Способ получения -(гликозилтиокар-бамоил)-аминокислот и пептидов

 

Соеэ Советскик

Социалистических

Республик

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОВСКОМУ СВИ ЕТЕЛЬСТВУ нл833981 е»

1 г,.

» (61) Дополнительное к авт. сеид-ву (22) Заявлено 111079 (2!) 2829114/23-04 с присоединением заявки Йо (23) ПрморитетОпубликовано 3р.p5,81. 6 6 ®HI 149 20 (53)М. Кл 3.С 07 Н 5/10

A 6l K 37/02

Государственный комитет

СССР по делам изобретений н открытий

) 547.455,491. .4(088.8) Дата опубликования описания 300581 (72) Авторы изобретения

:л-»

С.Э.Зурабян, В.А.Кулыгин, A.ß.Õñðëèí и М.Л.Шу ьман " - Г

Институт:биоорганической химии им. М.М.Шемяк

АН СССР (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ N-(ГЛИКОЗИЛТИОКАРБАМОИЛ)-АМИНОКИСЛОТ И -ПЕПТИДОВ

Изобретение относится к новому способу получения не описанных ранее

N-(гликозилтиокарбамоил)-аминокислот и-пептидов, которые могут быть использованы в создании сорбентов для аф- 5 финной хроматографии гликозидаз и лектинов.

Известен способ получения соединений сложных эфиров формулы

GNHC5NHACOOC>H, где G и A указаны ни- 10 же, заключающийся во взаимодействии перацетилированных гликозилизотиоцианатов с этиловыми эфирами аминокислот в среде пиридина $1) и (2).

Однако перейти от указанных слож- 15 ных эфиров к кислотам путем омыления или кислотного гидролиза сложноэфирной группы не представляется возможным, не затронув защитных ацильных групп углеводной части молекулы.При 2() проведении реакции гликозилизотиоцианатов с незащищенными аминокислотами в условиях аналоговых реакций, т.е. в среде пиридина,,образуется сложная смесь продуктов. Такой результат оп- 25 ределяется тем, что изотиоцианаты реагируют не только с аминами, но и с карбоновыми кислотами f 3g., поэтому с аминокислотами (и пептидами) они могут образовывать два типа продук- 30 тов — производные тиомочевины (реакция по аминогруппе) и производные аминов (реакция по карбоксильной группе).

Цель изобретения — создание НОВО го,простого способа получения и выделения N-(гликозилтиокарбамоил)-аминокислот и- пептидов, содержащих незащищенную карбоксильную группу без побочных реакций с высоким выходом.

Поставленная цель достигается способом получения N-(гликозилтиокарбамоил)-.аминокислот и -пептидов общей формулы 6йНС5ННАСООН, где С ацетилированный гликозильный остаток, A — остаток аминокислоты или пепти- да, заключающимся в том, что в реакцию с ацетилированными гликоэилизотиоцианатами вводят незащищенные аминокислоты и пептиды и реакцию проводят в слабощелочной водноорганической среде.

В качестве водноорганической среды можно использовать водный ацетон, водный спирт или эмульсию водного хлороформа, в которых достаточно растворима оба компонента реакции. Слабощелочная среда (рН 8-9) создается добавкой бикарбоната натрия, что обеспечивает протекание реакции по

833981 аминогруппе при сохранении защитных ацетильных групп углеводной части молекулы и облегчает выделение целевого продукта.

По завершении реакции органичес- . кий растворитель отгоняют из реакционной среды, а избыток гликозилиэо-, тиоцианата и побочные продукты реак, ции отьывают зкстракцией бикарбонатного раствора хлороформом или другим, подходящим растворителем. Целевой .продукт выделяют подкислением бикарбонатного раствора с последунщей зкстракцией хлороформом или другим подходящим растворителем.

Способ с существляется следующим образом.

К раствору 3,0-3,3 ммоль ацетата гликоэилиэотиоцианата в 10 мл ацетона прибавляют постепенно при пере мешивании раствор 3 ммоль аминокислоты или пептида в 5 мп насыценного раствора бикарбоната натрия. Смесь разбавляют 10 wr воды, перемешивают

30-60 мин, ацетон отгоняют в вакууме. Бикарбонатный раствор промывают хлороформом (Зх20 мл) и подкисляют концентрированной НС1 до РН 1-2.

Продукт извлекают хлороформом, хлороформный раствор сушат и упаривают досуха. Полученный продукт перекристаллизовывают или переосаждают.

© Предлагаеыам способом синтеэнрованн производные на основе моно- и дисахаридов (нейтральных, амино- и деэоксисахаров) с различными аминокислотами: глицином d-L- и f5-аланинами, f -аминомасляной и g-аминокап- .

f5 роновой кислотами, а также с дипептидом - L -аланил -(. -. аланином.

Полученные N-гликоэилтиокарбамоильные производные, а также константы синтезированных соединений приведены в таблице.

833981

1

1

I !

1

I

)

1

I LA

1

I

I

I

I

) )

I

1

I гл

ФьЪ

1 )э

3 Ю л

1 1. 0 л

1 О

I

I ч-)

1 )

)

I сй

СЭ

4.Э

-1

М я о

° и

Фо а ф л

4 д4

RC).g

"Вoн о

Э. .с»

Х л

С Ъ

))Ъ с.О

РЪ

О с

% !

tD ° л

Ch CO

)с

Ю с г О

« с Ъ

° л)е

)»1 с

С»

)Э

Ю с

С»

О с ) 00

С»

I

1

1

) н

I д

6 о

«г

I (Ъ

С )

I с1

1 I

1 )Ч

I г

I

I

Ф

Ф н

h)

4 ф ф ав а Ф

« )

1 Я

<ч g

Я с

О М

)ч о х х к

Ф о ж е я В

)- в й

Ф о х в я.I

1

I

I э

I Ф

I

1 !

1

1 Ф О

Ф 0Ъ

I

1

1 .) (Ч

I

1 I

1 eel х и !

I Ж

) ж .v ж

I б

j3 ф

О а

Н . до нх

10 к

° Ф сО

th 1 о ) Ц М у хох

I <Ч (Ч 1

М и

2

ДзО а с С!

Ф Ъ

) Ы

Щ и

I б

2к од

1

5к

1, 63

О Д

h» и до

) Я

lo к с 4 лр )

РЪ о

11 к ф

О Д.l М я к яо нх

° Ф

4 Ъ ь б

I4 O

) )ч

)Ч ) !

l

I

1

I

1 г)

1

I

I

I

1

1

I

)

t

) I ) а

1 ) ф! I

) )

I Н

1 Э

1 М

I I

О к

1 Ф К

) ди но й5 (1 Д

I Ю

I <Ч

I о а

"33

О

О

К 5 н

И ! Й ч» О лФ

1

Н )Ъ

) о х с Щ ъ я с g

)Ч М

1 <Ч

)Ч

1 <Ч

)Ч

) )Ч

СЧ

)Ч 4

)

I

1

I 1

)

)

1

I

I

1

1

4()

z )

О 1

О сэ 1

I х I

t .а I

1

« С

СР )

t

1 а 1 о в

C )

Ф )

Ц I

О I о

1

4 )

Ф )

4 )

1 )

° )

М I

3 ) н ) о

М I, х ) о ! i

О I ф а х о

Ж ) н о

Х I

В )

P. .«ю

1 ) и I

1

1

1

I !

1

)

1

I

Б l ион о ао

OL 1 л) с щ а,-с

° НХа) ко м)

ИФ))gl

Н 6111

I

1

1 с t

1 о I хю .) гъ

Д . 1

) I

I с о н а Ф л, ф Э Ф о о

00ФМ.ЖМ

:"й 3 3

S33981 %

CJ

Х

1

1О с ь

° 3 ОО

Ю

РЪ

СЧ

1

I

1

1 а х

if) Яь с (fj

Yl еч н а

Р1 o

3 н о о

Ol

% ! о а н

;Я

ul t4 н

Я

:Ь н о

IA

И

v б ф

М

cL, 1 н х

4 g а

Ф Ъ н ol

1 cV

СЧ и

1 ф й

1 о о

1 !ц

I ф

1 ф о о

I х

1 3 х

1 ф

I р<

I 1. о

1 g ф о

I ф х

1 ф

1 Х

1 н

Щ в

I I ф

1 я

1.1

1 к

1 о х ое хн нф ц Е х ф ° с

01

1 аю и 0 о о х

° о аФ ф Ю r + х - 1

Ф г 1 х . 30 о åà

О Г-1

"о Л

О ° z

Я

Х 1 Х х х 5

m 0 О

0О фа

Х 1ф о - н>

Н 00 х l6 х мъ ф Ц p,m о х!

4 g ХA

1 ф с 1

o e

1 ф ! х 3j о

Нф фН

3Ю и н

1 ф ф

Ю C P ф 5 g 2 н нх ф фа н

5 В с g x о af4 х

tv ф l6 х х ххф

М I и ф ф х 4 М g х ф

Я k(IC о х х х. к х

X x.10

833981

Формула изобретения

Составитель I .Æåëòóõèíà

Редактор Ю.Ковач Техред И.Асталош. Корректор Г.Решетник

I0

Заказ 3994/40 Тираж 397 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент ., г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Способ получения N-(гликозилтиокарбамоил)-аминокислот и -пептидов

/ обшей Формулы

GNHCSNHAC00H, где G - ацетилированный гликозильный остаток;

А - остаток аминокислоты или пептида, о т л и ч а к шийся тем, что ацетилированные гликозилизотиоцианаты вводят в реакцию с незащищенными аминокислотами и пептидами и реакцию проводят в слабощелочной водноорганической среде.

Источники инФормации,, принятые во внимание при экспертизе

1еHaringК.M,ЗОЬпзопТеВе

The synthes i s of gl ycos i donrel des °"J . Am. Chem. Soc. 1933,, v. 55, р . 395.

2. Mi cheel F., Lcugsfel d W.

Uber die Reactionen des 0 - Glucosamins, L0 . - "Chem.Вег.", 1955, 84. 88, Р 5, S 1246-1253.

3. Саундерс Дж.Х., Фриш К.К.

Химия полиуретанов. Перевод с англ.

З.A.Êî÷íîâîé, Ж.Т.Коркишко. Под ред. докт. хим. наук C.Ã.Ýíòåëècà.

М., "Химия", 1968, с. 227.