений можно замораживать без воды) и заморажгивают

В хОлОдильнОЙ камере obITo aoro холодильн.1ка. После замораживания лист О-.таивают и под эпидермис вводят воздух шприцем, размер которого зависит от размеров листа и толщины черешка. Для маленьких листьев требуется шприц малого размера, и наоборот. Иногда воздух вводят не под эпидермис, а .прямо в черешок, откуда воздух доходит до края листа. Чтобы хорошо огделить эпидермйс, в некоторых случаях срезают край листа.

После отделения эпидермис для просветления можно .поместить в 50 — 70 -ный этанол и подогреть. В дальнейшем, препарат заливают обычным способом. Способ дает возможность изучить как эпидермис, так и жилкование листа травянистых и древесных растений.

При этом не разрушается структура эпидермиса и мезофилл листа и происходит выявление жилок. Данным способом удалось выявить жилки листа растения Pepегоmia magnoliaefolia, жилкование,которого до сегодняшнего дня никаким спо-обом выявить .Не удавалось, Настоящий способ дает возможность отделить эпидермис сухого (гербарный материал) листа некоторых растений. При этом замораживание и оттаивание надо .повторить несколько раз.

Предложенный способ легкодоступен, проще известных способов,;не связан с использованием химических Beulec7 >3 и растВООите лей часто д01?ОгостОя?пик, п1?30>золяст

ВЫЯВЛЯТЬ ЖИЛКИ, ОСОООНHO ?КИЛКИ ЛИСТЬСВ у таких растений, у которых ?килки совсем

5 не заметны (микрожилки); и нс гриводит к изменению структуры эпидермиса.

Метод проверен на листьях многих травянистых и древесных растений, в т??»Incле

1p ficinalis, Мао17011а graudifio-,а, Ас .::, )иегспз, Platanus, Hedera со!сlпса, 1--,. ca;lcаз1ge1la, Н. pastuchovi, Vin< а herbacae, V.

minor, V. pubescens, 1<а1агап111178 roseus, Kuphorbia sp1ende1fs, Лз1?агадцз, Biexnum,.

15 1.10 11я Г11 П? V!!1 <«я ГЕ Ос i or ..O".u S

20 Способ отделения эпидермиса листа, î гл и ч à Io шийся тем, что, с ц ль10 получеHI!ÿ эп11деp . fèña со Всей j10uepхпости листа у,раaëè÷ fûx растений без изменения его структуры, лист за мора?Кыва1от, aàòeì от25 таивают и под эпидермис зводят воздух до отделения эпидермиса от мезофилла листа.

Источники информации, принятые во внимание при экопертизе:

1. Preparation of си11с1е free epidermal

peels for the demonstration of primary

pit-fields, Лпп. Hot., 1974, 38, 154.

2. Prepara11ол of ".nidermal 1гпpr!nfs of

mucilage and latex, Slain Тес1?„01?1., 1969, 44, 3,. 123--126.

3. Chen!ical method 10:epàra.. : g leal

epidermis from гпезор1?у11: .".: .., а:;;aë40 laT им aHfiaoaT лl!!!h, l жум."у, !:!. ilльарабста аль-муттахила,. ж. I:o! „1 АР, 1971 14 2 317 322

4. Kombinovana metoda ргерагас.. !istovych pokosek, Preslia, 1966., 03, .",. >05--207.

45 5. Stain technol, 1974,. 4 - -: - — !16.